基于拆方的蒙药地格达-4味汤配伍规律研究

目的:通过拆方的方法探讨蒙药"肋柱花-4味汤"配伍规律。方法:将蒙药"肋柱花-4味汤"拆成肋柱花、栀子、瞿麦和胡黄连等4个单味药,给急性肝损伤模型大鼠灌胃相应的药液后,在不同时间点取血,离心分离血清。以高效液相色谱(HPLC)法测定指标性成分獐牙菜苦苷、栀子苷、胡黄连苷Ⅱ含量;用分光光度法测定瞿麦总黄酮含量。根据四个单味药与地格达-4味汤的指标性成分含量变化,评价四个单味药在复方中"君、臣、佐、使"的关系。结果:肋柱花、栀子、瞿麦、和胡黄连组成方剂后,除了獐牙菜苦苷升高外其他三个成分均有降低趋势。结论:初步认为肋柱花为君药、栀子为臣药、胡黄连为臣药或佐药、瞿麦为使药。     

蒙药地格达-4味汤在D-GlaN致急性肝损伤大鼠血清移行成分的LC-MSDTrap分析

目的:分析蒙药地格达-4味汤在D-GlaN致急性肝损伤大鼠血清移行成分。方法:以地格达-4味汤水提物为示例药物、以D-GlaN致急性肝损伤大鼠为研究对象,应用液质联用仪和核磁共振仪对急性肝损伤大鼠灌胃给药地格达-4味汤后的血清中移行成分进行LC-MSDTrap分析。结果:灌胃给药地格达-4味汤后,在以D-GlaN致急性肝损伤大鼠血清中供检测到9个移行成分,其中4个移行成分为地格达-4味汤原型成分,即,4-O-β-glucopyranosylacetophenone、草夹竹桃苷、獐牙菜苦苷、Sweroside;5个移行成分为代谢产物。结论:所建立的测定方法比较全面、系统地分析地格达-4味汤血中移行成分,为揭示地格达-4味汤抗急性肝损伤药效物质基础提供科学依据。     

蒙药肋柱花抗体外CCl_4致大鼠肝星形细胞损伤作用研究

目的:观察蒙药肋柱花水提物抗四氯化碳(CCl_4)致大鼠肝星形细胞损伤的保护作用,明确肋柱花水提物抗急性肝损伤作用的药效物质基础。方法:在Hela细胞株上进行细胞毒性实验,确定药物的最大安全浓度;以CCl_4致体外肝细胞(HSC-T6)损伤模型,观察含肋柱花血清、肋柱花水提物、獐牙菜苦苷等对损伤的HSC-T6细胞的保护作用。结果:体外MTT实验结果表明,含肋柱花血清20%、肋柱花水提物0.13μg·μL~(-1)、獐牙菜苦苷0.40μg·μL~(-1)浓度时对Hela细胞的正常生长无明显影响,随着药物浓度的增加,Hela细胞的增殖活力有所下降、抑制作用增强。同时在安全浓度下部分实验药物表现出不同程度的抗CCl_4所致HSC-T6细胞损伤作用。细胞培养液中的AST或ALT含量及转化生长因子β1(TGF-β1)、胶原-1(Col-l)或α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在部分实验药物的作用下表达明显下降,与模型组相比具有显著差异(P0.05)。结论:肋柱花抗急性肝损伤的药效物质基础除了獐牙菜苦苷主要移行成分与其他体内移行成分有关。     

HPLC同时测定蒙药肋柱花四味汤散中栀子苷和獐牙菜苦苷的含量

目的:建立蒙药肋柱花四味汤散中栀子苷和獐牙菜苦苷的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,应用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;甲醇-0.1％磷酸溶液(25:75)为流动相;流速1.0mL· min-1;检测波长238 nm;柱温25℃.结果:栀子苷和獐牙菜苦苷分别在0.132 5 ～0.795 0μg,0.63750～3.8250 μg与峰面积具有良好的线性关系,栀子苷和獐牙菜苦苷的平均回收率分别为101.1％,99.66％,RSD为1.1％,1.3％(n=6).结论:该方法精密度高,分离度好,可用于蒙药肋柱花四味汤散中栀子苷和獐牙菜苦苷的含量测定.     

LC-MS研究炒白芍提取物中芍药苷在大鼠体内的药代动力学

目的:建立LC-MS测定大鼠血浆中芍药苷含量的方法,并探讨其在大鼠体内的药动学行为.方法:大鼠灌胃不同剂量的炒白芍提取物后不同时间点采血,LC-MS法测定血药浓度,拟合药动学模型并计算相关药动学参数.结果:芍药苷在2.5～500μg·L-1(r=9994)线性关系良好.方法学考察均符合要求.大鼠灌胃炒白芍提取物0.2,0.4,0.8 g·kg-1后,半衰期基本一致,AUC与给药剂量之间呈现良好的线性关系,属于线性动力学过程.结论:该法专属性强,灵敏度高,可用于芍药苷的体内定量分析,芍药苷在大鼠体内动力学过程符合一级吸收二室模型.     

龙胆苦苷在Beagle犬体内药代动力学研究

目的建立龙胆苦苷在 Beagle犬血清中的含量测定方法,研究龙胆苦苷在 Beagle犬体内的动力学规律.方法 建立快速敏感的高效液相色谱检测方法,使用外标法,以龙胆苦苷静脉注射给药, Beagle犬含药血清样品经液-液萃取后在 C18反相色谱柱上进行分离测定.结果 龙胆苦苷血药浓度在 0.1343～ 687.375 μ g· mL-1浓度范围内线性关系良好(R2=0.99993).方法回收率为 81.15 %～ 97.99 %,最低检测限为 0.1343 μ g· mL-1.结论龙胆苦苷在 Beagle犬体内的药动学过程表现为静脉内给药一房室模型,其中平均半衰期 t1/2 = 1.1324 h, 消除速率常数 Ke = 0.5811 h-1, 表观分布容 V=0.5316 L· kg-1,消除率 CL=0.3274 L· kg-1· h-1.提示龙胆苦苷在体内经历了迅速分布、消除过程,在体内不易蓄积.     

云南产青叶胆及其习用品药材中5种成分的HPLC含量测定

目的:建立1种用于测定青叶胆及习用品药材中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷、芒果苷和红白金花内酯含量的HPLC方法,并研究5种成分在青叶胆及习用品药材中的分布.方法:Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相0.1％磷酸溶液-甲醇,梯度洗脱,流速0.7～ 1.0 mL·min-1,柱温32℃,检测波长为250,260,225 nm.结果:5种成分的分离度良好,标准曲线在检测范围内均呈良好线性,r=0.999 7 ～ 0.999 9,平均回收率97.03％ ～ 102.7％,RSD为1.8％ ～6.2％.对8种30份青叶胆测定结果显示8个青叶胆品种中5种成分的有无及含量存在差异;弥勒獐牙菜、丽江獐牙菜等獐牙菜苦苷含量高达34.47～118.05 mg·g-1;西南獐牙菜中龙胆苦苷含量最高,紫红獐牙菜中獐牙菜苷的含量较高;根据獐牙菜苦苷及龙胆苦苷与獐牙菜苷含量之和的比较可以鉴别小青叶胆和大青叶胆;根据龙胆苦苷与5成分总和的比值可以区别西南獐牙菜.结论:本研究建立的方法操作简单、结果准确,具有较好的重复性和稳定性,可用于青叶胆类药材的鉴定及质量评价.     

獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞促凋亡作用及Bcl-2表达情况的影响

探讨獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLSs)及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的影响并讨论其作用机制。通过ZINC数据库和RCSB PDB数据库查询獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的三维化学成分结构和Bcl-2的蛋白靶点三维结构;借助AutoDock Mgltools 1.5.6软件、AutoDock Vina 1.1.2软件和pyMOL 2.2.0软件将獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的三维化学成分结构与Bcl-2(1GJH)靶点蛋白三维结构进行对接并分析;借助Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒检测给药后各组RA-FLSs的凋亡情况;借助Western blot法检测给药后各组RA-FLSs的Bcl-2蛋白表达情况;借助RT-PCR技术检测给药后各组RA-FLSs的Bcl-2 mRNA表达情况。各给药组的成分结构与Bcl-2(1GJH)的结合活性较好,獐牙菜苦苷的结合能为-6.9 kcal·mol^-1,龙胆苦苷的结合能为-6.7 kcal·mol^-1,獐牙菜苷的结合能为-6.4 kcal·mol^-1;龙胆苦苷组的促细胞凋亡作用最强(P<0.01),獐牙菜苷组次之,獐牙菜苦苷组最次;龙胆苦苷组的Bcl-2蛋白表达水平最低,抑制Bcl-2蛋白表达作用最强(P<0.01),獐牙菜苦苷组和獐牙菜苷组间比较无差异,作用相近;各给药组较空白组的Bcl-2 mRNA基因表达水平显示出不同程度降低(P<0.01,P<0.05),且作用相近。龙胆苦苷可以促进RA-FLSs凋亡,降低RA-FLSs的Bcl-2蛋白表达水平和Bcl-2 mRNA的基因表达水平,进而缓解因RA-FLSs的凋亡不足与异常增殖引起的病症。     

藏药川西獐牙菜的质量标准研究

目的:建立川西獐牙莱药材的质量标准.方法:采用薄层色谱法对川西獐牙菜药材进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定主要活性成分獐牙莱苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的含量.色谱柱为Diamonsil C18(4.6 mm ×250 mm,5μm),检测獐芽菜苦苷、芒果苷和当药醇苷的流动相甲醇-0.02％磷酸水(45:55),检测波长254 nm,检测齐墩果酸的流动相乙腈-甲醇-0.2％冰醋酸水(65:15:20),检测波长210 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:川西獐牙菜药材的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;獐牙菜苦苷、芒果苷、当药醇苷和齐墩果酸的HPLC含量测定线性范围分别为0.075～0.75μg(r=0.999 9),0.05 ～0.5 μg(r=0.999 7),0.032～0.32 μg(r=0.999 3),0.116～11.6 μg(r=0.999 4),平均回收率分别为98.91％ (RSD 0.77％),99.61％ (RSD1.38％),100.35％ (RSD 0.69％),99.26％(RSD 0.40％),并根据10批药材中相应成分的含量初步制定了其含量限度.结论:川西獐牙菜定性定量测定方法简单准确,能够为川西獐牙菜药材的质量控制提供有效依据.     

HPLC测定肋柱花中獐牙菜苦苷和当药黄素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定肋柱花中獐牙菜苦苷和当药黄素含量的方法.方法:采用高效液相色谱法测定肋柱花中獐牙菜苦苷和当药黄素的含量.色谱柱为Phenomenex C18(4.6rm ×250mm,5μm),流动相为水(A)和甲醇(B)梯度洗脱,流速1.5 mL.rin-,柱温25℃,检测波长237 nm.结果:獐牙菜苦苷对照品在0.27 ～ 5.40 mg与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.999 8),加样回收率为98.49％、RSD 1.06％ (n =9);当药黄素对照品在0.165～3.3 mg与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9996),加样回收率为97.35％、RSD 1.45％ (n=9).结论:该方法简单、快捷、准确、重复性好,可用于肋柱花中獐牙菜苦苷和当药黄素的含量测定.     

妇炎汤对急性盆腔炎大鼠血清炎性细胞因子表达的影响

目的:研究妇炎汤对急性盆腔炎大鼠血清炎性因子的影响.方法:采用金黄色葡萄球菌、解脲脲原体和大肠杆菌混合菌接种法建立急性盆腔炎模型.模型成功后随机分为假手术组、模型组、妇炎汤低、中、高剂量组、中药对照组(妇科千金片).妇炎汤高、中、低剂量组分别以3.15,6.0,12.6 g·kg-1 ·d-1ig给药,连续给药20 d,末次给药后禁食12 h,取外周血,采用ELASA法检测白介素2(IL-2)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况.并取卵巢和子宫组织,观察病理改变情况,同时,测血细胞的变化.结果:正常组IL-2,IL-6和TNF-α分别(117.62±3.24),(74.40±3.76),(22.17±2.87) ng·L“;与正常组相比,模型组IL-2为(95.44 ±2.83 )ng·L-1,明显降低(P＜ 0.01);IL-6和TNF-α分别为(89.85 ±4.57),(33.48 ±4.52)ng·L-1,明显升高(P＜0.01);与模型组相比,妇炎汤低、中剂量组IL-2,IL-6分别高于和低于模型组(P＜0.05),低剂量组TNF-α则无显著性差异.高剂组IL-2高于模型组(P＜0.01),IL-6和TNF-α低于模型组.治疗后,3组白细胞总数及中性粒细胞百分比均明显降低,子宫黏膜病理改变也明显减轻,炎细胞浸润明显减少.结论:妇炎汤对急性盆腔炎有一定防治作用,其机制可能与调节炎性细胞因子的表达有关.     

雄芍汤保肝降酶及抗氧化有效部位的研究

目的：研究雄芍汤抗肝纤维化的药效物质基础,分别筛选其保肝降酶及抗氧化的有效部位。方法：Wistar 雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶正组、雄芍组、多糖组、总碱组和总苷组,采用DMN 腹腔注射法制备大鼠肝纤维化模型,造模成功后灌胃给药,治疗组分别给予扶正化瘀胶囊（0.105 g·mL-1）、雄芍汤药液（1.610 g·mL-1）、雄芍汤粗多糖提取物（35.420 mg·mL-1）、雄芍汤总苷提取物（25.725 mg·mL-1）、雄芍汤总生物碱提取物（0.196 mg·mL-1）,正常组与模型组灌服等量生理盐水,每日1 次,疗程4 周。4 周后处死取材,全自动生化分析仪检测血清肝功能指标ALT、AST、TIBL 和ALB;黄嘌呤氧化酶法检测血清SOD活力;DTNB 还原法检测血清GSH-PX 活力;TBA 法检测血清MDA 含量;HE 染色及Masson 染色观察肝组织病理学改变。结果：与模型组比较,除总碱组无显著性差异外,其余各治疗组ALT、AST 及TBIL 均显著降低（P<0.05 或P<0.01）,ALB 均显著升高（P<0.05 或P<0.01）。与模型组比较,扶正组、雄芍组和总碱组SOD 及GSH-PX 均显著升高（P<0.01）,MDA 均显著降低（P<0.05 或P<0.01）,多糖组、总苷组无显著性意义。结论：粗多糖部位和总苷部位为雄芍汤保肝降酶的有效部位,总生物碱部位为雄芍汤抗氧化的有效部位。     

LC-MS-MS测定黄连解毒汤中3种生物碱在大鼠血清的含量及其药代动力学研究

目的:建立灵敏、特异、准确、可靠的药根碱、巴马汀、小檗碱在大鼠血清中液质联用(LC-MS-MS)分析方法,用于黄连解毒汤中3种生物碱在正常大鼠体内药代动力学研究.方法:优化药根碱、巴马汀、小檗碱及内标延胡索乙素质谱检测条件,确定相关条件并开展方法学考察.正常大鼠灌胃给予黄连解毒汤,经时取血,样品经处理后将该方法用于3种成分的测定.DAS药代动力学软件拟合房室模型,计算药动参数.结果:在ESI(+)离子化条件下采用MRM工作模式,用,m/z 338～322,351.9～308,336-319.8来分别检测药根碱、巴马汀、小檗碱,同时以m/z 356.1～192.1来检测内标延胡索乙素.药根碱在0.2～25μg·L~(-1)、巴马汀、小檗碱在O.4～50μg·L~(-1)呈良好线性关系.3种生物碱在高、中、低3个浓度的准确度、精密度、稳定性等均符合要求.药根碱、巴马汀、小檗碱在正常大鼠体内药动学过程符合一室开放模型.结论:应用LC-Ms-s技术建立了测定药根碱、巴马汀、小檗碱血药浓度的方法,并成功应用于黄连解毒汤正常大鼠体内这3个成分的药动学研究,为中药复方药动学研究提供了可以借鉴的分析方法.     

实验性肝损伤模型建立的初步探讨

目的建立四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤、小鼠四氯化碳反复给予造成肝中毒及酒精性肝病小鼠模型,筛选最佳给药剂量和次数。方法①SD大鼠每隔2天给予CCl41次,连续4次(10天),采用灌胃(ig)和腹腔注射(ip)的两种途径,测定谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST),并测体重和肝脏重、胸腺重,求脏器系数。②给小鼠CCl4灌胃给药,观察CCl4给药后24-96h(1-4d)的血清ALT变化。③给小鼠不同剂量、次数和时间的酒精,测定血清ALT。结果①CCl4所致大鼠急性肝损伤模型给药途径以腹腔注射为好,CCl4浓度以10%为好。②小鼠四氯化碳反复给予造成肝中毒,以20%CCl40.05ml/10g,三天1次灌胃给药的方法为好。③关于酒精所致小鼠急性肝损伤模型,以二锅头酒原液0.1ml/10g一天1次,5-7天的酒量为好。结论本试验筛选了实验性肝损伤模型的CCl4浓度、剂量及给药途径和酒精剂量、次数和时间,但为更好地建立模型,有待进一步探讨。     

虎茵汤对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：观察不同浓度的虎茵汤对四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：采用腹腔注射CCl4致小鼠争性肝损伤为模型,测定高、低剂量的虎茵汤对肝损伤ALT、AST的值的影响,同时对肝组织进行病理组织学检查。结果：虎菌汤能够明显降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT、AST值升高（P＜0．01）,减轻CCl4对肝脏细胞的病理损伤。结论：虎茵汤对CCl4致急性肝损伤具有一定的保护作用。     

黄连温胆汤对IGT大鼠炎症反应与肝细胞焦亡的影响

目的:探讨高脂饮食诱导糖耐量低减(IGT)大鼠是否存在炎症反应与细胞焦亡及黄连温胆汤对其干预作用.方法:健康雄性SD大鼠予45％脂肪含量饲料喂养20周复制IGT模型.将符合模型标准的大鼠随机分为3组,每组10只,另取10只空白鼠作为正常组.黄连温胆汤组予7.8 g·kg-1·d-1复方水煎液,阳性药组予盐酸二甲双胍水溶...     

柴胡理中汤改善非酒精性脂肪肝病大鼠肝功能和脂代谢效果观察

目的:探讨柴胡理中汤对非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)大鼠肝功能和脂代谢的效果。方法:将40只SD大鼠随机分为4组:空白对照组、模型对照组、西药对照组、柴胡理中汤组,每组10只。除空白组外,其余大鼠均饲以高脂饲料8周。8周后,每日以固定时间给予为期12周的相应药物灌胃(Irrigation,Ig),空白组与模型组蒸馏水灌胃,西药组予550 mg·kg-1·d-1多烯磷脂酰胆碱灌胃,柴胡理中汤组予9 g·kg-1·d-1的柴胡理中汤灌胃。实验过程中观察比较各组大鼠一般情况;实验结束前禁食12 h,称取体质量,并计算肝指数;抽取空腹血分离血清后测定肝酶系、血脂;在光镜下观察肝细胞并对其脂肪变性程度评级。结果:西药组与柴胡理中汤组的大鼠一般情况优于模型组,两组的体质量、肝指数、肝酶水平[丙氨酸转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、门冬氨酸转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、谷氨酰转肽酶(Glutamyl Transpeptidase,GGT)]、血脂[总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDL-C)]也明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),且两组均能改善脂肪变性,以柴胡理中汤组改善效果更佳。结论:柴胡理中汤能有效降低NAFLD大鼠肝酶水平,改善脂代谢紊乱和肝组织病变,达到治疗大鼠NAFLD的效果。     

芪泽汤对慢性肾功能衰竭大鼠 内质网应激相关凋亡分子表达的影响

目的:探讨芪泽汤对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠内质网应激(ERS)相关凋亡分子表达的影响.方法:2.5％腺嘌呤ig24 d建立SD大鼠肾衰模型.分为5组:正常组、模型组、尿毒清组(2.5 g·kg-1·d-1)、芪泽汤高、低剂量组(50.4,12.6g·kg-1·d-1),每组10只.造模同时各治疗组ig给药,干预24 d后,观察体重变化,全自动生化分析仪检测大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr),应用TUNEL法检测肾组织细胞凋亡,Western blot检测CHOP( C/EBP-homologous protein)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12( Caspase-12)肾内表达水平.结果:模型组BUN(17.21±4.63) mmol·L-1,SCr( 67.00±25.62) μmol·L-1较对照组BUN(4.19±0.77) mmol· L-1,SCr( 15.89±2.62)μmol·L-1明显升高(P ＜0.01);TUNEL结果显示空白组肾小管上皮细胞有少量凋亡,而模型组细胞凋亡数明显增多(P＜0.01);模型组CHOP,Caspase-12表达显著增强(P＜0.01).芪泽汤低剂量和尿毒清能抑制慢性肾功能衰竭大鼠肾小管上皮细胞凋亡和CHOP,Caspase-12表达(与模型组相比较P＜0.05).结论:芪泽汤低剂量能保护腺嘌呤导致的大鼠肾损害,可能与其抑制ERS相关凋亡分子CHOP,Caspase-12高表达有关.     

复方茵柏颗粒对四氯化碳致急性肝损伤大鼠TNF-α及细胞凋亡的影响

目的：探讨复方茵柏颗粒对四氯化碳（CCl4）致肝损伤大鼠TNF-α及细胞凋亡的影响。方法：大鼠腹腔单次注射40%CCl4玉米油制备急性肝损伤模型,将大鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、复方茵柏颗粒低、中、高剂量组（2.16 g·kg^-1、4.32 g·kg^-1、8.64 g·kg^-1）、阳性对照组（复方茵柏合剂8.64 g·kg^-1）,用酶联免疫吸附法测定血清TNF-α水平,用TUNEL法检测组织凋亡细胞,用酶联免疫吸附法检测肝匀浆Caspase-3的活性。结果：复方茵柏方能明显降低肝损伤组大鼠血清TNF-α水平,抑制细胞凋亡,并明显降低肝匀浆Caspase-3的蛋白表达量,与模型组比较有显著差异（P〈0.01,P〈0.05）。结论：复方茵柏颗粒抗CCl4所致肝损伤的作用与抑制TNF-α分泌、抑制细胞凋亡有关。     

四逆汤在过氧化氢引起的心肌细胞氧化应激性损伤中的保护效应

目的:观察四逆汤对乳鼠心肌细胞在过氧化氢损伤中的保护效应,探讨Bcl-xL/xS mRNA在四逆汤抗过氧化氢损伤保护心肌细胞中的作用.方法:采用过氧化氢诱导损伤制备乳鼠心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含不同浓度的四逆汤含药血清DMME培养基培养细胞,应用流式细胞仪检测培养细胞的存活率,筛选合适的四逆汤含药血清培养细胞的浓度;用1 mmol/L过氧化氢处理心肌细胞,分别在处理0.5 h,1 h,2 h,3 h,4 h,8 h后检测细胞内丙二醛(MDA)和过氧化物歧化酶(SOD)的活性,并用流式细胞仪检测不同作用时间的细胞凋亡率和坏死率;在过氧化氢处理心肌细胞1 h和8 h后,收获细胞,检测细胞胞浆Bcl-xL和Bcl-xSmRNA的表达情况.结果:采用含15%四逆汤含药血清的DMEM培养基是心肌细胞生长的合适浓度;过氧化氢对心肌细胞的损伤程度与处理时间成正相关;与单纯过氧化氢处理组相比,四逆汤含药血清组细胞内MDA的含量降低,SOD的活性增加,细胞的凋亡率和坏死率降低,Bcl-xL mRNA表达增加,Bcl-xS mRNA表达减少.结论:四逆汤含药血清有较好的抗氧化应激性损伤保护心肌细胞的作用,这种保护作用可能通过增加Bcl-xL mRNA的表达,降低Bcl-xS mRNA的表达来实现.