液相色谱-串联质谱法测定人血浆中沙格雷酯浓度及人体生物等效性研究

目的 建立具有高灵敏度和高选择性测定人血浆中沙格雷酯药物浓度的液相色谱-串联质谱检测方法,并将其应用于盐酸沙格雷酯片的人体生物等效性研究.方法 血浆样品经乙腈沉淀,采用C18色谱柱,在多反应监测正离子模式下,以电喷雾离子源作为电离技术扫描分析,离子通道分别为:沙格雷酯m/z 430.200→135.100,沙格雷酯-d...     

液相色谱-串联质谱法研究氯沙坦钾片的生物等效性及人体药动学

 目的 建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定受试者口服氯沙坦钾片受试制剂和参比制剂后的血药浓度,估算两制剂的药动学参数并评价生物等效性。方法 采用随机、开放、双周期交叉试验设计,20名中国男性健康受试者单剂量口服受试制剂和参比制剂50 mg后,血浆样品经甲醇直接沉淀蛋白后进行LC-MS/MS分析,利用DAS2.0软件计算药动学参数,并进行生物等效性评价。结果 受试制剂和参比制剂血浆中氯沙坦的ρ_max分别为(222 ± 131)和(226 ± 166) μg·L-1,tmax分别为(1.28±0.64)和(1.45±0.70) h,t1/2分别为(1.91±0.32)和(1.90±0.37) h,AUC_{0-12 h}分别为(450±191)和(446±227) μg·h·L-1,相对生物利用度为(104.0 ±14.3)%。结论 建立的分析方法准确、灵敏、简便,统计结果表明,受试制剂和参比制剂生物等效。     

血浆中硫普罗宁的测定及其片剂人体生物等效性研究

 目的研究硫普罗宁片在健康人体内的相对生物利用度。方法采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)测定了18名健康男性受试者交叉po 200mg的硫普罗宁参比制剂和受试制剂后不同时间血浆中硫普罗宁的浓度,求出主要药动学参数,并进行方差分析和双单侧t检验。结果HPLC-MS测定血浆中硫普罗宁的线性范围为0.02～5mg·L^-1,定量下限为0.02mg·L^-1。日内、日间精密度(RSD)均小于13%,相对回收率介于96%～106%之间。硫普罗宁片参比制剂和受试制剂主要药动学参数:ρ_max分别为(3.54±0.75)和(3.27±1.03)mg·L^-1;t_max分别为(4.6±1.1)和(4.3±1.0)h;AUC_0-96h分别为(18.2±4.5)和(17.6±5.9)mg·h·L^-1;AUC_0-∞分别为(20.4±5.5)和(19.9±6.9)mg·h·L^-1;t_1/2分别为(39.4±14.3)和(41.8±16.5)h。t_max经非参数秩和检验,受试制剂与参比制剂无统计学显著性差异;ρ_max、AUC_0-96h、AUC_0-∞经对数转换后进行方差分析,受试制剂与参比制剂无统计学显著性差异,双向单侧t检验结果表明,受试制剂ρ_max的90%可信限落在参比制剂70%～143%之间,受试制剂AUC的90%可信限落在参比制剂80%～125%之间;以AUC_0-96h计算,受试制剂硫普罗宁片的相对生物利用度为(95.7±26.1)%。结论两种硫普罗宁片制剂具有生物等效性。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中厄贝沙坦

 目的建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中厄贝沙坦的浓度。方法50μL血浆样品经乙腈沉淀蛋白处理后,以乙腈-水-甲酸(90∶10∶0.25)为流动相,Zorbax SB C₁₈柱分离,通过电喷雾离子源四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行检测。结果测定血浆中厄贝沙坦方法的线性范围为2.0～5 000μg·L^-1,定量下限为2.0μg·L^-1。日内、日间精密度(RSD)均小于8.3%,准确度(RE)在±4.1%以内。厄贝沙坦和内标替米沙坦的回收率分别为90.9%和90.4%;每个样品测试时间仅为3.6 min。应用此法研究了18名健康受试者单剂量po 150 mg厄贝沙坦片后的药动学特点。结论该法选择性强,灵敏度高,适用于厄贝沙坦的临床药动学研究。     

液相色谱-质谱联用测定大鼠血浆中芍药内酯苷及其药动学研究

 目的建立大鼠血浆中芍药内酯苷的HPLC-MS/MS定量分析方法,并用于大鼠体内芍药内酯苷药动学研究。方法血浆样品采用固相萃取预处理。色谱柱为Symmetry C₁₈(4.6mm×50mm,3.5μm),流动相为乙腈-0.05%甲酸溶液(25∶75)。采用三重四极杆质谱仪进行多反应监测方式(MRM),电喷雾离子源。对所建方法进行了较全面的验证。考察了3种剂量芍药内酯苷给与大鼠后的药动学特征。结果所建方法灵敏、重现性良好。芍药内酯苷在体内吸收迅速,消除也较快。经统计学检验表明,在给定的3个剂量范围内,芍药内酯苷具有线性动力学特征。结论建立的方法可用于芍药内酯苷的药动学研究。     

马来酸依那普利片的人体生物等效性研究

 目的用HPLC-MS测定健康受试者口服马来酸依那普利制剂后的血药浓度,估算受试制剂和参比制剂的药动学参数,评价两种制剂的生物等效性和相对生物利用度。方法采用随机二交叉设计试验,20例男性健康志愿受试者,单剂量口服受试制剂和参比制剂的马来酸依那普利片。以高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中依那普利和依那普利拉的浓度。采用SPSS及BAPP2.2软件处理计算主要药动学参数。结果受试制剂和参比制剂血浆中马来酸依那普利的t_1/2分别为(1.33±0.22)和(1.25±0.37)h;ρ_max分别为(238.59±55.40)和(230.61±78.29)μg·L^-1,t_max分别为(0.70±0.20)和(0.80±0.20)h,AUC_0-8h分别为(339.03±70.66)和(373.23±108.83)μg·h·L^-1,AUC_0-∞分别为(343.51±71.15)和(378.36±107.35)μg·h·L^-1。依那普利拉的t_1/2分别为(6.26±0.63)和(5.72±0.54)h;ρ_max分别为(83.75±25.91)和(99.13±29.61)μg.L^-1,t_max分别为(3.80±0.60)和(3.40±0.70)h,AUC_{0-36 h}分别为(812.02±181.88)和(803.35±199.50)μg·h·L^-1,AUC_0-∞分别为(832.99±180.85)和(817.36±201.78)μg·h·L^-1,以依那普利和依那普利拉计算的人体相对生物利用度分别为(90.84±39.6)%和(102.8±31.3)%。结论两种制剂在健康人体内具有生物等效性。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中布南色林及其代谢物的浓度

 目的 建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定人血浆中布南色林及其代谢产物N-去乙基物的药物浓度方法。方法 血浆样品经饱和碳酸氢钠水溶液0.2 mL碱化后用醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)萃取,布南色林与其代谢物N-去乙基物分别以布南色林B和布南色林D为内标,采用LC-MS/MS测定。色谱柱为Agilent Eclipse plus C₁₈(4.6 mm×150 mm,3.5 μm),以乙腈-水(87∶13,V/V,含0.005 mol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸)为流动相,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为40 ℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子监测(SRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 368.2→297.2(布南色林),m/z 396.3→297.2(布南色林B),m/z 340.2→297.1(N-去乙基物),m/z 356.2→313.3(布南色林D)。结果 布南色林和N-去乙基物在10~2 000 ng·L^-1(r²=0.997)内线性良好,其平均回收率分别为93.5%和74.5%以上,批内、批间精密度分别小于9.0%与16.4%。结论 本试验建立的布南色林及N-去乙基物血药浓度的测定方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床研究中布南色林及其代谢物的药动学研究与治疗药物监测。     

多潘立酮咀嚼片的人体药动学和生物等效性

 目的研究多潘立酮咀嚼片和普通片在中国健康人体中的药动学及生物等效性。方法18名健康男性受试者单次口服10 mg多潘立酮咀嚼片和多潘立酮普通片后,采用LC-MS/MS测定多潘立酮的血药浓度,并计算两制剂的主要药动学参数及相对生物利用度。结果多潘立酮咀嚼片和普通片的主要药动学参数t_max分别为(0.59±0.29)和(0.67±0.43)h,ρ_max分别为(11.27±4.31)和(10.87±4.31)μg·L^-1,t_1/2分别为(6.97±1.96)和(6.97±2.34)h,AUC_0-t分别为(37.89±13.15)和(37.54±12.53)μg·h·L^-1,AUC_0～∞分别为(41.53±13.96)和(41.67±13.56)μg·h·L^-1;两制剂的药动学参数基本相同,咀嚼片的相对生物利用度为(102.35±21.85)%。ρ_max,AUC_0-t,AUC_0-∞采用双向单侧t检验,并经对数转换后,进行统计学方差分析,t_max采用Wilcoxon符号秩和检验,显示两制剂间无显著性差异(P>0.05)。结论多潘立酮咀嚼片和普通片在人体内处置过程基本一致,2种制剂具生物等效,临床上可以替换使用。     

高效液相色谱串联质谱法测定唾液中氨磷汀浓度

 目的 建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)直接检测唾液中氨磷汀(amifostine,AMI)的方法。方法 收集6位健康成年志愿者唾液为基质,石杉碱甲（huperzine-A,HupA）为内标,采用蛋白沉淀法,用高效液相色谱串联质谱测定唾液中的氨磷汀。色谱柱为ZIC-HILIC亲水色谱分析柱（2.1 mm×100 mm,3.5 μm）,质谱分析采用多反应监测扫描模式（MRM）,离子源为电喷雾离子源（ESI）。结果 氨磷汀在唾液中检测到的线性范围为0.938～30 mg·L^-1 ,线性关系良好,典型代表方程为：y=0.072x-0.005 26 (r=0.999 1) (n=6),定量下限为0.938 mg·L^-1(S/N>10)。唾液样品的低、中、高3个质控浓度（1.0、5.0和25 mg·L^-1）批内、批间精密度(RSD)均小于15%,其方法回收率均大于85%。结论 本实验所建立的氨磷汀检测方法直接、快捷、简便、灵敏度高及定性好,适用于唾液中氨磷汀的测定及科学研究。     

液相色谱-串联质谱技术在中药体内过程研究中的应用

由于液相色谱-串联质谱法在复杂待测组分的定量和定性检测上相较于单一的色谱法和质谱法具有较好的分辨率,更高的灵敏度和准确性,近年来被广泛的应用于中药的研究.文章对液相色谱和质谱法的原理和在中药体内过程研究中所具备的优缺点进行介绍,并通过检索近15年来在国内外发布的运用液相色谱-串联质谱法研究中药体内过程的文献,对目前不同...     

液质联用快速测定血浆中非布司他浓度及其人体药动学研究

 目的 研究非布司他片在中国健康受试者体内单次及多次给药的药动学特征。方法 30名受试者随机分为3组,每组10人,男女各半,一组进行非布司他片中剂量(80 mg)的单/多次给药人体药动学试验,10名受试者每天服药1次,每次80 mg,一共服药6次;一组进行非布司他片低剂量(40 mg)的单次给药人体药动学试验;一组进行非布司他片高剂量(120 mg)的单次给药人体药动学试验。血药浓度用LC-MS/MS快速测定。结果 单次空腹口服非布司他片40,80,120 mg后,其主要药动学参数如下:ρ_max分别为(2 578±743),(4 522±1 376)和(6 407±2 463) ng·mL^-1;t_max分别为(1.80±1.15),(1.78±1.18)和(2.28±1.57) h;t_1/2分别为(6.21±2.11),(6.14±0.99)和(5.93±1.82) h;AUC_{0-36 h}分别为(6 949±1 947),(14 875±4 200)和(23 881±6 225) ng·h·mL^-1;AUC_0-∞分别为(7 039±1 931),(14 995±4 287)和 (24 056±6 236) ng·h·mL^-1。多次口服80 mg非布司他片后,其主要药动学参数如下:t_max为(1.60±0.74) h,t_1/2为(5.27±1.08) h,c^SS_max为(4 326±1 477) ng·mL^-1,c^SS_min为(33.97±7.84) ng·mL^-1,c^SS_av为(622.7±165.8) ng·mL^-1,AUC^SS为(14 945±3 979) ng·h·mL^-1,AUC_{0-36 h}为(15 196±4 119) ng·h·mL^-1,AUC_0-∞为(15 291±4 110) ng·h·mL^-1。结论 非布司他片在剂量为40~120 mg内呈线性药代动力学特征,多次口服非布司他片每日1次,每次80 mg,不存在蓄积现象。     

液质联用法测定左旋氨氯地平的血药浓度及其片剂的相对生物利用度研究

 目的建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中左旋氨氯地平的浓度,研究2种苯磺酸左旋氨氯地平片的人体药动学及相对生物利用度。方法血浆样品中加入内标硝苯地平,经乙醚-二氯甲烷(3:1)提取,采用液相色谱-串联质谱法。用建立的方法测定20例健康男性受试者单剂量口服苯磺酸左旋氨氯地平受试制剂或参比制剂后的血药浓度,求得药动学参数,并对2种制剂的生物等效性进行评价。结果在0.1～20.0μg·L^-1内呈良好的线性关系,方法回收率为99.9%～101.7%,日内、日间RSD均小于15%。单次po 5 mg苯磺酸左旋氨氯地平受试制剂或参比制剂后的t_max分别为(7.80±2.67)和(7.00±2.00)h;ρ_max分别为(3.01±1.00)和(3.17±0.93)μg·L^-1;t_1/2分别为(42.3±17.4)和(39.2±15.0)h;AUC_0-t分别为(111.2±29.2)和(116.8±31.1)μg·h·L^-1;AUC_0-∞分别为(131.3±35.5)和(136.5±32.5)μg·h·L^-1。受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(95.9±13.5) %。结论该方法灵敏,无杂质干扰。测得的受试制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,表明2种制剂在人体内生物等效。     

LC MS/MS快速测定血浆中依普利酮浓度及其人体药动学研究

 目的研究依普利酮片在中国健康受试者体内单次及多次给药的药动学特征。方法12名受试者（男、女各半）,按3×3拉丁方设计分别交叉口服依普利酮片25,50,100 mg,进行单次给药药动学研究;10名受试者（男、女各半）连续给药6 d,每天1次,每次50 mg,进行多次给药药动学研究。血药浓度用LC MS/MS快速测定。结果12名受试者单次给药25,50,100 mg依普利酮后,ρmax分别为(4502±1462)、(7652±2582)、(1 262±428)μg·L-1,tmax分别为(171±033)、(206±101)、(279±148) h,t1/2分别为(250±039)、(269±055)、(284±053) h,AUC0 24 h分别为(2 410±778)、(4 403±1 522)、(8 202±2 398)μg·h·L-1,AUC0 ∞分别为(2 429±774)、(4 426±1 523)、(8 246±2 407)μg·h·L-1;10名受试者单次给药50 mg和多次给药50 mg依普利酮达到稳态后,tmax分别为（340±127）和(265±100)h,t1/2分别为（303±066）和(322±062)h,ρmax和ρSSmax分别为(6907±2074)和(7432±1923)μg·L-1,ρSSmin为(1281±964)μg·L-1,ρSSav为(2190±596)μg·L-1,AUCSS为(5 256±1 431) μg·h·L-1。结论口服给药剂量范围在25~100 mg时,依普利酮在人体内具有线性药动学特征;依普利酮按每日给药1次,每次口服50 mg,连续给药6 d在人体内不会产生蓄积。     

液质联用测定人血浆中泮托拉唑的浓度

 目的 测定人血浆中泮托拉唑的浓度,并评价国产和进口泮托拉唑钠肠溶片的生物等效性。方法 采用LC-MS/MS测定人血浆中泮托拉唑的浓度,以DAS2.0计算药动学参数考察其生物等效性。结果 受试制剂和参比制剂的泮托拉唑t_1/2分别为（1.96±0.66）和（1.98±0.59）h,t_max分别为（3.17±0.84）和（3.09±0.81）h,ρ_max分别为（3.53±0.78）和（3.41±0.79）μg·mL^-1,AUC_0-∞分别为（10.12±4.09）和（10.86±3.99）μg·h·mL^-1。生物利用度为（97.9±22.3）%。结论 该方法重复性好,灵敏度高,泮托拉唑钠肠溶片受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS同时测定人血浆中阿莫西林-氨溴索浓度及其药动学研究

 目的建立LC-MS/MS同时测定人血浆中阿莫西林/氨溴索浓度。方法以Lichrospher C₁₈(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇溶液(含0.2%甲酸)和水溶液(含0.2%甲酸),采用梯度洗脱进行分析,流速为1.0mL·min^-1,柱温为30℃。血浆样品经甲醇沉淀后进样,采用多反应监测(MRM)方式对样品进行测定。结果血浆中阿莫西林线性范围为5～20000μg·L^-1,氨溴索线性范围为1～200μg·L^-1;批间和批内精密度RSD均小于9%;方法的准确度为(100±7)%;最低定量限浓度(LLOQ)阿莫西林为5μg·L^-1,氨溴索为1μg·L^-1。结论本试验建立了同时测定阿莫西林和氨溴索浓度的方法,该方法灵敏、准确、简便、快速,适用于阿莫西林/氨溴索人体药动学研究。     

LC-MS/MS测定人血浆中石杉碱甲的浓度及相对生物利用度

 目的建立人血浆中石杉碱甲浓度的LC-MS/MS测定方法,研究石杉碱甲在健康人体内的药动学行为,评价两种制剂的生物等效性。方法血浆样品经碱化后,乙酸乙酯提取,LC-MS/MS内标法分析。检测对象为石杉碱甲,m/z243/210,内标(磷酸可待因),m/z300/199。24名健康受试者交叉口服供试片和参比片,剂量均为0.4mg。结果石杉碱甲测定的线性范围为0.252～25.2μg·L^-1;口服供试制剂和参比制剂后石杉碱甲的AUC_0→t分别为:(1384.079±325.094),(1479.165±288.738)μg·h·L^-1;ρ_max分别为:(3.062±0.821),(3.558±0.973)μg·L^-1;t_max分别为:(47.92±12.85),(44.17±20.62)min。结论本法灵敏、准确、简便。供试品的相对生物利用度为:以AUC_0→t计算为(94.4±18.7)%;以ρ_max计算为(86.3±15.4)%。统计学结果表明,两种制剂生物等效。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中氯法拉滨的浓度

 目的 建立高效液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定人血浆中氯法拉滨浓度。方法 采用API3000串联质谱仪及Shimadzu系列液相色谱仪进行检测。血浆样品经乙酸乙酯提取处理,以克拉屈滨为内标。色谱柱为Thermo C₁₈柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（250∶3,其中含4 mmol的乙酸铵和0.3%的甲酸）,流速为0.5 mL·min^-1。氯法拉滨和克拉屈滨的MRM扫描离子通道m/z分别为304.0→170.0,286.1→170.0。进样体积为20 μL,每个样品的分析时间为5 min。结果 氯法拉滨和克拉屈滨保留时间分别为4.00,4.11 min。氯法拉滨在10~2 000 ng·mL^-1内线性关系良好（r=0.999 5）,日内、日间RSD均低于9.60%,准确度为101.10%~102.94%。结论 本法样品预处理简便快速,检测准确、灵敏、专一,适用于氯法拉滨药动学的研究。     

LC-MS/MS同时测定愈创甘油醚、溴己新和氨溴索及人体药动学中的应用

 目的建立同时测定人血浆中愈创甘油醚、溴己新和氨溴索浓度的LC-MS/MS方法,并应用于人体药动学研究。方法以盐酸维拉帕米为内标,血浆样品经液-液提取后经C₁₈柱分离,流动相:甲醇-16mmol·L^-1醋酸铵缓冲液(50∶50,甲酸调pH3.8),流速0.22mL·min^-1。采用SEI源正离子模式、多反应监测(MRM)方式进行定量分析,监测离子分别为199.1→125(愈创甘油醚)、374.9→114.1(溴己新)、378.9→264(氨溴索)。结果线性范围分别为愈创甘油醚10.0～5000μg·L^-1,溴己新、氨溴索为0.2～100μg·L^-1。3种药物的日内、日间精密度小于11%,方法回收率在97%～108%之间。结论该法灵敏、准确、快速,并成功用于复方制剂的药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定犬血浆中7 种人参皂苷类成分及其在人参提取物药代动力学研究中的应用

目的:建立同时检测Beagle犬血浆中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、Rc、Rb2/3和Rf的分析方法,并应用混合有机溶剂萃取法提取含药血浆中的成分。方法:采用C18反相柱,流动相为甲醇乙腈等比混合液-0.01%甲酸水溶液梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:定量分析的离子对(m/z)为:1131.8/789.5(G-Rb1)、1101.7/789.7(G-Rb2/3)、1101.7/789.7(G-Rc)、823.6/789.5(G-Rd)、969.7/789.7(G-Re)、823.6/643.6(G-Rg1)和823.6/365.3(G-Rf)。7种皂苷类成分定量分析可以在14.5 min内完成,且没有离子抑制现象,各成分的最低定量限分别为0.03125μg.L-(1G-Re和G-Rg1)、0.0625μg.L-(1G-Rf和G-Rd)和0.125μg.L-(1G-Rb1、G-Rc和G-Rb2/3),该方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结论:该法选择性强、灵敏度高、操作简便,可用于血浆中7种人参皂苷了成分的药代动力学研究。