原花青素联合缺血后处理对H9C2心肌细胞的保护作用

目的观察原花青素（procyanidine,PC）与缺血后处理（ischemic postconditioning,IPO）联合干预H9C2心肌细胞,对其凋亡率及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（P－p38MAPK）的作用。方法将培养的H9C2心肌细胞分为正常对照组（c组）、缺血再灌注组（I／R组）、缺血后处理组（IPO组）、原花青素＋缺血后处理组（Pc＋IP0组）。利用A0－EB染色法检测H9c2心肌细胞的凋亡率;利用Westernb lotting方法检测H9C2心肌细胞P－p38MAPK蛋白表达情况。结果对细胞凋亡率的影响：IPO单独和联合PC干预H9C2心肌细胞0、12h、24h后,各时间点IPO组和PC＋IP0组细胞凋亡率均低于I／R组（P〈0．01）。12h时,PC＋IPO组细胞凋亡率低于IP0组（P〈O．05）。对P—p38MAPK表达的影响：12h时,I／R组表达高于C组（P〈0．01）;PC＋IPO组和IPO组表达低于I／R组（P〈0．01）,同时PC＋IPO组低于IP0组（P〈0．05）。结论IPO单独和联合PC干预均可通过减少心肌细胞凋亡起到心肌保护作用,并且PC联合IP0更有效。该保护作用机制可能与抑制p38MAPK有关。     

甲基莲心碱对H202损伤心肌细胞的保护作用

目的：探讨甲基莲心碱（neferine）对氧化损伤的大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用。方法：分离培养sD乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞过氧化损伤模型,将细胞分为7组,即空白对照组（contr01）、溶剂对照组（DMSO）、氧化损伤组（H202）、氧化损伤加入槲皮素对照组（quercetin＋H202）、氧化损伤加入莲心碱低、中、高浓度组（甲基莲心碱＋H202、甲基莲心碱一M＋H202、甲基莲心碱一H＋H202）。将3001xmol／LH202作用于加入槲皮素及不同浓度甲基莲心碱预培2h的心肌细胞,继续培养24h,以细胞毒四唑盐（MTr）比色试验,乳酸脱氢酶（LDH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—px）、丙二醛（MDA）、流式细胞凋亡率、Caspase酶活性为检测指标。结果：甲基莲心碱呈剂量依赖性降低H202对心肌细胞活力的影响,降低MDA、LDH量,增加细胞GSH—px活性,并显著抑制Caspase一3和9活性,减少细胞凋亡数量,各指标差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：甲基莲心碱可保护和修复过氧化氢诱导的心肌细胞的损伤,其作用可能是通过抗氧化、增加细胞GSH—px活性,进而抑制Caspase一3和9活性,减少细胞凋亡。     

黄芪甲甙保护阿霉素心肌损伤大鼠抗凋亡作用的机制研究

目的 探讨黄芪甲甙（简称黄芪）抗阿霉素所致心肌细胞凋亡的可能机制。方法 取SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄芪3个剂量（低、中、高）组。空白组腹腔注射生理盐水,余4组分别给予阿霉素造模（15mg／kg,隔日腹腔注射1次,共6次）。黄芪3个剂量组同时用不同剂量黄芪甲甙灌胃治疗,空白组和模型组同时给予羧甲基纤维素钠。采用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡。细胞免疫组织化学检测bcl-2、bax蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测bcl-2、bax基因的表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠心肌细胞凋亡发生率增高（P〈0．01）,抑制凋亡因子bcl-2基因及蛋白表达下降（P〈0．01）,而促进凋亡因子bax基因及蛋白表达增强（P〈0．01）,bcl-2／baxmRNA比值降低（P〈0．05）。与模型组比较,黄芪高剂量组大鼠心肌细胞的凋亡率显著下降（P〈0．05）,bcl-2基因及蛋白水平表达增强（P〈0．05）,bax基因及蛋白水平表达下降（P〈0．05）,bcl-2／baxmRNA比值明显上升（P〈0．05）。结论 高剂量黄芪甲甙治疗可以抑制阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与凋亡基因bcl-2表达有关。     

四妙勇安汤合生脉饮对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察四妙勇安汤合生脉饮对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞细胞凋亡的影响,探讨其心肌细胞保护作用。方法采用胰蛋白和胶原酶联合消化的方法原代培养的SD乳鼠心肌细胞,利用高纯氮气建立心肌细胞缺氧／复氧模型。实验分为正常组、模型组和药物干预组（予四妙勇安汤合生脉饮）。采用流式细胞术AnnexinV-FITC／PI双染法检测心肌细胞凋亡率。结果与正常组比较,模型组及药物干预组心肌细胞凋亡率均升高（P〈0．05）。与模型组比较,药物干预组心肌细胞凋亡率下降（P〈0．05）。结论四妙勇安汤合生脉饮对缺氧／复氧后心肌细胞凋亡有保护作用。     

川芎嗪对脂多糖诱导巨噬细胞环氧化酶-2表达和心肌细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪对脂多糖(LPS)诱导RAW264．7小鼠巨噬细胞环氧化酶-2(COX-2)基因表达和活性的影响,进一步研究川芎嗪对脂多糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法采用RT—PCR和免疫印迹检测巨噬细胞COX-2基因表达,酶联免疫分析其活性,并应用荧光显微镜技术对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测,荧光分光光度计测定细胞内钙离子浓度。结果10～mol／L,10^-5mol／L和10^-4mol／L川芎嗪可显著减少LPS刺激的巨噬细胞COX-2 mRNA和蛋白的表达(P<0．05,P<0．01),但不同浓度川芎嗪对COX-2活性无明显作用;10^-5mol／L川芎嗪可显著降低心肌细胞内钙浓度,拮抗LPS诱导的乳鼠心肌细胞凋亡(P<0．05)。结论川芎嗪具有抑制LPS诱导巨噬细胞COX-2表达和乳鼠心肌细胞凋亡的药理学效应。     

芪丹通脉片对急性缺血／再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶系统的影响

目的观察芪丹通脉片对缺血／再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血／再灌注模型组、芪丹通脉片＋缺血／再灌注Ⅰ组、芪丹通脉片＋缺血／再灌注Ⅱ组。大鼠麻醉开胸，结扎冠状动脉前降支40mim，再灌注4h。TUNEL法测定大鼠心肌组织的细胞凋亡，化学比色法检测心肌组织中总的一氧化氮合酶（NOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性，并计算出结构型一氧化氮合酶（cNOS）的活性。结果不同剂量的芪丹通脉片预处理抑制缺血／再灌注大鼠心肌细胞凋亡，其凋亡指数与模型组比较均存在显著差异（P〈0．05，P〈0．01）。与假手术组比较，模型组心肌组织iNOS的活性增加（P〈0．05），cNOS活性降低（P〈0．01）。不同剂量的芪丹通脉片能够抑制心肌缺血／再灌注大鼠iNOS的活性（P〈0．05），增加cNOS活性（P〈0．05，P〈0．01）。结论芪丹通脉片能够抑制缺血／再灌注大鼠心肌细胞凋亡可能与调节心肌组织中NOS的活性有关。     

白英提取液对人肺癌A549细胞凋亡及Fas／FasL基因表达的影响

目的探讨白英提取液（STE）对人肺癌A549细胞凋亡及fas／fasL基因表达的影响。方法体外培养肺癌A549细胞，以0（正常对照组），10，20和40mg／ml STE处理A549细胞48h，并以25mg／L顺铂（DDP）作为阳性对照、采用MTT法检测细胞增殖抑制率，TUNEL法检测凋亡率，半定量RT—PCR检测fas和fasLmRNA表达。结果与正常对照组比较，STE各浓度组细胞增殖抑制率显著上升（P〈0．01），细胞凋亡率明显升高（P〈0．01），基因fasmRNA表达显著上升（P〈0．05或P〈0．01），而fasLmRNA表达明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论STE通过上调fas基因和下调fasL基因表达，诱导细胞凋亡，从而抑制A549细胞增殖。     

水杉总黄酮对胰岛素样生长因子-Ⅰ诱导的乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用

目的：探讨水杉总黄酮（TFM）对胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）诱导的体外培养的乳鼠心肌细胞DNA和RNA合成的影响。方法：体外分离培养乳鼠心肌细胞，分成4组，即正常对照组（C组）、IGF-Ⅰ组、IGF-Ⅰ＋TFM组、IGF-Ⅰ＋月见草油（OBL）阳性对照组，采用细胞CT扫描定量分析心肌细胞的DNA、RNA含量。结果：IGF-Ⅰ组心肌细胞的DNA和RNA合成明显增加，与正常对照组比较，均有显著性差异（P〈0．05）；IGF-Ⅰ＋TFM组心肌细胞的DNA和RNA合成明显低于IGF-Ⅰ组．两组比较差异明显（P〈0．05），与C组接近（P〉0．05）。结论：水杉总黄酮对IGF-Ⅰ诱导的乳鼠心肌细胞的肥大具有抑制作用。     

姜黄提取物对Na2S2O4诱导SK—N—SH细胞凋亡的保护作用

目的观察姜黄提取物对Na2S2O4诱导SK—N—SH细胞凋亡的保护作用及其机制。方法取相同代的SK—N—SH细胞随机分为正常对照组、模型组、姜黄提取物低浓度（20μmol／L）组、姜黄提取物中浓度（40μmol／L）组、姜黄提取物高浓度（80μmol／L）组。用分光光度法检测姜黄提取物对细胞外SOD、MDA的影响,通过MTT比色法检测细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Westernblot检测法检测细胞Caspase-3蛋白的表达情况。蛄果与模型组比较,姜黄提取物各组细胞存活率升高（P〈0．01）,姜黄提取物各组SK—N—SH细胞培养液内的MDA水平均明显降低（P均〈0．01）,而SOD水平均明显升高（P均〈0．01）,同时Caspase-3活性受到抑制。结论姜黄提取物能够通过抗氧化作用抑制Na2S2O4对SK—N—SH细胞凋亡作用。     

心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas／FasL蛋白表达影响的实验研究

目的：观察心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas／FasL蛋白表达的影响，探讨心肌康的作用机制。方法：给Balb／c小鼠多次接种嗜鼠心肌柯萨奇B3病毒制作慢性VMC模型，首次感染病毒50天后将存活小鼠分为模型组、心肌康组及氯沙坦组，同时设正常对照组，分别予以相应药物干预30天，采用原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡及免疫组化方法检测Fas／FasL蛋白表达。结果：正常组未见到心肌细胞凋亡，模型组心肌细胞凋亡，凋亡率较正常组显著增加（P〈0．05），心肌康组和氯沙坦组凋亡率较模型组显著降低（P〈0．05）。模型组Fas／FasL蛋白表达较正常组显著增多（P〈0．01），心肌康组和氯沙坦组较模型组显著降低（P〈0．01）。结论：心肌细胞凋亡参与了慢性病毒性心肌炎的发病，心肌康能够抑制VMC心肌细胞的凋亡，通过下调Fas／FasL蛋白表达，对心肌细胞起到保护作用。     

As2O3对大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2/Bax表达的变化

目的；观察不同剂量的染砷（As2O3）大鼠生精细胞凋亡及其Bcl-2／Bax表达的变化。方法：40只健康雄性sD大鼠随机分成4组，分别为0．375，0．75，1．5mg&#183;kg^-13个染毒组和正常正常组，灌胃法连续给药16周后处死，对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡，免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2／Bax的表达。结果：①与正常组相比，中剂量组（0．75mg&#183;kg^-1）和高剂量组（1．5mg&#183;kg^-1）睾丸精子头计数和DSP均显著降低（P〈0．01），生精细胞凋亡指数（AI）显著升高（P〈0．01），生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低（P〈0．01），Bax表达明显升高（P〈0．01）；②DSP与生精细胞AI呈负相关（r=-0．563，P〈0．01）；③生精细胞凋亡与Bcl-2表达呈负相关（r=-0．825，P〈0．01），与Bax表达呈正相关（r=0．710，P〈0．01）。结论：一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2和促进Bax的表达，诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

白藜芦醇诱导K562／AO2凋亡与mdr1基因表达的关系

目的研究白藜芦醇（Res）体外对K562／AO2增殖及凋亡的影响，并探讨与耐药基因mdr1表达的关系。方法用噻唑蓝比色法（MTT）检测对照组、不同剂量Res组（25～200μmol／L）作用48h后K562／AO2增殖率，用流式细胞仪检测各组凋亡率，并用逆转录-聚合链反应（RT—PCR）法检测各组mdr1 mRNA的表达。结果Res体外对人K562／AO2细胞有显著增殖抑制及凋亡诱导作用，Res组（25μmol／L、50μmol／L、100μmol／L、200μmol／L）作用48h后其凋亡率均显著高于对照组（P〈0．05）；mdr1 mRNA表达相对强度均显著低于对照组（P〈0．05），且随浓度增加而表达减弱。结论Res体外能诱导K562／AO2细胞的凋亡，且呈一定的浓度依赖性，其作用机制可能与逆转mdr1 mRNA基因表达有关。     

当归注射液对血管紧张素Ⅱ致乳鼠心肌细胞肥大的影响

目的：通过建立心肌细胞肥大模型，观察当归注射液对心肌细胞肥大的影响。方法：分离培养乳鼠心肌细胞，用血管紧张素Ⅱ（Angiotensin Ⅱ）诱导心肌细胞肥大，测定心肌细胞直径、蛋白含量，评价当归注射液对心肌细胞肥大的影响。结果：AngⅡ能够显著增加心肌细胞的直径和蛋白含量（P〈0．01），当归注射液对这一效应有逆转作用（P〈0．05）。结论：血管紧张素（终浓度为10^-4mmol／L）有明显促心肌肥大的作用，当归注射液（终浓度为10^-3g／mL）对血管紧张素诱导的心肌细胞肥大有一定的抑制作用。     

活性氧参与益母草水苏碱抗AngⅡ诱导心肌细胞肥大的影响

目的利用新生大鼠心肌细胞,观察益母草水苏碱对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大和活性氧（ROS）含量的影响。方法培养新生大鼠心肌细胞,利用AngⅡ诱导心肌细胞肥大,观察不同浓度的益母草水苏碱对细胞肥大的影响（细胞数目、蛋白以及DNA含量）,同时用H2DCFDA荧光探针标记、流式细胞仪检测ROS含量。结果①AngⅡ（10^-6mol／L）使心肌细胞蛋白含量明显增高（P〈0．05）,对细胞数目和DNA含量无影响（P〉0．05）;②10^-7mol／L～10^-4mol／L浓度的益母草水苏碱呈剂量依赖性关系对抗AngⅡ导致的蛋白含量的增高（P〈0．05）;③AngⅡ可诱导心肌细胞内ROS含量增加,加入益母草水苏碱抑制了AngⅡ的这一作用。结论益母草水苏碱可抑制AngⅡ诱导的新生大鼠心肌细胞肥大,抑制ROS含量增加可能是其作用机制之一。     

当归注射液对血管紧张素Ⅱ致乳鼠心肌细胞肥大的影响

目的：通过建立心肌细胞肥大模型，观察当归注射液对心肌细胞肥大的影响。方法：分离培养乳鼠心肌细胞，用血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ）诱导心肌细胞肥大，测定心肌细胞直径、蛋白含量，评价当归注射液对心肌细胞肥大的影响。结果：AnglI能够显著增加心肌细胞的直径和蛋白含量（P〈0．01），当归注射液对这一效应有逆转作用（P〈0．05）。结论：血管紧张（终浓度为10^-7mmol／L）有明显促心肌肥大的作用，当归注射液（终浓唐为10^-3g/mL）时血管贤张素诱导的心肌细胞肥大有一定的抑制作用。     

生脉胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察生脉胶囊对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将75只雌性sD大鼠随机分为假手术组、心衰模型组、生脉胶囊组、卡托普利组、生脉胶囊＋卡托普利组,采用腹主动脉缩窄法造成大鼠慢性心力衰竭模型,分组治疗7周时测定大鼠心肌细胞凋亡率与抑制凋亡蛋白Bcl-2含量。结果模型组心肌细胞凋亡率高于假手术组（P〈0．01）,生脉胶囊组、卡托普利组、生脉胶囊＋卡托普利组的细胞凋亡率均低于模型组（P〈0．01）。模型组心肌Bcl-2含量低于假手术组（P〈0．05）,生脉胶囊组、卡托普利组Bcl-2含量均高于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。结论生脉胶囊可提高心肌细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2含量,抑制心肌细胞凋亡,能减轻漫性心力衰竭大鼠的心室重构。     

乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4^＋／CD8^及Fas、FasL蛋白表达的实验研究

目的：观察乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4^＋／CD8^及Fas、FasL蛋白表达的影响。方法：采用雌性BALB／c小鼠皮下多点注射小鼠透明带多肽,建立免疫性卵巢早衰模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。另设正常组和佐剂组,共灌胃给药4周。实验末应用免疫组化法测定脾脏CD4^＋、CD8^,计算CD4^＋／CD8^的比值。应用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达。结果：模型组小鼠脾脏CD4^＋／CD8^比值明显高于正常组和佐剂组（P〈0．05）。乌鳖颗粒各剂量组小鼠脾脏CD4^＋／CD8^比值明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。模型组小鼠卵巢Fas蛋白表达低于正常组,Fas—L蛋白表达明显高于正常组,卵巢Fas、Fas—L蛋白表达和Fas／Fas—L比值与正常组比较具有显著性差异（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒大剂量组和中剂量组小鼠Fas蛋白表达明显高于模型组,（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒各剂量组Fas—L蛋白表达明显低于模型组（P〈0．05,P〈0．01）。乌鳖颗粒大剂量组、中剂量组小鼠Fas／Fas—L比值与模型组比较具有显著性差异（P〈0．01）。结论：乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠具有调节CD4^＋／CD8^比值和Fas／FasL系统的作用。     

冠心平对H2O2致乳大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的：观察冠心平对过氧化氢（H2O2）所致乳鼠培养心肌细胞损伤的保护作用。方法：原代培养的新生SD乳大鼠,随机分为正常组、模型组、维拉帕米组、和冠心平3个剂量组。用比色法观察乳鼠心肌细胞培养液的乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌酸激酶（CK）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,并用光镜观察心肌细胞形态学改变。结果：损伤组乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK-MB、CK和MDA含量非常显著增高,SOD活性非常显著降低（与对照组相比,P〈0.01）,心肌细胞损伤严重;冠心平保护组与H2O2损伤组相比,LDH、CK-MB、CK和MDA明显降低,SOD活性显著升高（P〈0.01,P〈0.05）,心肌细胞形态学变化减轻。结论：冠心平对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化损伤有关。     

当归芍药散防治老年期痴呆的物质基础与作用机理研究X——精简方及其CO2超临界萃取物对星形胶质细胞缺氧损伤的保护作用

目的：观察当归芍药散精简方（FBD）及其CO2超临界萃取物（P2）对体外培养的大鼠乳鼠皮质星形胶质细胞缺氧损伤的保护作用。方法：SD大鼠po FBD 125mg／kg或P2 16．3mg／kg后，采集含药脑脊液（CSF-FBD／P2）；MTT法测定FBD、P2人工脑脊液（ACSF-FBD／P2）及其含药脑脊液（CSF-FBD／P2）对Na2S2O4诱导星形胶质细胞缺氧损伤的保护作用。结果：1mmol／LNa2S2O4作用1h复氧4h可显著降低星形胶质细胞活力（P〈0．01）；（0．1—1）mg／LACSF．FBD和5％-15％CSF-FBD可显著促进缺氧损伤星形胶质细胞活力（P〈0．01）；（0．01—1）mg／LACSF．P2和15％CSF-P2可极显著或显著促进缺氧损伤星形胶质细胞活力（P〈0．01—0．05）。结论：FBD及其CO2超临界萃取物对星形胶质细胞缺氧损伤具有保护作用。     

心肌活力饮对实验性扩张型心肌病大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的观察心肌活力饮对扩张型心肌病大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响，探讨该药治疗扩张型心肌病的作用机理。方法60只动物随机分成6组，除正常对照组外，其余各组大鼠分别腹腔注射阿霉素，制造扩张型心肌病模型。各用药组分别予心肌活力饮、黄芪生脉饮灌胃给药。4周后采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡及凋亡相关基因p53和Fas的蛋白表达。结果模型组心肌细胞的凋亡率显著高于正常对照组（P〈0．01），凋亡促进基因p53和Fas的蛋白表达增高（P〈0．05）。心肌活力饮（5、10、20g原药材／kg）组大鼠心肌细胞相关凋亡基因p53和Fas的蛋白表达量比模型组减少（P〈0．05或P〈0．01），心肌细胞的凋亡率也明显降低（P〈0．01）。结论心肌活力饮可以减少实验性扩张型心肌病大鼠心肌细胞的凋亡，并且可能是通过抑制心肌细胞相关凋亡基因p53和Fas的表达而发挥此作用的。