抑癌基因APC启动子甲基化检测及其在肺癌诊断中的应用

目的　建立抑癌基因APC启动子部位甲基化的检测方法 ,并对肺癌临床样品进行初步检测研究。方法 :对肺癌组织提取的DNA及转甲基后的脐带血DNA进行化学修饰 ,以甲基化特异性引物进行基因扩增 (methylationspecificPCR ,MSP)和甲基化序列分析 (methylationsequencing ,MS)。结果 :经转甲基的人脐带血DNA样品MSP检测为阳性 ,其序列与预期相符 ,未经转甲基样品为阴性。 17例肺癌患者的肿瘤及其正常肺组织APC甲基化检测阳性率分别为 4 7% (8/ 17)和 18% (3/ 17) ,1例肺部良性肿瘤及其正常肺组织的检测结果均为阴性 ;对MSP检测为阴性的 9例肺癌患者肿瘤及其正常肺组织进行MS检测分析 ,有 4例APC启动子部位存在CpG甲基化。结论 :利用MSP和MS两种甲基化检测分析手段 ,对 17例临床确诊肺癌组织的检测总阳性率可达 71% (12 / 17)。MSP操作简便 ,价格低廉 ,可适合于大规模肿瘤患者样本的筛查 ;而对于MSP检测为阴性的临床样品 ,可以利用MS进行进一步的确认 ,为临床肺癌诊断提供更准确的信息。     

非小细胞肺癌p16基因甲基化及其临床诊断意义

目的 研究非小细胞肺癌癌组织p16基因甲基化及其临床诊断意义.方法 选择47例非小细胞肺癌患者,用MSP技术检测肺癌组织和癌旁正常组织p16基因甲基化.结果 肺癌组织p16基因甲基化率44.7%,高于癌旁组织的17.0%(P＜0.01);肺癌组织甲基化检出率与临床分期、临床病理分型和临床分类之间差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 提示肺癌有关组织或样本的p16基因甲基化,可能成为各种临床类型的非小细胞肺癌早期诊断的一个有效指标.但特异性、灵敏性和可行性等有待进一步研究.     

DNA甲基化转移酶1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的观察DNA甲基化转移酶1(DNMT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织、癌旁组织及正常肺组织中的表达,通过其表达水平的分析,探讨其与临床特征的关系。方法选取睢宁县人民医院胸外科手术切除的肺癌标本,分别取癌组织54例,癌旁组织48例,另取周边正常组织24例为对照组,行免疫组化检测,分析各组织中DNMT1表达差异及与临床各指标之间关系。结果 DNMT1在NSCLC的癌组织、癌旁组织、正常肺组织中阳性表达率分别39/54(72.2%)、30/48(62.5%)、0/24(0%),与正常肺组织比较差异有统计学意义(P<0.01)。DNMT1的表达与NSCLC组织的分化程度、TNM分期、患者的年龄、性别、吸烟、病理类型无相关性。结论 DNMT1在NSCLC癌组织、癌旁组织中出现高表达,在正常肺组织中表达缺失,提示DNMT1参与NSCLC发病机制,可以作为病理诊断NSCLC的标志物。DNMT1与NSCLC的临床特征之间无相关性,不能作为预后的指标。     

多种指标联合检测非小细胞肺癌的诊断价值

目的：探讨血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片断（CYFRA21‐1）、乳酸脱氢酶（LDH）检测在非小细胞肺癌临床诊断中的价值。方法选择病理确诊的非小细胞肺癌患者86例作为研究对象,选取50例非肿瘤肺部感染患者及60例体检健康者血清作对照,采用Beckman全自动免疫分析系统检测患者血清中CEA、CYFRA21‐1水平,Roche411检测患者血清中NSE水平,Beckman全自动生化仪（AU5821）检测LDH水平,分析NSE、CEA、CYFRA21‐1、LDH水平与非小细胞肺癌临床特征之间的关系。结果（1）非小细胞肺癌患者血清中NSE、CEA、CYFRA21‐1、LDH水平明显高于非肿瘤肺部感染患者及健康者;（2）非小细胞肺癌组中NSE在未分型患者中水平明显高于鳞状细胞癌和腺癌患者,CYFRA21‐1在鳞状细胞癌中水平较高,CEA、LDH的水平差异不明显;（3）NSE、CEA、CYFRA21‐1联合检测阳性率高于NSE单独检测的阳性率。结论血清NSE、CEA、CYFRA21‐1水平联合检测有利于提高非小细胞肺癌的诊断率。     

非小细胞肺癌血清血管内皮细胞生长因子水平检测的意义

目的　检测非小细胞肺癌 (NSCLC)患者的血清血管内皮细胞生长因子 (VEGF) ,探讨血清VEGF与NSCLC患者的关系及临床意义。方法　用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 12 3例NSCLC患者和 34例健康正常人的血清VEGF含量 ,并进行对照分析。结果　NSCLC患者的血清VEGF(15 3± 12 1)pg ml明显高于健康正常人 (32± 2 7 2 )pg ml(P =0 0 0 0 )。血清VEGF与患者的年龄、性别以及病理类型无显著性意义(P >0 0 5 )。初治组中有远处转移 (n =2 4 )的血清VEGF比无远处转移 (n =16 )高 (P =0 0 0 3)。已手术切除、体内未发现明确病灶的手术组和术后随访组与有明确病灶的初治组和复治组之间 ,血清VEGF有显著性意义 (P =0 0 0 5 )。 4 0例高VEGF组比 19例低VEGF组的疗效差 (P =0 0 0 6 )。结论　监测NSCLC患者的血清VEGF对判断肿瘤负荷、疗效、复发转移、预后都有重要参考价值     

肿瘤标志物联合检测在非小细胞肺癌诊断中的应用价值

目的 探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)和血清铁蛋白(SF)联合检测在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法 采用化学发光免疫分析法检测52例NSCLC患者(NSCLC组),35例肺部良性疾病患者(肺部良性疾病组)及44例健康体检者(对照组)血清中NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125、CA19-9和SF的水平,并进行统计学分析。结果 NSCLC组血清中NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125、CA19-9和SF的检测水平均明显高于肺部良性疾病组和对照组,差异有统计学意义(P<0.01);腺癌患者CEA水平明显高于鳞癌患者,鳞癌患者CYFRA21-1的水平明显高于腺癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);6项肿瘤标志物联合检测NSCLC的灵敏度为96.2%,特异性为87.3%,准确性为90.8%,均优于任何单项肿瘤标志物检测。结论 肿瘤标志物联合检测对NSCLC的辅助诊断有一定价值,可明显提高诊断灵敏度和准确性。     

血清肿瘤标志物联合检测在非小细胞肺癌诊断和预后评估中的价值

目的 探讨血清肿瘤标志物微小RNA-21(miRNA-21)、癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCCAg)联合检测在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断和预后评估中的应用价值。方法 收集2015年6月至2016年12月在日照市人民医院初次确诊的118例NSCLC患者(恶性肿瘤组)为研究对象,另选取同期来医院就诊的50例肺良性病变患者及50例健康志愿者为良性对照组及正常对照组。采用实时荧光定量PCR法、免疫化学发光法检测三组人群血清miRNA-21、CEA、SCCAg水平,回顾性统计分析血清miRNA-21、CEA、SCCAg联合检测在NSCLC诊断和预后评估中的价值。结果 恶性肿瘤组血清miRNA-21、CEA、SCCAg水平明显高于良性对照组和正常对照组(P<0.01),良性对照组和正常对照组血清水平比较差异无统计学意义(P>0.05);NSCLC血清miRNA-21、CEA、SCCAg水平与患者性别、年龄无明显相关性(P>0.05),NSCLC患者肿瘤直径>3 cm、临床高分期、低分化、复发、转移及治疗前血清miRNA-21、CEA、SCCAg水平明显高于肿瘤...     

改进的PCR在抑癌基因启动子CpG岛甲基化检测中的应用

目的改进聚合酶链反应(PCR),并检验改进后的方法在甲基化检测中的可行性。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7,提取基因组DNA,利用亚硫酸氢盐测序法,用常规、降落及改进PCR分别扩增,比较扩增效果,PCR产物纯化回收后,TA克隆入载体pGEM-T,转化大肠杆菌(E.coliDH5α),筛选阳性克隆,经PCR扩增鉴定后获得阳性重组质粒,测序比对。结果改进后PCR与常规、降落PCR相比,扩增效率增高,二聚体及非特异性扩增减少;测序结果显示,MCF-7细胞基因组DNA中,RASSF lA基因启动子CpG岛是高甲基化的,E-cadherin基因启动子CpG岛未呈现高甲基化状态。结论改进后方法提高了以PCR为基础的甲基化分析的可行性,更适用于基因甲基化状态的检测,并为扩增富含CG的基因启动子区域提供参考。     

非小细胞肺癌中p16基因甲基化的临床分析

目的：研究非小细胞肺癌中p16基因甲基化的表达,分析p16基因甲基化与临床、病理资料之间的相关性。方法对61例经手术切除且病理确诊的非小细胞肺癌在术中提取新鲜癌组织和癌旁组织样本冷冻保存,提取DNA后经重亚硫酸盐修饰,用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测癌和癌旁组织中p16基因甲基化状态。结合临床及病理资料对实验结果进行统计学分析。结果非小细胞肺癌和癌旁组织中出现p16基因甲基化的阳性率分别为11.48%（7/61）和1.64%（1/61）（P＞0.05）。不同的病理分型、分化程度、TNM分期、淋巴结转移程度及吸烟指数间p16基因甲基化状态差异无统计学意义（P＞0.05）。结论非小细胞肺癌组织中存在p16基因甲基化。     

改进的PCR在抑癌基因启动子CpG岛甲基化检测中的应用

目的改进聚合酶链反应（PCR）,并检验改进后的方法在甲基化检测中的可行性。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7,提取基因组DNA,利用亚硫酸氢盐测序法,用常规、降落及改进PCR分别扩增,比较扩增效果,PCR产物纯化回收后,TA克隆入载体pGEM-T,转化大肠杆菌（E．coli DH5α）,筛选阳性克降,经PCR扩增鉴定后获得阳性重组质粒,测序比对。结果改进后PCR与常规、降落PCR相比,扩增效率增高,二聚体及非特异性扩增减少;测序结果显示,MCF-7细胞基因组DNA中,RASSFIA基因启动子CpG岛是高甲基化的,E-cadherin基因启动子CpG岛末呈现高甲基化状态。结论改进后方法提高了以PCR为基础的甲基化分析的可行性,更适用于基因甲基化状态的检测,并为扩增富含CG的基因启动子区域提供参考。     

非小细胞肺癌患者血浆纤维蛋白原检测的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆纤维蛋白原水平与肺癌临床病理特征关系及预后的相关性。方法对55例NSCLC患者及20例健康人的血浆纤维蛋白原分别进行测定。结果NSCLC患者血浆纤维蛋白原水平显著高于健康对照组（P〈0．01）,肺癌患者血浆纤维蛋白原水平与患者的病理类型、TNM分期之间无明显关系。NSCLC患者血浆纤维蛋白原水平与其生存期之间有显著的负相关（r=-0．37,P〈0．01）。结论NSCLC患者存在血浆纤维蛋白原水平增高,血液存在高凝状态;血浆纤维蛋白原水平与患者的生存期呈负相关,血浆纤维蛋白原是反映NSCLC患者预后的重要指标。     

非小细胞肺癌患者血浆纤维蛋白原检测的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆纤维蛋白原水平与肺癌临床病理特征关系及预后的相关性。方法对55例NSCLC患者及20例健康人的血浆纤维蛋白原分别进行测定。结果NSCLC患者血浆纤维蛋白原水平显著高于健康对照组(P<0.01),肺癌患者血浆纤维蛋白原水平与患者的病理类型、TNM分期之间无明显关系。NSCLC患者血浆纤维蛋白原水平与其生存期之间有显著的负相关(r=-0.37,P<0.01)。结论NSCLC患者存在血浆纤维蛋白原水平增高,血液存在高凝状态;血浆纤维蛋白原水平与患者的生存期呈负相关,血浆纤维蛋白原是反映NSCLC患者预后的重要指标。     

血清miR-6801在非小细胞肺癌辅助诊断中的临床意义

目的探讨血清miR-6801在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达水平及其在NSCLC辅助诊断中的临床意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测40例健康人和78例NSCLC患者血清中miR-6801的表达量,并构建受试者操作特征(ROC)曲线计算血清miR-6801的灵敏度和特异度。结果 NSCLC患者血清中miR-6801的表达水平显著低于健康者,差异有统计学意义(P0.05);血清miR-6801在Ⅲ期+Ⅳ期中的表达水平显著低于Ⅰ期+Ⅱ期(P0.05);血清miR-6801对NSCLC检测的灵敏度为51.9%;miR-6801对Ⅰ期、Ⅱ期NSCLC检测的灵敏度为40.6%。结论 NSCLC患者miR-6801的检测对于NSCLC的辅助诊断和早期诊断有一定的临床应用价值。     

非小细胞肺癌患者血清中p53蛋白检测的临床意义

目的研究非小细胞肺癌（NsCLC）患者血清中p53蛋白检测的临床意义。方法收集非小细胞肺癌（NScLC）患者及体检健康者的血清,采用双抗体夹心生物素一亲和素酶联免疫吸附方法（ABC—ELISA）测定血清中p53蛋白水平。结果手术组手术前血清中p53蛋白水平与手术后相比,差异有统计学意义（P〈0．01）;化疗有效组患者血清中p53蛋白水平均低于化疗前和化疗无效组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论检测血清中p53蛋白水平,对NSCLC的诊断、治疗效果评价和预后估计有一定的临床意义。     

非小细胞肺癌放疗前后血清肿瘤标记物的改变及其临床意义

目的观察非小细胞肺癌（NSCLC）放疗前后血清CEA、CYFRA21-1、NSE的变化,探讨血清肿瘤标记物的改变能否用于评价放疗疗效。方法选取58例接受放射治疗的非小细胞肺癌病例（其中22例为局部晚期患者行胸部原发灶放疗,12例行骨转移放疗,24例行脑转移放疗）,所选病例放疗前肿瘤标记物均高于正常参考值,分别记录放疗前与放疗后血清CEA、NSE、CYFRA21-1的数值,并用Wilcoxon秩检验进行统计分析,以p〈0.05为有统计学意义。结果 22例胸部放疗患者放疗后血清CEA、NSE、CYFRA21-1水平较放疗前降低（P值分别为0.046,0.003,0.002）,12例骨转移患者放疗后血清CEA、NSE、CYFRA21-1水平较放疗前降低（P值分别为0.05,0.015,0.017）,24例肺癌脑转移患者放疗前后血清CEA、NSE、CYFRA21-1水平无统计学差异（P〉0.05）。结论血清CEA、CYFRA21-1、NSE水平可以用于非小细胞肺癌胸部放疗及骨转移放疗后的疗效评价。     

3种肿瘤标志物联合检测对非小细胞肺癌诊断的临床应用价值

目的：探讨溶血磷脂酸(LPA)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)及糖类抗原19-9(CA19-9)联合检测对非小细胞肺癌(NSCLC)诊断的临床价值。方法对102例 NSCLC 患者(NSCLC 组)、63例肺良性疾病患者(肺良性疾病组)、50例体检健康者(健康对照组)的血清 LPA、TSGF 和 CA19-9水平进行测定,分析3种肿瘤标志物联合检测对 NSCLC 的诊断价值。结果NSCLC 组血清 LPA、TSGF、CA19-9水平高于肺良性疾病组与健康对照组,差异均有统计学意义(均 P <0.05)。LPA、TSGF 和CA19-9联合检测的灵敏度和特异度分别为68.63%、37.17%,其灵敏度高于单项检测和2项联合检测。结论肿瘤标志物联合检测可提高对 NSCLC 诊断的灵敏度,为 NSCLC 的诊断提供可靠的实验依据。     

小细胞肺癌患者血清胃泌素释放肽前体检测的临床意义

目的探讨血清肿瘤标志物胃泌素释放肽前体(ProGRP)在小细胞肺癌(SCLC)与非小细胞肺癌(NSCLC)鉴别诊断以及化疗效评估中的临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测210例健康人、200例肺部良性疾病患者、260例NSCLC患者和182例SCLC患者化疗前后血清中ProGRP水平。结果 SCLC患者血清中ProGRP水平明显高于NSCLC组、健康对照组和肺部良性疾病组(P0.01)。ProGRP对SCLC检测的敏感性为56.3%,特异性为92.6%;SCLC患者经过2个周期化疗后,ProGRP水平明显低于化疗前(P0.01)。结论肿瘤标志物ProGRP对于SCLC的辅助诊断、鉴别诊断以及化疗效评估有非常重要的临床指导意义。     

非小细胞肺癌血清miR-125b水平变化及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中miR-125b的表达水平变化及其在NSCLC辅助诊断和疗效评估中的临床应用价值。方法采用实时荧光定量PCR法检测102例NSCLC患者、45例肺部良性疾病患者和42例健康对照者血清中miR-125b的表达量。结果 NSCLC患者化疗前血清中miR-125b的表达水平明显高于健康人和肺部良性疾病组(P0.05);血清miR-125b在Ⅲ期+Ⅳ期中的表达水平显著高于Ⅰ期+Ⅱ期(P0.01)。与化疗前比较,晚期NSCLC患者化疗2个周期后,血清中miR-125b的表达量明显降低(P0.05)。结论血清miR-125b的检测对于NSCLC的辅助诊断和化疗疗效评价有一定的临床应用价值。     

非小细胞肺癌患者血清中MALAT1表达水平及其临床意义

目的探讨肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达水平及其诊断价值。方法提取60例NSCLC患者、42例肺良性病变患者及50例健康人血清中的总RNA,用Taq Man实时荧光定量RT-PCR检测MALAT1基因的表达水平并分析其与NSCLC患者临床病理因素的关系,以受试者工作特征曲线(ROC)分析血清MALAT1的诊断效能。结果肺癌组血清MALAT1相对表达水平(0.51±0.09)低于肺良性病变组(0.80±0.12)及健康人对照组(1.01±0.30),差异有统计学意义(q分别为13.95、12.27,P0.01);肺良性病变组血清MALAT1表达水平低于健康人对照组(q=10.24,P0.01);腺癌患者血清MALAT1相对表达量(0.57±0.04)较鳞癌患者(0.45±0.07)明显增高(t=4.260,P0.01),而与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分布部位无显著相关性(P0.05);ROC曲线下面积(AUCROC)为0.956,当cut off值为0.62时,敏感性和特异性分别是87.5%和94.1%,诊断指数为181.6%。结论血清MALAT1检测效能好,可用于NSCLC的诊断及病理类型的鉴别。     

血清癌胚抗原与溶血磷脂酸联合检测在非小细胞肺癌诊断中的应用价值

目的探讨血清癌胚抗原(CEA)与溶血磷脂酸(LPA)联合检测在非小细胞肺癌诊断中的应用价值。方法选取2013年1月至2015年6月该院收治的85例非小细胞肺癌患者作为非小细胞肺癌组。另外,选取同期80例肺炎患者作为肺炎组,以及80例健康体检者作为健康对照组。分别采用酶联免疫吸附法和免疫发光法测定上述人群的血清LPA和CEA水平。比较不同组间人群血清CEA与LPA水平,不同病理类型的非小细胞肺癌患者血清指标阳性率,以及CEA和LPA单独及联合检测用于非小细胞肺癌诊断的效能。结果非小细胞肺癌组患者血清CEA、LPA水平[(23.5±17.2)ng/mL、(9.8±2.4)μmol/L]高于肺炎组患者[(2.8±1.1)ng/mL、(1.8±0.4)μmol/L]和健康对照组患者[(2.3±0.8)ng/mL、(1.6±0.4)μmol/L],差异有统计学意义(P0.05);腺癌组患者血清CEA阳性检测率(68.3%)显著高于鳞状细胞癌组(32.4%)和组织未分型组患者(40.4%),差异有统计学意义(P0.05);血清CEA与LPA联合检测的准确度(69.4%)和灵敏度(61.2%)高于CEA、LPA单独检测的准确度、灵敏度;联合检测的特异度(73.8%)低于CEA、LPA单独检测的特异度(77.5%、75.6%)。结论血清CEA与LPA联合检测有利于提高非小细胞肺癌诊断率,值得临床推广应用。