姜黄素对角质形成细胞增殖、周期及相关分子表达的影响

[目的]探讨姜黄素对人角质形成细胞(HaCaT细胞)增殖、周期及其相关分子表达的影响.[方法]MTT法检测姜黄素不同药物浓度和作用时间对HaCaT细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测姜黄素作用24 h后细胞周期变化情况;荧光定量PCR检测姜黄素作用24 h后增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)的mRNA的表达情况,并与未加入姜黄素的对照组比较.[结果]姜黄素随着浓度增加对HaCaT细胞增殖的抑制作用逐渐增强(P＜0.05);随着作用时间的延长,对细胞增殖的抑制作用也逐渐增强(P＜0.05);姜黄素处理24 h后,细胞G1期比例与对照纽相比显著增加(P＜0.05);姜黄素各浓度组的PC-NA、CyclinD1的mRNA的表达与对照组相比均下降(P＜0.05).[结论]姜黄素能够抑制HaCaT细胞增殖,引起细胞周期阻滞于G1期,以上作用与其能够下调PCNA、Cyclin D1的表达有关.     

慢病毒载体介导的IRX1基因沉默对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响

目的观察慢病毒载体介导的易洛魁家族同源盒1(IRX1)基因沉默对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响。方法培养宫颈癌SiHa细胞并分为3组:其中未做任何处理的SiHa细胞为Control组、转染空载质粒的SiHa细胞为sh-NC组、转染IRX1短发夹RNA(shRNA)重组慢病毒载体质粒的SiHa细胞为sh-IRX1组。实时定量PCR和蛋白免疫印迹法分别在IRX1 mRNA和蛋白表达水平上鉴定转染效果,CCK-8法和克隆形成试验检测转染后SiHa细胞增殖能力变化,流式细胞术检测转染后SiHa细胞周期和细胞凋亡的变化,蛋白免疫印迹法检测SiHa细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤(BCL)关联X蛋白(BAX)和BCL-2蛋白表达水平。结果与Control组和sh-NC组比较,sh-IRX1组SiHa细胞中IRX1mRNA和蛋白表达水平均下调,SiHa细胞活性和克隆形成能力均降低,G0/G1期细胞比例增多,S期和G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡率升高,细胞中PCNA、Cyclin D1和BCL-2蛋白表达水平下调,BAX蛋白表达水平上调(P均...     

5-氮杂胞苷对RASSF1去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨5-氮杂胞苷对RASSF1基因去甲基化与胃癌细胞增殖和凋亡的关系。方法将SGC7901胃癌细胞分为AZA组（5-氮杂胞苷处理）和CON组（未用5-氮杂胞苷处理）,比较两组细胞RASSF1基因启动子甲基化、基因表达、细胞周期和凋亡的差异。结果 CON组SGC7901胃癌细胞RASSF1基因启动子MSP处于甲基化状态,AZA组胃癌细胞未检测到甲基化,AZA组RASSF1基因mRNA和蛋白质表达水平高于CON组细胞。AZA组SGC7901胃癌细胞G0/G1期和凋亡率高于CON组细胞（P〈0.05）,S期、G2/M期和PI低于CON组细胞（P〈0.05）。结论5-氮杂胞苷可逆转胃癌细胞RASSF1基因启动子甲基化状态,使沉默的RASSF1基因重新获得表达而抑制胃癌细胞的增殖并促进其凋亡。     

中华眼镜蛇毒对K562/ADM和难治性急性髓性白血病细胞作用研究

目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对人红白血病/阿霉素细胞(K562/ADM细胞)及原代难治性急性髓性白血病细胞的作用。方法:以K562/ADM细胞及10例急性髓性白血病(AML)患者的原代初发难治性急性髓性白血病细胞为研究对象进行实验,应用不同剂量的NNAV作用于细胞后,采用噻唑蓝实验法(MTT)测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl2表达,流式细胞仪测定凋亡率,蛋白质印迹法检测Caspase-3表达。流式细胞仪检测NNAV对细胞周期的影响,检测原代初发难治性急性髓性白血病细胞细胞周期蛋白D(Cyclin-D)的表达情况;观察以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组有无差异。结果:经过不同浓度的NNAV处理后,无论是K562/ADM细胞还是初发难治性急性髓性白血病细胞,Bcl-2表达下调,Caspase-3表达上调;细胞增殖抑制明显,并具有时间依赖性及剂量依赖性。流式细胞仪检测证实0.8 mg/L和1.0 mg/L的NNAV均能够使原代初发难治性细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,而处于G2/M期的细胞含量减少。10例原发难治性急性髓性白血病细胞中Cyclin-D表达阳性7例,Cyclin-D表达阴性3例,但以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组无显著差异。结论:NNAV在体外可明显抑制K562/ADM细胞和原代初发难治性AML细胞增殖;调节细胞周期停滞于G0/G1期,减少G2/M期的细胞含量,提示NNAV有可能通过干预Bcl-2、Caspase-3表达而诱导细胞凋亡,细胞周期进程可能是中华眼镜蛇毒组分对原发难治性AML细胞的发挥增殖抑制作用的机制。     

华蟾素联合放疗对胃癌细胞BGC-823增殖及凋亡的影响

目的:观察华蟾素对胃癌细胞BGC-823的增殖抑制及联合放疗对细胞周期、细胞凋亡的影响。方法:MTT法测定华蟾素对胃癌细胞BGC-823的抑制率,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率。结果:华蟾素能抑制胃癌细胞BGC-823增殖,48h的IC50值为1.73μg/mL。华蟾素与放疗联合使G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例降低,联合组与各单独作用组相比差异显著。联合组诱导胃癌细胞株BGC-823的凋亡率显著高于各单独作用组。结论:华蟾素联合放疗可诱导BGC-823细胞周期阻滞和细胞凋亡,从而抑制BGC-823细胞生长。     

siRNA沉默VDAC1对MCF-7细胞增殖、周期的影响及其作用机制

[目的]观察siRNA沉默VDAC1基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响.[方法]针对人VDAC1基因设计并合成siRNA,并将VDAC1-siRNA转染MCF-7细胞后,应用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测MCF-7细胞中VDAC1的表达水平,MTT法检测MCF-7细胞的增殖情况,流式细胞术检测MCF-7细胞的周期分布,同时Western印迹法检测周期蛋白D1的表达.[结果]MCF-7细胞转染VDAC1-siRNA后能够有效抑制VDAC1的表达,显著抑制其增殖水平,促使MCF-7细胞发生G1期阻滞,同时下调Cyclin D1蛋白表达.[结论]VDAC1沉默能够有效抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,促使细胞发生G1期阻滞.VDAC1可作为乳腺癌治疗的新靶点.     

前列腺癌细胞DU145同步化诱导的DNA损伤反应通路和PI3KAkt通路对凋亡抑制因子基因Apollon(BIRC6) mRNA表达的影响

[目的] 探讨在前列腺癌细胞DU145同步化培养后引起的DNA损伤反应通路和PI3K/AKT通路对凋亡抑制因子(IAP)基因Apollon/BIRC6 mRNA表达的影响.同时分析Apollon基因所在染色体是否存在特异性的异常.[方法]采用无血清的饥饿培养法使细胞同步在G0期;用含羞草碱、胸腺嘧啶和噻氨酯哒唑分别使细胞同步在G1期、S期和G2/M期并引起DNA损伤反应,同时加入PI3K的特异性抑制剂ly294002以阻止PI3K/AKT通路.利用RT-PCR半定量法检测Apollon mRNA在各个细胞周期相的表达情况.细胞遗传学的常规G式显带法,分析凋亡抑制因子基因所在的染色体是否存在特异性的异常.[结果]含羞草碱同步化的G0/G1期细胞达到了78.04%,胸腺嘧啶同步化的S期细胞达到62.19%,噻氨酯哒唑同步化的G2/M 60.5%.Apollon基因所在的染色体2p,存在缺失或者重复,如2p-,2p+.Apollon mRNA的表达, 同步化的G2/M、S期细胞组分别与非同步化细胞组比较差异有显著性(P<0.01),噻氨酯哒唑+ly294002组与噻氨酯哒唑相比较差异有显著性(P<0.01).[结论]前列腺癌细胞株DU145存在某些染色体的结构和数目异常,可能影响某些基因的表达.药物的同步化激活了DNA损伤反应通路和生存信号通路,再通过PI3K/Akt通路,在细胞周期的某个时相调控BIRC6/Apollon mRNA的表达.     

丙戊酸钠对Molt-4细胞增殖的影响及其作用途径探讨

目的 观察丙戊酸钠(VPA)对人急性T细胞白血病细胞系Molt-4细胞增殖和细胞周期的影响,并探讨其对Molt-4细胞p15INK4B基因甲基化状态的影响.方法 不同浓度VPA作用Molt-4细胞后,用MTr法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期的变化,半巢式甲基化特异PCR(MSP)法检测p15INK4B基因甲基化状态,RT-PCR方法检测p15基因、DNA甲基转移酶DNMT-1、DNMT3A、DNMrT3B mRNA的表达.结果 VPA可明显抑制细胞增殖,影响Molt-4细胞周期分布,5.0mmol/L VPA作用Molt-4细胞48 h,G0/G1期细胞为(66.87±3.31)%,S期细胞为(8.47±2.56)%,与未加VPA组相比,S期细胞明显下降,G0/G1期细胞明显升高(P＜0.05).经VPA作用后Molt-4细胞p15基因甲基化程度明显下降,p15基因表达水平明显增加,DNMT-1、DNMT3B mRNA表达水平下降,以DNMT-1下降较明显.结论 VPA可能通过抑制甲基转移酶DNMT-1和(或)DNMT3B表达使p15INK4B基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制Molt-4细胞增殖,使细胞周期阻滞于G0/G1期.     

导入RASSF1A基因抑制膀胱癌细胞增殖的研究

[目的]探讨RASSF1A基因的表达对人膀胱癌细胞株体外增殖的影响.[方法]通过脂质体介导的基因转染法将野生型RASSF1A基因的真核表达载体及空载体转染膀胱癌BIU87细胞株.以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖程度,原位凋亡细胞检测技术和流式细胞仪检测膀胱癌BIU87细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测膀胱癌BIU87细胞Cyclin D1蛋白表达的改变.[结果]成功建立稳定表达野生型RASSF1A基因的膀胱癌细胞株.野生型RASSF1A基因的表达可明显抑制膀胱癌细胞在体外的生长,可以显著降低BIU87细胞的增殖比和增高BIU87细胞的凋亡指数,与对照相组比差异显著( P <0.05).BIU87细胞的细胞周期发生 G1/S期阻滞,Cyclin D1蛋白的表达水平下调.[结论]野生型RASSF1A的重表达通过下调Cyclin D1,抑制膀胱癌BIU87细胞体外增殖.     

儿童遗传性心律失常的诊治进展

回顾在遗传性心律失常领域最新发表的相关研究,主要关注与儿童心源性猝死关系密切的离子通道病,包括长QT综合征（LQTS）、短QT综合征（SQTS）、Brugada综合征（BrS）和儿茶酚胺敏感性多形性室性心动过速（CPVT）,总结它们在发病机制及诊治方面的进展。     

The acoustic characteristics of the skull

Many investigators have stated that the difficulties of imaging with acoustical energy through the skull result from the marked attenuation of the energy by the skull. In the literature measurements of total attenuation have been confused with those for absorption.Measurements made by us show that absorption by compact bone varies between 2–3 dB cm^?1 MHz^?1 and, in the low megaHertz region appears to be directly proportional to frequency.It has also between shown that the convoluted inner surface of the ivory bone of the inner table of the skull may degrade the collimation and directionality of the beam by refraction.Cancellous bone, such as is present in the dipole of the skull, greatly attenuates the energy. It is postulated that this largely results from scattering. It is also postulated that the energy propagates through cancellous bone as two components, one in the soft tissues and the other partly in the bony spicules. Observations suggest that attenuation due to scattering much more markedly affects the latter of these components and scatters more greatly the higher frequencies in a pulse of broad bandwidth.The energy in each component has varying propagation paths so that the later cycles in the pulse of each component are subject to increasing interference as a result of the variations in propagation times. The two components moreover may have different propagation times so that interference may occur between the pulses of each component as well.All of these phenomena degrade the collimation, coherence, directionality, beam width, pulse length, frequency and other properties of the ultrasonic energy upon which imaging through the skull depends.The interference effects described above are least for the first cycle in the pulse which usually is not the cycle of highest amplitude. Since, in the free field, most of the energy is concentrated around the beam axis, most of the energy in the field which is deflected from its normal propagation path is deflected away from the beam axis. Thus the directionality of the beam is least degraded in the beam axis. The effects of the skull in degrading the properties of the ultrasonic pulse would therefore be lessened if the amplitude of the first cycle of the pulse and the directionality of its energy could be used for imaging.     

家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症1例并文献复习

目的加强对家族性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（familially hemophagocytic lymphohistiocytosis,FHL）的认识。方法报道确诊为FHL的新病例1例,结合国内外报道的FHL的病例,对该病的临床特点进行汇总分析。结果FHL2常与PRF1基因突变相关,约20%~40%的患者存在穿孔素基因突变。结论对于有阳性家族史,基因诊断明确,应尽早行化疗或者造血干细胞移植。若无家族史,未发现与继发性HLH相关的原发病因,可考虑行基因筛查以明确是否存在FHL的可能。     

甲状旁腺功能减退性心肌病的系统综述

目的 甲状旁腺功能减退（甲旁减）性心肌病是一种罕见的心脏疾病,为扩张型心肌病中少数可逆转的一种,常被误诊为不明原因或难治性心力衰竭。本文旨在探寻甲旁减性心肌病的规律性特征。方法 检索Pubmed、SinoMed、万方数据库中符合标准的甲旁减性心肌病病例,采用统计分组法对纳入研究的文献进行分析,依据系统综述和meta分析优先报告条目（PRISMA声明）进行报告。结果 在我们筛查出的41例患者中,女性居多（68.29%）,平均年龄为45.5岁,各年龄段均有发病。甲旁减性心肌病最常见的病因为特发性甲旁减（78.05%）,颈部手术导致的甲旁减性心肌病次之（17.07%）。患者均以心力衰竭就诊,伴不同程度的低钙血症。51%的患者有神经肌肉兴奋性增加的病史,90%的患者左心室射血分数降低。该病误诊漏诊率较高,仅36%的患者于入院后即明确诊断为甲旁减性心肌病。低血钙的纠正是治疗的关键,90%的患者心脏功能在血钙浓度正常化后恢复至正常。结论 对所有不明原因或难治性心力衰竭患者都应警惕甲旁减性心肌病的可能。     

Burkitt's lymphoma of maxillary gingiva: A case report

Burkitt's lymphoma(BL) is an aggressive form of nonHodgkin's B-cell lymphoma with three variants namely endemic, sporadic, and immunodeficiency-associated types. It is endemic in Africa and sporadic in other parts of the world. While the endemic form is widely reported to occur in early childhood and commonly involves the jaw bones, the sporadic form typically presents as an abdominal mass. This presentation reports a rare case of sporadic form of BL clinically manifesting as a generalized gingival enlargement in an immunocompetent adult male which demonstrated an aggressive behavior. The patient reported with a prominent anterior gingival swelling of 6 mo duration which slowly enlarged in size and associated with multiple lymph node involvement. Microscopic examination of the lesion using H, E and immunohistochemical diagnosis confirmed the diagnosis as BL. The patient succumbed to the disease before any therapy could be instituted. Since a wide array of causes can be attributed to gingival enlargements, it is necessary to consider malignancies as one of the important differential diagnosis so as to facilitate the need for appropriate diagnosis and prompt treatment.     

动态心电图临床操作标准化方法

动态心电图,又称Holter或Holter检查,是一种评价各种心脏病患者心电图异常的简便、高效、准确、安全的无创检查,广泛用于心律失常的相关症状评价,心肌缺血的诊断,心脏病患者的预后和日常生活能力评估,药物疗效评价,起搏器等埋藏式心脏电治疗装置监测等领域。目前动态心电图已广泛用于于临床各级医疗机构,为了更好地发挥其作用,有必要对该项技术进行规范化培训。本文参考相关指南、共识及专家建议,结合作者经验,撰写动态心电图临床操作标准化方法供临床使用时参考。     

经颅黑质超声诊断帕金森病的临床评价

目的 通过对帕金森病患者及正常对照组进行经颅超声(transcranial sonography,TCS)检查,结合帕金森病患者的Hoehn Yahr（H Y）分级及帕金森病统一评分量表评分结果,了解我国大陆地区帕金森病患者有无黑质(substantia nigra, SN)回声增强表现。方法 对入选对象进行TCS检查,并对检查结果进行评价。结果 帕金森病患者 SN阳性率明显高于正常对照者（P＜0.05）。帕金森病SN异常组 H Y 分期明显高于帕金森病SN正常组(P＜0.05),表明帕金森病患者SN高回声面积与H Y分期相关。TCS检查对帕金森病的敏感性为80.5%,特异性为79.9%。结论 我国帕金森病患者SN强回声检出率显著高于对照组,说明我国帕金森病患者也存在SN回声增强这一现象,与国内外报道相一致。TCS检查对帕金森病的诊断具有一定的意义,敏感性及特异性较高。     

儿童中枢神经系统感染脑脊液主要病原菌的构成及耐药性的监测

目的探讨儿童中枢神经系统感染脑脊液病原菌的构成及耐药性。方法全自动细菌鉴定仪VITEK32进行细菌鉴定和药敏实验并结合K B药敏实验法,根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准进行结果判读。结果住院患儿中枢神经系统感染脑脊液标本1 990份共分离病原菌181株,检出阳性率9.1%（181/1 990）。细菌检出率95.0%（172/181）,真菌检出率5.0%（9/181）,其中肺炎链球菌19.3%（35/181）,表皮葡萄球菌18.8%（34/181）,大肠埃希菌17.1%（31/181）。3种主要细菌的分离率较高,主要集中分布在1岁以内患儿。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）检出率较高,分别为41.9%（13/31）和50.0%（3/6）。主要的革兰阴性细菌大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对厄它培南和亚胺培南耐药率为0,未发现耐万古霉素的革兰阳性细菌。结论对中枢神经系统感染患儿脑脊液进行培养和药敏实验,根据药敏结果合理选用抗生素,对降低细菌的耐药和提高药物的敏感性,临床合理使用抗菌药物有指导作用。     

Effects of intravenous anesthetic agents on middle cerebral artery blood flow velocity during induction of general anesthesia

Objective. Our objective was to quantify the effects of intravenous anesthetics on values measured by or derived from transcranial Doppler sonography (TCD) during induction of general anesthesia.Methods. We recorded blood flow velocity in the middle cerebral artery (V-MCA) before, during, and after induction of general anesthesia in six groups of young patients without intracranial pathology (n=10 each) using TCD. Patients were randomized to receive either 2 mg/kg propofol, 1.5 mg/kg methohexital, 5 mg/kg thiopental, 0.3 mg/kg etomidate, 2 µg/kg fentanyl and 0.15 mg/kg midazolam, or 1.5 mg/kg ketamine and 0.15 mg/kg midazolam intravenously. At 2 min after injection, each patient was intubated and given isoflurane 0.8% and nitrous oxide 66% in oxygen. Ventilation was set to achieve an end-tidalPco ₂ of 40 mm Hg. V-MCA, arterial blood pressure, heart rate, hematocrit, andPco ₂ (venous samples) were measured before and 1, 3, 5, 10, and 30 min after induction of anesthesia.Results. The preinduction data were not different between groups. At 1 min after injection, propofol, thiopental, methohexital, and etomidate significantly decreased V-MCA. TCD values were only slightly affected following fentanyl/midazolam. Ketamine/midazolam induced a modest rise in V-MCA. After endotracheal intubation, V-MCA increased in all groups, and slowly declined thereafter.Conclusions. Under the circumstances of our study, values derived from TCD measurements responded differently to the agents used to induce general anesthesia in nonneurosurgical patients.     

吗啡、氯胺酮联合用于术后镇痛临床观察

目的 :比较吗啡、氯胺酮联合与吗啡单独使用用于术后镇痛的临床效果。方法 :30例ASAⅠ～Ⅱ的腹部手术全麻病人随机分为两组 ,术后使用吗啡静脉自控镇痛并分别加氯胺酮静脉输注 (氯胺酮组 )和生理盐水静脉输注(生理盐水组 )。观察两组的视觉模拟评分 (VAS) ,吗啡消耗量和发生的