Survivin拮抗肽的筛选及鉴定

目的：筛选能与Survivin相结合的多肽,从中寻找拮抗剂,抑制Survivin的作用。方法：通过筛选噬菌体12肽库得到与Survivin相结合的多肽,以固相法合成这些多肽并用质谱仪进行鉴定;利用Wwestern blot和caspase-3活性检测从中筛选拮抗Survivin表达和功能的多肽。结果：用Survivin蛋白筛选噬菌体肽库,得到8条结合多肽;经体外实验验证,8条肽抑制Survivin蛋白的活性不一,其中3条有显著活性（P〈0.05）;而且这3条多肽能够增强caspase-3的活性。结论：以噬菌体随机肽库法筛选获得了有抑制Survivin功能的拮抗肽,此结果为抗肿瘤肽类药物的研制奠定了基础。     

非离子型造影剂用同种造影剂试敏的价值

本文对使用非离子型造影剂碘试敏进行对比研究，探讨非离造影剂前未进行同种造影剂碘过敏试验与在使用非离子型造影剂前行同种类型子型造影剂使用前行同种药物碘过敏试验的价值。     

赫塞汀治疗转移性乳腺癌的护理

对我科2004—03以来赫塞汀治疗转移性乳腺癌的护理体会总结如下。1临床资料1．1一般资料本组均为女性，年龄26～69岁。肿瘤组织免疫组化检查HER-2表达为（＋＋）或（＋＋＋），卡氏评分70～80分，病程6个月～8a，其中单一使用赫塞汀8例，赫塞汀与化疗药物合并使用5例。接受赫塞汀首次负荷量4mg／kg，加入生理盐水250ml静脉滴注90min，维持剂量2mg／kg，加入生理盐水250ml静脉滴注30min，1次／周，用药10～20周或至肿瘤进展。     

兔血管内膜增生过程中核因子κB活性与氯沙坦的影响

背景核因子κB可参与细胞增殖反应,其复杂的机制需深入研究.目的研究氯沙坦对血管内膜增生及核因子κB活性的影响.设计以实验动物为研究对象,完全随机分组设计,探索性实验研究.单位一所大学医院心内科.对象本实验于2001-11/2002-06在武汉大学人民医院实验室及实验动物中心完成.实验选用雄性日本大耳白兔24只,随机取8只作为正常组,始终饲以普通饲料;另外16只造成腹主动脉内皮损伤并以高脂饮食饲养8周后再随机分为对照组、氯沙坦组,每组8只.方法术后氯沙坦组给予氯沙坦10 mg/(kg·d)口服,对照组喂生理盐水.4周后取腹主动脉行组织形态学观察及用免疫组织化学方法分析核因子κB、α-平滑肌肌动蛋白、巨噬细胞、细胞间黏附分子1.主要观察指标3组动物经不同干预措施后血管内膜厚度、内膜面积、内膜核因子κB,细胞间黏附分子1的表达和平滑肌细胞、巨噬细胞数量比较.结果对照组兔血管氯沙坦组血管内膜厚度、内膜厚度/中膜厚度、内膜面积、内膜面积/中膜面积明显大于正常组(P＜0.01).氯沙坦组兔血管内膜厚度、内膜厚度/中膜厚度、内膜面积、内膜面积/中膜面积[(0.42±0.08)mm,0.43±0.10,(3.18±0 83)mm2,0.54±0.11]均明显小于对照组[(1.35±0.35)mm,0.67±0.15,(5.30±1.71)mm2,0.77±0.14](P均＜0.01).氯沙坦组新生内膜中巨噬细胞、平滑肌细胞数均明显少于对照组(P＜0.01,0.05).氯沙坦组兔血管核因子κB及其靶基因产物细胞间黏附分子1的水平也明显低于对照组(P＜0.01,0.05).结论氯沙坦可阻断血管紧张素Ⅱ受体,进而抑制核因子κB,从而抑制平滑肌细胞迁移、增殖和新生内膜形成.     

中药抗疲劳机制及方药的筛选规律

运用中医药原理,对疲劳的发生发展、五脏调节和方药筛选规律进行探讨。认为疲劳有健康性疲劳、亚健康性疲劳及慢性疲劳综合征的不同发展阶段;根据辨证立法和以法选药的原则,结合现代中药药理研究成果,可以筛选出能有效缓解和消除疲劳的常用方药。     

离体海马脑片CA1区锥体细胞缺氧期间电生理指标变化与N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801干预后的变化

背景海马CA1区锥体细胞是对缺血缺氧性损伤最为敏感的神经元,缺血缺氧后海马CA1区锥体细胞膜电位表现为缺氧早期细胞膜的超极化,随着缺氧时间的延长,细胞膜发生缓慢去极化及快速去极化,引起神经元不可逆性损伤.目的应用细胞内记录技术,观察N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801对离体海马脑片CA1区锥体细胞缺氧期间电生理指标的变化.设计观察对比实验.单位解放军第九七医院,徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室,Healthy-Science Center,State University of New York.材料实验于2002-09/2003-02在美国纽约州立大学医学中心完成.选择成年雄性SD大鼠5只,预吸纯氧3 min后以体积分数为0.02的异氟醚麻醉,快速断头取脑,制备离体海马脑片.方法大鼠海马脑片随机分为单纯缺氧组和MK801组,每组10个.单纯缺氧组海马脑片给予10 min缺氧;而MK801组的海马脑片在缺氧前10 min及10 min的缺氧期间分别应用100 μmol/L的MK801.所有脑片均给予60 min的复氧.应用细胞内记录技术记录海马CA1区神经元缓慢去极化及快速去极化的时间、快速去极化的幅度.在复氧末,应用细胞内注入电流及经Schaffer通路刺激,观察神经元对刺激的反应.主要观察指标①两组海马CA1区锥体神经元缓慢去极化速率.②两组海马CA1区神经元的快速去极化时间.③两组海马CA1区神经元的快速去极化幅度.④MK801对海马CA1区神经元功能恢复的影响.结果①海马CA1区锥体神经元缓慢去极化速率单纯缺氧组显著高于MK801组[(0.20±0.05)mV/s,(0.08±0.03)mV/s,(P＜0.05)].②海马CA1区神经元的快速去极化时间MK801组显著高于单纯缺氧组[(537±139)s,(261±26)s,(P＜0.05)].③海马CA1区神经元的快速去极化的幅度MK801组显著小于单纯缺氧组[(4±13)mV,(53±7)mV,(P＜0.05).④在复氧末期,MK801组的10个神经元中,9个神经元恢复对刺激的反应.结论N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂MK801可以显著降低缺氧引起的神经元缓慢去极化速率,延缓神经元快速去极化的发生及降低快速去极化的幅度,说明N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂可显著减轻神经元的缺氧性损伤,促进复氧后神经元功能的恢复.     

脂多糖诱导骨关节炎滑膜细胞表达一氧化氮与氨基胍的抑制效应

目的:观察氨基胍对脂多糖诱导骨关节炎滑膜细胞表达一氧化氮的影响,进一步了解炎性因子与一氧化氮之间的相互关系。方法:实验于2006-3/2006-7在南方医科大学组织工程研究中心进行。①6例骨关节炎滑膜,体外培养滑膜细胞。②将细胞浓度为1×108L-1,培养3～5代的滑膜细胞,以0.5mL/孔的量,加入至24孔板中,培养24h后,分别加入0,1,10,100mg/L脂多糖,及20mg/L脂多糖分别加0,0.1,1,10mmol/L氨基胍,继续培养48h后,收集培养液上清液。测量不同浓度脂多糖诱导下培养上清液中诱导型一氧化氮合酶的含量变化和同一浓度脂多糖 不同浓度氨基胍培养上清液中一氧化氮的含量变化。结果:①未加入脂多糖组培养上清液中诱导型一氧化氮合酶的含量极低,与培养基对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。诱导型一氧化氮合酶的含量随加入脂多糖浓度的增加而逐渐增加,各组间比较,差异有显著性意义(P<0.05)。②滑膜细胞在20mg/L脂多糖诱导下,0,0.1,1,10mmol/L氨基胍组一氧化氮表达的量逐渐减少,组见比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:在炎症因子脂多糖的作用下,滑膜细胞诱导型一氧化氮合酶的含量明显增加,诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍可以减少一氧化氮的生成,有助于阻断炎性因子与一氧化氮相互促进的恶性循环。     

杜拉宝治疗婴幼儿腹泻病疗效观察

目的:观察杜拉宝治疗婴幼儿腹泻病的临床疗效。方法:随机将小儿腹泻病患儿75例分为两组,对照组35例,给予常规治疗,治疗组40例,在常规治疗基础上加用杜拉宝口服。结果:治疗组总有效率95%,对照组总有效率63%,两组间比较2χ=10.128,P<0.01,差异有统计学意义。结论:杜拉宝治疗小儿腹泻病疗效显著。     

分子影像技术应用于药物研发的研究进展

分子影像学具有无创、高特异性、高敏感度、高分辨率、快速实时成像等优点,用于药物研发有利于缩短研发周期、降低研发成本、提高经济效益。本文就分子影像技术在药物研发过程中的靶向表达与靶点确定、药物先导化合物筛选、药物动力学/微剂量评价、抗肿瘤药物的有效性评估、纳米技术药物的缓释与成像等方面进行综述。     

艾普拉唑联合铋剂标准四联与序贯方案治疗幽门螺杆菌感染性慢性胃炎的疗效比较

【目的】观察艾普拉唑联合铋剂14 d标准四联方案及序贯方案治疗幽门螺杆菌（H ．pylor ,Hp）感染性慢性胃炎患者的临床疗效。【方法】经胃镜、快速尿素酶试验确诊的 H p阳性患者160例,按区组随机化分组法分为两组,每组80例,分别接受艾普拉唑＋枸橼酸铋钾＋阿莫西林克拉维酸钾＋左氧氟沙星的14 d的标准四联方案（标准组）或艾普拉唑＋阿莫西林克拉维酸钾＋左氧氟沙星＋呋喃唑酮14 d序贯疗法方案（序贯组）治疗。疗程结束后4～6周内行14 C尿素呼吸试验检测并观察比较两组患者症状改善及不良反应发生情况。【结果】标准组和序贯组H p根除率的符合方案数据分析分别为87％（67／77）和87．17％（68／78）;意向性分析分别为82．5％（66／80）和81．2％（65／80）。标准组和序贯组对上腹痛、反酸、烧心感等临床症状缓解有效率分别达94．8％（73／77）和94．87％（74／78）;不良反应轻微,发生率分别为5．19％和6．41％。两组患者在上述3个方面相比较差异均无显著性（均 P ＞0．05）。【结论】艾普拉唑联合铋剂14 d标准四联方案或14 d序贯疗法方案治疗 Hp阳性慢性胃炎患者均可获得临床症状改善率高、不良反应轻、Hp根除率高的疗效。     

遗传性神经系统离子通道病基因治疗的研究进展

目的遗传性神经系统离子通道病现有的治疗方法往往难以控制病情或者患者耐受度较低,因此探索新的治疗方法势在必行。基因治疗在多项研究中显示可能应用于神经系统疾病,并可能成为未来遗传性神经系统离子通道病的有效治疗手段。同时,光遗传学、化学遗传学方法、基因编辑技术的不断进步也为遗传性神经系统离子通道病的基因治疗提供了良好的发展基础。我们将就遗传性神经系统离子通道病基因治疗的方法机制、转导载体、启动子及给药途径作一综述。     

孟鲁司特对哮喘患儿气道炎症及气道重构的影响

【目的】探讨孟鲁司特对哮喘患儿气道炎症及气道重构的影响。【方法】64例哮喘发作期患儿随机分为试验组（A组）34例,对照组（B组）30例,B组予常规GINA方案吸入辅舒酮200～600μg／d治疗,A组在B组基础上加服孟鲁司特钠片5mg／次,1次／天,睡前口服,均连续用药3个月。抽静脉血检测治疗前后炎症介质的变化。【结果】①治疗后A、B两组白三烯B4（LTB4）、白介素25（IL-25）水平较治疗前显著降低（P〈0．05）,其中A组降低水平显著低于B组（P〈0．05）;A、B两组IL-12水平治疗后水平均升高,其中A组治疗后水平显著高于B组（P〈0．05）。②A、B两组基质金属蛋白酶9（MMP9）及其组织掏剂-1（TIMP-1）、MMP-9／TIMP-1水平治疗前后均高于正常组（P〈0．05）。A组治疗后MMP-9,MMP-9／TIMP1水平均显著低于B组（P〈0．05）,但TIMP-1水平无显著性差异（P〉0．05）。【结论】孟鲁司特能有效控制哮喘患儿气道炎症,改善气道重构。     

维拉帕米和Na+/H+通道阻滞剂对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响及其机制

[目的]研究维拉帕米(VP)和5-N-乙基-异丙基阿米洛利(EIPA)单独及联合作用对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤保护作用及其机制.[方法]50只SD大鼠随机分成空白组(A组),缺血再灌注组(B组),EIPA 缺血再灌注组(C组),维拉帕米 缺血再灌注组(D组),EIPA VP 缺血再灌注组(E组),每组10只.缺血前10 min自尾静脉注入药物.制备95%肝脏缺血模型,缺血30 min,再灌注2 h后取静脉血、肝脏标本,比较各组之间的肝功能(ALT, AST),肝组织匀浆XOD活性,肝组织Ca2 浓度以及肝组织形态学变化.[结果]VP和EIPA组各项检测指标与缺血再灌注组比有显著性差异,联合用药组与单独用药组比较有显著性差异(P＜0.05).[结论]维拉帕米和EIPA预处理能减轻肝脏缺血再灌注损伤,联合用药有协同保护作用,效果更明显.     

普罗布考联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病的疗效观察

【目的】观察普罗布考联合厄贝沙坦治疗糖尿病肾病（DN）的疗效。【方法】60例DN患者随机分成治疗组和对照组。两组患者均在严格执行糖尿病饮食、减少蛋白摄入、控制血糖、血压达标的基础上,治疗组给厄贝沙坦150mg／d口服,同时给普罗布考每次0．5g,每天两次口服;对照组单用厄贝沙坦150mg／d口服。两组均随访3个月。【结果】两纽治疗后血清肌酐（Scr）、血丙二醛（MDA）、C反应蛋白（cRP）、尿白蛋白排泄率（UAER）均有降低（P〈0．05）;治疗组治疗后CRP和MDA、uAER较对照组明显下降（P〈0．05）。【结论】普罗布考与厄贝沙坦联合应用比单用厄贝沙坦能更有效地减轻蛋白尿和保护肾脏。     

K562细胞及其耐药细胞株K562/A02细胞白血病耐药相关microRNA筛选

目的 通过检测慢性粒细胞白血病急变细胞系K562及其阿霉素耐药株K562/A02的微小RNA(microRNA、miR)表达差异,探讨microRNA与白血病化疗耐药的关系.方法 MTT法检测K562/A02及其亲本细胞系K562的耐药性能;流式细胞术检测K562与K562/A02细胞的P-gp表达;运用microRNA芯片技术筛查K562与K562/A02细胞之间差异表达的microRNA,随后用实时荧光定量RT-PCR方法进一步证实.结果 阿霉素耐药株K562/A02相对于其亲本细胞系K562对阿霉素的耐药倍数为180倍;K562细胞P-gp的表达率为0.2%,K562/A02细胞P-gp的表达率为86%;microRNA芯片结果显示K562/A02与K562细胞之间有22种microRNA表达存在显著的差异(P<0.01),表达差异在2倍以上的有9种,其中miR-221、miR-155、miR-451在K562/A02细胞表达上调,而miR-98、miR-181a、let-7f、miR-424、let-7g和miR-563则表达下调.实时荧光定量RT-PCR进一步证实了上述结果,并显示miR-451、miR-155、miR-221、let-7f、miR-424在两种细胞中表达差异显著.结论 K562/A02与K562细胞存在microRNA表达差异,其中miR-451、miR-155和miR-221在K562/A02中表达显著上调,而let-7f、miR-424则显著下调,提示microRNA可能参与白血病耐药形成,差异表达的microRNA可能为逆转白血病耐药提供新的作用靶点.     

厄贝沙坦对急性脑梗死患者血浆溶血磷脂酸和血清超敏C反应蛋白的影响

【目的】观察厄贝沙坦对急性脑梗死患者血浆溶血磷脂酸（LPA）和血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）含量的影响。【方法】将78例急性脑梗死患者依据治疗方法分为厄贝沙坦治疗组（A组,39例）和常规治疗组（B组,39例）,另选取40名健康体检者作为对照组。A组给予厄贝沙坦150mg联合阿司匹林100mg,每日1次;B组给予阿司匹林100mg,每日1次;两组其余治疗方法相同,连续治疗两周。在治疗前、后测定LPA和hs-CRP含量,并评定其临床疗效。【结果】A,B两组脑梗死患者血浆LPA和血清hs-CRP含量较对照组均显著升高（均P〈0．01）,LPA和hs-cRP含量与爱登堡斯堪的那维亚卒中量表（NDs）呈正相关;A,B两组治疗后血浆LPA和血清hs-cRP含量和NDS与治疗前相比较均明显降低,其差异有显著性意义（P〈0．01）;A组治疗前后血浆LPA和血清hs-CRP含量的差值与B组比较差异有显著性（P〈0．05）。【结论】厄贝沙坦能明显降低急性脑梗死患者的血浆LPA和血清hs-CRP,并有助于脑梗死患者的神经功能恢复。     

Gonococcal Invasion of Epithelial Cells Driven by P.IA,a Bacterial Ion Channel with GTP Binding Properties

The neisserial porin P.I is a GTP binding protein that forms a voltage-gated channel that translocates into mammalian cell membranes and modulates host cell signaling events. Here, we report that P.I confers invasion of the bacterial pathogen Neisseria gonorrhoeae into Chang epithelial cells and that this event is controlled by GTP, as well as other phosphorus-containing compounds. Bacterial invasion was observed only for strains carrying the P.IA subtype of porin, which is typically associated with the development of disseminated neisserial disease, and did not require opacity outer membrane proteins, previously recognized as gonococcal invasins. Allelic replacement studies showed that bacterial invasiveness cotransferred with the P.IA (por1A) gene. Mutation of the P.I-associated protein Rmp did not alter the invasive properties. Cross-linking of labeled GTP to the porin revealed more efficient GTP binding to the P.IA than P.IB porin subtype. GTP binding was inhibited by an excess of unlabeled GTP, ATP, and GDP, as well as inorganic phosphate, but not by UTP or beta-glycerophosphate, fully in line with the respective invasion-inhibitory activities observed for these compounds. The P.IA-mediated cellular invasion may explain the more invasive behavior of P.IA strains in the natural infection and may broaden the basis for the development of a P.I-based gonococcal vaccine.     

复方鳖甲软肝方对家兔心室肌细胞钙通道的影响

目的研究复方鳖甲软肝方对家兔单个心室肌细胞L-型钙通道(ICa-L)的电生理作用.方法采用改良的中药血清药理学方法及全细胞膜片钳技术观察不同浓度的复方鳖甲软肝方药物血清干预心肌细胞后对心肌细胞ICa-L电流的影响.结果含0.7 g/L和1.4 g/L的复方鳖甲软肝方药物血清使兔心室肌细胞ICa-L峰值电流密度(ICa-L max)由(6.90±0.52)pA/pF分别下降至(3.40±0.28)pA/pF和(2.30±0.18)pA/pF(P＜0.01).复方鳖甲软肝方使ICa-L的电流-电压曲线上移,但不改变其激活电位、电位峰值和反转电位,同时还抑制ICa-L的激活过程.结论复方鳖甲软肝方对ICa-L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心肌纤维化的部分机制.     

人胃癌组织CCR7和COX-2的表达及意义

【目的】检测胃癌患者癌组织中趋化因子受体7（CCR7）和环氧化酶-2（cox-2）的表达及意义。【方法】检测43例胃癌患者癌组织和35例癌旁正常胃组织中CCR7mRNA和COx-2mRNA的表达情况。【结果】胃癌组织中CCR7mRNA和COX-2mRNA的表达阳性率分别为62．79％和58．14％,相对表达量分别为0．59±0．28和0．66±0．21,均明显高于癌旁正常胃组织阳性率（分别为14．29％和8．57％）和相对表达量（分别为0．13±0．05和0．09土0．01）,两组比较差异均有显著性（P〈0．05）。CCR7mRNA和COX-2mRNA在胃癌组织中的阳性表达率和相对表达量均随癌细胞浸润程度的加深、临床分期的增加及淋巴结转移明显增高（P〈0．05）,但与性别和肿瘤分化程度无明显相关（P〉0．05）。【结论】CCR7和COX-2在胃癌组织中高表达,可能与癌细胞的浸润与淋巴转移有关。     

lon Torrent半导体测序联合MLPA技术检测神经纤维瘤患者的致病突变

摘要:目的建 立临床适用的神经纤维瘤病(NF)的分子遗传分析方法,对NF进行分子遺传诊断和遗传咨询,并对NF家庭进 行产前诊断。方法 以南京医科大学附属妇产医院遗传咨询门诊收治的18 例NF患者为研究对象,收集患者及其家属的外 周血标本并提取基因组DNA,应用lon Torrent半导体测序技术进行NF1/NF2基因测序并结合多重连接探针扩增反应(ML- PA)检测,筛选致病突变并用Sanger测序验证,结合亲子二代的分子遗传检测结果,制定适当的临床干预和随访计划。在NF 家系母亲再次妊娠时,对胎儿进行产前诊断。结果应用 lon Torrent半导体测序技术检测出9例致病突变和1例可疑致病突 变,其中包括3个未报道过的新突变;应用MLPA技术检测出1例拷贝数大片段缺失。对其中5个家系的孕妇行羊膜腔穿刺 术抽取羊水进行产前诊断,其胎儿均不携带家系的致病突变。结论基于 lon Torent半导体测序及MLPA技术建立的基因诊 断方法可为NF临床诊断及遗传咨询提供分子遗传学依据,具有较高的临床应用价值。