白细胞介素—10与器官移植

白细胞介素－10（IL－10）是近年发现的细胞因子网络中为数不多的抑制性细胞因子,主要由TH2细胞产生,能够抑制IL－2,IL－1。,IFN－γ,TNF－α等多种细胞因子的合成及活性,越来越多的证据表明器官移植后产生免疫耐受出现IL－10的高表达,而移植后发生排异反应时则表现为IL－10的低表达,移植后应用IL－10或将IL－10基因转染移植物能够延长移植物的存活。     

白细胞介素-2单克隆抗体对急性排斥反应中细胞因子表达的影响

目的　观察白细胞介素 2单克隆抗体 (IL 2Mab)对同种大鼠心脏移植物存活时间及局部细胞因子网络的影响。方法　分A组 (对照组 ) ,B组 (IL 2Mab组 )。每组 12只。分别静脉给予生理盐水及抗白细胞介素 2单克隆抗体 (A3 8 3 ) ,采用改良的移植术式建立移植模型。常规监测排斥反应发生情况。每组 5只用于观察移植物存活时间 ,7只用于动态切取标本。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)的方法检测移植物局部细胞因子如IL 1β、IL 2、CD2 5、IL 4、IL 5、IL 6、IL 10、肿瘤坏死因子 (TNF) α、干扰素 (IFN ) γ的表达水平。结果　IL 2Mab组移植心存活时间( 2 6.4± 5 .7)d显著长于对照组 ( 8.3± 1.7)d ,实验组IL 1β、IL 5、IL 6、IL 10、IFN γ的表达较强于对照组 ,而IL 2、CD2 5、IL 4、TNF α的表达反之。结论　IL 2Mab能够显著的延长移植物生存时间 ,但对细胞因子表达模式的偏离产生的预期效果并不理想 ,其可能的机制在于细胞因子网络的复杂性。     

细胞因子对异种脱细胞真皮基质免疫调节作用的临床研究

目的　探讨烧伤患者接受异种 /异体脱细胞真皮基质 (xeno /allo ADM )移植后全身和局部多种细胞因子与移植物近期转归的关系。　方法　在大面积烧伤患者的四肢切痂创面上 ,移植xeno ADM (12例 ,19块 )或allo ADM(15例 ,18块 ) ,其上覆盖自体超薄断层皮片 ,并以 6例单纯移植自体中厚断层皮片 (auto TTS)的烧伤患者为对照。移植物成活后 4～ 8周 ,收集局部组织标本、血清和xeno ADM排斥后的创面渗出液 ,采用免疫组织化学染色与酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测白细胞介素 (IL) 1β、IL 4、IL 6、肿瘤坏死因子α(TNF α)和γ型干扰素 (IFN γ)的含量。　结果　免疫组织化学染色结果显示 ,移植物内IL 1β、IL 4、IL 6、TNF α和IFN γ的阳性细胞密度或着色强度相比较 ,xeno ADM >allo ADM >auto TTS (P <0 .0 5 )。ELISA检测结果显示 ,xeno ADM被排斥后创面渗出液中IL 4、IL 6、TNF α和IFN γ水平明显高于自体血清 ,但其血清IL 4与IFN γ水平分别低于和高于未排斥时。xeno ADM移植后血清中IL 4、IFN γ水平明显高于allo ADM和auto TTS(P <0 .0 5～ 0 .0 1)。　结论　xeno ADM移植后可在局部检测到高水平的IL 1β、IL 4、IL 6、IFN γ ,可能与细胞杀伤和细胞因子介导的免疫放大作用有关。这些细胞因子的动态变     

骨髓细胞移植入心肌梗死区对细胞因子分泌的影响

目的　研究骨髓细胞移植入心肌梗死区对细胞因子bFGF、IGF 1、TGF β1、IL 1β、和IL 8分泌的影响。方法　移植组将骨髓细胞经局部注射移植入心肌梗死区域 ,对照组予以注射相同剂量的PBS液。 1、2、4、8周后取心肌标本 ,应用免疫组织化学方法及放射免疫测定法检测心肌梗死区血管密度及细胞因子表达或含量。结果　骨髓细胞移植 1、2、4、8周后 ,梗死区血管密度高于对照组 ,且随移植后观察时间的延长 ,血管密度逐渐增加 ;同时 ,移植组梗死局部注射区间质细胞bFGF、TGF β1表达明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,梗死区心肌细胞TGF β1表达明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;移植组梗死区心肌IGF 1、IL 1β含量明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;IL 8含量也明显高于对照组 (P <0 .0 5)。结论　骨髓细胞移植入梗死心肌 ,可通过分泌细胞因子bFGF、IGF 1、TGF β1、IL 1β、和IL 8对梗死心肌起到积极作用     

肝肠联合移植对小肠移植物免疫保护作用的实验研究

目的研究肝肠联合移植中肝脏对小肠移植物的免疫保护作用。方法建立大鼠肝肠联合移植、单独小肠移植及单独肝移植模型 ,每组取 12只受体大鼠观察生存期 ,另取 6只大鼠分别于移植术后 5、7、14d收集小肠及肝脏移植物 ,进行组织病理学研究并利用半定量RT PCR方法检测移植物中IL 2、IL 4、穿孔素以及颗粒酶B的mRNA表达。结果联合移植组受体生存时间 (2 7 83±4 4 7)d较小肠移植组 (11 5 8± 3 2 6 )d明显延长 (t=7 19,P <0 0 1) ,与肝移植组 (2 8 92± 2 39)d相比 ,差异无显著性 (t=0 75 ,P >0 0 5 )。联合移植组小肠移植物排斥反应较小肠移植组明显减轻 ,穿孔素及颗粒酶B表达水平降低。结论肝 /肠联合移植可以为小肠移植物提供免疫保护。     

睾丸支持细胞与共刺激通路阻断剂对异体移植肾细胞的保护作用

目的　研究表达Fas配体 (FasL)的睾丸支持细胞与共刺激通路阻断剂细胞毒性T细胞相关抗原 4免疫球蛋白 (CTLA 4Ig)对异体移植肾细胞的保护作用 ,以提高移植肾的免疫耐受性。方法　酶消化法制备睾丸支持细胞及肾细胞。取 10 6个细胞混合移植于大鼠肾包膜下 ,实验大鼠分为 3组 :对照组 (10只 )、混合细胞移植组 (混合移植组 ,16只 )、联合CTLA 4Ig组 (CTLA组 ,10只 )。分别于术后 1、7、14、2 0d检测血清白细胞介素 2 (IL 2 )水平变化。术后 2 0d取出移植物 ,以亲和素 生物素 过氧化物酶复合物技术观察肾细胞存活状况 ;MD 2 0图像分析系统测定混合移植物灰度值 ;末端脱氧核糖核酸转移酶介导的X dUTP缺口末端标记 (TUNEL)法观察移植物中凋亡的细胞。　结果对照组无移植物存活 ;混合移植组 14只移植物存活 ,灰度值为 0 36 2± 0 0 17;CTLA组 10只移植物均存活 ,灰度值为 0 4 4 5± 0 0 2 1;混合移植组与CTLA组间灰度值差异有显著意义。术后CTLA组血清IL 2水平较混合移植组低 ,差异有显著意义 ;混合移植物中可见凋亡的淋巴细胞。　结论　异体肾细胞移植中 ,睾丸支持细胞与CTLA 4Ig对移植肾细胞具有协同保护作用。     

自异体皮混合移植成活机制中角质形成细胞及细胞因子作用的实验研究

目的　观察细胞因子及角质形成细胞在自异体皮混合移植成活机制中的作用。　方法建立自异体皮混合移植大鼠模型和人体表皮细胞 淋巴细胞混合培养 (MELC)模型 ,检测大鼠移植术后血清及创面局部组织标本培养上清液中白细胞介素 (IL)1 0的水平 ,观察体外表皮细胞在诱导免疫抑制中的作用。　结果　术后 7d,移植大鼠血清IL 1 0含量为 (2 5 .89± 2 .82 )ng/L,明显高于正常大鼠的 (1 4 .2 0± 2 .4 3)ng/L(P <0.0 5 )。术后 4～ 1 4d,大鼠组织标本培养上清液中IL 1 0含量显著不同(P <0.0 5或 0 .0 1 ) ;术后 2 1、2 8d与正常大鼠比较 ,差异无显著性意义 (P >0.0 5 )。自体表皮细胞、角质形成细胞在MELC体系中的抑制作用与其剂量相关。自体角质形成细胞加入到MELC中 ,辅助性T淋巴细胞 (Th)1分泌的细胞因子谱主要通过IL 1 0介导而抑制Th2细胞因子谱的分泌 ;当加入抗IL 1 0单克隆抗体后该抑制作用消失。　结论　自异体皮混合移植后 ,嵌入自体皮片中的角质形成细胞通过激活Th2使局部IL 1 0水平升高 ,这可能是移植成活的重要原因之一。     

中药狼疮方对狼疮样小鼠外周血IL-6和IL-10水平的影响

目的 :探讨狼疮样小鼠外周血IL - 6和IL - 10水平及中药狼疮方对其影响。方法 :采用慢性移植物抗宿主病小鼠模型 ,经中药狼疮方、强的松及联合治疗后分别检测血清抗ds -DNA抗体、和IL - 6、IL - 10水平。结果 :( 1)模型组血清抗ds -DNA抗体为 1.75± 0 .2 5 ,与对照组比较差异显著 ( 1.2 0± 0 .2 1,P <0 0 0 1) ;各治疗组血清抗ds-DNA抗体与对照组比较差异不显著 (P >0 0 5 )。 ( 2 )模型组狼疮样小鼠血清Th2 细胞因子IL - 6和IL - 10水平明显高于对照组及各治疗组 ,差异显著 (P <0 0 5 )。结论 :狼疮方具有免疫抑制作用 ,可抑制T和B细胞活化、减少Th2细胞因子的形成、自身抗体产生 ,有效的治疗狼疮性肾炎。     

同种异体大鼠气管腹腔移植后闭塞性细支气管炎发生机制探讨

目的建立肺移植后闭塞性细支气管炎动物模型,对其发病机制进行初步探讨。方法新鲜SD大鼠气管（每段5环）异位移植到SD大鼠（Ⅰ组）和Wistar大鼠（Ⅱ、Ⅲ组）腹腔并用大网膜包裹,Ⅰ、Ⅱ组不接受环孢菌素A（CsA）,Ⅲ组全程接受CsA10mg·kg^-1·d^-1。分别在3、14、28d后取出移植气管检测形态学改变和Th1（IL-2、IFN-γ）／Th2（IL-4、IL-10）细胞因子表达,并观察CsA对上述指标的影响。结果术后3d时3组气管形态学变化差异无统计学意义（P〉0．05）。14d时Ⅰ组气管形态基本恢复;Ⅱ、Ⅲ组上皮细胞几乎全部缺失,差异无统计学意义（P〉0．05）,与Ⅰ组区别明显（P〈0．01）;Ⅱ组管腔阻塞（28．5±5．0）％,淋巴细胞密集浸润,Ⅲ组阻塞（19．4±2．9）％,较多淋巴细胞分布,3组差异有统计学意义（P〈0．01）。28d时Ⅰ组形态正常,Ⅱ组管腔阻塞（94．8±3．6）％,浸润淋巴细胞有所减少,Ⅲ组阻塞（36．6±7．6）％,淋巴细胞分布减少,3组差异有统计学意义（P〈0．01）。Ⅱ组Th1／Th2细胞因子表达比Ⅰ组明显升高。与Ⅰ组相比,Ⅱ组Th1细胞因子表达比Th2细胞因子升高更为显著。Ⅲ组IL-2表达比Ⅱ组明显减少,但2组IFN-γ、IL-4、IL-10表达差异没有统计学意义。结论同种异体移植物在上皮细胞损害、纤维性细胞增生以及淋巴细胞浸润等方面较同系移植物有明显变化。Th1／Th2促进了同种异体大鼠异位移植气管闭塞性细支气管炎（OB）的发生,其细胞因子可能介入了OB的发病机制。CsA减少管腔阻塞和淋巴细胞浸润,但对于移植物上皮没有明显保护作用。CsA抑制IL-2基因转录,在一定程度上减少了OB病理性损害。     

白细胞介素12在皮肤移植局部的mRNA表达

目的　探讨白细胞介素 - 12 (IL - 12 )在皮肤移植局部组织中的免疫调节作用。　方法　应用大鼠皮肤混合移植、异体移植、自体移植模型 ,观察不同时相移植皮肤局部组织细胞中IL -12亚单位 (P35、P40 )的mRNA表达。　结果　在IL - 12 (P35 )mRNA表达中 ,异体移植和自体移植组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;混合移植组除第 14天外 ,其余各时间点差异有显著性意义(P<0 .0 5 ) ;混合和自体移植组相比较 ,在第 4、7、14、2 1天 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。在IL -12 (P40 )mRNA表达中 ,异体和自体移植组相比 ,2 1d前差异明显 (P <0 .0 5 ) ;异体移植和混合移植组相比 ,仅第 4天差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;混合和自体移植组相比较第 7、14、2 1天差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。在异体、混合移植的排异反应过程中 ,IL - 12mRNA表达规律与临床观察及病理动态检测结果相一致。　结论　IL - 12参与了炎症反应 ,并在T辅助细胞向I型T辅助细胞转化 ,介导细胞免疫过程中发挥重要作用。混合移植中可能存在着由Ⅱ型T辅助细胞类细胞因子介导的免疫抑制现象。     

转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞瘤苗体外诱导抗肿瘤免疫应答的研究

目的　研究转 4 1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗体外诱导淋巴细胞特异性杀伤活性及刺激同系小鼠脾细胞产生细胞因子 (IL 2、TNF α和GM CSF)的能力。方法　采用脂质体介导法将真核表达质粒 pCDNA3 1( ) m4 1BBL导入小鼠肝癌细胞Hepa1 6 ,经G4 18筛选后获得稳定高表达克隆 ,以丝裂霉素C(MMC)处理后 ,制成肿瘤细胞疫苗 (TCV) ,经体外与同系小鼠脾淋巴细胞共同培养后 ,测定淋巴细胞特异性杀伤活性及对脾细胞产生细胞因子 (IL 2、TNF α和GM CSF)的影响。结果转染 4 1BBL的Hepa1 6细胞能够高表达 4 1BBL蛋白 ,并且经MMC处理后制成的瘤苗在培养 4 8h仍能表达m4 1BBL。与野生型的Hepa1 6细胞相比 ,上述瘤苗能诱导淋巴细胞产生针对亲本的小鼠肝癌细胞Hepa1 6的特异性杀伤作用 (P <0 0 5 ) ,但是对于小鼠肝癌细胞H2 2及成纤维细胞NIH3T3无效 ;此瘤苗在体外能显著增强脾细胞分泌细胞因子IL 2、TNF α和GM CSF的能力。结论　转 4 1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗能诱导有效的抗肝癌免疫反应。     

免疫缺陷树突状细胞诱导异种胰岛细胞移植耐受

目的　研究受体来源免疫缺陷树突状细胞(dendriticcell, DC)诱导异种胰岛细胞移植的免疫耐受作用及其机制。方法　从BALB/C小鼠骨髓干细胞诱导分化免疫缺陷DC,负载Wistar大鼠MHC抗原。将上述DC通过尾静脉回输糖尿病小鼠体内(预处理组), 7d后分别将Wistar或SD大鼠胰岛细胞移植于受体鼠肾包膜下。观察移植物存活时间,检测T细胞增殖及TH1 /TH2细胞因子的表达。结果　与对照组相比,预处理组胰岛细胞存活时间明显延长(P < 0. 0 5 ),而以SD大鼠胰岛细胞作为供体的移植物存活时间无明显改变。免疫缺陷DC预处理受体鼠T细胞增殖反应微弱,且TH1 /TH2细胞因子表达明显下降。结论　负载异种MHC抗原的免疫缺陷型DC预处理受体可诱导抗原特异性T细胞无能,以及TH1 /TH2细胞因子的低表达,从而有效地延长异种胰岛细胞存活时间。     

体外转染可溶性IL-1RI-Ig基因延长糖尿病小鼠移植胰岛细胞存活时间

目的 探讨糖尿病小鼠移植经可溶性白细胞介素1(IL-1)受体胞外段Fc融合蛋白(sIL-1RI-Ig)基因修饰的胰岛细胞对延长移植物存活时间的作用及机制.方法 将Ad-sIL-1RI-Ig体外转染Balb/c小鼠的胰岛细胞,并将其移植给糖尿病C57BL/6小鼠,观察移植物的存活时间,并检测移植局部组织炎症细胞的浸润以及炎症细胞因子的表达.结果 糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后,血糖水平很快下降至正常范围,胰岛移植物存活时间达(39±3)d,而移植正常胰岛细胞的小鼠胰岛移植物存活时间为(9±2)d(P<0.01).糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后,胰岛素分泌量随糖负荷增加而升高,并与胰岛素分泌功能正常的小鼠呈相似变化趋势(P>0.05).糖尿病小鼠移植转染sIL-1RI-Ig基因的胰岛细胞后,移植局部组织表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)和RANTES等水平明显下调;病理学观察发现移植局部组织浸润的炎症细胞明显少于移植正常胰岛细胞的小鼠.结论 sIL-1RI-Ig基因转染胰岛细胞后,可通过表达sIL-1RI-Ig,阻断IL-1的作用,降低TNF-α、IFN-γ、RANTES等细胞因子的表达,从而减轻排斥反应,延长胰岛细胞移植物的存活时间和提高胰岛素分泌功能.     

抑制炎症的细胞因子与肾小球肾炎的关系

在肾小球肾炎发病机理研究中 ,细胞因子网络调节作用在肾小球肾炎发生发展及肾小球硬化中发挥重要作用。致炎性与抗炎性细胞因子相互作用维持机体免疫系统的平衡。IL 1及TNF是由炎症细胞产生的主要前炎症细胞因子。主要由Th2细胞分泌的抗炎性细胞因子如IL 4、IL 1 0、IL 1 3也能被用于抑制IL 1及TNF合成和增加其拮抗剂产生。抗炎性细胞因子 ,主要是IL 4、IL 1 0、IL 1 3、IL 6与肾脏炎症疾病关系研究亦有一定进展。     

移植物局部Th1和Th2型细胞因子在猪胰肾联合移植门脉和体静脉回流术式的表达及其意义

目的 探讨Th1和Th2型细胞因子在猪胰肾联合移植门脉(PVD)和体静脉(SVD)回流术式移植物局部表达及意义.方法 58例四川当地杂交第1代长白猪,分成假手术组(10例)、PE组(24例)和SE组(24例).假手术组行开腹术,PE组和SE组切除受者胰腺制成Ⅰ型糖尿病模型,并切除右肾.PE组门静脉与受者肠系膜上静脉吻合,SE组门静脉与受者肝下下腔静脉吻合,外分泌均采用肠道引流.术后第3、7天开腹取移植胰腺、肾脏组织,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和ELISA检测移植物局部Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子白细胞介素(IL)-4mRNA及蛋白的表达.结果 术后第3、7天,与对照组比较,移植肾和胰腺IFN-γ mRNA及蛋白在SE组和PE组均呈高表达(P<0.05),SE组高于PE组(P<0.05)(第7天,蛋白在对照组比SE组比PE组表达:移植胰腺,[(3.36±0.25)比(7.72±0.67)比(6.52±0.34)pg/mg蛋白],移植肾[(3.66±0.28)比(10.83±1.48)比(7.79±0.60)pg/mg蛋白].移植胰腺和肾IL-4 mRNA及蛋白在SE组和假手术组呈低表达,PE组呈高表达(P<0.05)(第7天,蛋白在对照组比SE组比PE组表达:移植胰腺,[(7.18±0.16)比(6.10±0.16)比(20.66±1.47)pg/mg蛋白];移植肾,[(5.74±0.48)比(10.38±0.92)比(19.66±1.57)pg/mg蛋白].结论 胰肾联合移植PVD术式移植物血流经过肝脏后可诱导,Th1细胞向Th2细胞偏离,是PVD免疫学优越性的可能机制.     

供体特异性T细胞疫苗延长协调性异种移植物存活时间的作用探讨

目的探讨T细胞疫苗(TCV)延长异种移植胎肠存活时间的作用及其机制.方法将大鼠→小鼠游离胎肠移植模型分为供体特异性TCV(WTCV)免疫组、无关异种抗原TCV(LTCV)免疫组和单纯移植组.观察移植物各时相点的存活率,并用原位杂交法检测移植物内细胞因子mRNA表达,及用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定单向混合淋巴细胞反应.结果WTCV和LTCV免疫组移植物各时相点的存活率均显著高于单纯移植组,WTCV免疫组又高于LTCV免疫组(P<0.01).WTCV组对混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制率高于LTCV组(P<0.01).WTCV免疫后,异种移植物内各细胞因子mRNA的表达均显著下调,其中以白介素-4(IL-4)mRNA表达下降最为显著(P<0.01).结论(1)供体特异性TCV能延长异种移植物存活时间,其作用具有抗原特异和非特异的双重性;(2)WTCV延长异种移植物存活时间的作用可能与诱导移植物免疫耐受以及移植物内Th2细胞功能下调有关.     

Th1/Th2细胞因子变化在大鼠肝移植免疫耐受中的作用

目的:研究大鼠肝移植术后移植肝和外周血中细胞因子的表达,并分析其在急性排异反应和耐受诱导中的作用。方法:Kamada法建立大鼠肝移植模型,并随机分为4组,每组8只。A组:同品系组;B组:免疫排异组;C组:B组+免疫抑制剂;D组:C组+骨髓输注。RT-PCR和ELISA技术分别检测移植肝和外周血中细胞因子IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10、TGF-β1的表达,并观察受体存活率。结果:在B组中Th1型细胞因子(IL-2、INF-γ)表达高于A、C和D组(P<0.05);而Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)和TGF-β1表达低于C和D组(P<0.05);细胞因子在C组与D组大鼠中的表达无统计学差异。A、C、D组大鼠术后近、远期存活率明显优于B组。结论:Th1型细胞因子(IL-2、INF-γ)参与肝移植急性排异反应的发生,Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)和TGF-β1可能参与移植物免疫耐受的诱导,延长移植物存活。     

供体特异性输血对大鼠胰十二指肠移植的保护作用

目的　探讨供体特异性输血 (DST)对大鼠胰十二指肠移植的保护作用和作用机制。方法　通过对施行胰十二指肠移植治疗糖尿病的大鼠进行DST ,观察大鼠胰腺移植过程中发生的病理生理变化 ,包括血糖、丙二醛 (MDA)含量及细胞因子表达的变化。结果　胰腺移植术后 2 4h ,糖尿病大鼠血糖恢复正常。与对照组相比 ,DST组的移植胰腺急性排斥反应程度较轻 ,MDA含量基本正常。DST组的移植胰腺 ,白细胞介素 (IL) 4、IL 5、肿瘤坏死因子 (TNF) α表达的增强不同程度受到抑制 ,而IL 6和干扰素 (IFN) γ的表达反而增强。结论　DST对移植胰腺具有保护作用 ,细胞因子表达的变化与此作用关系密切。     

白细胞介素-10选择性抑制钛颗粒激活的巨噬细胞活性研究

目的　本实验研究钛颗粒通过特定的信号传递通道激活巨噬细胞的转录因子核因子 IL 6(NF IL 6)、核因子 κB(NF κB)的表达 ,检测白细胞介素 (IL) 1β、 6和肿瘤坏死因子 (TNF) α水平 ,并采用细胞因子抑制剂IL 10处理巨噬细胞 ,观察其对巨噬细胞活性的抑制作用。方法　从健康人外周静脉血中分离单核 /巨噬细胞 ,进行体外培养。巨噬细胞处理用钛颗粒浓度为 0 .0 75 %(体积比 )。IL 10组先用IL 10 (2 0 μg/L)预处理巨噬细胞 10min ,后再加入钛颗粒。按不同时间段采集细胞培养液和巨噬细胞。培养液中细胞因子IL 6、IL 1β和TNF α采用ELISA方法检测。巨噬细胞经核酸抽提 ,采用EMSA方法检测NF IL 6和NF κB ,并经半定量分析。结果　未经钛颗粒刺激的巨噬细胞 ,48h内上清液中未能检测出上述细胞因子。钛颗粒刺激后 2h ,上清液中检测出IL 6,4h后可检测出IL 1β和TNF α。TNF α在 12h达到高峰 ,IL 6和IL 1β在 2 4h达到高峰 ,随后下降。IL 10在各时相抑制近一半IL 6的释放 (P <0 .0 5 ) ;IL 1β和TNF α也受到IL 10不同程度的抑制 ,但是差异并无显著性 (P >0 .0 5 )。经钛颗粒刺激后 1h ,EMSA方法即可检测出NF IL 6表达 ,并持续表达 5h。IL 10预处理的巨噬细胞 ,NF IL 6的表达量减少 (P <0 .0 5 )。巨噬细     

白细胞介素10基因转染抑制小鼠心脏移植排斥反应的实验研究

目的　探讨白细胞介素 1 0 (IL 1 0 )基因转染对小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用。方法　采用小鼠颈部心脏移植模型。随机将心脏移植后的小鼠分为 4组 :(1 )对照组 :心脏移植后每天用生理盐水 1ml灌胃 ;(2 )环孢素A(CsA)组 :心脏移植后每天用CsA 5mg/kg 灌胃 ;(3)IL 1 0组 :心脏移植时用IL 1 0重组腺病毒 30 0 μl(腺病毒滴度为 5× 1 0 1 1 pfu/ml)经主动脉根部灌注小鼠供心。(4)IL 1 0 CsA半剂量组 :在IL 1 0组的基础上 ,每天用CsA 2 .5mg/kg灌胃。观察移植心脏的存活时间及心脏跳动情况。结果　IL 1 0组、IL 1 0 CsA半剂量组和CsA组移植心脏存活时间均较对照组显著延长 (P <0 .0 1 ) ;IL 1 0组移植心脏存活时间较CsA组明显延长 (P <0 .0 5 ) ;IL 1 0 CsA半剂量组移植心脏存活时间最长 ,优于IL 1 0组 (P <0 .0 5 )和CsA组 (P <0 .0 1 )。结论　IL 1 0基因转染对心脏移植排斥反应有较强的免疫抑制作用 ,可明显延长移植心脏的存活时间 ,并且与CsA有协同作用 ,共同应用时 ,可减少CsA的用量。