时间分辨荧光法高通量筛选鱼肉组织中土霉素的残留量

目的动物组织中抗生素残留量的测定一般需要多步骤的样品处理过程。本文介绍了一种全新的、简便和快速筛选鱼肉中土霉素残留量的方法。采用固相萃取和时间分辨荧光(time resolved luminescence,TRL)技术,无须离心和过滤,简化了分析过程。方法将C18小片浸在组织匀浆液中提取和富集20min,取出,在水中浸泡3min,接着浸在TRL试剂溶液中2min,最后取出干燥。干燥后,在C18小片表面上直接进行荧光测定。结果土霉素在0~8μg/g的范围内,仪器信号的响应与浓度呈现良好的线性关系(γ2=0.9992),检测限为0.026μg/g,采用本法对45个加标准液的样品(浓度范围在0~4μg/g)进行分析,其中41个样品的定性结果正确,只有4个样品定性结果显假阳性。结论本方法简便,快速,准确,适用于鱼肉组织中土霉素的高通量筛选分析。     

人血浆中甲苯磺酸妥舒沙星的HPLC-荧光法测定及相对生物利用度

建立了HPLC-荧光法测定人血浆中的甲苯磺酸妥舒沙星,以加替沙星为内标,血浆样品萃取后经C18色谱柱分离,流动相为乙腈-甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH 6.5)(10:30:60),荧光激发波长350 nm,发射波长420 nm.血浆中妥舒沙星在18.2～2 280 ng/ml浓度范围内线性关系良好,方法回收率为93.7%～104.1%,日内、日间RSD不大于10.1%和9.4%.18名健康志愿者采用随机交叉方式分别单剂量口服甲苯磺酸妥舒沙星分散片(受试制剂)或片剂(参比制剂)0.3 g,AUG 0→24h为(6403.0±1 827.4)和(6 544.1±1 937.9)ng·h·ml-1,c max为(1 266.9±409.6)和(1 258.2±395.8)ng/ml,t max为(0.9±0.3)和(1.0±0.3)h.受试制剂的相对生物利用度为(98.6±7.4)%.     

荧光法研究兔体内多潘立酮药时曲线及脏器内分布

采用荧光法测定家兔血浆及脏器中多潘立酮浓度。生物样品经二氯甲烷提取净化后 ,异丙醇定容 ,于 EX= 2 90 nm,EM=32 0 nm处测荧光强度。多潘立酮浓度在 0 .5～ 5.0 μg/ ml范围内与荧光强度线性相关 ,回归方程C =0 .2 0 5F - 0 .398,样品提取回收率为 96.6% ,RSD =5.6%。     

反相高效液相色谱法测定兔血清中甲磺酸帕珠沙星浓度

目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC法)测定兔血清中甲磺酸帕珠沙星的浓度.方法:采用YWG C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液-三乙胺(55:44.5:0.5),流速为1.0 mL/min,进样量为20μL,检测波长为254nm,柱温为35℃,血清样品以诺氟沙星为内标.结果:甲磺酸帕珠沙星的线性范围为1～40μg/mL,最低检测浓度为0.1μg/mL,平均回收率在97.6%～106.1%之间,日内、日间RSD均小于5.0%.结论:RP-HPLC法精确、灵敏、稳定,可用于甲磺酸帕珠沙星血药浓度的测定和药代动力学研究.     

大鼠血浆中环丙沙星的HPLC荧光分析检测法及其体内药物动力学研究

建立测定大鼠血浆中环丙沙星的RP HPLC荧光检测法和研究其体内的药物动力学。以格帕沙星为内标 ,血浆样品经乙腈沉淀蛋白 ,取上清夜进行HPLC检测。流动相为 0 0 5mol/L磷酸盐缓冲液( pH3 0 )—乙腈—甲醇 ( 77∶13∶10 ,v/v/v) ,荧光检测 ,λEX=2 76nm ,λEM=448nm。血浆样品在 0 0 0 2 5～ 0 5μg/ml范围内线性关系良好 ,平均提取回收率为 97 1% ,日间和日内精密度RSD均小于 8 0 % ,最低检测限达到 1 0ng/ml。环丙沙星在大鼠体内的过程符合双隔室开放型一级吸收动力学模型、药动学参数分别为 :T1/2(ka) =0 44h ,T1/2 (α) =0 92h ,T1/2 ( β) =5 6 6h ,Tmax=1 0 4h ,Cmax=0 35 μg/ml,AUC =1 86h·μg/ml。     

RP-HPLC荧光法测定人尿中巴洛沙星的含量

目的建立反相高效液相色谱荧光法测定人尿中巴洛沙星质量浓度。方法采用DiamonsilODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温:室温,流动相:乙腈-0.05 mol.L-1KH2PO4缓冲液(体积比为25∶75,三乙胺和H3PO4调pH为3.4),流速:1.0 mL.min-1。尿液样品用0.1 mol.L-1KH2PO4(KOH调pH为7.0)缓冲液稀释100倍,然后与二氯甲烷旋涡混合后,提取有机层,在40℃条件下氮气吹干,残渣用流动相溶解进样,荧光检测器(λex=295 nm,λem=500 nm)检测,以加替沙星作内标,按内标法定量。结果标准曲线在50~6 000μg.L-1内线性良好,最低检测限为10μg.L-1,巴洛沙星及内标的保留时间分别为5.42、4.05 min,日内和日间RSD均小于10.0%,提取回收率和方法回收率分别在93%~96%和98%~108%。结论本法适用于人尿液中巴洛沙星质量浓度测定及药物动力学研究。     

HPLC法检查普卢利沙星有关物质

目的 :建立普卢利沙星有关物质检查的HPLC法。方法 :使用C1 8柱 (2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,以 0 0 5mol L枸橼酸溶液 (用三乙胺调节pH值 3 0 ) 乙腈 (6 0∶4 0 )为流动相 ,检测波长为 2 72nm ,流速 1 0ml min。结果 :主要降解产物NM394含量在 0 4 9μg ml～ 16 4 μg ml、中间体Ⅸ在 0 2 0 μg ml～ 2 0 0 μg ml、中间体Ⅹ在 0 19μg ml～19 0 μg ml范围内峰面积与浓度的线性关系较好 ,相关系数分别为 0 99998、 0 99999、 0 99999;检测限分别为5 2ng ml、5 9ng ml、6 4ng ml。结论 :本法的准确度、精密度、专属性及耐用性好 ,可用于对普卢利沙星的有关物质检查。     

反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中拉贝洛尔的含量

目的:建立血浆中拉贝洛尔的反相高效液相色谱-荧光检测法.方法:血浆样品经叔丁基甲醚一次萃取后有机相挥干,以少量流动相重组,采用Kromasil KR100-5C18(250mm×4.6mm,5μm)为分析柱,甲醇:水:2.4mol/L二乙胺-磷酸缓冲液(pH=4.0)(50:48:2)为流动相,荧光激发波长(Ex)为302nm,发射波长(Em)为420nm.拉贝洛尔和内标(盐酸普萘洛尔)的保留时间分别为5.5min和8.0min.结果:血浆中的拉贝洛尔在2.5ng/mL～160ng/mL范围内线性关系良好,r=0.9998.方法的最低检测浓度为2.5ng/mL,样品和内标平均提取回收率分别为81.28%和88.68%,批内、批间精密度为0.42%～7.72%.结论:本方法灵敏可靠,可满足拉贝洛尔的临床血药浓度监测和药代动力学研究的需要.     

HPLC法测定玉容胶囊中人参皂苷R_(g1)的含量

采用 HPLC法测定玉容胶囊中人参皂苷 Rg1的含量。C18色谱柱 ,以乙腈 -水 ( 2 3∶ 77)为流动相 ,检测波长为 2 0 3nm,样品用 5 0 %乙醇超声提取 60 min,结果 3批样品中人参皂苷 Rg1的含量为 1 4.84～1 5 .79mg/g,方法回收率为 98.2 7% ( RSD =2 .5 5 % )。     

高效液相色谱-荧光检测法测定复合维B片中维生素B1含量

目的建立测定复合维B片中维生素B1含量的高效液相色谱-荧光检测法。方法样品用0．1mol／L盐酸提取，碱性铁氰化钾氧化，正丁醇萃取；采用Kromasil 100—5 C18柱（150mm×4．6mm，5μm）为色谱柱，以0．02mol／L乙酸铵-甲醇（70：30）为流动相，流速为1.0mL／min，荧光检测激发波长365nm，发射波长475nm。结果维生素B1质量浓度在0．5～20μg／mL范围内与峰面积线性关系良好，平均回收率为100.37％，RSD为1．34％，方法检出限（S／N=3）为2．3ng。结论高效液相色谱-荧光检测法快速、简便、准确，适用于复合维B片中维生素B1的含量测定。     

荧光法测定某些蒽环类抗生素

目的 建立高灵敏度的间接荧光法测定蒽环类抗生素的新方法 .方法 在适当的缓冲介质中,柔红霉素(daunorubicin,DNR)、多柔比星(doxorubicin,DOX)和米托蒽醌(mitoxantrone,MXT)等蒽环类抗生素能将无荧光的Ce(Ⅳ)离子还原成能发射特征荧光的Ce(Ⅲ)离子.加入三磷酸钠.可使体系的荧光强度大大增强.且增强的特征荧光(△F)与葸环类抗生素浓度在一定范围内线性相关.结果 3种蒽环类抗生素的线性范围和检出限分别为0.043～3.0μg/ml和12.8 ng/ml(DNR);0.045～3.0μg/ml和13.4 ng/ml(DOX);0.022～2.8μg/ml和6.5ns/ml(MXT).结论 方法 灵敏度高,选择性好,操作简便快速.用于尿液和血清样品中的MXT的分析测定,结果 满意.     

Stability-indicating methods for the determination of mosapride citrate in the presence of its degradation products according to ICH guidelines

In the present work, different spectrophotometric methods and one spectrofluorimetric method have been developed and validated for the determination of mosapride citrate in the presence of its acid-induced degradation products. The drug was subjected to stress stability study including acid, alkali, oxidative, photolytic, and thermal stress degradation. The developed spectrophotometric methods included the use of first order derivative ((1)D), derivative of ratio spectra ((1)DD), mean centring of ratio spectra (MC) and H-point standard additions (HPSAM) spectrophotometric methods. For (1)D method, the peaks amplitudes at 282.8 and 319.6 nm were measured, while for (1)DD method those at 308 nm and 323 nm were measured. Mean centring of ratio spectra method used the values at 317 nm for calibration, while for HPSAM the absorbance at 273 and 288.6 nm were used. These methods were successfully applied for determination of mosapride in the concentration range of 5-70 μg.ml(-1). The spectrofluorimetric method was based on measuring the native fluorescence of mosapride in 0.1 M NaOH using λ(excitation) 276 nm and λ(emission) 344 nm and 684 nm with linearity ranges of 50-3000 ng.ml(-1) and 50-9000 ng.ml(-1), respectively. All the developed methods were validated according to the International Conference on Harmonization (ICH) guidelines and were applied for bulk powder and dosage form. The results obtained were statistically compared to each other using one-way ANOVA testing.     

反相HPLC法同时测定复方氧氟沙星滴眼液中氧氟沙星和地塞米松磷酸钠的含量及有关物质

目的：建立反相高效液相色谱法测定复方氧氟沙星滴眼液中氧氟沙星和地塞米松磷酸钠的含量及有关物质。方法：反相高效液相色谱法,用资生堂SHISEIDOC18（UG120,4．6mm×250mm,5μm）色谱柱;以醋酸铵高氯酸钠溶液（取醋酸铵2．4g和高氯酸钠4．2g,用水900mL使溶解,用磷酸调pH值至2．5,再加水稀释至1000mL）＋乙腈一甲醇（68：22：10）为流动相;检测波长有关物质为242μm和293nm,含量测定为254nm。结果：氧氟沙星和地塞米松磷酸钠的最低检测限分别为0．07ng和0．25ng;氧氟沙星在0．09～0．27g·L、地塞米松磷酸钠在0．03～0．09g·L。的范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程分别为C=3．5×10A-4．5×10。（r=1．000）和C=4．4×10-8-1．1×10-4（r=1．000）;两组分的回收率分别为100．1％和100．6％,相对标准偏差（RSD）为0．89％和1．32％。结论：本方法灵敏、准确、专属性强可用于测定复方氧氟沙星滴眼液中两组分的含量和有关物质。     

荧光分光光度法测定制剂和人尿样中的诺氟沙星含量

目的建立用于制剂和人体尿样中诺氟沙星含量测定的荧光分光光度法。方法研究不同pH条件下诺氟沙星的光谱行为,对样品测定条件进行优化,并对胶囊和人体尿液中诺氟沙星进行定量分析。结果用于制剂分析时,λex和λem分别为333nm和448nm,其线性范围为0．01μg·mL^-1～1．0μg·mL^-1;用于人尿样分析时,为了避免尿液中杂质的干扰,选定λex和λem分别为290nm和448nm,其线性范围为0：01μg·mL^-1～2．0μg·mL^-1;最低检出限均为0．01μg·mL^-1。结论该方法简便、快速、灵敏、无干扰,可作为尿样或制剂的含量直接分析方法。     

高效液相色谱-荧光分析法测定血浆中替米沙坦浓度

目的建立高效液相色谱-荧光分析（HPLC—FLD）测定人血浆中替米沙坦质量浓度的方法。方法色谱柱为Agilent HC C18柱（250mm×4．6mm，5μm），柱温30％，流动相为磷酸二氢钾缓冲液（磷酸调节pH值为3．7）-甲醇（29：71），流速1．0mL／min，荧光激发波长为300nm，发射波长为366nm。结果替米沙坦和萘普生（内标）的保留时间分别为5．7min和4．4min；替米沙坦质量浓度范围是2．42．484ng／mL（r=0．9997），最低定量质量浓度为2．42ng／mL。结论该法操作简便、选择性好、灵敏度高，可用于替米沙坦的血药浓度测定和药代动力学研究。     

薄层扫描法测定升血小板胶囊中栀子苷含量

目的 :用薄层扫描法测定升血小板胶囊中栀子苷含量。方法 :样品经适当提取后点于硅胶GF254 薄层板上 ,以氯仿 -甲醇 (4∶1)为展开剂 ,紫外光灯 (254nm波长)下定位 ,双波长反射法锯齿扫描 ,λs=245nm ,λR=350nm。结果 :通过方法学考察 ,点样量在1μg～9μg范围内呈现良好的线性关系 ,其回归方程为 :Y=0 0903+0 1155X ,r=0 9991 ;平均回收率为98 80% ,RSD=0 45 %。结论 :该方法操作简便 ,测定结果准确     

A sensitive fluorescence optosensor for analysing propranolol in pharmaceutical preparations and a test for its control in urine in sport

We describe a simple and selective method for analysing propranolol and a sensitive test for its control in urine. A flow-through fluorescence optosensor based on on-line immobilization in a non-ionic-exchanger (Amberlite XAD-7) solid support in a continuous flow was used in both cases. Determination was made in 5 mM H(2)PO(4)(-)/HPO(4)(2-) buffer solution at pH 6 at a working temperature of 20 degrees C. Fluorescence intensities were measured at lambda(ex/em) = 300/338 nm with a response time of 80 s, thus obtaining a linear concentration range of between 0 and 250.0 ng ml(-1) with a detection limit of 1.3 ng ml(-1), an analytical sensitivity of 6.0 ng ml(-1) and a standard deviation of 2.40% at a 150 ng ml(-1) concentration level for propranolol. We also propose a test to detect propranolol in urine with a linear concentration range between 0 and 100.0 ng ml(-1), a detection limit of 0.2 ng ml(-1), an analytical sensitivity of 1.0 ng ml(-1), and a standard deviation of 0.84% at a 75 ng ml(-1) concentration level. The effect of proteins presents in urine samples were evaluated. The two proposed methods were satisfactorily applied to commercial formulations and urine samples respectively.     

HPLC-荧光法同时测定人血浆中3种抗抑郁药的浓度

目的:建立以高效液相色谱-荧光法同时测定人血浆中文拉法辛、氟西汀、舍曲林浓度的方法。方法:以异丙嗪为内标,样品碱化后经液-液萃取,用Phenomenex-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液(50mmol·L-1磷酸二氢钠用磷酸调节pH值至2.5)=35∶65,流速为1.2mL.min-1,柱温为40℃。荧光检测文拉法辛,激发波长为276nm,发射波长为598nm;紫外检测氟西汀和舍曲林,检测波长为200nm。结果:文拉法辛、氟西汀、舍曲林血药浓度分别在5～1000μg·L-1(r=0.9980)、40～1000μg·L-1(r=0.9990)、20～800μg·L-1(r=0.9980)范围内线性关系良好;日内、日间RSD均<10%,提取回收率均>70%,方法回收率均>90%。结论:本法简便、快速、灵敏、准确,可用于文拉法辛、氟西汀、舍曲林的治疗药物监测、中毒分析及药动学研究。     

高效分子排阻色谱法分析注射用头孢噻吩钠中的高分子杂质

目的：建立高效分子排阻色谱（HPSEC）法测定注射用头孢噻吩钠中的高分子杂质。方法：采用TSK-GEL G2000SWXL凝胶色谱柱（30cm×7．8mm×5μm）,流动相为0．002mol·L^-1磷酸盐缓冲液（pH7．0）-乙腈（95：5）,流速为0．6mL·min^-1,检测波长235nm。结果：头孢噻吩和高分子杂质的线性范围分别为1．01～25．7μg·mL^-1（r=1．000）和0．0252～7．00g·L^-1（r=1．000）;头孢噻吩的检测限为0．5ng,头孢噻吩高分子杂质的定量限以头孢噻吩计为1．4ng;对照溶液重复进样（n=6）的精密度（RSD）为0．23％,样品测定（n=6）的重复性（RSD）为0．70％。结论：本方法操作简单,专属性强,灵敏度高。