胰酶制备中三酶活性的相互关系及其主要影响因素的研究

作者对猪胰酶制备过程中胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等三酶活性间的相互关系,主要影响因素及如何提高胰酶产品的三酶活性等方面进行了研究。结果表明,三酶中起主导作用的是胰蛋白酶,最不稳定的是胰脂肪酶;三酶活性可通过温度、时间、激活剂等因素控制,适当的工艺条件可使产品在脂肪酶、淀粉酶活性较高的前提下,其蛋白酶活性提高。     

应用正交试验对提高胰酶收率及活力的探讨

<正> 胰酶是猪的胰脏中提取得到的一种混合酶,其中含有胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性酶、激肽释放酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶、羧基肽酶核糖核酸酶及过氧化物酶等。胰酶它是一种微带吸湿性、显白色或淡黄色的粉末,具有弱臭味,在水中不完全溶解,在乙醇和乙醚中均不溶,其水溶液遇酸、热不稳定、重金属盐、醇及单宁可使之产生沉淀。胰蛋白酶通常是以无活性的酶元存在于胰     

从生产胰岛素的胰渣中制备胰酶、胰蛋白酶及糜蛋白酶

目的 从中性乙醇提取胰岛素后的残渣中提取制备高活性的胰酶,并从中分离纯化出胰蛋白酶(T)、糜蛋白酶(CT).方法 在胰渣中加入活化剂活化后,用PEG-6000沉淀、丙酮脱脂干燥得到胰酶;胰酶经CM-纤维素纯化得到胰糜蛋白酶混合制剂,再经CM-sepharose FF层析分离得胰蛋白酶和糜蛋白酶.结果 胰酶回收率为12.1％,胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶的活性分别为5.40、39.72、76.72 U·mg-1,3种酶的活性比例达1∶7.4∶14.2.胰蛋白酶、糜蛋白酶的效价分别为2505、1003 U·mg-1;相对于胰酶,二者的活性回收分别为48.93％、61.73％.结论 从胰渣中制得的胰酶活性较高(约9倍于《中国药典》2010年版中的标准);制得的T及CT的活力也达到《中国药典》2010年版中的标准.     

胰酶药物

<正> 胰酶是具有生理活性的复合酶,是国际医药卫生界公认的疗效确切的生化药品之一。主要含有胰蛋白酶、胰糜蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶,还有羧肽酶、核糖核酸酶、弹性蛋白酶及激肽释放酶等。1983年以前,我国生产的胰酶是控制单项     

胰酶中脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶活力测定方法的研究

<正> 胰酶是指从猪、牛羊等动物胰脏提取得到的一种混合物,主要含胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧肽酶、淀粉酶、脂肪酶和RNA酶。临床上广泛应用于腹外分泌障碍,消化不良等疾患。目前,各国药典对胰酶制剂质量标准不一致,胰酶中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶直接影响人体的消化吸收和营养状态。外国药典(B.P、USP、J.P等)胰酶制剂大都是规定胰蛋白酶、胰淀粉酶,胰脂肪酶三酶的含量指标和三酶比例,而中国药典(77)对此品种仅作胰蛋白酶的半     

温度及不同浓度乙醇对胰酶活力的影响

目的找出胰酶在制剂工艺过程中酶活力损失较大的主要原因。方法根据胰酶的制剂生产工艺条件 ,选取 40℃及不同浓度乙醇 (2 0 %～ 10 0 % ) ,分别考察对胰酶活力的影响。结果 40℃ 8～ 12h胰脂肪酶活力降低10 %左右 ;吸湿更容易降低胰脂肪酶和胰淀粉酶活力。结论胰酶制剂最好不用湿法制粒。     

胰脏激活提取对胰酶收率和活力的影响

探讨了胰脏激活提取温度和时间对胰酶的收率和活力的影响。结果表明,提取过程中的温度和时间是影响胰酶收率和活力的主要因素。选择较佳激活提取工艺条件,胰酶收率可达8～11％,胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活力比为1:30:10。     

由胰腺提取胰岛素及胰酶的方法

<正> 按照惯常的制备胰岛素所用的方法,是用酸化乙醇处理胰脏使胰岛素得以溶解,使用的乙醇浓度通常是60～80％(按重量计),由于胰腺含有水份故对乙醇进一步产生相当大的稀释作用。通过这种处理,不管怎样,一些现存的酶要受到破坏,胰脂肪酶和胰淀粉酶几乎完全被破坏,而在胰蛋白酶和其他蛋白消化酶方面,酶的一部份要和胰岛素一起溶解,以致使随后的分离将陷入很大的困难,并且酶的一部份会失活。提取后的残渣仅仅含很少量的蛋白消化酶,几乎没有胰脂肪酶或胰淀粉酶。     

混乱的胰酶制剂急需纠正

<正> 我国一九八五年版药典明确规定,胰酶“每1g含胰蛋白酶不得少于600单位,胰淀粉酶不得少于7000单位,胰脂肪酶不得少于4000单位”。但国内大多数厂家生产的胰酶只注意到胰蛋白酶,测定方法是已经淘汰了的转化酪蛋白的方法(我国一九七七年版药典的胰酶标准早已通知停用),未测定胰淀粉酶和胰脂肪酶。按我国药品管理法规定“禁止生产,销售劣药,有下列情形之一的药品为劣药:一、药品成份     

高活力胰酶制备工艺的研究

本文报告了高活力胰酶的简易制备方法。本法用稀醇提取,加适量保护剂与激活剂,将酶原激活,获高活力胰酶。按干品计算,每克胰酶粉的酶活力平均含胰蛋白酶为281,000个单位、胰淀粉酶为37,400个单位、胰脂肪酶为18,300个单位;炽烧残渣为4.59％;干燥失重为3.97％;收率为10.47％;脂肪含量小于20毫克。本法工艺简单、稳定、生产周期短、易推广。     

胰酶生产工艺的研究

胰酶生产工艺的研究何新霞,冯高德,张旭（浙江师范大学生物系,金华３２１００４）徐丽珊（浙江金华生化药厂,金华３２１０００）胰酶是从动物胰脏中提取制备的消化酶混合物,其中主要是胰蛋白酶、胰脂肪酶和胶淀粉酶。药用胰酶是否具有胰脏中天然比例的酶特性,应视生...     

胰酶制造方法

<正> 本发明涉及的是具有分解淀粉、蛋白质和脂肪的高活力,而无致病菌的胰酶混合物及其制备方法。胰腺外分泌部份分泌一种弱碱性的液体,经胰管最后进入十二指肠。这种胰液含有活化后会使蛋白质水解成肽的胰蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶原,使淀粉变成糊精和糖的淀粉酶,以及把脂肪转变成甘油和脂肪酸的脂肪酶。胰蛋白酶是由十二指肠里分泌的所谓肠激酶激活的。胰蛋白酶又转而激活胰凝乳蛋白酶原。淀粉酶和脂肪酶主要是从体内分泌时自身活化的。     

胰腺激活提取对胰酶原粉收率和激肽释放酶活性的影响

目的探讨胰腺激活、提取温度和时间对胰酶收率和三酶 (蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶 )活力以及胰酶中激肽释放酶活性的影响。方法改变激活、提取温度和时间 ,了解影响胰酶收率、三酶活力和胰酶中激肽释放酶活性的主要因素。结果选择较佳的胰酶生产工艺条件 (激活温度 5℃ ,激活时间 4 0h ,提取温度 10℃ ,提取时间 4h) ,胰酶收率可达 9%～ 11% ,胰蛋白酶、胰淀粉酶、胰脂肪酶的活力比为 1∶18∶7,胰酶中激肽释放酶的活力达 (110 0±10 0 )u/mg ,产品质量符合出口标准。结论该方法简便实用 ,便于生产推广。     

猪胰酶、胰岛素与胰蛋白酶抑制剂的联产

目的 以猪胰浆为原料,联产胰酶、胰岛素(INS)与胰蛋白酶抑制剂(TI).方法 猪胰浆用中性醇处理,得到胰渣和上清液(Ⅰ);胰渣经过聚乙二醇-6000沉淀得到胰酶;Ⅰ用酸沉淀去掉杂质后再沉淀得到INS粗品和上清液(Ⅱ);INS粗品经DE-AE-Sepharose FF层析纯化;Ⅱ经Trypsin一壳聚糖多孔珠亲和吸附得到TI.结果 胰酶的回收率为15.1%4±0.6%,主要成分胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶的含量分别为(5.13±0.17)×103、(38.47±1.16)×103、(58.27±2.49)×103U·g-1;INS的回收率为73.7±9.0 mg·kg-1(n=3),效价为27.25±0.34U·mg-1,并具有完整的生物学活性;TI比活为102.59 U·mg,-1,产率为33.86 U·g-1.结论 胰酶、INS与TI的联产极大地提高了胰脏的利用率.     

大黄中酶抑制剂的研究

酶抑制剂广泛分布于植物、动物和微生物中,大黄是我国应用最广的中药之一,我们研究发现,它的根茎的水溶性部分有抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶的作用。本文报道了应用水提取、乙醇沉淀、硫酸铵沉淀、透析、Sephadex G-100凝胶过滤以及胰蛋白酶-琼脂糖凝胶亲和层析等方法,首次从大黄根茎水溶醇不溶部位中分离纯化到二种新的胰蛋白酶抑制剂Ⅰ和Ⅱ。抑制Ⅰ和Ⅱ除能抑制胰蛋白酶外,还能抑制胰凝乳蛋白酶。用苯甲酰精氨酸β-萘酰胺(BANA)为底物,分别求出抑制剂Ⅰ、Ⅱ对胰蛋白酶的重量抑制比值为1:0.94和1:1.35。两者对胰蛋白酶的抑制常数在10~(-7)～10~(-8)范围内。用葡聚糖凝胶过滤测定了抑制剂Ⅰ、Ⅱ     

胰酶和激肽释放酶分离的初步研究

<正> 胰酶应基本上含有动物胰脏中存在的各种酶类,如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和核酸酶等。胰酶中的蛋白酶类属内肽酶的包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、弹性蛋白酶和激肽释放酶等。这些内肽酶皆系丝氨酸蛋白酶。属外肽酶的主要是羧肽酶A和B。猪胰激肽释放酶在日本脏器生化药物中其年产值居于首位,临床已用于治疗初老期循环     

胰酶工艺研究

猪胰脏经十二指肠和钙盐激活、过滤、沉淀、乙醚或丙酮脱脂脱水可以得到三酶活力比为1:16:30(胰蛋白酶:胰脂肪酶:胰淀粉酶),收率为9～11％的胰酶。     

胰脏三酶提取中激活温度与时间对酶活力的影响

药用胰酶由动物胰脏激活提取而得,是胰蛋白酶,胰淀粉酶,胰脂肪酶等混合酶之总称。胰脏被绞碎后,内外肽酶、蛋白酶等以酶原形式最大限度地释放于溶液中,须激活后才具有水解蛋白质的能力。而胰淀粉酶、胰     

多酶片的质量考查

多酶片是一种具有生理活性的复合酶制剂,它含有胃蛋白酶和胰酶(胰蛋白酶、胰淀粉酶,胰脂肪酶),是医药卫生界公认的疗效确切的生化药品之一该药安全有效,使刚面广,是临床常用药,于1989年载入卫生部药品标准。我们按卫生部药品标准生化药品第一册(1989年)方法于1991～1992年连续2年考察     

牛胰蛋白酶制备工艺的改进及其对基因工程人胰岛素前体的酶切作用

目的对牛胰蛋白酶制备工艺进行改进,制备高纯度牛胰蛋白酶,并对其酶切基因工程人胰岛素前体的作用进行考察。方法采用粗制后先色谱分离再活化的方法对传统工艺进行改进,对传统工艺制备样品和改进工艺制备样品中的胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的比活力进行测定和比较;进一步采用这2种样品对基因工程人胰岛素前体进行酶切,对酶切作用进行比较。结果传统工艺制备样品中胰蛋白酶比活力为212.5 U·mg-1,胰凝乳蛋白酶比活力为20.4 U·mg-1;而改进工艺样品中胰蛋白酶比活力为240.4 U·mg-1,胰凝乳蛋白酶比活力为0.14 U·mg-1。传统工艺制备样品酶切基因工程人胰岛素前体目标产物纯度质量分数为16.3%,改进工艺制备样品酶切基因工程人胰岛素前体目标产物纯度质量分数为32.2%。结论粗制后先进行SP色谱可实现胰蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶原较好的分离,该方法适合于高纯度胰蛋白酶的制备,制备的胰蛋白酶适合作为工具酶进行基因工程人胰岛素前体的酶切。