TRAIL、Caspase-8和NF-κB蛋白在人骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨TRAIL、Caspase-8和NF—κB在人骨肉瘤组织及骨软骨瘤组织中的表达规律及其与骨肉瘤细胞凋亡的相互关系。方法应用免疫组化方法,检测TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白在43例骨肉瘤及15例骨软骨瘤中的表达,并经图像分析系统测量TRAIL、Caspase-8和NF—κB蛋白的平均光密度（0D）值;用TUNEL方法检测骨肉瘤及骨软骨瘤中细胞凋亡。结果TRAIL、Caspase-8蛋白在骨肉瘤中的阳性表达均低于骨软骨瘤组织（P〈0．05）;而NF—κB蛋白在骨肉瘤中的表达高于骨软骨瘤（P〈0．05）。TRATL与Caspase-8蛋白在骨肉瘤中表达呈正相关（P〈0．01）;而TRATL与NF-κB蛋白在骨肉瘤中表达呈负相关（P〈0．01）。骨肉瘤组细胞凋亡指数（AI）显著低于骨软骨瘤组（P〈0．05）;TRAIL、Caspase-8蛋白表达与细胞凋亡均呈正相关（P〈0．01）;而NF—κB蛋白表达与骨肉瘤细胞凋亡呈负相关（P〈0．01）。结论TRAIL基因可能是诱导骨肉瘤细胞凋亡的分子基础,参与了其发生发展过程中细胞凋亡的调控。Caspase-8作为影响细胞凋亡过程的因子,在骨肉瘤发生、发展中发挥作用。NF-κB在骨肉瘤细胞增殖与凋亡中具有重要作用。TRAIL、Caspase-8蛋白呈低表达,可能受NF—κB高表达的调控而不能诱导细胞凋亡。提示三者在骨肉瘤的发生、发展中起协同作用。     

骨肉瘤组织Livin和Caspase-3表达及其临床意义

目的:探讨骨肉瘤组织Livin和Caspase-3的表达及其临床意义。方法:用SABC免疫组化方法检测Livin和Caspase-3在45例骨肉瘤及30例骨软骨瘤组织中的表达。结果:Livin在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为62.2%和3.3%,P=0.000;Caspase-3在骨肉瘤和骨软骨瘤组织中阳性表达率分别为35.6%和83.3%,P=0.001。骨肉瘤组织中Livin和Caspase-3的表达呈显著负相关,r=-0.666,P=0.000。Livin的高表达与骨肉瘤组织分型无关,与Price病理分级和肺转移有关,Caspase-3的低表达与分化程度及肺转移有关。结论:骨肉瘤组织中存在Livin表达增强并伴有Caspase-3表达减低。联合检测Livin和Caspase-3的表达将对骨肉瘤的早期诊断,判定恶性程度和预后具有指导意义。     

VEGF与PTEN在骨肉瘤中的表达及临床意义

[目的]研究骨肉瘤组织中VEGF和PTEN的表达及相关性，为治疗骨肉瘤与评估预后提供理论依据。[方法]应用免疫组织化学方法对40例骨肉瘤和20例骨软骨瘤标本进行检测，并利用SPSS12．0软件进行数据分析其表达意义和相关性。[结果]骨肉瘤中VEGF表达率为57．5％（23／40），在骨软骨瘤中不表达。VEGF在骨肉瘤和骨软骨瘤中阳性表达率有显著性差异（x^2=18．65，P〈0．05）。骨肉瘤中PTEN表达率为55．0％（22／40），在骨软骨瘤中表达率为90．0％（18／20）。在骨肉瘤和骨软骨瘤中阳性表达率有显著性差异（X^2=7．35．P〈0．05）。VEGF和PTEN在骨肉瘤中的阳性表达呈负相关（r=-0．3710，P=0．0189）。[结论]联合检测骨肉瘤组织PTEN、VEGF，作为判定骨肉瘤侵袭转移能力的一项客观指标，可能对骨肉瘤的预后判断具有重要意义，PTEN表达阳性而VEGF表达阴性者，可能预后较好。     

Skp2 、p27 在骨肉瘤中的表达及其临床意义

 目的 探讨骨肉瘤中Skp2和p27蛋白的表达与患者临床病理和预后的关系以及两种蛋白之间的相关性。方法 用免疫组织化学SP法检测16例骨软骨瘤和48例骨肉瘤组织中Skp2和p27蛋白的表达情况。结果 Skp2蛋白在骨软骨瘤中的表达均为阴性，而在骨肉瘤中的表达阳性率为43．75％（21／48），后者的阳性率显著高于前者（P〈0．01）。Skp2蛋白表达与临床分期、肺转移及分化程度显著正相关（P〈0．05）。p27蛋白在骨软骨瘤、骨肉瘤中阳性率分别为81．25％（13／16）、47．92％（23／48），两者比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。p27蛋白表达与临床分期、肺转移及分化程度呈负相关（P〈0．05）。Skp2蛋白在骨肉瘤中表达与p27蛋白呈负相关（P〈0．05）。结论 Skp2可能通过对细胞周期抑制因子p27蛋白的降解而参与骨肉瘤的发生、发展，联合检测Skp2及p27蛋白的表达对骨肉瘤患者的早期诊断，判定恶性程度及预后具有指导意义。     

Notch1、Dll4蛋白在骨肉瘤的表达及临床意义

目的探讨Notch1及其配体Dll4在骨肉瘤的表达及其和血管生成的关系。方法采用免疫组化SP法检测62例骨肉瘤Notch1和Dll4蛋白的表达,并根据CD34染色结果计数微血管密度（MVD）。43例骨软骨瘤标本作为对照。结果（1）Notch1和Dll4在骨肉瘤表达的阳性率为85．5％、88．7％,骨软骨瘤表达阳性率为21．2％、23．6％,差异具有显著性（P〈0．05）;且Notch1和Dll4表达存在正相关（P〈0．05,r=0．842）。（2）Notch1和Dll4蛋白的阳性表达与骨肉瘤组织分化程度、Ennecking分期和有无转移密切相关（P〈0．05）。（3）Notch1或Dll4高表达组MVD显著高于低表达组（P〈0．05）。结论Notch1、Dll4在骨肉瘤组织中的表达上调与血管生成密切相关,可能在骨肉瘤发生、发展中起重要作用。     

p53基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨p53基因在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组化方法（s—P法）测定p53蛋白在36例骨肉瘤和17例骨软骨瘤组织中的表达,并随访骨肉瘤患者生存时间。36例骨肉瘤中男19例,女17例,年龄平均19．9岁。Enneking分期II,3例,Ⅱ,27例,Ⅲ,6例,并发病理性骨折7例。结果-36例骨肉瘤随访时间平均3年6个月,其中存活3年及以上者13例,存活3年以下者23例,死亡病例均因骨肉瘤远处转移全身衰竭致死。36例骨肉瘤p53蛋白阳性表达率为52．8％,显著高于骨软骨瘤组,有显著性差异（P〈0．01）。p53蛋白表达在不同Enneking外科分期组间无显著性差异（P〉0．05）,在生存时间3年以上组及3年以下组间有显著性差异（P〈0．01）。结论：p53基因突变对骨肉瘤的发病可能产生影响,对患者预后评估具有一定价值。     

P53、P16基因在骨肉瘤中表达及临床相关性研究

目的探讨P53、P16抑癌基因在骨肿瘤中的表达及临床相关性研究。方法采用免疫组化染色及原位杂交方法检测105例骨肿瘤P53、P16蛋白及基因的表达，其中骨肉瘤85例、骨软骨瘤20例，并对骨肉瘤主要临床资料和病理分级参数进行比较，用x^2检验进行统计学处理。结果骨肉瘤中P53蛋白及基因的阳性表达率为64．7％、65．9％，明显高于骨软骨瘤阳性表达率20．0％、20．0％，有显著性差异（P〈0．0005）呈正相关。骨肉瘤中P16蛋白及基因的阳性表达率为52．9％、54．1％，明显低于骨软骨瘤阳性表达率85．0％、90．0％，两者之间有显著性差异（P〈0．005，0．01），呈负相关。P53蛋白及基因在骨肉瘤Ⅱb期、Ⅲ期的表达率明显高于Ⅰ、Ⅱa期（P〈0．0005）。病理分级P53蛋白及基因阳性表达率分别为Ⅰ级35．0％、40％；Ⅱ级64．7％、64．7％；Ⅲ级83．8％、83．8％，有显著性差异（P〈0．005）。软组织浸润和转移P53蛋白及基因阳性表达率明显高于非浸润和非转移组（P〈0．0001，0．01）。P16蛋白及基因在骨肉瘤Ⅰ、Ⅱa期的表达率明显高于Ⅱb期、Ⅲ期（P〈0．0005，0．001）。病理分级P16蛋白及基因阳性表达率分别为Ⅰ级85．0％、85．0％；Ⅱ级52．9％、55．9％；Ⅲ级32．3％、32．3％，有显著性差异（P〈0．001）。软组织浸润和转移P16蛋白及基因阳性表达率明显低于非浸润和非转移组（P〈0．0005，0．005）。结论P53蛋白及基因在骨肉瘤中不同程度异常表达与骨肉瘤的病理分级、临床分期和浸润、转移密切相关，P16蛋白及基因在骨肉瘤中的异常表达与骨肉瘤的发生、发展中起重要作用，提示两种基因均可作为判断骨肉瘤进展及患者预后参考指标。     

Livin在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其与FHIT、Caspase-3相关性的初步研究

目的研究Livin在皮肤鳞状细胞癌（SCC）中的表达及其与脆性组氨酸三联体（FHIT）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达的相关性。方法应用免疫组织化学SP法检测Livin、FHIT、Caspase-3蛋白在48例SCC、20例慢性溃疡及12例正常皮肤组织中的表达。结果Livin在SCC的表达（33／48）明显高于慢性溃疡组织（3／20）及正常组织（0／12）（P〈0．01）;Caspase-3及FHIT在SCC中的表达明显低于正常皮肤和慢性溃疡组织（P〈0．01）;Livin、Caspase-3表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移差异有统计学意义（P〈0．05）。Livin、Caspase-3的表达与患者的年龄、性别以及肿瘤大小差异无统计学意义（P〉0．05）。SCC组织中Livin与Caspase-3（rs=-0．509,P：0．004）、FHIT（rs=-0．413,P=0．023）的表达呈负相关。结论Livin、FHIT、Caspase-3在SCC中的异常表达可能与SCC的发生、发展有关,并有可能成为SCC的预防和治疗的靶标。     

p27KIP1和CyclinE在骨肉瘤中表达的意义

目的：研究p27^KIP1和CyclinE蛋白在骨肉瘤中的表达，探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法：应用免疫组化S－P方法检测28例骨肉瘤石蜡标本中p27^KIP1和CyclinE蛋白的表达情况。结果：p27^KIP1蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为42．9％，在对照组20例骨软骨瘤中为75．0％，骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异（P＜0．05）。CyclinE蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为67．9％，在20例骨软骨瘤中为10．0％，骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异（P＜0．01）。p27^KIP1蛋白在骨肉瘤中的表达阴性率为57．1％，与CyclinE蛋白在骨肉瘤中表达阴性率67．9％相比二者差异不显著（P＞0．05）。结论：p27^KIP1在骨肉瘤中表达降低，CyclinE在骨肉瘤中高表达，二者与骨肉瘤发生机制有关，且具有相关性。     

vWF在骨肉瘤中的表达及与肺转移的关系

目的检测骨肉瘤组织中血管性血友病因子（vWF）的表达，分析vWF的表达与骨肉瘤肺转移的关系。方法应用免疫组织化学SABC方法检测10例骨软骨瘤和54例骨肉瘤组织中的vWF表达情况。结果vWF蛋白在骨软骨瘤细胞中的表达均阴性，54例骨肉瘤患者中vWF阳性表达率为77．78％（42／54），且在转移骨肉瘤中比在原发灶中表达明显增加，两者差异有显著性（P〈0．01）。vWF在骨肉瘤中的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分型、肿瘤组织微血管密度无关，和临床分期，肺转移正相关。结论vWF在骨肉瘤组织中有不同程度的高表达，vWF表达可能潜在地导致骨肉瘤转移，其可作为骨肉瘤转移的一个新指标。     

凋亡相关基因Livin mRNA在骨肉瘤中的表达及意义

目的 探讨凋亡相关基因Livin mRNA在骨肉瘤的表达及其与骨肉瘤发生发展的关系.方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测47例骨肉瘤组织中Livin mRNA的表达情况.结合临床资料进行分析.结果 Livin mRNA在经病理证实的20例肿瘤外5cm的正常骨组织中均未检出,47例骨肉瘤组织中29例表达阳性,Livin mRNA的表达与Enneking分期有关（P〈0.05）,而与肿瘤部位和Dahlin病理分型无关（P〉0.05）.结论 Livin mRNA在骨肉瘤组织中的特异性表达可能在骨肉瘤的发生发展中起重要作用.阻断Livin mRNA的表达可为骨肉瘤的治疗提供新的途径.     

乳腺癌中Livin 和Survivin基因mRNA的表达及其临床意义

目的 探讨凋亡抑制基因Livin和Survivin在乳腺癌组织中的mRNA水平表达情况、两者间的相关性及其临床意义。方法 采用实时定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)检测乳腺癌组织和癌旁正常组织中Livin和Survivin基因的mRNA表达情况。结果 61例乳腺癌中Survivin和Livin基因mRNA水平的阳性表达率分别是62.3%(38例)和54.1%(33例),Survivin的表达与临床分期、淋巴结转移和HER-2表达有关(P＜0.05),Livin的表达仅与淋巴结转移有关(P＜0.05)。在38例Survivin阳性表达病例中有21例Livin呈阳性表达,而两者之间不存在相关性(P＞0.05)。Survivin基因和Livin基因阳性表达患者3年总生存率明显低于阴性表达患者(P＜0.001和P＜0.001)。结论 乳腺癌组织中Survivin和Livin基因在mRNA水平表达上调与乳腺癌的发生发展密切相关,且两者与淋巴结转移的相关表明它们的高表达与乳腺癌较差预后有关,并可能成为乳腺癌中新的治疗靶点。     

Livin在小细胞肺癌组织中的表达

目的：探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族中的新成员Livin在小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）组织中的表达及其与临床病理的关系。方法：采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测SCLC组织中LivinαmRNA和LivinβmRNA的表达,并用western blot分析Livin蛋白的表达。结果：30例SCLC组织中有19例Livin表达,阳性率为63.33%,其表达与患者年龄、性别、肿瘤的TNM分期、淋巴结转移和肿瘤大小均无关（P〉0.05）。而16例癌旁正常肺组织中Livin低表达,阳性率为12.5%（P〈0.01）。结论：Livin在SCLC组织中异常表达,有望成为小细胞肺癌诊断和基因治疗的新靶点。     

Livin与Smac在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制因子Livin和凋亡促进因子Smac在鼻咽癌组织的表达及相关性,分析其与鼻咽癌转移复发的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测80例鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎组织中Livin和Smac蛋白的表达情况。结果：80例鼻咽癌组织中Livin蛋白表达的阳性率显著高于鼻咽慢性炎组织（P=0.000）,癌组织中Smac表达的阳性率显著低于鼻咽慢性炎组织（P=0.000）。鼻咽癌组织中Livin的表达与颈淋巴结转移、远处转移、复发及临床分期密切相关（P〈0.05）;Smac的表达与T分期、颈淋巴结转移、远处转移、复发及临床分期密切相关（P〈0.05）。Livin和Smac的表达呈显著负相关（γ=-0.368,P=0.001）。结论：Livin的高表达及Smac的失活可能在鼻咽癌的发生及进展中起着重要作用。     

凋亡相关基因Livin、Smac／DIABLO在胃癌组织中的表达及其意义

背景与目的：作为一种促凋亡基因,Smac／DIABLO与凋亡抑制基因Livin相互作用,共同参与调控细胞癌变的起始及发展。本研究检测凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac／DIABLO在胃癌组织中的表达．观察其表达水平与胃癌各临床病理因素的关系。方法：应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法检测75例手术切除的胃癌组织、20例癌旁组织及正常胃组织中Livin mRNA和Smac／DIABLO mRNA的表达,Westernblot结合及免疫组化SP法检测两种蛋白的表达及组织学定位。结果：正常胃组织及癌旁组织中均无Livin mRNA表达,胃癌组织中Livin mRNA表达显著上调,相对表达量为6．374±4．759,低分化胃腺癌组织及有淋巴结转移组的相对表达量显著高于中高分化胃腺癌组织（P〈0．05）,其表达与肿瘤大小、浸润深度及TNM分期无关,Livin蛋白的表达结果与之相符;胃癌组织中Smac／DIABLO mRNA的表达（0．731±0．420）低于正常胃组织（1．104±0．276）及癌旁组织（1．061±0．737）,但差异无统计学意义（P〉0．05）,Smac／DIABLO mRNA表达水平与胃癌各临床病理因素无关;Smac／DIABLO蛋白表达与mRNA表达存在差异。Smac／DIABLO在肠型胃癌（84．38％）与弥漫型胃癌（60．65％）中的表达有一定差异（P〈0．05）。结论：Livin与Smac／DIABLO在不同阶段和不同病理类型胃癌中的表达及相关性存在差异,Livin基因高表达与胃癌的发生及分化转移密切相关。     

胃癌组织中Livin蛋白的表达及相关性研究

目的探讨胃癌组织中Livin、Fas、FasL蛋白的表达情况及它们之间的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测41例胃癌和10cm以外的癌旁正常胃组织中Livin、Fas和FasL蛋白的表达情况。结果Livin在胃癌组织中的阳性率为78．5％,在正常胃组织中的阳性率为14．6％,两者相比有显著性差异（P〈0．05）。Livin的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位、浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴转移、远处转移和IUCC分期均无明显关系（P〉0．05）,与Fas,FasL的表达无明显相关性（P〉0．05）。结论Livin的过表达与胃癌的形成密切相关。     

Livin与Survivin在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Livin和Survivin在鼻咽癌组织中的表达及相关性,分析其与鼻咽癌转移复发的关系。方法应用免疫组织化学Envision两步法检测80例鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎组织中Livin和Survivin蛋白的表达情况。结果 80例鼻咽癌组织中Livin和Survivin蛋白表达的阳性率显著高于鼻咽慢性炎组织(P=0.000)。鼻咽癌组织中Livin的表达与颈淋巴结转移、远处转移、复发及临床分期密切相关(P<0.05);Survivin的表达与T分期、颈淋巴结转移、远处转移、复发及临床分期密切相关(P<0.05)。Livin和Survivin的表达呈显著正相关(γ=0.239,P=0.033)。结论 Livin和Survivin的高表达可能在鼻咽癌的发生及进展中起着重要作用。     

乳腺癌中Livin的表达与癌细胞凋亡相关性的研究

目的：探讨凋亡抑制基因Livin在乳腺癌组织中的表达与细胞凋亡的关系。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测乳腺癌组织中LivinmRNA的表达,并用westernblot分析Livin蛋白的表达。应用流式细胞术检测乳腺癌细胞的凋亡水平。结果：40例乳腺癌组织中有26例Livin表达,阳性率为65．00％,而13例癌旁正常乳腺组织中Livin低表达,阳性率为15．39％（P〈0．01）。40例乳腺癌组织中,26例乳腺癌组织Livin表达阳性者,肿瘤细胞早期细胞凋亡率为（4．27±0．72）％;14例Livin表达阴性者,肿瘤细胞早期细胞凋亡率为（4．56±0．76）％,两者比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：Livin在乳腺癌组织中的异常表达与乳腺癌细胞凋亡有关,有望成为乳腺癌基因治疗的新靶点。