肺癌患者血浆RASSF1A和BLU基因甲基化检测及临床意义

【目的】探讨肺癌患者外周血血浆中抑癌基因Ras相关结构域家族1A（RASSF1A）和BLU基因启动子的甲基化状态及其临床意义。【方法】利用巢式甲基化特畀性PCR（nMSP）法检测肺癌患者外周血血浆与正常人血浆中抑癌基因RASSF1A和BLU基因启动子的甲基化状态。【结果】58例肺癌患者血浆样品中分别发现22例（37．93％）RASSF1A基因启动子的异常甲基化和17例（29．31％）BLU基因启动予的异常甲基化,20例正常对照血浆中都未检测到RASSF1A和BLU基因启动子的异常甲基化,差异有显著性（P〈0．01）;但血浆中两基因甲基化检出率与患者性别、肺癌组织学分型及临床分期无明显相关性（P〉0．05）。【结论】利用nMSP法检测外周血血浆中RASSF1A和BLU基因启动子的甲基化,可为肺癌的筛查、早期诊断提供有用的信息。     

RASSF1A 基因甲基化与胃癌的相关性分析

目的：探讨 RASSF1A 甲基化与胃癌临床病理资料的关系。方法通过计算机检索 PUBMED （1998．01～2012．07）、中国知网（1998．01～2012．07）、万方数据库（1998．01～2012．07）等数据库,收集RASSF1A 甲基化与胃癌关系的相关文献,按纳入与排除标准筛选病例对照试验。评价质量及提取资料后,采用 RevMan 5．1软件对数据进行 Meta 分析。结果共检索到36篇,经筛选最终纳入9篇,共506例胃癌组织。Meta 分析结果显示,早期（Ⅰ期-Ⅱ期）与中晚期胃癌（Ⅲ期-Ⅳ期）患者胃癌组织中 RASSF1A 甲基化阳性率合并的 OR 值为0．36[95％CI（0．22,0．60）,P ＜0．01],中高分化与低分化胃癌组织中 RASSF1A 甲基化率合并的 OR 值为0．73[95％CI（0．39,1．34）,P ＞0．05],淋巴结转移与无转移患者胃癌组织中 RASSF1A 甲基化阳性率合并的 OR 值为2．07[95％CI（1．19,3．60）,P ＝0．01],男性与女性患者 OR 值为1．09[95％CI（0．68,1．73）,P ＞0．05],＜60岁与≥60岁患者胃癌组织中 RASSF1A 甲基化阳性率合并的 OR 值为0．77[95％CI （0．47,1．25）,P ＞0．05],肠型与弥漫型患者胃癌组织中 RASSF1A 甲基化阳性率合并的 OR 值为0．95[95％CI（0．37,2．46）,P ＞0．05]。结论胃癌患者病理分期、有无淋巴结转移与胃癌组织 RASSF1A 甲基化密切相关,中晚期胃癌患者 RASSF1A 甲基化阳性率高于早期胃癌患者,有淋巴结转移的胃癌患者 RASSF1A 甲基化阳性率较高。而胃癌患者的性别、年龄、分化程度、Lauren 分型与胃癌组织中的 RASSF1A 甲基化阳性率无显著相关性。     

胃镜活检组织RASSF1基因启动子甲基化检测及其临床意义分析

目的：探讨胃镜活检组织RAS相关结构域蛋白1（RASSF1）基因启动子甲基化水平及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测胃癌患者胃镜活检癌组织、癌旁组织及健康者正常胃组织RASSF1基因启动子甲基化状态,并比较其差异;分析胃癌患者RASSF1基因启动子甲基化与不同临床病理因素的关系。结果胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率为62．7％,癌旁组织甲基化率为4．0％,健康者正常胃组织甲基化率为2．7％,癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织（P＜0．05）。胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率在不同性别、年龄、病变部位及幽门螺杆菌感染患者间比较差异无统计学意义（P＞0．05）,在不同分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和 TNM 分期患者间,比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论胃癌患者胃镜活检癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织,且甲基化率与癌组织分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关,可反映胃癌患者的病情及预后。     

乳腺癌中 PALB2基因启动子甲基化情况及其临床预后价值

【目的】探讨乳腺癌易感基因PALB2启动子甲基化与乳腺癌临床病理特征、预后的关系。【方法】采用MSP法检测128例乳腺癌石蜡组织中PALB2启动子甲基化情况，分析其与乳腺癌临床病理特征及临床预后的相关性。【结果】128例乳腺癌中有淋巴结转移的患者中14．04％（8／57）检测出PALB2启动子甲基化，高于无淋巴结转移患者的2．82％（2／71），且差异具有显著性（ P ＜0．05）。PALB2启动子甲基化组的中位无瘤生存时间与中位总生存时间分别为50个月和51．5个月，无甲基化组的中位无瘤生存时间与总生存时间分别为54个月和88个月，两者相比较差异均具有显著性（ P ＜0．01）。乳腺癌患者预后相关因素分析提示N分期及PALB2启动子甲基化情况均是影响乳腺癌患者预后的独立危险因素。【结论】乳腺癌组织PALB2基因启动子甲基化情况与是否有淋巴结转移相关。与PALB2启动子无甲基化组比较，有甲基化组乳腺癌患者的预后更差。PALB2启动子甲基化作为影响乳腺癌患者预后的独立危险因素，对于评估患者临床预后有着重要意义。     

胃癌患者血清抑癌基因启动子超甲基化测定的临床意义

目的：探讨胃癌患者血清中抑癌基因超甲基化检测的临床意义。方法随机收集2011～2013年上海市静安区中心医院进行胃镜检查的患者,32例胃癌患者为胃癌组,29例萎缩性胃炎为萎缩性胃炎组和30例健康者为健康对照组。应用甲基化特异性PCR（MSP）方法,测定血清Ras相关区域家族基因1a（RASSFA1）基因、人类相关转录因子3（Runx3）基因、错配修复蛋白MutL同源物1（hmLH1）基因、多肿瘤抑制基因1（MTS1）也称P16基因、上皮E钙粘蛋白（E-Cadherin）基因、组织因子途径抑制物2（TFPI-2）基因启动子甲基化状态。结果胃癌组血清RASSF1A、RUNX3、hmLH1、P16、E-Cadherin、TFPI-2基因超甲基化阳性率分别为21．9％,40．6％,21．9％,34．4％,28．1％,28．1％;萎缩性胃炎组分别为3．5％,13．8％,0．0％,6．9％,3．5％,6．9％;对照组仅检出RUNX3基因启动子甲基化,阳性率3．5％;胃癌组血清6种基因启动子甲基化阳性率均明显高于萎缩性胃炎组和健康对照组（P＜0．05）。联合血清中6种基因启动子甲基化对胃癌诊断灵敏度为76．7％,较单独一个基因明显升高（P＜0．05）;特异性为86．5％,与RUNX3基因比较,差异无统计学意义（P＞0．05）,与其他5个基因单独测定特异性降低（P＜0．05）。结论 MSP检测能检测到血清中RASSF1A、RUNX3、hmLH1、P16、E-Cadherin、TFPI-2基因启动子超甲基化。6个基因启动子联合测定对胃癌诊断的灵敏度更高,可为胃癌的诊断、治疗以及判断预后提供新方法或依据。     

老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压患者血浆内 ET-1及内源性 NO 表达及意义

【目的】探讨老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）合并高血压患者血浆内皮素（ET‐1）及内源性一氧化氮（NO）的表达及意义。【方法】选取老年OSAHS合并高血压患者60例（A组）、单纯老年OS‐AHS患者60例（B组）及正常健康体检者60例（C组）,采用ELISA法测定ET‐1,硝酸还原酶法测定NO ,多导睡眠仪监测睡眠呼吸指标,包括呼吸暂停低通气指数（AHI）、微觉醒指数（MAI）、平均动脉血氧饱和度（MSaO2）、最低动脉血氧饱和度（LSaO2）、呼吸障碍最长时间,分析ET‐1、NO与睡眠呼吸指标的相关性。【结果】A组与B组ET‐1、ET／NO均显著高于C组（ P＜0．05）,NO均低于C组;A组ET‐1、ET／NO显著高于B组（ P ＜0．05）, NO低于B组（ P＜0．05）;A组AHI、MAI、呼吸障碍最长时间均显著高于 B组（ P＜0．05）,LSaO2、MSaO2指标均低于B组（ P＜0．05）。在A组中,血浆ET‐1水平与AHI呈正相关（ r＝0．526,P＜0．05）,与LSaO2、MSaO2呈负相关（ r＝－0．275,r ＝－0．192,P ＜0．05）;血浆NO水平与AHI、MSaO2呈负相关（ r ＝－0．484,r ＝－0．536,P＜0．05）,与LSaO2呈正相关（ r＝0．589,P＜0．05）。【结论】老年OSAHS合并高血压患者血浆ET‐1及NO水平异常,内皮功能损伤可能参与了老年 OSAHS合并高血压病变过程。     

膀胱癌和肾癌中RASSF1A和BLU的甲基化状态

目的探讨RASSF1A和BLU在膀胱癌和肾癌中启动子甲基化状态及其意义。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）技术分别在45例膀胱癌组织和相应癌周正常组织、12例肾癌组织及其相应癌周正常组织和3例非肿瘤患者正常膀胱组织中检测RASSF1A和BLU启动子区域的甲基化状态。结果膀胱癌组织中,RASSF1A和BLU甲基化率分别为55.6%和31.5%;肾癌组织中,两基因甲基化率为66.7%和33.3%。RASSF1A和BLU启动子甲基化状态与膀胱癌临床病理参数无明显相关性（P〉0.05）。在膀胱癌或肾癌中,RASSF1A和BLU启动子甲基化状态之间均无明显相关性（P〉0.05）。结论膀胱癌和肾癌中,RASSF1A和BLU频繁发生高甲基化,高甲基化可能参与膀胱癌和肾癌两类肿瘤的发生。     

妊娠中期妇女超甲基化 RASSF1A 基因表达水平与子痫前期的关系

目的：探讨妊娠中期妇女血浆中超甲基化 RASSF1A 基因表达水平变化与子痫前期的关系。方法选择规律产前检查孕妇506例,分别于孕15～19周及孕20～24周采外周血,同时监测孕妇血压、尿蛋白值,其中诊断为妊娠期高血压疾病的孕妇中包括子痫前期组（48例）、妊娠期高血压组（48例）,从同期单胎健康孕妇中随机选取96名为对照组。收集入组孕妇外周血,提取游离DNA,经甲基化敏感的限制性内切酶消化处理,联合荧光定量 PCR 检测血浆中超甲基化 RASSF1A 基因的表达水平,分析其与子痫前期的关系。结果 孕15～19周,子痫前期组及妊娠期高血压组的超甲基化 RASSF1A 基因表达水平均高于对照组（P ＜0．05）,子痫前期组与妊娠期高血压组组间比较差异无统计学意义（P ＞0．05）。孕20～24周,子痫前期组孕妇血浆中超甲基化 RASSF1A 基因表达水平高于妊娠期高血压组及正常妊娠组（P ＜0．05）,妊娠期高血压组孕妇血浆中超甲基化 RASSF1A 基因表达水平亦高于正常妊娠组（P ＜0．05）。结论妊娠中期妇女血浆中超甲基化 RASSF1A 基因水平升高可能提示子痫前期的发生。     

应用MSP方法检测非小细胞肺癌RASSFlA基因启动子甲基化

目的探讨应用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测非小细胞肺癌（NSCLC）RASSF1A基因启动子甲基化情况。方法留取58例非小细胞肺癌患者手术标本及正常肺组织，甲基化特异性PCR分析RASSF1A基因启动子甲基化情况。结果58例非小细胞肺癌中RASSF1A基因启动子甲基化阳性率为34．5％，甲基化与各临床参数之间无显著相关性。结论原发性非小细胞肺癌中存在着较高比例的RASSF1A启动子过度甲基化，提示RASSF1A在非小细胞肺癌的发生中起着重要作用。     

血浆DNA甲基化检测在宫颈疾病诊断中的应用

目的对宫颈疾病患者血浆APC和RASSF1A基因启动子甲基化水平进行定量检测,探讨其在宫颈疾病诊断中的意义。方法收集34例宫颈低度病变(CINⅠ期)、43例宫颈高度病变(包含CINⅡ、CINⅢ期)、41例宫颈癌患者治疗前血浆及25例健康妇女血浆。另收集31例与血浆对应的宫颈组织标本。用双重实时荧光定量甲基化特异性PCR(qMSP)技术检测APC和RASSF1A基因启动子甲基化水平并进行统计学分析。结果宫颈疾病患者血浆中APC和RASSF1A甲基化水平与肿瘤组织有较好的一致性,且肿瘤组织水平高于血浆水平(Z分别为-2.236和-3.228,P均<0.05)。宫颈癌组血浆APC与RASSF1A甲基化率均高于低度病变组(P均<0.05);宫颈高度病变组血浆RASSF1A甲基化率也高于低度病变组,差异有显著性(P<0.05)。血浆APC和RASSF1A甲基化阳性结果在低度病变组、高度病变组和宫颈癌组均无显著性差异(P>0.05)。结论血浆DNA甲基化水平能反映宫颈癌的发生、发展变化,在宫颈癌的早期诊断中可能有重要价值。     

动态三维超声造影对肝细胞癌的超声诊断价值

【目的】探讨动态三维超声造影（3D‐CEUS）对肝细胞癌的诊断价值。【方法】回顾性分析2014年6月至2015年12月本院收治的50例肝细胞癌患者临床和影像学资料。每例患者都进行动态3D‐CEUS 和增强 CT （CECT ）检查。对两种检查方法图像质量,包括动脉期肿瘤内部显示情况（增强方式、肿瘤内部血管）、各期肿瘤供血血管及肿瘤边界显示情况进行综合评分。【结果】注射造影剂后,50例肿瘤3D‐CEUS 显示均有不同程度的强化。评分结果表明：3D‐CEUS 为0分者3例,1分者10例,2分者37例;CECT 无0分者,1分者9例,2分者41例。对两种方法评分均为2分的32例肿瘤内部显示情况进一步分析发现,增强方式上3D‐CEUS 与 CECT 图像上无统计学差别（ P ＞0．05）,一致性评分 Kappa 值为0．88。而在肿瘤内血管显示情况方面,3D‐CEUS 优于 CECT（ P ＜0．05）;在供血动脉方面,二者并不完全相同,0分和1分的图像3D‐CEUS与 CECT 无统计学差异（ P ＞0．05）,而2分的图像3D‐CEUS 优于 CECT （ P ＜0．05）;在周边组织关系方面,二者无统计学差异（ P ＞0．05）。【结论】动态3D‐CEUS 对肝细胞癌的成像具有较高质量,在显示肿瘤增强方式、肿瘤边界的清晰度方面与 CECT 相同,而在显示肿瘤内部血管及供血血管方面,其能力优于 CECT 。     

Mta-1在甲状腺肿瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系

【目的】探讨转移相关基因（Mta-1）蛋白在甲状腺肿瘤组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。【方法】选择甲状腺肿瘤石蜡组织标本160例,其中甲状腺癌120例和甲状腺腺瘤40例,另选择正常甲状腺组织50例。采用免疫组织化学SP法检测上述标本中Mta-1蛋白的表达,并检测其肿瘤微血管计数（MVC）,分析Mta-1蛋白的表达与肿瘤血管生成的关系。【结果】甲状腺癌中Mta-1阳性表达和M VC值明显高于正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤,其差异有统计学意义（P＜0．05）。在120例甲状腺癌组织中,Mta-1的阳性表达和MVC值均与是否有颈部淋巴结转移、包膜完整性及 TNM 分期密切相关（ P＜0．01）,而与其他临床病理特征指标无关（P＞0．05）。甲状腺癌组织中 Mta-1表达与MVC 值呈正相关（r＝0．625,P＜0．01）。【结论】Mta-1蛋白的异常表达与甲状腺癌的发生、浸润、淋巴转移等恶性潜能密切相关,其参与了甲状腺癌组织中肿瘤新生血管的生成。     

胶质瘤患者RASSF1A基因转录表达和启动子区甲基化的研究

目的 探讨RASSF1A(RAS association domain family 1A)基因mRNA表达水平和基因启动子区CpG岛甲基化程度及其与启动子甲基化的关系。方法 用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测28份胶质瘤组织和4份正常脑组织中RASSF1A基因mRNA相对表达水平;用甲基化特异性PCR方法研究胶质瘤组织、正常脑组织和U251细胞株中,RASSF1A基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果 RASSF1A mRNA在4份正常脑组织中全部表达;在脑胶质瘤中表达缺失率为21.4％(6/28),且表达量低于正常脑组织,但与患者年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度间的差异无显著意义(P>0.05)。按病理学分类,胶质母细胞瘤与少突胶质肿瘤的差异有显著意义(P=0.011)。脑胶质瘤中RASSF1A基因启动子发生甲基化的频率为39.3％(11/28),正常脑组织和U251细胞株中,RASSF1A基因启动了未发生甲基化。11份启动子区甲基化的胶质瘤标本中,5份同时伴mRNA表达缺失(P=0.022)。结论 RASSF1A基因启动了在胶质瘤中发生异常甲基化。尽管RASSF1A mRNA在脑胶质瘤中表达缺失并不广泛,但其表达普遍下调。推测启动子区CpG岛甲基化可能是导致RASSF1A基因在胶质瘤中表达缺失或表达水平下调的一种机制。     

异丙酚与七氟醚复合舒芬太尼对颅内肿瘤手术中脑组织氧代谢的影响比较

【目的】探讨异丙酚与七氟醚分别复合舒芬太尼对脑组织氧代谢的影响。【方法】本院收治的颅内肿瘤患者58例,按照麻醉方式不同分为 A 组（异丙酚复合舒芬太尼）和 B 组（七氟醚复合舒芬太尼）,每组29例。 A 组静脉注射异丙酚＋舒芬太尼＋顺苯磺阿曲库铵,B 组静脉注射咪达唑仑＋舒芬太尼＋顺苯磺阿曲库铵,术中同时使用七氟醚维持麻醉,监测手术插管后5 min（T1）、切开硬膜（T2）、取瘤后30 min（T3）、手术结束（T4）和拔管时（T5）5个时间段患者的心率（HR）、平均动脉压（MAP）、脉搏血氧饱和度（SpO2）、颈内静脉血氧饱和度（SjvO2）以及脑动静脉血氧分压（Da‐jvO2）以及麻醉情况。【结果】A 组各时间段 HR 、MAP 及 SpO2变化均较平稳,与 B 组同时间点比较差异有显著性（ P ＜0．05）。 A 组 T2、T3、T4时段的 SjvO2水平明显高于 T1时段（ P ＜0．05）,T2、T3、T4时段的 Da‐jvO2水平明显低于 T1时段（ P ＜0．05）;与 B 组比较,A 组在 T2、T3、T4时段的 SjvO2水平和Da‐jvO2水平改善更明显,组间比较差异有显著性（ P ＜0．05）。两组的麻醉时间相比较无明显差异（ P ＞0．05）, A 组清醒拔管时间和住院时间短于 B 组且差异有显著性（ P ＜0．05）。【结论】异丙酚复合舒芬太尼麻醉应用于颅脑肿瘤患者手术具有血流动力学平稳,能够平衡脑氧供需,降低脑氧代谢率以及安全性高等特点,且麻醉后清醒时间较短,有利于患者术后恢复。     

多种肿瘤标记物检测在肺癌诊断中的意义

【目的】探讨多种肿瘤标记物检测在肺癌诊断中的应用价值。【方法】本院接受治疗的50例肺癌患者为观察对象,同时选取48例肺良性病变者（肺良性病变组）以及42例健康体检者作为对照。观察三组对象血清肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖蛋白抗原 CA19‐9（ CA19‐9）、CA125和神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平的差异及不同临床特征肺癌患者肿瘤标志物水平的差异。【结果】三组 CEA 、CA19‐9,CA125,NSE 等肿瘤标志物水平由高到低分别为肺癌组、肺良性病变组和健康对照组,且各组之间相比较差异具有显著性（P ＜0．01）;分化程度低、肿瘤直径≥5 cm 、有远处转移的肺癌患者其 CEA 、CA19‐9、CA125和 NSE 水平较高（P ＜0．05）,而不同年龄、性别的肺癌患者上述指标相比较差异无显著性（P ＞0．05）。【结论】患者血清 CEA 、CA19‐9,CA125,NSE 水平与肺癌的分化程度、转移情况密切相关,其检测结果有利于肺癌的早期发现和治疗,具有较好的应用价值。     

食管鳞癌患者血浆与肿瘤组织DNA甲基化检测的应用价值

目的 研究食管鳞癌患者肿瘤组织和血浆多基因甲基化状态及其对食管鳞癌诊断的应用价值.方法 用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)检测76例食管鳞癌患者肿瘤组织、配对癌旁正常组织、患者术前1d、术后7d血浆游离DNA中腺瘤性息肉瘤基因(adenomatous polyposis coli,APC)、维甲酸受体β2基因(retinoic acid receptor-beta2,RARβ2)、上皮细胞钙黏蛋白基因(E-cadherin,CDH1)、细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂4A家族p16基因(cyclin-dependent kinase inhibitor4A,p16INK4α)、Ras相关家族蛋白1A基因(ras association domain family member 1A,RASSF1 A)甲基化,选取同期60名年龄、性别匹配的健康志愿者血浆DNA作对照.用x2检验分析各类组织与血浆标本中5个基因DNA甲基化率的差异;血浆与食管鳞癌组织标本DNA甲基化的相关性用Spearman相关分析;绘制受试者操作特征(receive operating characteristic,ROC)曲线评价单基因与5个基因联合检测诊断食管鳞癌的敏感度、特异度.结果 食管鳞癌组肿瘤组织中的APC、RARβ2、CDH1、p16INK4α、RASSF1A基因甲基化阳性率分别为44.7％ (34/76)、72.4％(55/76)、72.4％( 55/76)、86.8％( 66/76)、55.3％ (42/76),均显著高于对应癌旁正常组织[6.6％(5/76)、3.9％ (3/76)、3.9％ (3/76)、3.9％ (3/76)、2.6％( 2/76),x2值分别为29.01、75.39、75.39、105.34、57.18,P均＜0.001].食管鳞癌组术前血浆中5个基因的甲基化阳性率分别为42.1％(32/76)、63.2％ (48/76)、63.2％ (48/76)、71.1％ (54/76)、50.0％( 38/76),均显著高于健康对照组[3.3％ (2/60)、3.3％(2/60)、1.7％( 1/60)、3.3％ (2/60)、1.7％ (1/60),x2值分别为26.88、51.62、55.01、63.48、38.30,P均＜0.001].食管鳞癌患者血浆与肿瘤组织中5个基因甲基化的符合率均较高(Kappa值分别为0.679、0.791、0.791、0.542、0.895,P均＜0.001).血浆中APC、RARβ2、CDH1、p16INK4α、RASSF1A基因甲基化单项诊断食管鳞癌的敏感度分别为42.1％( 32/76)、63.2％(48/76)、63.2％( 48/76)、71.1％ (54/76)、50.0％( 38/76),特异度分别为96.7％( 58/60)、96.7％(58/60)、98.3％ (59/60)、96.7％( 58/60)、98.3％( 59/60);ROC曲线下面积(AUC)分别为0.694[95％可信限(CI)0.606～0.782]、0.799( 95％ CI 0.723 ～0.875)、0.807( 95％ CI 0.733～0.882)、0.839(95％ CI0.769～0.908)、0.742(95％ CI 0.659～0.824);5个基因联合检测血浆甲基化的敏感度为80.3％ (61/76),特异度88.3％ (53/60),ROC曲线AUC为0.843(95％ CI 0.773～0.913).联合检测的敏感度显著高于APC、RASSF1A单项检测(x2值分别为23.30、15.33,P均＜0.001),但与RARβ2、CDH1、p16INK4α的敏感度差异无统计学意义(x2值分别为5.48、5.48、1.75,P值分别为0.019、0.019、0.186);联合检测与单项检测的特异度差异无统计学意义(x2值分别为1.922、1.922、3.348、1.922、3.348,P均＞0.05).结论 食管鳞癌患者血浆与肿瘤组织中抑癌基因甲基化符合率均较高,血浆中5个基因甲基化联合检测诊断食管鳞癌与单基因检测相比无显著优势,但前者敏感度高于后者.     

Prognostic significance of RASSF1A promoter methylation in operable breast cancer

ObjectivesThe aim of our study was to evaluate the prognostic significance of RASSF1A promoter methylation status in operable breast cancer.Design and methodsBy using Methylation Specific PCR, we evaluated the specificity of RASSF1A promoter methylation in 10 breast tumors and matching normal tissues, 10 breast fibroadenomas and 11 normal breast tissues. The prognostic significance of RASSF1A methylation was validated in 93 formalin fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues obtained from patients with operable breast cancer.ResultsMethylation of RASSF1A promoter was observed in 1/31 (3.2%) non-cancerous breast tissues and 53/93 (57.0%) early stage breast tumors. The only positive sample in the non-cancerous breast tissues group was found in a histological normal tissue surrounding the tumor. During the follow-up period, 24/93 (25.8%) patients relapsed and 19/93 (20.4%) died. Disease-Free-Interval (DFI) was significantly associated with RASSF1A methylation (p = 0.028).ConclusionsRASSF1A promoter methylation provides important prognostic information in early stage breast cancer patients.     

胃癌组织中HOXA5和HOXA10基因启动子甲基化状况及其临床意义

[目的]研究胃癌组织中HOXA5和HOXA10基因启动子甲基化状况及与临床病理特征关系.[方法]采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测51例胃癌组织和正常胃粘膜组织中HOXA5和HOXA10基因启动子甲基化状态,并探讨其与临床病理特征的关系.[结果]①胃癌组织中HOXA5基因启动子的甲基化率(74.5％)明显高于正常胃粘膜组织(37.3％),差异有统计学意义(x2=14.356,P=0.000).HOXA5基因启动子甲基化率与肿瘤分化程度(x2=4.311,P=0.038)、浸润深度(x2=5.669,P=0.017)、淋巴结转移(x2=9.349,P=0.002)和肿瘤分期(x2=16.023,P=0.000)呈负相关,而与年龄和性别无关(P均＞0.05).②胃癌组织中HOXA10基因启动子的甲基化率(68.6％)明显高于正常胃粘膜组织(41.2％),差异有统计学意义(x2 =7.761,P=0.009).HOXA10基因启动子甲基化率与肿瘤分化程度(x2=5.304,P =0.021)、浸润深度(x2=15.457,P=0.000)和淋巴结转移(x2=6.157,P=0.013)呈负相关,而与肿瘤分期、年龄和性别无关(P均＞0.05).③HOXA5基因启动子甲基化率与其蛋白表达之间具有负相关性(r=-0.495,P=0.000),HOXA10基因启动子甲基化率与其蛋白表达之间亦具有负相关性(r=-0.343,P=0.000).两基因启动子甲基化率之间存在正相关性(r=0.751,P=0.000).[结论]胃癌组织中HOXA5和HOXA10基因启动子呈高甲基化状态,并且与其蛋白表达之间呈负相关;DNA异常甲基化可能是HOXA5和HOXA10基因表达改变的重要调控机制之一.