吉林省珲春市3株肾综合征出血热汉城型病毒的分离与鉴定

目的对2006年吉林省珲春市采集的鼠肺标本进行病毒分离与鉴定。方法采集鼠肺组织活体标本132份，用免疫荧光法筛检出阳性标本20份，用VeroE6细胞培养分离病毒，对病毒分离株进行血清学（EUSA和IFA方法）、分子生物学（RT-PCR）鉴定。结果本实验共筛检出阳性标本20份，分离到3株病毒，分离率为15％，分别命名为H156、H158、H162。结论在珲春市采集的褐家鼠标本中分离到3株病毒，经血清学和分子生物学鉴定为汉坦病毒汉城型，这是在珲春市首次分离到汉城型病毒。     

江西省1株汉滩型汉坦病毒的分离与鉴定

目的 了解江西省啮齿动物携带的肾综合征出血热汉坦病毒的基因型别。方法 采用Vero-E6细胞对8份免疫荧光汉坦病毒抗原阳性鼠肺标本进行病毒分离,采用直接免疫荧光法和RT-PCR方法对培养物进行鉴定,对分离株部分M基因进行序列测定和分析。结果 1份标本培养后经直接免疫荧光试验检测到汉坦病毒特异性免疫荧光颗粒,培养物能在Vero-E6细胞中稳定传代,毒株命名为AYW89-15。毒株核酸经汉坦病毒M基因特异性分型引物进行RT-PCR检测,获得汉滩型汉坦病毒(Hantaan virus, HTNV)预期大小的目的片段;通过序列分析发现,分离株与HTNV参考株核苷酸同源性为83.1%～94.7%,氨基酸同源性为95.0%～99.0%,与汉城型等其他型别汉坦病毒核苷酸和氨基酸同源性均低于75%。进化树分析表明AYW89-15位于HTNV所在的枝系。 结论 新分离株AYW89-15为HTNV。     

肾综合征出血热发病机制的研究进展

肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS）是由汉坦病毒感染引起的以发热、休克、出血和肾脏损害为主要特征的急性自然疫源性疾病。汉坦病毒主要感染人血管内皮细胞,引起小血管和毛细血管广泛损伤。血管通透性增加是HFRS临床表现的病理基础。国内外学者尽管在汉坦病毒致病机制方面开展了诸多研究,如病毒诱导的免疫病理反应、宿主遗传与细胞凋亡、血小板减少与功能障碍、血管内皮损伤等,但HFRS发病机制仍未完全阐明,也无特效治疗药物,深入探讨汉坦病毒致病的分子机制,寻找有效治疗药物仍是汉坦病毒/HFRS领域的研究热点。本文结合近年来国内外相关研究,阐述HFRS发病机制的研究进展。     

广西肾综合征出血热宿主动物及其病毒感染状况

目的调查广西壮族自治区（广西区）肾综合征出血热（HFRS）宿主动物及其自然感染汉坦病毒状况。方法用夹夜法在室内及室外捕鼠,捕获鼠经分类鉴定后无菌取血清及肺组织,用ELISA法检测血清汉坦病毒抗体及肺组织抗原,对汉坦病毒抗原阳性的肺组织标本用RT-PCR检测汉坦病毒核酸及分型。结果 2006-2008年共捕获宿主动物17种1984只,以小型啮齿动物为主,宿主动物感染汉坦病毒总抗体阳性率为14.51%;褐家鼠肺组织汉坦病毒抗原阳性标本6份,经核酸检测和测序证实为汉城型病毒。结论广西区广泛存在以褐家鼠为主要宿主的HFRS家鼠型疫源地,并存在汉城型汉坦病毒的流行。     

肾综合征出血热疫苗后备毒株的分离和生物学特性研究

目的从肾综合征出血热(HFRS)疫区阳性鼠肺中分离汉坦病毒(HV),并对分离到的病毒进行型别鉴定和生物学特性研究,为HFRS疫苗后备毒种库的建立打下基础。方法疫区阳性鼠肺研磨液接种长爪沙鼠分离病毒,并将分离到的HV经乳沙鼠脑内连续传代,采用直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验,检查毒株的型别,研究传代后毒株的繁殖特性、病毒滴度和抗原滴度。结果从疫区32份阳性鼠肺中分离到9株HV,经单克隆直接荧光血清检查6株为汉滩病毒株,3株为汉城病毒株,经乳沙鼠脑内连续传代,其中4株毒株的病毒滴度和抗原滴度较高,汉滩和汉城毒株的病毒和抗原滴度最高分别达106.50、106.00和1∶5120、1∶5120。结论4株毒株的病毒滴度和抗原滴度均较高,可作为HFRS疫苗后备毒种的筛选毒株。     

肾综合征出血热浙江分离株Z521株的分子生物学特征分析

目的:研究分析肾综合征出血热浙江分离株Z521病毒株的S片段基因的结构特征。方法:从病毒感染的细胞中提取细胞总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到了与理论值相符的产物,将RT-PCR产物直接克隆T载体,纯化后测定序列,应用DNA STAR软件分析比较。结果:Z521病毒株S片段的全基因序列共1700个核苷酸,四种核苷酸的比例分别为A31.82%,G 23.29%,T25.41%,C 19.47%,GC含量为42.76%,AT含量为57.24%,共编码429个氨基酸。Z521株S片段与HTN76118和SEO R22病毒比较,核苷酸同源率分别为86%和71.5%,氨基酸同源率分别为97.9%和83%。结论:Z521病毒株为HTN型毒株,与目前的浙江省毒株Z10存在差异,可能为新的亚型。     

尤溪县肾综合征出血热疫源地调查及病毒分离

目的了解尤溪县肾综合征出血热(HFRS)疫区类型,为防治工作提供依据。方法应用笼夜法捕鼠,计算鼠密度及鼠种构成,对鼠肺进行HFRS病毒抗原检测及病毒分离与鉴定。结果 2008年调查显示褐家鼠为优势种,带病毒率也较高,并从褐家鼠中分离出II型病毒;2010年疫情明显下降。结论尤溪县存在以褐家鼠为主要宿主的家鼠型疫源地,采取了一系列防控措施后,疫情明显下降,说明措施有效。     

肾综合征出血热病毒分型的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对４株肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒进行了分型。ＨＦＲＳ病毒的ＲＮＡ经逆转录为ＣＤＮＡ后用ＮＴＮ（野鼠型）、ＳＥＯ（家鼠型）两种引物进行体外扩增，经琼脂糖凝胶电泳，ＰＣＲ产物的ＮＤＡ片段与Ｍａｒｋ对照，证实扩增出的产物为ＨＦＲＳ病毒ＤＮＡ片段。ＰＣＲ分型与物异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法分型作比较，结果相符合。     

一株肾综合征出血热病毒的鉴定

肾综合征出血热(HFRS)病毒引起的疾病以肾脏组织损害为主,发病过程分为5期,即发热期、肾损害期、少尿期、多尿期、恢复期。我国目前发现的病毒流行株仅有2个型,即Ⅰ型(姬鼠型)和Ⅱ型(家鼠型) ;Ⅰ型病毒致病力强,病人症状严重,病死率高;Ⅱ型病毒则相对较轻。汉坦病毒(HV)的主要宿主为啮齿类动物。本实验将1株由褐家鼠肺组织中分离出的病毒,用血清学和分子生物学方法鉴定。1　材料和方法1 .1　分离毒株　从广州市某风景区捕获1只雄性成年褐家鼠,无菌剖取肺组织,切片后HFRSMcAb直接免疫荧光试验(FAT)检测,抗原特异荧光强度为强阳性,单克…     

福建省不同疫区肾综合征出血热宿主动物监测及病毒分离

目的了解福建省。肾综合征出血热（HFRS）疫区类型,为防治工作提供依据。方法应用笼夜法捕鼠,计算鼠密度及鼠种构成,对鼠肺进行HFRS病毒抗原检测及病毒分离与鉴定。结果家鼠型疫区室内平均鼠密度为4．91％,褐家鼠为主要鼠种。混合型疫区室内平均鼠密度为5．73％,褐家鼠为优势种;野外平均鼠密度为12．95％,秋冬季明显高于春季,黑线姬鼠为优势种。室内以褐家鼠为主要带病毒鼠种,携带Ⅱ型病毒,野外带病毒鼠均为黑线姬鼠,携带I型病毒。从黑线姬鼠和褐家鼠中各分离出1株HFRS病毒,定名为A44和R50株。结论福建省HFRS的主要宿主动物仍以褐家鼠为主,混合型疫区野外主要宿主动物为黑线姬鼠,应加强重点疫区和老疫区的HFRS监测防治工作。     

革螨及恙螨体内肾综合征出血热病毒定位的研究

目的 确定紧综合征出血热病毒（HFRSV）在螨体内的定位。方法 用原位RT－PCR技术检测HFRSV在螨体内的分布。结果 HFRSV多见于革螨及恙螨的卵巢卵细胞、中肠及中肠支囊上皮细胞的细胞核周围,呈弥散分布,前体组织细胞少,其他组织细胞未见。革螨子4代、子3代和恙螨若虫阳性颗粒多于革螨子2代、子1代和恙螨幼虫。结论 从分子生物学水平进一步证明革螨及恙螨可作为紧综合征出血热的传播媒介。     

肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株在Vero细胞上的适应传代及其抗原性研究

〔目的〕将肾综合征出血热疫苗后备毒株适应于Vero细胞 ,观察病变情况 ,并对其抗原性和繁殖特性进行研究。〔方法〕将新分离的汉坦病毒ZJ2、ZJ4、ZJ7株和汉城病毒ZJ5株在Vero细胞上进行连续传代 ,采用间接免疫荧光法(IFA)、反向被动血凝试验 (RPHA) ,研究传代后毒株的病毒滴度、抗原量以及细胞的病变情况 ,同时将传代后的病毒接种敏感动物 ,观察动物的发病情况和毒株的繁殖特性。〔结果〕经过 5次连续传代 ,四株病毒在Vero细胞上均显示出良好的适应性 ,从第二代开始病毒滴度稳定在 6.0 0LgTCID5 0 ml以上 ,第五代时最高达 7.5 0LgTCID5 0 ml ,第三代毒株抗原量均已达到 1:12 8,ZJ7株抗原量最高时达 1:768,四株毒株感染Vero细胞 ,连续观察 12d不见细胞产生病变 ,第五代细胞病毒液接种敏感动物 ,9d后动物发病甚至死亡。〔结论〕四株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性 ,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。     

Clinical and epidemiological aspects of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) in Greece

Twenty-three cases of hemorrhagic fever with renal syndrome were serologically diagnosed in rural populations of Greece between 1982 and 1985. The clinical picture of the disease was severe, (3 deaths recorded among 23 cases) and more closely resembled Korean hemorrhagic fever than nephropathia epidemica. Examination of patients' sera by indirect immunofluorescence (IFA) assays and plaque reduction neutralization (PRNT) tests using Hantaan 76–118, Puumala, and Seoul (Urban rat-associated Hantaan-like) viruses, suggested that the virus existing in Greece is either prototype Hantaan virus or a distinct virus which is closely related to Hantaan. Small mammal survey results suggest that Apodemus flavicollis may be the host of this virus. Serosurvey results of 2,653 blood samples taken from apparently healthy residents (farmers, shepherds, and woodcutters) from 22 of 54 counties in Greece, showed the percentage of seropositives to be 4%, with a range from 0 to 14%. Fifteen of 22 counties were characterized as endemic areas of the virus due to the presence of seropositive individuals. In 6 of the 15 endemic areas, overt human disease was serologically diagnosed.     

肾综合征出血热发病机制研究进展

肾综合征出血热发病机制至今仍未完全阐明,病毒、病毒受体、细胞因子、自由基、特异性CTL反应、HLA差异性均可能与发病有关.此文对近年来的研究进展进行了综述.     

湖南省2006年肾综合征出血热病原学监测研究

目的 了解湖南省啮齿动物中汉坦病毒带病毒率、基因型别和分布.方法 采用直接免疫荧光(DFA)法检测鼠肺汉坦病毒抗原,从汉坦病毒阳性鼠肺标本中提取病毒RNA,应用汉坦病毒型特异性引物进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增、核苷酸序列测定以及基因分型和同源性分析.结果 总鼠密度为3.15%,鼠带病毒率为1.31%,在室内捕获的7只褐家鼠、黑线姬鼠、小家鼠、黄胸鼠鼠肺标本中均发现携带SEO型病毒,在室外捕获的1只黑线姬鼠鼠肺标本则携带HTN型病毒.成功对6份阳性PCR产物进行了序列分析,浏阳市1、2、4、6号标本同源性较高为100%,邵东市的7、8号标本同源性也较高为100%,但两地区间的同源性差异为89.3%,L99株与浏阳分离株的同源性为94.4%,与邵东分离株的同源性为88.3%.结论 湖南省汉坦病毒存在HTN和SEO型,以SEO型为主.     

A Phase 1 clinical trial of Hantaan virus and Puumala virus M-segment DNA vaccines for hemorrhagic fever with renal syndrome

Candidate DNA vaccines for hemorrhagic fever with renal syndrome expressing the envelope glycoprotein genes of Hantaan (HTNV) or Puumala (PUUV) viruses were evaluated in an open-label, single-center Phase 1 study consisting of three vaccination groups of nine volunteers. The volunteers were vaccinated by particle-mediated epidermal delivery (PMED) three times at four-week intervals with the HTNV DNA vaccine, the PUUV DNA vaccine or both vaccines. At each dosing, the volunteers received 8 μg DNA/4 mg gold. There were no study-related serious adverse events, and all injection site pain was graded as mild. The most commonly reported systemic adverse events were fatigue, headache, malaise, myalgia, and lymphadenopathy. Blood samples were collected on days 0, 28, 56, 84, 140, and 180, and assayed for the presence of neutralizing antibodies. In the single vaccine groups, neutralizing antibodies to HTNV or PUUV were detected in 30% or 44% of individuals, respectively. In the combined vaccine group, 56% of the volunteers developed neutralizing antibodies to one or both viruses. These results demonstrate that the HTNV and PUUV DNA vaccines are safe and can be immunogenic in humans when delivered by PMED.     

北京东灵山地区肾综合征出血热疫源地调查

目的了解北京市东灵山小兽种类构成,是否存在肾综合征出血热疫源地及其分布特征。方法从山麓到山顶选择三类生境和海拔为监测点,采用夹夜法进行鼠密度测定,应用间接免疫荧光法检测捕获小兽的汉坦病毒抗原携带、抗体阳性状况。结果本次调查共捕获小兽13种,287只;不同生境的小兽密度为9．13％～14．69％,平均11．43％;平均带病毒率为3．98％,平均感染率为6．37％;其中在社鼠、黑线姬鼠、大林姬鼠中查到汉坦病毒抗原或／和抗体,其他无汉坦病毒感染。结论北京东灵山地区存在肾综合征出血热疫源地。     

中国大陆2004-2015年肾综合征出血热的时空分布

目的 观察中国大陆肾综合征出血热(HFRS)疫情的时空分布,为HFRS的防治工作提供数据参考.方法 2004-2015年中国大陆的HFRS疫情资料来自中国卫生统计年鉴及中国疾病预防控制中心(CDC)报表,采用Excel 2013和地理信息系统(GIS)软件统计和分析数据.结果 2004-2015年,中国大陆HFRS发病数呈季节性波动;年均发病数、发病率及病死率分别为13 237人、1.00/10万(0.66/10万～1.93/10万)和1.02％(0.46％～1.31％);自2007年以来,年发病率均低于1.00/10万人;2012年以来,病死率均低于1.00％.传统疫情高发地区如黑龙江、吉林和辽宁的HFRS发病率下降明显.结论 近年来我国的HFRS疫情总体呈下降趋势,这可能与政府各部门的环境治理、灭鼠防鼠、疫苗接种、健康教育等措施和城市化进程相关.