ELISA法测定血清Ⅳ型胶原

目的 建立一种测定血清Ⅳ型胶原（ＣⅣ）的夹心ＥＬＩＳＡ法。方法 分别制备Ⅳ型胶原的多抗和单抗,正辛酸－硫酸铵沉淀法纯化,用改良过碘酸钠法标记单抗。采用多抗包板,单抗标酶,建立测定血清ＣⅣ的双抗夹心ＥＬＩＳＡ法。结果 该法灵敏度为２２．０μｇ／Ｌ,线性范围为３１￣１０００μｇ／Ｌ。本法的批内和批间变异系数分别为５．２％和１１．８％,平均回收率为９６％,与进口试剂盒相比相关性良好,临床应用结果可信。结     

人血清载脂蛋白B100免疫浊度测定法研究

为寻求一种简易、快速、成批地测定人血清载脂蛋白Ｂ１００（ａｐｏＢ１００）的方法，作者采用自制羊抗人ａｐｏＢ１００血清，以免疫浊度测定法测定人血清ａｐｏＢ１００。此法灵敏、特异、易自动化操作，最小检测量为３．１μｇ，标准曲线测定范围为０．３４～１．７０ｇ／Ｌ，批内及批间重复变异系数分别为１．１３％～３．４８％及２．９１％～４．４８％。测定１００例正常成人血清ａｐｏＢ１００的含量（ｘ±ｓ）为０．８２１±０．１６５ｇ／Ｌ。文内还对影响测定的有关因素进行了讨论。     

血清鳞状细胞癌抗原在肺鳞癌诊断中的价值

本实验采用全自动快速荧光酶分析系统（ＩＭｘ），用微粒子酶免疫测定法（ＭＥＩＡ）测定了１０５人血清鳞状细胞癌抗原（ＳＣＣＡｇ）水平，其中３４例肺鳞癌（ＳＣＣ），２６例肺非鳞癌（ＮＳＣＣ）患血清ＳＣＣＡｇ水平，以２０例肺良性肺疾病和２５例健康人为对照组。取２μｇ／Ｌ为正常值上限，超过此值为阳性，结果显示：血清ＳＣＣＡｇ水平在肺ＳＣＣ组（３．６６０±３．０２７μｇ／Ｌ）明显高于正常对照组（０．７５５±     

地高辛抗体的制备和应用

目的制备地高辛免疫试剂盒所需的特异抗体和酶标抗原。方法化学合成地高辛（Ｄｉｇ）、牛血清白蛋白（ＢＳＡ）结合物（Ｄｉｇ－ＢＳＡ），形成完全抗原；依据动物体的免疫反应规律安排免疫日程，制备高质量的抗地高辛特异性抗体（Ｄｉｇ－Ａｂ）。化学合成酶标记抗原，将地高辛抗体和酶标抗原应用于地高辛血浓度监测的免疫脂质体溶破法（ＬＩＬＡ）、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和化学发光酶免疫法（ＣＬＥＩＡ）测定。结果抗体效价达１∶１．８×１０６放射免疫法（ＲＩＡ），亲合系数为２．６７×１０９，与人血清内源物质无交叉反应。三种免疫方法的灵敏度、线性、回收率、精密度分别为０．２～０．０６μｇ／Ｌ、１０μｇ／Ｌ、８９．３％～１１０．５％、２．４％～８．８％（批内）、６．０％～１８．８％（批间），与荧光偏振法和ＲＩＡ法有良好相关。结论制备的抗体和酶标抗原可用于地高辛的免疫试剂盒。     

人血清载脂蛋白AⅡ酶联免疫测定法研究

本文介绍测定人血清载脂蛋白ＡⅡ（ａｐｏＡⅡ）的酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）。特异抗人ａｐｏＡⅡ血清由免疫山羊获得，按过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶羊抗人ａｐｏＡⅡγ球蛋白交联物。用羊抗人ａｐｏＡⅡγ球蛋白（２０μｇ／ｍｌ）包被聚苯乙烯酶标板。结果表明：ａｐｏＡⅡ抗血清与ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣｓ，ａｎｏＢ１００（ＬＤＬ）以及人血清白蛋白无交叉反应，最小检测量为５０Ｏｎｇ，标准曲线工作范围为０．２５～８．００ｍｇ／ｄｌ，板内及板间变异系数分别为５．０％～９．２％及６．８％～１１．７％，回收率１０６．０±２．１％（ｎ＝４）。应用本法测得４１例血脂正常者ａｐｏＡⅡ含量为２４．４±５．９ｍｇ／ｄｌ，与用ＲＩＤ法测得的结果２６．７±４．６ｍｇ／ｄｌ相比（ｒ＝０．８０００，Ｐ＜０．００１），无显著性差异。本法特异性强，灵敏度高，简便快速。     

过氧化物酶测定对原发性肝癌的诊断价值

测定原发性肝癌（ＨＣＣ）８１例，肝硬化３２例，病毒性肝炎３０例，良性肝占位１０例，消化道癌３１例及７２例正常人血清过氧化物酶（ＰＯＤ）。结果正常血清ＰＯＤ值为１．４３±０．５６（μｍｏｌ／ｓ）／Ｌ。ＨＣＣＰＯＤ值为３．４±０．１７９（μｍｏｌ／ｓ）／Ｌ明显高于正常对照组及其他各组。以ＰＯＤ≥３．０（μｍｏｌ／ｓ）／Ｌ为ＨＣＣ诊断标准，其阳性率为５６．８％，特异性为９３．６％，准确性为８１．３％。ＰＯＤ与ＡＦＰ含量无相关关系（ｒ＝０．１６，Ｐ＝０．１６）。在ＡＦＰ阴性ＨＣＣ病例中，ＰＯＤ阳性率６２．２％，两者联合检测ＨＣＣ，其检出率可高到７９％。结果提示，血清ＰＯＤ检测可用于ＨＣＣ的诊断及对良恶性肝病的鉴别诊断。     

反相高效液相色谱法同时测定血清维生素A和维生素E

采用反相ＨＰＬＣ紫外检测法，利用同一内标物（视黄醇醋酸酯），同时测定血清视黄醇和α－生育酚，本法在视黄醇为１０００μｇ／Ｌ，α－生育酚为１０ｍｇ／Ｌ内线性良好，视黄醇最低检限为１０μｇ／Ｌ，回收率为９６．２４％，批内和批间ＣＶ值分别为３．１％和３．３％，α－生育酚最低检限为０．５ｍｇ／Ｌ，回收率为９７．２２％，批内和批间ＣＶ值分别为３．８％和３．９％，结果表明，本法可对血清视黄醇和α－生育酚作出较     

血清中HA,hpc:Ⅲ及Ⅳ.C异常程度与临床诊断肝纤维化的关系

目的 研究肝病患者血清中ＨＡ,ｈｐｃ：Ⅲ及Ⅳ．Ｃ异常程序与肝纤维化临床诊断的关系。方法 应用放射免疫分析法（ＲＩＡ）,联合检测１１４例各型肝病口才血清透明质酸、人Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原呈并进行分析。结果 ＨＡ检测值〉８００μｇ／Ｌ肝硬化组占７５．１％,慢性迁延性肝炎组占３６．２％;ｈｐｃ：Ⅲ检测值,２１０μｇ／Ｌ,肝硬化组占７２．６％,慢性迁延性肝炎组占６０．８％;Ⅳ．Ｃ检测值〉１２０μｇ／Ｌ,肝硬     

亲环素及其自身抗体与SLE活动性的相关性探讨

目的：探讨血浆与淋巴细胞内亲环素（ＣｙＰ）水平及抗亲环素自身抗体与全身性红斑狼疮（ＳＬＥ）活动性的关系。方法：用重组人亲环素（ｒｈＣｙＰ）制备单克隆和多克隆抗体,建立双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法,测定血浆和细胞内ＣｙＰ水平,用ｒｈＣｙＰ包被反应板微孔,建立间接ＥＬＩＳＡ法检测抗ＣｙＰ自身抗体,对活动性和非活动性ＳＬＥ患者进行了观察。结果：ＳＬＥ患者含量分别为（３２３±４２０）μｇ／Ｌ和（２６４０±６５０）μｇ／ｇ蛋白,均显著高于正常对照组的（１６５±８０）μｇ／Ｌ和（２２９０±３８０）μｇ／ｇ蛋白;其中活动性ＳＬＥ患者又显著高于非活动性ＳＬＥ（Ｐ＜０．０５）。ＳＬＥ抗ＣｙＰ自身抗体阳性率（４８％）显著高于正常人（２．５％）,抗ＣｙＰ阳性与皮肤粘膜损害、关节痛、发热、白细胞减少、抗Ｓｍ抗体阳性密切相关。结论：血浆和淋巴细胞内ＣｙＰ升高和抗ＣｙＰ自身抗体阳性可反映ＳＬＥ活动性。     

人血清载脂蛋白B100免疫浊度测定法研究

为寻求一种简易、快速，成批发测定人血清载脂蛋白Ｂ１００的方法，作者采用自制羊抗人ａｐｏＢ１００血清，以免疫浊度测定法测定了血清ａｐｏＢ１００。此法灵敏，特异，易自动化操作，最小检测量为３．１μｇ，标准曲线测定范围为０．３４￣１．７０ｇ／Ｌ，批内及批间重复变异系数分别为１．１３％￣３．４８％及２．９１％￣４．４８％，测定１００例正常成人血清ａｐｏＢ１００的含量为０．８２１±０．１６５ｇ／Ｌ。文内还对     

Ⅳ型胶原酶联免疫检测方法的改进

目的建立一种敏感、特异、操作简单的血清Ⅳ型胶原蛋白(COLⅣ)测定方法,并可与肝炎标记物同步进行测定。方法以免疫家兔制备抗人COLⅣ多抗包被微孔板,采用改良过碘酸钠法辣根过氧化物酶标记抗人COLⅣ单抗,改变各种稀释液成分及浓度,建立双抗夹心酶免疫测定法(ELISA)。结果最低检测极限为30μg／L,平均回收率为102．75％,批内和批间变异系数分别为<6.0％和11.8％;测定50例健康人,其参考值为97．9μg／L。结论此方法具有灵敏、准确、稳定、特异性较高、标本用量少、检验用时短,并可与乙型肝炎标志物同时检测的特点,易在临床推广使用。     

慢性肾小球肾炎患者血清Ⅳ型胶原水平的变化及意义

为探讨慢性肾小球肾炎患者血清Ⅳ型胶原 (CⅣ )质量浓度的变化及其与肾功能损害的关系 ,采用酶联免疫法对 34例慢性肾小球肾炎患者和 30例正常人血清CⅣ水平进行检测。结果 :慢性肾炎患者血清CⅣ质量浓度为( 4 0 1 .4 6± 1 1 8.5 3) μg/L ,明显高于对照组的 ( 6 4 .32± 4 2 .5 4 ) μg/L(P <0 .0 1 )。CⅣ与血 β2 MG、尿 β2 MG、血肌酐(SCr)均呈显著正相关 ,相关系数r分别为 0 .6 97、0 .6 4 4、0 .5 2 3,P均 <0 .0 1 ;与肾小球滤过率 (GFR)呈显著负相关(r=-0 .70 1 ,P <0 .0 1 )。提示 :监测慢性肾小球肾炎患者的血清CⅣ有助于监测、判断疾病的活动及病程进展     

胃蛋白酶原联合同型半胱氨酸检测对胃组织良恶性病变的诊断价值

目的 探讨胃蛋白酶原(PG)联合同型半胱氨酸(Hcy)检测对胃组织良恶性病变的诊断价值.方法 收集2014年1月至2016年8月我院收治的100例胃癌患者为胃癌组,100例胃良性病变患者(41例胃炎、25例胃息肉、34例胃溃疡)为胃良性病变组,选取同期我院健康体检者200例为对照组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定三组受检者的血清PG(PGⅠ、PGⅡ)水平并计算胃蛋白酶原率(PGR),循环酶法测定三组受检者的血清Hcy水平,并计算血清PG联合Hcy对胃良性病变及胃癌的诊断价值.结果 胃癌组、胃良性病变组血清PGⅠ水平分别为(59.37±14.16)μg/L、(93.85±14.23)μg/L,PGR分别为(3.27±1.52)、(7.65±2.04),均低于对照组的(149.92±13.34)μg/L、(11.40±1.95),差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组、胃良性病变组血清PGⅡ水平分别为(20.18±4.59)μg/L、(16.06±5.87)μg/L,Hcy水平分别为(26.37±3.85)μmol/L、(12.16±3.91)μmol/L,均高于对照组的(10.71±5.15)μg/L、(9.83±3.24)μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组血清PGⅠ水平、PGR低于胃良性病变组,血清PGⅡ、Hcy水平高于胃良性病变组,差异均有统计学意义(P<0.05).在TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ时,血清Hcy水平分别为(19.64±4.98)μmol/L、(22.00±5.14)μmol/L、(24.38±5.97)μmol/L、(27.07±4.52)μmol/L,呈递增趋势,整体比较差异有统计学意义(P<0.05),PG I水平分别为(67.63±15.91)μg/L、(55.39±15.18)μg/L、(46.18±14.97)μg/L、(39.72±15.50)μg/L,PGⅡ水平分别为(18.02±3.97)μg/L、(17.25±4.25)μg/L、(16.34±4.50)μg/L、(15.38±4.12)μg/L,PGR分别为(3.87±2.28)、(3.38±2.56)、(2.76±3.31)、(2.02±3.54),均呈递减趋势,整体比较差异均有统计学意义(P<0.05).PGⅠ+PGR+Hcy对胃癌诊断的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值及准确率分别为89.00%、95.00%、94.68%、89.62%、92.00%,均高于PG I+PGR的76.00%、83.00%、81.72%、77.57%、79.50%以及Hcy的71.00%、86.00%、83.53%、74.78%、78.50%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 血清PG、Hcy可有效评估胃黏膜的疾病状态,两指标联合有助于早期鉴别诊断胃良性病变和胃癌,提高对胃癌的诊断价值.     

L158,809和西拉普利对体外培养系膜细胞TGF-β1表达和细胞外基质蛋白分泌的影响

目的：观察血管紧张素受体拮抗剂(ARBs)L158，809和血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂西拉普利对体外培养人肾小球系膜细胞转化生成因子(TGF—β1)表达和纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原分泌的影响。方法：分别在不同葡萄糖浓度(5.6mmol／L和30mmol／L)和药物浓度(1、10、100和500μmol／L)下体外培养人肾小球系膜细胞，分别于24、48和72h后测定细胞增殖。然后将系膜细胞分为低糖(5．6mmol／L)对照组(LG)、高糖(30mmol／L)对照组(HG)、L158，809(10μmol／L)组和西拉普利(10μmmol／L)组，48h后，分别用RT-PCR法测定TGF-β1表达，ELISA和放射免疫法测定细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ胶原浓度。结果：与低糖对照组相比，高糖对照组系膜细胞过度增殖，细胞上清液中TGF-βl、纤维连接蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ胶原浓度明显升高，TGF-βlmRNA表达也显升高；而L158，809组和西拉普利组TGF-β1和细胞外基质(ECM)蛋白水平明显低于高糖对照组，且TGF-β1mRNA水平亦表达明显降低。结论：高糖可刺激体外培养系膜细胞过度增殖，TGF-β1表达增高，ECM蛋白分泌明显增加，而L158，809和西拉普利均可抑制高糖环境下上述现象。     

血清Ⅳ型胶原水平的测定及该胶原在各型肝病患者体内的变化

目的 :测定各型肝病患者血清Ⅳ型胶原水平。方法 :用Sandwich免疫酶技术 ,即用两个单克隆抗体识别Ⅳ型胶原的 7S和TH区 ,测定各型肝炎、肝硬化及肝癌患者 (共 42 8例 )体内血清Ⅳ型胶原的水平。结果 :健康对照组血清Ⅳ型胶原水平为 (6 3 2± 3 1 9) μg·L- 1 ,重型肝炎者最高 [80 1 .8± 43 1 .2 μg·L- 1 ],各型肝病组血清Ⅳ型胶原水平均显著高于对照组 (均P <0 .0 1 )。结论 :本法简单、实用 ,可用于临床评价肝纤维化。     

血管内皮生长因子及可溶性受体-1水平变化对子痫前期发病的预测探讨

目的:探讨孕妇血浆中血管内皮生长因子(VEGF)及可溶性受体-1(sFlt-1)水平变化对子痫前期发病的早期预测价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对200例初始血压正常的孕妇自孕16周开始检测血清VEGF及sFlt-1水平,共测定3次。结果:(1)200例孕妇中发展为子痫前期18例,其余182例孕妇妊娠结局正常;(2)在孕16~20、22~28、30~36周子痫前期组孕妇血清VEGF、sFlt-1水平分别为(29.30±4.25)ng/L、(6.68±1.65)μg/L;(26.98±3.81)ng/L、(15.18±3.99)μg/L;(26.77±4.32)ng/L、(20.23±5.67)μg/L。正常妊娠组VEGF、sFlt-1水平分别为(33.18±2.01)ng/L、(6.72±0.76)μg/L;(30.97±3.24)ng/L、(6.78±1.03)μg/L;(30.62±1.65)ng/L、(6.87±1.03)μg/L。两组比较孕16~20周差异无统计学意义(P>0.05),而孕22~28周、孕30~36周差异有统计学意义(P<0.01)。(3)sFlt-1水平作为预测子痫前期发生的指标,采用ROC曲线求得sFlt-1预测界限值为9.26μg/L。其预测敏感度81.82%,特异度99.13%,阳性预测值94.74%,阴性预测值96.61%。结论:血清sFlt-1水平可以作为子痫前期发病的早期预测指标。     

血清Ⅲ、Ⅳ型胶原及板层素对肝纤维化的诊断价值

目的：探索诊断早期肝纤维化的敏感指标。方法：用放射免疫法检测２３６例各型肝病患者血清Ⅲ型胶原（ＴｐｙｅⅢｃｏｌａｇｅｎ,ＰＣⅢ）、Ⅳ型胶原（ＴｐｙｅⅣｃｏｌａｇｅｎ,Ⅳ－Ｃ）和板层素（Ｌａｍｉｎｉｎ,ＬＮ）水平。结果：各类肝病患者血清ＰＣⅢ、Ⅳ－Ｃ和ＬＮ水平随病情进展而逐渐升高。以ＰＣⅢ≥１３５μｇ／Ｌ、Ⅳ－Ｃ≥１３０μｇ／Ｌ为诊断肝纤维化的临界点,其敏感度、特异性、准确率分别达８０％以上。结论：表明ＰＣⅢ、Ⅳ－Ｃ及ＬＮ可作为肝纤维化诊断较为敏感的指标,其中Ⅳ－Ｃ对早期肝纤维化的诊断优于ＰＣⅢ及ＬＮ,对肝癌的诊断有一定意义     

MCP-1﹑Ⅳcollagen和血清对单核细胞迁移作用的实验研究

目的 初步探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）﹑Ⅳ型胶原蛋白（Ⅳcollagen）和血清在单核细胞迁移过程中的作用。方法 体外单核细胞迁移模型的建立，在体积分数10%FBS/1μgⅣcollagen和体积分数0%FBS/1μgⅣcollagen的实验条件下添加650ng/mlMCP-1与0ng/mlMCP-1。统计分析迁移后两组细胞的贴壁率，流式细胞术检测迁移前后单核细胞表面抗原CD14阳性率。结果 在体积分数0%FBS/1μgⅣcollagen的实验条件加入650ng/ml MCP-1时细胞生长良好，细胞贴壁率高于对照组。迁移前CD14细胞阳性率19.6%，迁移后CD14细胞阳性率1.5%。结论 单核细胞在体积分数0%FBS/1μgⅣcollagen/650ng/mlMCP-1实验条件时细胞迁移数量最多，条件最适宜。     

口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白诱导实验性CIA小鼠免疫耐受

评价口服鸡源性Ⅱ型胶原蛋白 (chickentypeⅡcollagen ,CCⅡ )对胶原性关节炎 (collagen inducedarthritis,CIA)小鼠的抗炎及免疫作用的影响。方法 :以CCⅡ蛋白与福氏完全佐剂免疫昆明种小鼠 ,并于第 2 1天强化免疫 1次。CCⅡ于致敏前第 5天即开始灌胃给药 ,共 2 0d。每周两次评价多发性关节炎评分。以ELISA法测定CIA小鼠血清抗CⅡ抗体。以流式细胞测定法测定小鼠脾T淋巴细胞亚型。以ELISA法测定佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞IL 1分泌水平。结果 :口服CCⅡ 5 μg·kg-1和 5 0 μg·kg-1可明显降低多发性关节炎评分值 ,而25 0 μg·kg-1剂量组则无作用 ;CCⅡ 5 μg·kg-1剂量组可抑制CIA小鼠升高了的血清抗CⅡ抗体水平 ;口服CCⅡ可使CIA小鼠升高的L3T4+/Lyt 2 +值有所降低。口服CCⅡ可使佐剂性关节炎大鼠升高了的IL 1水平有所降低。结论 :口服CCⅡ可抑制CIA小鼠多发性关节炎的发生 ,此作用可能有体液免疫和细胞免疫两种机制参与。以上作用的发生为剂量依赖性的 ,即小剂量作用最强。     

血清脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性研究

目的 探讨血清脂联素(APN)浓度与慢性乙型肝炎肝纤维化的关系.方法 选择我院传染科2013年1月至2015年6月期间收治的63例慢性乙型肝炎肝纤维化患者,根据肝纤维化程度分为轻度组(n=28)、重度组(n=22)、肝硬化组(n=13),并选择30例健康体检者纳入对照组,检测各组受检者的血清APN浓度及透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)和Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)浓度,并比较慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后上述指标水平的变化.结果 血清APN浓度在对照组、轻度组、重度组及肝硬化组分别为(6.41±2.21)μg/mL、(9.46±3.27)μg/mL、(15.11±4.30)μg/mL、(20.54±5.52)μg/mL,两两比较依次上升,血清HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ浓度也依次上升,差异均有统计学意义(P<0.05),且血清APN浓度与肝纤维化分级之间存在正相关性(P<0.05);肝纤维化患者抗病毒治疗后血清APN及HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ均明显降低,与治疗前比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的发生、发展关系密切,血清脂联素浓度可反映肝纤维化的程度及抗病毒治疗后肝纤维化的改善程度.