肝硬化患者外周血B细胞和T细胞及其亚群的研究

目的　探讨了肝硬化患者外周血 B细胞和 T淋巴细胞及其亚群的变化。方法　应用单克隆技术测定了 33例肝硬化患者外周血 B细胞和 T淋巴细胞亚群的水平并以 30名正常健康人作比较。结果　肝硬化患者外周血B细胞数显著地高于正常人组 (P<0 .0 0 1 ) ,CD3、CD4 、CD4 / CD8显著地低于正常人 (P<0 .0 1 )。结论　肝硬化患者是一种自身免疫调节异常的疾病     

肿瘤细胞裂解物抗小鼠B16F10黑色素瘤的作用研究

反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407～426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B16F10-DT-M2-OK432(BDTMOK),探讨其能否抑制小鼠B16黑色素瘤,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的BDTMOK免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗B16肿瘤细胞裂解物(B16 tumor cell lysate,B16TCL)类抗体。淋巴细胞增殖实验的结果显示,BDTMOK的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防结合治疗性实验的结果显示,BDTMOK激发的免疫应答对于B16肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,皮下注射BDTMOK可以延长皮下移植瘤发生的潜伏期(P<0.05),并且平均瘤重显著降低(P<0.05);抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01)。疫苗BDTMOK能有效的抑制小鼠B16黑色素瘤的生长。     

慢性乙型病毒性肝炎中Bcl-2及Bax的表达与T、B淋巴细胞数量变化的关系

目的:研究Bcl-2及Bax在慢性乙型病毒性肝炎(简称慢乙肝)患者肝组织中淋巴细胞的表达与T、B淋巴细胞数量变化的关系.方法:用免疫组织化学的方法,检测57例慢乙肝患者肝脏活检组织和20例肝血管瘤患者外科手术切除标本正常肝组织淋巴细胞中Bcl-2,Bax的分布及数量的变化,并同时进行CD3和CD20免疫组织化学染色,计算T和B淋巴细胞数量变化与表达Bcl-2、Bax的淋巴细胞数量变化的关系.阳性细胞的计数和分析数据均使用病理图像分析仪获得.结果:随着肝炎炎症活动度和纤维化程度的增加,慢乙肝患者肝组织中表达Bcl-2、Bax的淋巴细胞数量增加,同时T、B淋巴细胞数量也增多,均明显多于正常肝组织(P＜0.01).结论:Bcl-2、Bax在慢乙肝患者肝组织淋巴细胞中的表达与T、B淋巴细胞数量的变化有关,并影响慢乙肝患者炎症活动度和纤维化程度的进展.     

三种黑素瘤动物模型的建立

目的：建立黑素瘤动物模型，用于抗黑素瘤药物的疗效评价。方法：分别通过皮下、静脉和腹腔注射方式，将B16F10黑素瘤细胞接种于小鼠体内，建立3种黑素瘤及其肺转移小鼠模型，并以达卡巴嗪作为试药，考察其对这3种模型小鼠的作用。结果：成功建立了小鼠皮下、肺转移及腹腔黑素瘤模型。达卡巴嗪对3种模型均有明显的治疗作用。结论：这3种黑素瘤动物模型可综合用于新药的临床前评价。     

老年原发免疫性血小板减少症患者治疗前后T淋巴细胞亚群的临床研究

目的 检测老年原发免疫性血小板减少症(ITP)患者治疗前后T淋巴细胞亚群的动态变化, 探讨其在ITP发生发展中的作用。方法 采用流式细胞术测定ITP患者治疗前后及正常对照组外周血T淋巴细胞亚群的水平。结果 ITP患者治疗前后T淋巴细胞绝对值、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺CD25⁺T淋巴细胞比例及CD4⁺/CD8⁺比值分别为(0.83±0.16)vs(1.74±0.36)、(71.71±1.07)% vs(72.69±1.35)%、(41.78±0.71)% vs(42.46±1.20)%、(29.67±0.97)% vs(28.56±1.75)%、(8.76±0.56)% vs(9.39±1.26)%、(1.42±0.07)vs(1.49±0.13), CD8⁺T淋巴细胞比例治疗后显著降低, 其余均显著升高, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 T淋巴细胞亚群的异常改变, 破坏自身免疫, 与病情相关, 可指导临床治疗, 并作为评估预后的参考指标。     

胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响

目的:研究胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响.方法:采用小鼠B16/F10黑色素瘤人工肺转移模型研究胡桃醌对肿瘤细胞血道转移的作用.结果:与溶剂对照组相比,4.5、3、1.5和0.75 mg/kg胡桃醌组显著减少小鼠黑色素瘤B16F10血道转移(P＜0.05),其抑制率分别为27.30％、55.35％、31.52％和25.34％;3 mg/kg胡桃醌与阳性对照组相比,抑瘤率无统计学差异(P＞0.05).结论:胡桃醌可抑制小鼠黑色素瘤B16F10血道转移.     

大剂量静脉注射免疫球蛋白对新生儿肺炎患儿T、 B细胞功能的抑制作用

目的 观察两种剂量静脉注射免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)对新生儿肺炎患儿的疗效及其免疫抑制作用,为IVIG在新生儿肺炎的应用提供依据.方法 随机选取41例新生儿肺炎患儿,分为对照组,500~700mg/kg IVIG组及1000~1200mg/kg IVIG组,后两组分别于病程之l~4天接受IVIG治疗,其余治疗方法三组同.观察疗效并检测治疗前后患儿血清IgG、IgA、IgM、IgG亚类,T、B细胞增殖反应,外周血单个核细胞产生IgG亚类、IL-2、IL-4及IL-6能力.结果 两种剂量IVIG组患儿临床恢复情况与对照组相比无显著差异.与对照组比较,大剂量IVIG组治疗后血清IgG及IgG亚类水平明显升高,但其T、B细胞增殖反应、PBMC产生IL-2及IgG1、IgGZ2、IgG3水平明显下降.对照组治疗前后各指标均无明显变化.结论 IVIG对新生儿肺炎似无明显疗效,大剂量使用IVIG可能因其至少短期内具有抑制T、B细胞功能作用而加重新生儿期暂时免疫缺陷,故建议应据新生儿的免疫系统功能状态针对性选用IVIG.     

羟喜树碱对黑素瘤B16F10细胞侵袭和凋亡的影响及作用机制

目的:观察羟喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对黑素瘤B16F10细胞侵袭能力以及凋亡相关蛋白p53和Bcl-2表达的影响,并探讨其抑制黑素瘤细胞的作用机制.方法:分别用5、10、20、50μmol/L的HCPT处理B16F10细胞24 h及48 h,采用Transwell实验评价细胞的侵袭能力...     

B,T淋巴细胞免疫表型染色分析

应用免疫组化方法探讨Ｂ，Ｔ淋巴细胞免疫表型染色的特异性和交叉反应性，发现Ｂ细胞表型标志的ＣＤ２０和ＣＤ７４细胞对非何杰金氏淋巴瘤染色阳性率达８８．２％～１００％，但ＣＤ７４特异性不强，而ＣＤ２０表现出高度的特异性，交叉反应性为０％，Ｔ细胞表型标志的ＣＤ４５ＲＯ，ＣＤ４３和ＣＤ３对Ｔ细胞非何杰金氏淋巴瘤染色阳性率达８５．７％～１００％，但ＣＤ４５ＲＯ和ＣＤ４３特异性不强，而多克隆性的ＣＤ３仅与５．９     

急性肾炎患儿治疗前后B细胞和T细胞亚群的检测

目的　探讨急性肾炎患儿治疗前后外周血 B细胞和 T细胞亚群含量。方法　应用单克隆抗体技术测定 30例小儿急性肾炎外周血 B细胞和 T细胞亚群 ,并以 35名健康人作对照。结果　急性肾炎患儿外周血 B细胞数显著地高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,CD3、CD4、CD4/CD8显著地低于正常人对照组 (P<0 .0 1或 P<0 .0 0 1)。结论　急性肾炎患儿为一种自身免疫调节异常的疾病。     

痛风性关节炎与外周血T淋巴细胞关系的研究

目的 分析痛风性关节炎(GA)与外周血T淋巴细胞的关系.方法 选取101例痛风性关节炎患者作为痛风性关节炎组,另选取101例健康志愿者作为健康对照组.采用流式细胞学测定两组血清外周血T淋巴细胞辅助性T细胞17(Th17)及调节性T细胞(Treg).比较两组尿酸、肌酐、低密度脂蛋白胆固醇水平及体质量指数,外周血Th17、...     

慢性HBV感染者外周血淋巴细胞亚群的特征性研究

目的 分析慢性HBV感染者外周血T细胞亚群的特征及病程不同阶段的变化及意义.方法 采用流式细胞分析技术对75例慢性HBV感染者的外周血T细胞亚群进行检测,分析其差异及意义并与正常对照组相比较.结果 乙肝肝硬化患者的外周血白细胞及淋巴细胞绝对数低于慢性乙肝患者、携带者及正常对照组:与正常对照组比较,慢性乙肝、肝硬化患者的外周血CD4 T细胞、CD8 T细胞、NK细胞计数减少,并且随病情的进展逐渐降低.结论 HBV感染者体内存在T淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱.外周血T淋巴细胞亚群随病情进展而减少,主要为CD4 T细胞、CD8 T细胞、NK细胞的减少.     

Deferiprone modulates in vitro responses by peripheral blood T cells from control and relapsing-remitting multiple sclerosis subjects

T cells are important mediators of autoimmune inflammation in relapsing–remitting multiple sclerosis (RRMS). Previous studies found that deferiprone, an iron chelator, suppressed disease activity in a mouse model of multiple sclerosis, and inhibition of T cell proliferation was implicated as a putative mechanism. The objective of the present study was to examine the effects of deferiprone on suppressing in vitro responses of T cells from control and RRMS subjects. Peripheral blood T cells were co-stimulated with anti-CD3+anti-CD28 and cultured with or without interleukin 2 (IL-2). Proliferating CD4+ T cells from control and RRMS subjects, cultured with or without IL-2, decreased in response to 75 μM deferiprone, although the extent of decreased proliferation of CD4+ T cells from RRMS subjects was less than for control subjects. Proliferating CD8+ T cells from control subjects, cultured with or without IL-2, also decreased in response to 75 μM deferiprone, and this decrease was seen in proliferating CD8+ T cells from RRMS cultured with IL-2. CD4+CD25+ and CD8+CD25+ cells from control subjects, cultured with or without IL-2, declined in 75 μM deferiprone, but the decrease was smaller than for the CD4+ and CD8+ proliferative responses. CD4+CD25+ and CD8+CD25+ cells from RRMS subjects showed more variability than for control subjects, but CD4+CD25+ cultured with IL-2 and CD8+CD25+ cells cultured without IL-2 significantly declined in 75 μM deferiprone. CD4+FoxP3+ and CD4+CD25+FoxP3+ cells tended to remain constant or increase. In summary, deferiprone induced declines in proliferative responses at a dosage that is within peak serum pharmacological concentrations.     

化疗后T细胞亚群变化与乙型肝炎病毒再激活关系研究

目的 了解患者化疗后出现乙型肝炎病毒再激活时T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD8＋变化情况.方法 采用流式细胞术检测接受化疗的32例发生乙型肝炎病毒再激活和25例未发生乙型肝炎病毒再激活化疗前后外周血T细胞亚群.结果 化疗后CD3＋T细胞、CD4＋ T细胞百分比以及CD4＋/CD8＋较化疗前明显降低（P＜0.05）,CD8＋T细胞百分比较化疗前无明显变化（P＞0.05）.结论 化疗能对T细胞数量及比例产生明显的影响,抑制细胞免疫功能是导致乙型肝炎病毒再激活的原因之一.     

共刺激分子B7-CD28/CD152在过敏性哮喘中的作用

目的　观察 5 0例过敏性哮喘患者不同时期共刺激分子CD2 8、CD15 2 (CTLA4)、CD80(B7 1)、CD86 (B7 2 )和外周血T淋巴细胞及其亚群CD3+ 、CD4+ 、CD8+ 、CD4+ /CD8+ 、CD2 1、CD2 5、HLA DR等变化 ,探讨这些分子在哮喘发病中的意义。方法　采用间、直接荧光标记流式细胞仪测定上述分子表达。结果　共刺激分子CD80、CD86在过敏性哮喘急性发作期明显上调 (P <0 0 5 ) ,CD2 8虽有升高趋势 ,但与健康对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;而CD15 2在哮喘急性发作期、缓解期均无变化。急性发作期、缓解期过敏性哮喘病人外周血CD3+ 、CD4+ 、CD8+ 、CD4+ /CD8+ 等T细胞亚群与对照组相比差异无显著性 ,但T细胞活化标记物HLA DR明显升高 (P <0 0 5 )。结论　共刺激分子B7 CD2 8/CD15 2可能参与了过敏性哮喘的发病过程 ;过敏性哮喘患者外周血T细胞及其亚群虽无比例失调但存在功能紊乱。     

三氧化二砷诱导黑色素瘤B16细胞凋亡机制

目的 观察三氧化二砷（As2O3）对黑色素瘤B16细胞（B16细胞）的作用,探讨As2O3抗肿瘤的机制。方法 Hoechst33258染色观察细胞凋亡特征;应用激光扫描共聚焦显微术（LSCM）,结合特异性荧光探针Fluo-3／AM、H2EXEF-DA和DAF-FMDA,观察Asz03引起瘤细胞内钙离子（Ca^2＋）、活性氧（ROS）和一氧化氮（NO）的变化。结果 50μmol／L As2O3作用细胞12h后,Hoechst33258核染色可见典型凋亡细胞;细胞内Ca^2＋、ROS和NO含量明显高于对照组（P〈0．01）。结论 As2O3可诱导B16细胞发生凋亡,As2O3诱导凋亡可能与细胞内Ca^2＋、ROS和NO的增加有关。     

Aflatoxin B1 modulates the expression of phenotypic markers and cytokines by splenic lymphocytes of male F344 rats

Aflatoxin B₁ (AFB₁) is immunotoxic to animals and a suspected immunosuppressant in humans. In this study, we investigated the effects of AFB₁ on splenic lymphocyte phenotypes and the inflammatory cytokine expression in male F344 rats. Exposure of animals to AFB₁ [5–75 µg kg^–1 body weight (BW)] for 1 week showed dose‐dependent decreases in the percentage of splenic CD8⁺ T cells and CD3^‐CD8a⁺ NK cells. A general inhibition of the expression of interleukin (IL)‐4 and interferon (IFN)‐γ by CD4⁺ T cells, IL‐4 and IFN‐γ by CD8a⁺ cells, and tumor necrosis factor (TNF)‐α expression by natural killer (NK) cells was also found; however, no concurrent histological changes in spleen tissue were present, suggesting acute immunosuppression without overt toxicity. Five‐week exposure with AFB₁ significantly increased the percentages of CD3⁺ and CD8⁺ T cells, especially at low doses (≤ 25 µg kg^–1). AFB₁ treatment significantly decreased the anti‐inflammatory cytokine IL‐4 expression by CD4⁺ T cells and significantly increased the pro‐inflammatory cytokine IFN‐γ expression by CD4⁺ T cells and TNF‐α expression by NK cells. These results indicated that repeated AFB₁ exposure promotes inflammatory responses by regulating cytokine expression. Our data provides novel insights into the mechanisms by which AFB₁ exposure differentially modulates the cell‐mediated immune responses and suggests the involvement of an inflammatory response upon repeated exposure. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

测定慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的临床意义

目的研究T淋巴细胞亚群在慢性乙型肝炎患者外周血中的变化及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测70例慢性乙型肝炎、10例乙肝肝硬化患者及30例健康人的外周血T淋巴细胞亚群,并进行统计分析。结果与对照组相比较,慢性乙型肝炎组及乙肝肝硬化组的CD4 、CD4 /CD8 有非常显著性下降(P<0.01),CD3 、CD8 、CD56 的变化不明显(P>0.05)。结论慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱,且与疾病的进展有一定关系。     

不同亚型乙型病毒性肝炎患者T细胞亚群调查研究

目的 研究不同亚型乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法选择40例慢性活动性乙型肝炎、30例病毒携带者、30例乙型肝炎肝硬化、20例急性乙型肝炎患者和30例健康对照者，采用流式细胞仪检测各组外周血T淋巴细胞亚群的改变。结果与正常对照组比较，慢性活动性肝炎、肝炎肝硬变患者外周血CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋比值均有显著性下降（P〈0.01），以肝炎肝硬变下降最显著，慢性病毒携带者肝炎、急性乙型肝炎外周血T细胞亚群数量和比值变化不明显（P〉0．05）。HBV DNA病毒载量与患者外周血CD4 T细胞数量无相关性（P〉0．05）。结论慢性活动性乙型肝炎和肝硬化患者的细胞免疫功能降低，其下降程度与病毒复制水平无相关性。     

Evaluation of anti-metastatic potential of Cisplatin polymeric nanocarriers on B16F10 melanoma cells

Nanoparticles are being increasingly used in the field of cancer treatment due to their unique properties and advantages. The aim of the present research work was to prepare and characterize a polymeric albumin nanosystem for Cisplatin and evaluate its in-vitro efficacy against B16F10 melanoma. The developed nanoparticles were almost spherical in shape with a particle size in the range of 150–300 nm, low polydispersity values and about 80% drug entrapment efficiency. Albumin nanocarriers sustained the release of Cisplatin for more than 48 h, suggesting the reduction in dosing schedule for this drug. The results from in-vitro cell line studies indicated the dose dependent cytotoxic potential of drug loaded albumin nanoparticles, their potential to inhibit cell proliferation and induce morphological changes. In addition, these nanoparticles exhibited superiority to Cisplatin in hampering the cell migration. Developed nanoparticles caused cell cycle arrest along with time and concentration dependent cellular uptake in B16F10 cell line. These results signify that the prepared Cisplatin albumin nanoparticles could serve as a promising approach for B16F10 melanoma treatment.