异丙酚对大鼠海马CA1区突触传递可塑性的影响

目的研究异丙酚对海马CAl区突触传递和可塑性的影响。方法断头分离Wistar大鼠海马半脑,制备400μm厚度海马脑片。45张脑片分为六组。脂肪乳剂组和异丙酚组的脑片以印防己毒素预孵30min,然后加入450μl脂肪乳剂或异丙酚(相当于500μmol/L),观察对兴奋性突触后电流(EPSC)的影响。脂肪乳剂长时程增强(LTP)组、脂肪乳剂长时程抑制(LTD)组、异丙酚LTP组、异丙酚LTD组的脑片以90μl脂肪乳剂或异丙酚(相当于100 μmol/L)预孵60 min,给予高频刺激(HFS)或低频刺激(LFS),记录LTP或LTD的发生情况。结果 脂肪乳剂对EPSC无影响(P>0.05);500 μmol/L异丙酚使2/3细胞EPSC下降至基础值的67.5％(P<0.05),使1,3细胞EPSC上升至基础值的140.3％(P<0.05)。脂肪乳剂LTP组给予HFS后EPSC值为基础值的151.6％(P<0.05),脂肪乳剂LTD组给予LFS后EPSC值为基础值的57.9％(P<0.05);异丙酚LTP组给予HFS后,LTP可以产生但不能维持,HFS后EPSC值为基础值的98.8％(P>0.05),异丙酚LTD组给予LFS后EPSC值为基础值的40.8％(P<0.05),明显低于脂肪乳剂LTD组(P<0.05)。结论异丙酚对大鼠海马CAl区突触传递具有双重影响,出现抑制和兴奋两种效果;异丙酚损害大鼠海马CAl区锥体神经元LTP的维持而易化LTD。     

皮质酮复合异丙酚对大鼠海马 CA1区长时程抑制的影响

目的探讨皮质酮复合异丙酚对大鼠海马CA1区锥体神经元产生的长时程抑制(LTD)的影响。方法制备Wistar大鼠400μm厚度的海马脑片,随机分为5组:对照组、脂肪乳剂组、异丙酚组、皮质酮组、皮质酮 异丙酚组。对照组不加任何药物,脂肪乳剂组、异丙酚组、皮质酮组、皮质酮 异丙酚组分别以100μmol/L脂肪乳剂、100μmol／L异丙酚、10μmol／L皮质酮、10μmol／L皮质酮复合100μmol／L异丙酚预孵脑片60min,然后给予低频刺激(LFS),记录LTD的表达情况。结果各组海马CAI区锥体神经元给予LFS后,都产生LTD,与对照组相比,脂肪乳剂组给予LPS后10-40minEPSC值没有明显变化,异丙酚组、皮质酮组和皮质酮 异丙酚组给予LPS后10-40min的EPSC值明显降低(P<0.05),且皮质酮 异丙酚组给予LPS后10-40min兴奋性突触后电流与异丙酚组和皮质酮组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论100μmol／L异丙酚或10μmol/L皮质酮都使大鼠海马CA1区锥体神经元LTD表达易化,二药复合应用时则进一步增强LTD的表达。     

长时程增强及长时程抑制与全麻药关系的研究进展

长时程增强(long-term potentation,LTP)和长时程抑制(long-term depression,LTD)作为突触可塑性的两种不同表达方式,是学习记忆活动的细胞水平的生物学基础,与记忆的形成和维持有关.近年来许多研究表明,全身麻醉药的遗忘、镇静催眠及镇痛等效应与影响神经系统的突触可塑性即LTP和LTD有密切的关系.现就近年来LTP及LTD与全身麻醉药之间的最新进展作一综述.     

神经病理性痛大鼠海马突触长时程增强的变化

目的 探讨神经病理性痛大鼠海马突触长时程增强(LTP)的变化.方法 成年雄性Wistar大鼠18只,体重190～240 g,随机分为3组(n=6):对照组(C组)、假手术组(S组)和神经病理性痛组(NP组).采用结扎左侧L4,5脊神经的方法 制备大鼠神经病理性痛模型.对照组不制备模型;假手术组仅暴露左侧L4,5脊神经.于模型制备后7、14和21 d时观察大鼠痛行为学及足部形态;于模型制备前(基础状态)、制备后7、14和21 d时测定痛阈;于最后一次痛阈测定结束后3 d时记录海马CA1区兴奋性突触后电位(EPSP),以高频刺激(HFS)诱发LTP,LTP为HFS后EPSP峰值较基础值增大10%以上且维持时间≥60 min,行LTP分级,以评价其程度.结果 NP组模型制备后痛阈低于基础值及C组和S组,LTP程度高于C组和S组(P<0.05).结论 神经损伤可易化大鼠海马CA1区突触LTP,提示神经病理性痛可能与海马突触LTP的易化有关.     

异丙酚对大鼠脑突触体Na~ ,K~ -ATP酶活性的影响

目的 :了解异丙酚是否通过影响脑突触体Na ,K ATP酶活性而产生中枢抑制效应。方法 :SD大鼠 30只 ,随机分为三组 ,分别腹腔注射 (ip)异丙酚 5 0mg/kg、10 0mg/kg和生理盐水 10ml/kg。结果 :ip异丙酚 5 0mg/kg能明显抑制海马、脑干突触体的Na ,K ATP酶活性 (P <0 0 1) ,ip异丙酚 10 0mg/kg能使大脑皮层、脑干及海马突触体的Na ,K ATP酶活性明显降低 (P <0 0 1)。异丙酚 10 0mg/kg组的大脑皮层、脑干及海马突触体的Na ,K ATP酶活性均明显低于异丙酚 5 0mg/kg组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :异丙酚对中枢神经系统的抑制作用 ,可能与其抑制脑突触体Na ,K ATP酶活性有关     

异丙酚对皮质酮抑制体外培养大鼠海马神经前体细胞增殖的影响

目的 评价异丙酚对皮质酮抑制体外培养大鼠海马神经前体细胞增殖的影响及其与GABAA受体表达的关系。方法 体外培养大鼠海马神经前体细胞,第二代生长良好的细胞随机分为10组：空白对照组（Con组）、异丙酚0．5μmol/L组（P1组）、异丙酚2．5μmol/L组（P2组）、皮质酮100μmol/L组（Cort组）、荷包牡丹碱10μmol/L组（Bic组）、皮质酮和异丙酚0．5μmol/L组（CP1组）、皮质酮和异丙酚2．5μmol/L组（CP2组）、皮质酮、荷包牡丹碱和异丙酚0．5μmol/L组（BCP1组）、皮质酮、荷包牡丹碱和异丙酚2．5μmol/L组（BCP2组）、皮质酮和荷包牡丹碱组（BC组）。建立皮质酮抑制细胞增殖模型,利用噻唑蓝法和胸腺嘧啶核苷掺人法观察体外培养大鼠海马神经前体细胞的增殖。采用免疫细胞化学方法鉴定海马神经前体细胞GABAA受体的表达;采用ELISA法定量观察海马神经前体细胞表面GABAA受体表达。结果 异丙酚（0．5、2．5μmol/L）可以减轻皮质酮引起的大鼠海马神经前体细胞增殖的抑制作用,荷包牡丹碱可完全拮抗其作用。海马神经前体细胞有GABAA受体的表达,皮质酮100μmol/L可以使海马神经前体细胞GABAA受体表达下调（P＜0．05）,异丙酚可以阻断皮质酮的效应。结论 低浓度异丙酚可以减轻皮质酮引起的体外培养大鼠海马神经前体细胞增殖的抑制作用,可能与异丙酚激活GABAA受体有关。     

NR2B在神经病理性痛大鼠海马突触长时程增强易化中的作用

目的 评价含2B亚基的N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR2B)在神经病理性痛大鼠海马突触长时程增强(LTP)易化中的作用.方法 成年雄性Wistar大鼠24只,体重180～230 g,随机分为4组(n=6):假手术组(S组),假手术+Ro25-6981组(SR组)、神经病理性痛组(NP组)和神经病理性痛+Ro25-6981组(NR组).采用结扎L4,5左侧脊神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型.于模型制备后7、14和21 d时观察大鼠痛行为学及足部形态;于模型制备前(基础状态)、制备后7,14和21 d时测定痛阈;于最后一次痛阈测定结束后3 d记录海马CAI区兴奋性突触后电位(EPSP),以高频刺激(HFS)诱发LTP,SR组和NR组于HFS前20 min经侧脑室输注Ro25-6981(NR2B特异性阻断剂)6 μl(2.3 μg),速率1μl/min.LTP为HFS后EPSP峰值较基础值增大10%以上且维持时间≥10 min,并行LTP分级,以评价其程度.结果 与S组和SR组比较,NP组和NR组各时点痛阈降低,NP组LTP程度升高(P<0.05),NR组LTP程度差异无统计学意义(P>0.05);NR组LTP程度组低于NP组(P<0.05).结论 神经病理性痛大鼠海马突触LTP的易化可能与NR2B的激活有关.     

神经病理性疼痛老年大鼠海马CA1区突触长时程增强的变化

目的观察神经病理性疼痛老年大鼠海马CA1区突触长时程增强(LTP)的变化。方法老年雄性Wistar大鼠15只,随机均分为三组。模型组,结扎左侧L4/L5脊神经;D-2-氨基-5-磷酸戊酸(AP5)组,侧脑室输注AP5,余同模型组;假手术组,操作同模型组,但不结扎。观察大鼠行为变化,连续3周测定大鼠电痛阈值,1次/周;记录海马CA1区树突层兴奋性突触后膜电位(EPSP)、输入/输出曲线及LTP的变化。结果模型组与AP5组大鼠术后行为异常,术后各时点电痛阈值低于术前值及假手术组相应时点值(P<0.05);三组基础EPSP幅值稳定,最大基础EPSP幅值的50%组间比较差异无统计学意义;模型组LTP高于其他两组(P<0.05)。结论结扎老年大鼠L4/L5脊神经所致的神经病理性疼痛,不干扰海马CA1区突触及锥体细胞兴奋性,但可易化该区突触LTP。     

多次氯胺酮给药对大鼠海马CA1区突触长时程增强的影响

目的研究多次氯胺酮给药对大鼠海马CA1区突触长时程增强(LTP)的影响。方法 30只SD大鼠,年龄35-45 d,随机分为Con1组、Con2组、Ket1组、Ket2组及Ket3组(n=6)。Con1组单次腹腔注射生理盐水2 ml,Con2组每3日腹腔注射生理盐水2ml一次,共5次,Ket1组单次腹腔注射氯胺酮70 mg·kg-1(生理盐水稀释至2 ml),Ket2组每3日腹腔注射氯胺酮70 mg·kg-1(生理盐水稀释至2ml)共3次,Ket3组每3日腹腔注射氯胺酮70 mg·kg-1(生理盐水稀释至2 ml)共5次。末次给药7 d后,制作海马脑片,应用大鼠海马脑片细胞外记录技术检测海马CA1区LTP和强直刺激后群体峰电位振幅(PSA)的变化。结果与Con1组、Con2组比较,Ket1组PSA与LTP诱发率差异无统计学意义 (P>0．05),Ket3组PSA与LTP诱发率降低(P<0．01)。结论多次氯胺酮给药可降低大鼠海马CA1 区突触的可塑性。     

异丙酚对多巴胺转运蛋白转运功能的影响

目的 研究异丙酚对多巴胺转运蛋白(DAT)转运功能的影响。方法 ①应用高表达DAT的中华仓鼠卵巢(CHO)细胞,在给予异丙酚后,测定 DAT摄取氢~3H标记的多巴胺(~3H-DA)功能;②应用非线性动力学方法,观测异丙酚作用时,DAT最大摄取速度(Vmax)和米氏常数(Km)的变化。结果 异丙酚显著降低了高表达多巴胺转运蛋白的中华仓鼠卵巢(CHO/DAT)细胞对多巴胺(DA)的摄取能力;异丙酚药物转运动力学实验表明,异丙酚降低了CHO/DAT对~H-DA的Vmax,对照细胞和异丙酚用药细胞Vmax分别为16.67pmol·min~(-1)·10~(-5)cells和11.6pmol·min~(-1)·10~(-5)cells,但与DAT的亲和力未发生改变,Km分别为0.46pmol·L~(-1)和0.53pmol·L~(-1)。结论 异丙酚以非竞争性的方式抑制了DAT的转运功能,降低了多巴胺(DA)的再摄取,导致突触间隙DA浓度升高,从而增强了中枢多巴胺能神经信息的传递。     

氯胺酮对神经病理性痛大鼠海马长时程增强维持的影响

目的探讨氯胺酮对神经病理性痛大鼠海马CA1区突触长时程增强(LTP)维持的影响。方法成年雄性Wistar大鼠15只,随机均分为三组:神经病理性痛模型组(NP组)、氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)。采用结扎L4,5左侧脊神经的方法制备大鼠模型,于术前、术后1、2和3周观察大鼠痛行为学及足部形态;于术前、术后1、2和3周测定痛阈;于最后一次痛阈测定结束后3 d记录海马CA1区兴奋性突触后电位(EPSP),以高频刺激(HFS)诱发LTP。K1组于HFS前20 min经腹腔注射氯胺酮25 mg/kg,K2组HFS后60 min腹腔注射氯胺酮25 mg/kg。结果与术前比较,术后三组各时点痛阈降低(P<0.05);与基础值比较,NP组与K2组HFS后各时段EPSP幅值升高(P<0.05),与NP组和K2组比较,K1组HFS后各时段降低(P<0.05)。结论氯胺酮可阻滞神经病理性痛大鼠海马CA1区突触LTP的诱导,但不干扰维持。     

多次异丙酚给药对大鼠海马pCREB表达的影响

目的 探讨多次异丙酚给药对大鼠海马磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pcREB)表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠48只,日龄18～21 d,体重40～60 g,随机分为4组,每组12只,各组分别腹腔注射0.9%生理盐水10 ml/ks(A组)、异丙酚50 mg/kg(B组)、异丙酚100 mg/kg(C组)或异丙酚200 mg/kg(D组),连续用药5 d.每天均采用Morris水迷宫实验测试大鼠空间学习记忆能力.第5天测试结束后处死大鼠取脑分离海马组织,每组随机取6只应用免疫组织化学法检测海马pCREB的表达,剩余6只透射电镜下观察海马神经元突触结构.结果 与第1天比较,各组第4、5天逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);与A组比较,其余3组第4、5天逃避潜伏期延长(P<0.05);与B组比较,D组第5天逃避潜伏期延长(P<0.05);与A组和B组比较,c组和D组海马pCREB表达下调(P<0.05).随异丙酚剂量增加,大鼠海马神经元突触结构受损加重.结论 多次较大剂量异丙酚给药可引起幼年大鼠空间学习记忆能力降低,其机制可能与海马pCREB表达下调、海马神经元突触结构改变有关.     

作用于GABA-R的静脉麻醉药(异丙酚与咪唑安定)之间相互作用的研究进展

目前普遍认为位于突触后膜的配体门控型离子通道可能是全麻药的分子作用位点.其中γ-氨基丁酸型受体(GABAa受体)及其门控Cl-通道复合物尤显重要.本文扼要概述了异丙酚与苯二氮(艹卓)类在该通道复合物水平的相互作用及其可能机制.     

作用于GABA—R的静脉麻醉药（异丙酚与咪唑安定）之间相互作用的研究进展

目前普遍认为位于突触后膜的配体门控型离子通道可能是全麻药的分子作用位点。其中γ-氨基丁酸型受体(GABAa受体)及其门控C1^-通道复合物尤显重要。本文扼要概述了异丙酚与苯二氮革类在该通道复合物水平的相互作用及其可能机制。     

异丙酚对大鼠海马CA1区神经元兴奋性突触传递的影响

目的 研究异丙酚对大鼠海马CA1区神经元兴奋性突触后电流（EPSC）和自发性兴奋性突触后电流（sEPSC）的影响。方法 Wistar大鼠断头后分离海马脑组织，制成400μm厚度的海马脑片，脑片随机分为5组（n=10）。脂肪乳剂Ⅰ组、异丙酚Ⅰ组、SR95531＋异丙酚组：记录EPSC10min（基础值）后分别加入10％脂肪乳剂90μl,1％异丙酚90μl（相当于100μmol／L）、10μmol／LSR95531＋100μmol/L异丙酚，继续记录EPSC40min，分析EPSC幅值的变化。脂肪乳剂Ⅱ组、异丙酚Ⅱ组：细胞破膜后稳定10．15min，分别加入10％脂肪乳剂90出和1％异丙酚90出，记录sEPSC40min，分析sEPSC频率、幅值和半衰期的变化。膜钳制电压均为-70mV。结果 与基础值比较，给药后脂肪乳剂Ⅰ组和SR95531＋异丙酚组EPSC幅值差异无统计学意义，异丙酚Ⅰ组EPSC幅值降低；给药后异丙酚Ⅰ组EPSC幅值比脂肪乳剂Ⅰ组降低（P〈0．05）。与脂肪乳剂Ⅱ组比较，异丙酚Ⅱ组sEPSC的频率、幅值降低、半衰期缩短（P〈0．05）。结论 异丙酚主要通过增强大鼠海马CA1区神经元突触前膜和突触后膜的GABA．受体活性，产生突触前抑制和突触后抑制，从而抑制兴奋性突触传递。     

异丙酚全麻作用的分子学机理

异丙酚的全麻作用机理仍不十分清楚。目前认为异丙酚的全麻作用主要与其兴奋GABA_A受体-CL~-通道复合体功能和(或)抑制GABA的重摄取,从而增强抑制性突触后电位;抑制电压敏感性钙通道;影响胞内第二信使系统以及抑制兴奋性神经递质谷氨酸的释放等方面有关。     

异丙酚对大鼠脑突触体Na^＋,K^＋—ATP酶活性的影响

目的;了解异丙酚是否通过影响脑突触体Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性产生中枢抑制效应。方法：ＳＤ大鼠３０只,随机分为三组,分别腹腔注射异丙酚５０ｍｇ／ｋｇ,１００ｍｇ／ｋｇ和生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ。结果：ｉｐ异丙酚５０ｍｇ／ｋｇ能明显抑制海马,脑干突触体的Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性,ｉｐ异丙酚１００ｍｇ／ｋｇ能使大脑皮层,脑干及海马突触体的Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性明显降低。     

异丙酚对大脑皮层突触体谷氨酸释放的影响

目的 探讨异丙酚的麻醉作用机理。方法 分别制备１０只成年ＳＤ大鼠大脑皮层突触体。实验分为ＫＣＬ组（突触体悬液中均加入２０ｍｍｏｌ．ｍｌ＾－１ＫＣＬ）和氨基吡啶组（突触体悬液中加入６．７ｍｍｏｌ．ｍｌ＾－１氨基吡啶）。每组又分为５个亚组，分别对应于突触体悬中异丙酚浓度０、１２．５、２５、５０和１００μｍｏｌ．ｍｌ＾－１。谷氨酸的释一由连续酶标荧光法测定。结果 异丙酚对ＫＣ１组突触体谷投案酸释放量无显     

内侧视前区毁损对异丙酚及氯胺酮麻醉作用的影响

目的 观察毁损前下丘脑的内侧视前区(mPOA)对静脉麻醉药异丙酚、氯胺酮诱发大鼠翻正反射消失潜伏期(RL)、恢复时间(RT)的影响,探讨mPOA在异丙酚、氯胺酮麻醉作用机制中的地位。方法 24只SD大鼠,随机分为两组,每组12只,即mPOA微量注射NS组(NS组),甲基天冬氨酸(NMDA)毁损组(NMDA-des组);7 d后再将其各分为两个亚组,即NS+异丙酚组,NS+氯胺酮组,NMDA-des+异丙酚组,NMDA-des+氯胺酮组。微量注射NMDA(5μg/0.2μl)毁损大鼠mPOA后,观察大鼠行为学和体重的变化;7 d后分别腹腔注射异丙酚(100mg·kg-1)和氯胺酮(100mg·kg-1),观察对大鼠翻正反射消失潜伏期和恢复时间的影响。结果 mPOA微量注射NS组大鼠行为学及体重无明显变化,NMDA毁损组与NS组比较体重显著减轻(P<0.01);腹腔注射异丙酚或氯胺酮后,毁损组大鼠RL较NS组均显著延长(P<0.01),RT显著缩短(P<0.01,P<0.05)。结论 mPOA可能参与了对异丙酚、氯胺酮麻醉作用的调节。     

异丙酚对新生大鼠海马CA1区兴奋性突触反应的影响

目的：研究异丙酚对新生大鼠海马CAI区兴奋性突触反应的影响。方法：取1周龄Wistar大鼠,快速断头取脑,用振动切片机切取400μm厚的海马脑片,电刺激靠近海马CA1区的Schaffer纤维,用全细胞膜片钳技术记录CA1区锥体细胞的兴奋性突触后电流（excitatory post—synaptic current,EPSC）。循环液中加入不同浓度的异丙酚,观察其对EPSC的影响。然后给与低频刺激（900pulse,3Hz）诱导长时程抑制（10ng—term depression,LTD）,并观察异丙酚对LTD诱导的影响。结果：异丙酚呈剂量依赖性地抑制EPSC,其怍用可被印防己毒素（picrotoxin,pic）阻断;异丙酚可易化由N-甲基-D-门冬氨酸（N—methvl—D—aspartate,NMDA）受体介导的LTD的诱导。结论：异丙酚可影响新生大鼠海马CA1区的兴奋性突触传递和突触可塑性,从而对大鼠的学习和记忆产生影响。