表皮生长因子受体基因突变与肺腺癌亚型关系的研究

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因突变类型与肺腺癌亚型的相关性。方法收集2011~2015年该院3 028例非小细胞肺腺癌(NSCLC)患者的肿瘤组织,提取DNA后采用突变阻滞扩增系统(ARMS)检测EGFR基因突变。结果 3 028例NSCLC患者标本中,EGFR基因突变率为39.7%,其中第19号外显子缺失突变543例,第21号外显子L858R点突变535例,共占89.8%;新分类中浸润前病变与微浸润性腺癌、浸润性腺癌的EGFR基因突变比较,差异有统计学意义(P0.05);中分化肺腺癌有较高的EGFR突变率,不同分化程度的EGFR突变率比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论新分类表现出与分子诊断的相关性,不同亚型EGFR突变率有差异,EGFR基因突变与腺癌组织分化程度存在一定的相关性。     

非小细胞肺癌患者血浆表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义

目的 探讨表皮生长因子受体基因（EGFR）在多种肺部肿瘤中的突变情况及其临床意义.方法 对2006年6月至2012年6月入住我院的60例肺部肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析,应用EGFR基因突变酶切富集PCR法对患者血浆游离核酸EGFR基因外显子-19缺失以及外显子-21 L858R发生突变.对血浆EGFR基因突变与患者的性别、吸烟史、TNM分期、病理类型以及吉非替尼治疗客观有效率与疾病无进展等之间的关系加以分析.结果 （1）本组60例患者血浆标本共检测出EGFR基因发生突变数为29例,突变率为48.3％,且血浆EGFR基因突变多发生于肺腺癌患者中（P＜0.01）;（2）血浆中EGFR水平与肺部良性病变EGFR水平存在统计学差异（P＜0.01）,且肺鳞癌、肺腺鳞癌患者血浆中的EGFR水平与肺腺癌血浆中的EGFR存在统计学差异（P＜0.05）;（3）在本组34例接受吉非替尼治疗的患者之中,血浆EGFR基因突变呈阳性的患者的客观有效率与中位疾病无进展生存期均要明显优于血浆EGFR 的基因突变阴性患者（P＜0.01）.结论 EGFR基因在多种肺部肿瘤中的突变率接近50％,且血浆游离核酸酶切富集PCR法能够灵敏而特异地对EGFR基因出现突变的情况进行检测,且基因突变检测呈阳性患者对吉非替尼的反应率要显著地高于野生型患者.     

潮州地区乙肝病毒分型和耐药突变基因检测的应用

目的 探讨潮州地区乙型肝炎病毒(HBV)基因分型和耐药基因突变检测的临床意义.方法 采用PCR-反向点杂交(RDB)法对慢性乙肝(Chronic hepatitis B,CHB)患者血清进行基因分型和耐药突变检测,拉米夫定(Lamivudine)耐药患者改用阿德福韦酯(Adefovir)治疗,1 a后测定其HBV DNA和谷丙转氨酶(ALT)含量.结果 HBV B亚型占92.31％(120/130),HBV C亚型占5.38％(7/130),B+D基因型占3.21％(3/130).检测出24例均为HBV B亚型的耐药突变基因,耐药突变率18.46％(24/130).HBV B亚型与HBVC亚型的HBV DNA和ALT含量比较差异有统计学意义(P＜0.05),阿德福韦酯治疗1 a前后的HBV DNA和ALT含量差异有统计学意义(P＜0.05).结论 潮州地区HBV基因型以B亚型为主,耐药突变基因型是影响疾病进程的重要因素.     

深圳地区103例非小细胞肺癌患者EGFR基因突变分析

目的了解深圳地区非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变情况,为NSCLC患者药物靶向治疗提供科学依据。方法收集2013年3月~2015年11月深圳地区3家三级区属医院的103例NSCLC肺癌组织,分别提取DNA,采用突变特异性扩增系统(ARMS)扩增检测EGFR基因外显子18、19、20及2l的突变情况,并统计分析EGFR基因突变率。结果 103例NSCLC患者中EGFR基因总突变率为38.8%(40/103),其中第18、19、20及21外显子突变分别占总突变的2.5%(1/40)、35.0%(14/40)、5.0%(2/40)及57.5%(23/40);腺癌患者EGFR基因突变率为48.7%(37/76),高于非腺癌患者的11.1%(3/27),差异有统计学意义(χ~2=25.617,P0.01);不吸烟的NSCLC患者EGFR基因突变率为56.1%(32/57),明显高于吸烟患者的17.4%(8/46),差异有统计意义(χ~2=20.195,P0.01);女性患者突变率为52.4%(22/42),高于男性患者的29.5%(18/61),差异有统计意义(χ~2=5.127,P0.05);≤56岁的NSCLC患者EGFR基因突变率为39.5%(17/43),56岁的患者为38.3%(23/60),差异无统计学意义(χ~2=0.618,P0.05)。结论深圳地区NSCLC患者EGFR基因突变主要以21外显子为主,其次为19外显子;腺癌、女性及不吸烟NSCLC患者EGFR基因突变率较高,可接受EGFR-TKIs治疗。     

云南地区非小细胞肺癌10种驱动基因突变联合检测分析

目的 探讨云南地区非小细胞肺癌(NSCLC)患者EGFR、ALK、ROS1、KRAS、BRAF、NRAS、PIK3CA、HER2、RET和MET 10种基因突变特点及与临床病理特征的关系,探索10种基因突变联合检测的临床应用价值。方法 收集2016年7月至2021年7月昆明医科大学第一附属医院经病理诊断为NSCLC的云南地区227例患者的肿瘤组织和临床病理资料,采用扩增阻滞突变系统(ARMS)检测10基因突变状态。结果 227例NSCLC标本中,10种驱动基因的总突变率为78.85%,EGFR突变频率最高,KRAS突变位居第二,ALK融合位居第三,并且原发灶的突变率与转移灶比较,术后石蜡样本突变率与细胞学样本比较,差异无统计学意义(χ²=1.646,0.216,P>0.05)。EGFR基因突变率为44.93%,主要以19Del和21号外显子L858R为主型,占总突变率的78.43%。EGFR基因突变率在女性患者高于男性患者,腺癌患者高于非腺癌患者,不吸烟患者高于吸烟患者,差异有统计学意义(χ²=11.050、12.365、19.936,...     

非小细胞肺癌患者功能性驱动基因突变的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者功能性驱动基因表皮生长因子受体(EGFR)、间变淋巴瘤激酶(ALK)、Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)和B-Raf原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(BRAF)基因的突变状况。 方法选择2009年1月至2016年6月安徽省铜陵市人民医院及安徽省立医院呼吸科、胸外科、肿瘤科诊治的经病理诊断为NSCLC患者,共203例(其中铜陵市人民医院117例,安徽省立医院86例),收集患者的外科手术肿瘤组织标本和淋巴结活检、肺穿刺活检、气管镜活检和胸腔积液沉渣标本,应用突变扩增阻滞系统(ARMS)进行EGFR、KRAS和BRAF基因突变检测和免疫组化法进行ALK基因分析,采用χ²检验分析基因的突变率及其与临床特征的关系。 结果NSCLC患者EGFR、ALK、KRAS和BRAF基因的突变率分别为51.23%(104/203),4.88%(8/164),10.69%(17/159)和1.26%(2/159)。EGFR基因阳性突变率女性组66.67%(58/87)高于男性组36.21%(42/116),腺癌组48.80%(81/166)高于鳞癌组33.33%(7/21),非吸烟组63.38%(90/142)高于吸烟组16.39%(10/61),差异有统计学意义(χ²＝18.45,113.13,37.69;均P<0.05)。而EGFR基因突变状况与标本来源类型如手术、淋巴结活检、肺穿刺活检、气管镜活检和胸腔积液沉渣标本间差异无统计学意义(χ²＝3.91,P>0.05)。ALK基因突变状况与性别、病理类型、吸烟状态之间均差异无统计学意义(χ²＝0.00,0.86,0.55;均P>0.05)。KRAS基因突变状况与性别、病理类型、吸烟状态之间均差异无统计学意义(χ²＝3.63,2.13,2.36;均P>0.05)。此外BRAF基因突变均为男性、吸烟患者。检测中发现3例19,21外显子EGFR双突变;1例EGFR和ALK双突变。 结论NSCLC患者EGFR基因突变率最高,其次为KRAS、ALK、BRAF基因。EGFR基因突变以女性、不吸烟、腺癌为优势人群,EGFR与ALK双突变可共存。     

新疆维吾尔族非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体及KRAS基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨新疆维吾尔族非小细胞肺癌（NSCLC）患者组织中表皮生长因子受体（EGFR）及KRAS基因突变与临床病理特征的关系。方法应用探针扩增阻滞突变系统（ARMS）检测50例NSCLC组织中EGFR基因第18、19、20和21外显子及KRAS基因12、13密码子上7种热点体细胞的突变情况,分析EGFR及KRAS基因突变与维吾尔族NSCLC患者临床病理特征之间的相关性。结果50例标本中,EGFR总检出率为12．0％,其中4例为19外显子缺失突变,2例为21外显子L858R点突变;KRAS总检出率为10％,均位于12密码子Glyl2Ala突变;无1例发生EGFR与KRAS同时突变。腺癌、鳞癌、大细胞癌EGFR及KRAS基因突变检出率分别为27．8％、3．5％、0％和22．2％、3．5％、0％。腺癌患者EGFR基因突变率（27．8％）明显高于非腺癌者（3．1％）,差异有统计学意义。腺癌与非腺癌患者KRAS基因突变比较,差异有统计学意义。维吾尔族患者EGFR及KRAS基因突变与年龄、性别、吸烟状况、TNM分期及ECOG评分均无关。结论与汉族人群相比,新疆维吾尔族NSCLC患者EGFR突变率较低,KRAS突变率较高,类似于欧美高加索人群的突变特点。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体突变与表皮生长因子受体和ki67表达相关性分析

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因外显子的突变情况并探讨其与EGFR和ki67表达之间的联系。方法用测序法检测80例NSCLC患者标本的基因突变情况,并用免疫组织化学法检测EGFR和ki67的表达。结果 80例NSCLC患者中有16例存在EGFR基因突变,其中5例为第19外显子缺失突变,11例为第21外显子替代突变。女性患者突变率高于男性患者;腺癌患者突变率高于非腺癌患者。EGFR和ki67的表达与EGFR基因突变无关。结论 EGFR基因突变率以女性和腺癌患者较高,且与EGFR和ki67表达无关。     

晚期非小细胞肺癌患者EGFR基因突变及其与血清肿瘤标志物的相关性

目的利用扩增阻滞突变系统(ARMS)检测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变情况,探讨其与患者临床特征和血清肿瘤标志物的相关性。方法收集2015年1月至2016年4月山东大学齐鲁医院收治的92例晚期NSCLC患者血浆标本,采用ADx-ARMS方法检测EGFR基因突变情况,采用化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC-Ag)、糖类抗原(CA)125、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、唾液酸(SA)水平。结果晚期NSCLC患者EGFR基因总突变率为32.6%(30/92)。其中,EGFR19-del突变率为15.2%(14/92),EGFR21-L858R突变率为12.0%(11/92),EGFR20-T790M突变率为2.2%(2/92)。晚期NSCLC患者EGFR基因突变与患者性别、吸烟史、病理类型具有明显相关性。与EGFR基因野生型患者比较,EGFR基因突变患者CEA水平明显升高(P0.05),CA125、CYFRA21-1、SCC-Ag水平明显降低(P0.05)。结论晚期NSCLC患者EGFR基因突变者血清肿瘤标志物CEA、CA125、CYFRA21-1、SCC-Ag水平与未突变患者存在明显差异,为发现EGFR基因突变与血清肿瘤标志物的相关性乃至筛选表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗的优势人群提供参考。     

非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中检测EGFR基因突变

目的检测非小细胞肺癌患者外周血游离DNA中表皮生长因子受体(EGFR)基因19和21外显子的突变情况,并与相应的肿瘤组织检测结果进行比较,探讨非小细胞肺癌患者应用外周血游离DNA检测EGFR突变的临床意义。方法应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测32例非小细胞肺癌患者术后肿瘤组织和术前外周血游离DNA中EGFR基因19和21外显子的突变,所有扩增标本均经基因测序法验证。结果 32份外周血标本中,共检测到13份EGFR基因突变,突变率达40.6%,肿瘤组织中有16份EGFR基因突变,突变率达50.0%,外周血和肿瘤组织EGFR基因同时突变的有13份,两者突变一致性达到81.2%,两者间差异无统计学意义(P0.05)。结论外周血游离DNA代替肿瘤组织进行EGFR基因突变检测具有可行性,为无法取得肿瘤组织的非小细胞肺癌患者提供一种更快捷、简便的EGFR基因突变检测方法,其检测结果可为临床选择靶向药物治疗提供依据。     

SLC30A8基因单核苷酸多态性与中国南方人2型糖尿病的相关性

[目的]研究SLC30A8(rs13266634)基因多态性与2型糖尿病患者(T2DM)以及相关代谢指标的关系.[方法]T2DM 259例(T2DM组)、健康者(NC组)200例(受试者均来自上海及其周边地区).试剂盒提取外周血基因组DNA,标本基因型的判断用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)技...     

MTA-1基因在口腔疣状癌和鳞癌中的表达研究

【目的】研究肿瘤转移相关基因-1（metastasis—associatedgene1,MTA-1）在口腔疣状癌和鳞癌中的表达。【方法】取20例口腔鳞状细胞癌和10例口腔疣状癌组织及20例正常口腔黏膜组织标本,应用反转录多聚酶链式反应（RT-PCR）方法检测MTA-1基因mRNA的表达。【结果】口腔疣状癌组织与口腔鳞癌组织MTA-1基因mRNA的表达水平明显高于正常口腔黏膜上皮组织（P〈0．05）;口腔疣状癌中MTA-1基因mRNA的表达显著低于口腔鳞癌（P〈0．05）。【结论】MTA—1基因可能在口腔疣．状癌和口腔鳞状细胞癌的发生发展中起作用;可能与口腔鳞状细胞癌的浸润与转移密切相关。     

膀胱移行细胞癌多药耐药基因与p53基因表达的临床研究

【目的】探讨膀胱癌中多药耐药基因（MDR1）与p53基因表达的临床意义。【方法】采用免疫组化（SABC）法对32例膀胱移行细胞癌中MDR1表达产物P—GP与p53基因产物p53蛋白进行了检测。【结果】32例膀胱移行细胞癌中P—GP、p53阳性率分别为41．0％和47．0％,且随膀胱癌的病理分级和临床分期而增高。T2～T4期同Tis～T1期相比,MDR1及p53的表达均差异有显著性。【结论】临床检测MDR1及p53可对膀胱癌患者提供更多的预后信息。     

HIF-1α在膀胱移行细胞癌组织中的表达及临床意义

[目的]检测膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中HIF-1α的表达情况,初步探讨HIF-1α在BTCC中表达的临床意义.[方法]应用免疫组织化学及RT-PCR技术检测BTCC组织中HIF-1α的蛋白和mRNA表达,并分析其表达与肿瘤临床分期、病理分级及复发的关系.[结果]免疫组织化学染色显示:12例正常膀胱组织未发现HIF-1α阳性表达,57例BTCC组织中有30例HIF-1α表达阳性,阳性表达率占52.63%.其表达与肿瘤的病理分级无关,但与肿瘤的临床分期(Tis-T1期的表达率与T2～T4期相比,P=0.026)及复发明显相关.RT-PCR检测显示:BTCC组织中HIF-1α mRNA的阳性表达率显著高于正常膀胱组织,但BTCC组织中HIF-1α mRNA的表达与其蛋白水平表达无明显相关性.[结论]在BTCC中,HIF-1α蛋白的表达明显上调,HIF-1α在BTCC的侵袭等生物学过程中具有重要的作用,HIF-1α可能可以用于临床监控BTCC的进展.     

原发性红斑肢痛症一家系排除与2q24．1-32区间连锁分析

【目的】研究原发性红斑肢痛症与2亏染色体长臂2q24．1-32区间的连锁情况。【方法】收集一个原发性红斑肢痛症家系成员的血样抽提DNA,选用2号染色体长臂2q24．1-32区间内7个微卫星标记对该家系成员进行基因扫描,并对基因分型结果进行连锁分析及单倍型分析。【结果】连锁分析所得两点LOD值结果（重组率0—0时）〈-2,单倍型分析发现该疾病表型与基因型不共分离。【结论】排除该家系与2号染色体体长臂2q24．1-32区间连锁,提示原发性红斑肢痛症具有遗传异质性。该家系可能有新的致病基因位点。     

双J管生物被膜菌临床特性及其相关基因研究

[目的]研究双J管生物被膜菌的临床分布,对抗生素的耐药特性及粪肠球菌相关基因与生物被膜形成的关系.[方法]收集本院92例患者双J管.筛选生物被膜菌株和相应浮游菌株;浮游菌与双J管生物被膜菌在MH培养基上作耐药性分析;生物被膜阳性菌在泊洛沙姆培养基和普通MH培养基上作耐药差异性分析.实时荧光定量PCR方法对生物被膜菌组和浮游菌组细菌中ebpA、gelE两种与生物被膜形成相关的基因表达进行检测.[结果]92例患者双J管中筛选出生物被膜菌41株,阳性率为45%;生物被膜菌与相应的浮游菌比较,在普通MH培养基上药敏结果相似,无统计学差异（P＞0.05）;生物被膜菌在Poloxamer培养基和MH培养基上药敏结果差异有统计学意义（P＜0.05）,且前者耐药性更强.生物被膜菌组ebpA,gelE表达量分别是浮游菌组的2019倍和1/138.[结论]本院双J管生物被膜菌在临床上以肠球菌属和葡萄球菌属为主;生物被膜菌与浮游菌耐药性无见明显差异, Poloxamer培养基可模拟出生物被膜菌的生存环境,而且对药物的耐受性更强.ebpA与促进生物被膜形成有关,gelE与抑制生物被膜形成有关.     

脑梗死患者AGT、ACE和MTHFR基因多态性的研究

[目的]探讨血管l紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与脑梗死的相关性.[方法]应用基因芯片技术联合检测中国南方的114例脑梗死患者和76例正常对照者AGT基因M235T、ACE基因I/D和MTHFR基因C667T多态性位点.[结果]脑梗死组的AGT基因TT型和T等位基因、ACE基因DD型和D等位基因频率均显著高于对照组(χ2=6.370,P=0.012;χ2=5.627,P=0.018;χ2=4.216,P=0.040;χ2=11.916,P=0.001);MTHFR基因TT型和T等位基因在脑梗死组和对照组间无差异(χ2=1.037,P=0.287;χ2=0.779,P=0.377).[结论]AGT和ACE基因多态性可能是中国南方汉族人群脑梗死的遗传危险因素,而MTHFR基因多态性可能与脑梗死无相关性.     

转化生长因子-β1基因多态性与高血压心房颤动相关性研究

[目的]研究转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）基因＋869T／C多态性与高血压心房颤动发生的关系,探讨TGF-β1基因＋869T／C基因型对高血压心房颤动发生的影响。[方法]采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）,检测99例高血压患者（其中47例伴心房颤动）及49名对照组TGF-β1基因＋869T／C。[结果]在高血压心房颤动组中＋869T／C位点的CC基因型频率高于高血压无心房颤动组及对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,高血压心房颤动组＋869C等位基因频率高于高血压无心房颤动组及对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,与高血压无心房颤动组比较,携带C等位基因的个体患心房颤动的相对风险度（0R）为2．044（95％CI：1．157～3．612）。[结论]TGF-β＋869CC基因型是高血压心房颤动的易感基因型;C等位基因可能是高血压心房颤动发病的遗传易感基因。     

利用生物信息学分析CALHM2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

[目的]基于TCGA及GEO等数据库收录肿瘤高通量数据,分析钙稳态调节家族蛋白2(CAL-HM2)等CALHMs家族基因在非小细胞肺癌癌(NSCLC)中的表达及临床价值.[方法]利用Oncomine,GEPIA及UALCAN等在线工具分析和验证CALHMs(CALHM1-6)家族基因在NSCLC的表达水平;利用Huma...     

C-erbB-2在子宫颈癌中的表达及临床意义

【目的】探讨癌基因C-erbB-2在子宫颈癌中的表达及与临床病理因素之间的关系。【方法】采用免疫组织化学法检测60例宫颈鳞癌组织，20例宫颈良性肿瘤组织。15例正常宫颈组织中CerbB-2的表达。【结果】正常宫颈、宫颈良性肿瘤及宫颈鳞癌中C-erbB-2阳性表达率分别为0％，5％，51．66％；三组间差异有显著性（X^2-23．67，P〈0．01），在不同分化程度的宫颈鳞癌中，C-erbB-2的表达强度的差异均有显著性（Hc=10．2934；P=0．0058）．在不同临床分期的宫颈癌中．C-erbB-2的表达强度差异亦有显著性（Hc=9．2126；P-0．0266），在淋巴结有转移与淋巴结无转移组之间，C-erbB-2的表达强度差异均有显著性（P-0．0010）。【结论】①C-erbB-2的表达与宫颈鳞癌的发生发展有关。②检测CerbB-2可作为判定宫颈鳞癌恶性程度，评估其侵袭性及转移性的分子生物学指标。其对早期宫颈鳞癌的诊断及宫颈鳞癌的预后判定可能具有重要的参考价值。