胃癌患者TH1/TH2漂移的研究

目的观察胃癌病人外周血TH1/TH2细胞及其细胞因子水平的变化,为肿瘤的免疫治疗提供实验依据.方法应用ELISPOT法检测TH1/TH2细胞,ELISA法检测细胞因子.结果胃癌病人TH1细胞及其细胞因子降低,TH2细胞及其细胞因子升高,TH1/TH2比值降低.正常人外周血单个核细胞加IL-12和抗IL-4单抗组,TH1细胞阳性率增加,TH2细胞阳性率降低,TH1/TH2比值升高;加IL-4和抗IFN-γ单抗组TH1细胞阳性率降低,TH2细胞阳性率升高,TH1/TH2比值降低(P＜0.05).结论胃癌病人TH1细胞受抑制,TH2细胞亢进,导致机体的抗肿瘤免疫应答受抑制.利用IL-12诱导TH1细胞的增殖,有可能恢复TH1/TH2平衡.     

CpG-ODN2216刺激健康人外周血淋巴细胞TH1/TH2细胞因子的表达

目的 观察CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞（PBMC）中TH1/TH2淋巴细胞的极化作用,以及培养上清液中TH1/TH2型细胞因子的水平.方法 取健康献血员外周血用淋巴细胞分离液分离PBMC,与CpG-ODN2216共培养24 h,流式细胞仪检测PBMC中TH1/TH2淋巴细胞的改变,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的释放水平.结果 CpG-ODN2216能刺激淋巴细胞向TH1、Tc1转化,对TH2无明显的刺激作用.培养上清液中IFN-γ的表达水平显著增高（P＜0.01）,IL-2、IL-4和IL-10无明显改变（P＞0.05）.结论 CpG-ODN2216可以促进外周血淋巴细胞向TH1、Tc1极化,并诱导PBMC产生高水平的TH1型细胞因子IFN-γ,介导TH1型免疫应答.     

TH细胞检测研究的现状

T淋巴细胞是高度异质性的群体,根据发育过程中出现的分化抗原的不同,分为CD4^ 和CD8^ T细胞,这种分类对于区分T细胞的异质性有一定的价值。但随着对T细胞功能研究的深入,人们发现,T细胞的功能主要是由其分泌的细胞因子介导的。1986年Mosmann等根据小鼠的CD4^ T细胞克隆产生细胞因子类型的不同,将CD4^ T细胞分为TH1和TH2两种类型,随后Romagnani等人证实人体内也存在相应的TH1和TH2亚群。     

卵巢癌患者TH1／TH2型细胞因子的测定

[目的]探讨THl／TH2型细胞因子水平与卵巢癌患者发生、发展之间的关系。[方法]采用夹心酶联免疫吸附实验和逆转录PCR法,对36例卵巢癌及32例健康对照组外周血淋巴细胞中TH1／TH2型细胞因子的蛋白水平及其mRNA水平进行了测定。[结果]与健康对照组相比,卵巢癌患者外周血淋巴细胞培养上清中的IL-2、IFN-v水平显著降低,而IL-4、IL-6和IL-10则显著增高,具有统计学意义。相应的外周血淋巴细胞mRNA水平与蛋白水平相同。(结论]卵巢癌患者异常分泌的TH1／TH2型细胞因子水平与卵巢癌的发生、发展密切相关。     

流式细胞术检测胎儿红细胞的影响因素探讨

目的 探讨流式细胞术检测胎儿红细胞的影响因素。方法45名健康产妇脐血样本分别用同血型健康人外周血调整为5种浓度,使用抗胎儿血红蛋白（HbF）单克隆抗体,用直接标记和间接标记2种方法分别测定HbF阳性细胞比例．将样本放置24h、48h和7211后再次测定。结果以Fetal Cell Count TM Kit Ⅱ双色标记碳酸酐酶和HbF抗体[碳酸酐酶-异硫氰酸荧光素（CA-FITC）、HbF-藻红蛋白（PE）]为标准,5种浓度的直接标记结果均高于间接标记（P〈0．05）,阳性细胞数低时差异有统计学意义（P〈0．01）。样本放置48h直接标记结果未见明显下降,间接标记结果下降明显,放置72h直接标记结果也有明显下降（P〈0．05）。结论利用流式细胞仪检测母血中胎儿红细胞含量受到标记方法、样本放置时间等因素的影响。较好的方法是采用直接标记法,染色完毕立即检测,最好不要超过3d,样本必须避光保存。     

流式细胞仪检测淋巴细胞亚型中若干问题探讨

对流式细胞仪检测淋巴细胞亚型中可能的影响因素进行探讨，证明可随时取样，存放室温可达４８ｈ，但不应存放冰箱，双色荧光直标试剂优于单色直标试剂，对样品处理，不同试经物干扰等进行了实验探讨，简述了正确设门及图象分析中的注意事项。     

流式细胞术计数血小板

目的　建立流式细胞仪计数血小板的实验方法。方法　用PE标记抗人CD61抗体标记全血中血小板 ,同时加入 5 μl已知浓度的FITC 微球溶液。流式细胞仪检测血小板 (FL2 )和微球 (FL1)的数量 ,换算出患者血小板浓度。结果　流式细胞仪法与血细胞计数仪法计数结果无显著性差异 ,低血小板组两法相关程度低于正常血小板组 ,提示流式细胞仪计数血小板能排除多种干扰因素 ,最低检出血小板量为 0 15 0× 10 9/L。该方法CV =5 4 % (Plt=2 2 0×10 9/L)和 11 1% (Plt=1 5 7× 10 9/L)。结论　流式细胞仪法适合对低血小板标本血小板的精确计数。     

流式细胞术检测白血病微小残留病的研究进展

流式细胞术（flow cytometry，FCM）具有高度的精密性，测定数据可靠，既可分析单个细胞，也可区分群体细胞，利用白血病免疫表型标志与正常细胞的不同，通过多参数分析，可从以正常细胞中区分白血病细胞，具有快速、简便、定量和灵敏度高等优点，为白血病微小残留病（MRD）的检测提供了一种新颖可靠的手段，从而给白血病治疗策略的制定提供了依据。     

流式细胞术与三种活化血小板检测方法的比较

血小板活化与多种血栓性疾病有关。血液中活化血小板增高可作为动脉血管病，如脑梗死、心肌梗死，外周血管病等局部血栓形成的标志物。活化血小板的测定，对于血栓形成的预防、诊断及治疗有着重要的意义。近年来，随着流式细胞仪应用的普及，使得活化血小板的检测成为可能。目前，活化血小板的测定方法主要有传统的血浆法、全血法与较新应用的内固定法。本研究对3种方法的具体操作步骤和方法进行比较，旨在全面评价和筛选最适合于临床实验室日常应用的活化血小板检测方法。     

流式细胞术-白血病免疫分型规范化

近十年来流式细胞术已被我国各级医院较广泛采用,主要用途之一是测定血液恶性肿瘤的免疫表型。流式细胞术的免疫分型（FCM－IM）可为白血病与淋巴细胞增殖性疾病（LPO）提供准确的数据。国际上公认是诊断血液系统恶性疾病一项不可缺少的标准,还可提供指导治疗的相关信息。图1与图2示某些白血病与LPDs典型的免疫表型。值得注意的是变异是常见的。现提出以下几点注意事项以使实验结果更为可靠并减少实验室间的差异：①用直接免疫标记法及多色分析法。②CD45／SSC设门法优于FSC／SSC设门法,可更清楚地显示不正常细胞群体。在原／幼细胞少时尤为明显。③结论中详细描述不正常细胞群的表型较计算各标志细胞的百分数更为重要。④用直接标记,多色分析法时不再以20％为正常值界线。⑤由于抗体／抗原的多向性,白血病细胞抗原表达的不保真性以及白血病细胞生物学的多变性,单纯依靠FCM术数据勿轻易诊断杂合性或双表型白血病。流式细胞仪不是细胞计数器,其实验结果须结合临床和其它有关信息综合判断。     

流式细胞术用于临床检验中的一些问题

流式细胞仪 (ＦＣＭ)是用于研究细胞生物学的重要工具。其特点是快速、精确、多参数 ,相对定量测定单个细胞膜、胞浆、或核内的多种物质。自上个世纪 70年代以来已较广泛地用于细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学等研究。近年来由于仪器进一步提高了自动化程度便于操作 ,多种单克隆抗体的制备成功以及多种荧光素的应用使ＦＣＭ不仅局限于研究并已较广泛地用于临床诊断。 2 0年前ＦＣＭ在我国还是凤毛麟角 ,如今已有 2 0 0余台分布于全国各大中小城市的科研与医疗机构。ＦＣＭ虽然在我国起步较慢 ,但近年来的发展迅速。很多单位业已开展了不…     

流式细胞术检测培养细胞表面抗原的样品制备方法探讨

目的：探讨不同样品制备方法对贴壁培养细胞表面抗原的影响。方法：应用EDTA、胰酶、细胞刮、联用EDTA及细胞刮制备培养人视网膜色素上皮细胞单细胞悬液。采用流式细胞仪检测人视网膜色素上皮细胞表面HLA—DR及ICAM-1的表达和细胞数。结果：单用EDTA或细胞刮制备的细胞悬液中细胞产量低，胰酶或联用EDTA及细胞刮制备的细胞悬液中细胞产量高（F=263．63，P〈0．001）。胰酶组细胞表面HLA—DR和ICAM-1的荧光强度明显降低，且以HLA—DR抗原下降比例较多（HIA—DR：F=3．77，P=0．022；CD54：F=10．33，P〈0．001）。EDTA组、细胞刮组、EDTA联合细胞刮组间HLA—DR和ICAM-1的荧光强度表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：EDTA联合细胞刮法是贴壁培养细胞制备单细胞悬液的一种好方法。     

流式细胞仪检测网织血小板的要点分析

网织血小板（reticdated platelet，RP）是来源于巨核细胞的细胞颗粒，这种细胞颗粒不含核或DNA成分，却含有少量的RNA，并且保持了合成少量蛋白质的能力人们把这种RNA含量较高的年轻的血小板称之为网织血小板。网织血小板是骨髓新释放进入血液循环的血小板。可以相对准确地反映骨髓血小板生成情况。     

TH1,TH2细胞与外科应激

机体许多因素参与ＴＨ１、ＴＨ２细胞分化和功能的维持。在机体遭受创伤，烧伤，出血、手术等应激性打击以后，ＴＨ１、ＴＨ２细胞反应类型便受到神经－内分泌和其自身分泌的细胞因子的调节。     

流式细胞术检测白血病微小残留病的研究进展

流式细胞术(flow cytometry,FCM)具有高度的精密性,测定数据可靠,既可分析单个细胞,也可区分群体细胞,利用白血病细胞免疫表型标志与正常细胞的不同,通过多参数分析,可以从正常细胞中区分白血病细胞,具有快速、简便、定量和灵敏度高等优点,为白血病微小残留病(MRD)的检测提供了一种新颖可靠的手段,从而给白血病治疗策略的制定提供了依据。     

流式细胞术与显微镜法计数低浓度白细胞

流式细胞术与显微镜法计数低浓度白细胞朱月清，周振英，张军妮，邹元国（江苏省肿瘤防治研究所，南京２１０００９）关键词流式细胞仪，显微镜，白细胞，白细胞过滤器目前，全血经白细胞滤器过滤后白细胞（ＷＢＣ）的去除率国内尚无统一标准。本文参照国外标准：全血白细...     

流式细胞分析检测细胞凋亡的研究进展

流式细胞术是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行高参数的定量分析和分选技术。在基础医学研究领域，流式细胞术测定凋亡过程中细胞所发生的变化，已广泛用于细胞凋亡的定性与定量分析。本文介绍了流式细胞分析检测细胞凋亡的基本原理及最新进展。     

足月妊娠分娩发动时孕妇蜕膜组织中TH1及TH2型细胞的变化

目的研究足月妊娠孕妇分娩前后蜕膜组织中Th1／Th2细胞因子的变化并探讨其在分娩发动中的作用。方法应用流式细胞技术检测孕晚期未临产组（剖宫产组）和临产组蜕膜组织中TH1TH2型细胞因子。结果足月妊娠孕妇蜕膜NK细胞胞内IFN—γ的表达率为临产组明显高于剖宫产组,而IL4的表达率为临产组明显低于剖宫产组,差异有显著性（P〈0．05）。结论分娩发动时,孕妇蜕膜组织中Th1和Th2型细胞发生变化,其机制复杂有待进一步研究。