MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜组织中的表达

目的：采用腹腔注射链脲佐菌素（STZ）法复制糖尿病大鼠模型,观察糖尿病模型大鼠不同时期视网膜组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达水平,阐明MMP-2在糖尿病大鼠糖尿病视网膜病变（DR）中的作用。方法：雌性SD大鼠分为正常对照组（n=24）、4周模型组（n=30）、6周模型组（n=30）和8周模型组（n=30）,模型组大鼠连续5 d腹腔注射小剂量STZ复制糖尿病大鼠模型,正常对照组大鼠注射等量的柠檬酸钠溶液。4、6和8周时检测各组大鼠体质量和血糖水平。末次检测后麻醉获取大鼠右眼视网膜组织,采用RT-PCR和Western blotting法检测MMP-2 mRNA及蛋白表达水平,免疫组织化学染色观察大鼠视网膜组织中MMP-2表达情况。结果：造模前,各组大鼠体质量和禁食12 h的空腹血糖值比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。4周模型组大鼠死亡3只,6周时死亡5只,8周时死亡7只,存活动物继续进行实验。各模型组大鼠体质量均明显低于同时期正常对照组（P < 0.05或P < 0.01）,而空腹血糖值明显升高（P < 0.05或P < 0.01）。各模型组大鼠视网膜组织中MMP-2 mRNA和蛋白表达水平均明显高于正常对照组（P < 0.05）。正常对照组大鼠视网膜结构层次清晰分明、细胞排列整齐,可见单层排列的神经节细胞,核圆形或椭圆形状,核较大;与正常对照组比较,模型组大鼠视网膜组织结构松散,内核层及视杆细胞层细胞外界膜模糊,数量减少。MMP-2阳性细胞可见棕黄色颗粒沉淀,在神经节细胞层胞浆和血管内皮细胞尤为集中。4、6及8周模型组MMP-2阳性表达水平均高于正常对照组（P < 0.05）。结论：MMP-2在糖尿病模型大鼠视网膜上表达,并随着糖尿病大鼠模型维持时间的延长呈递增趋势,说明MMP-2与DR有关。     

链脲佐菌素诱导的小鼠糖尿病视网膜病变模型的构建

长期以来,链脲佐菌素（STZ）被广泛用于诱导多种动物的糖尿病视网膜病变（DR）模型。STZ诱导的动物DR模型的临床特征和病理变化与人1型糖尿病的DR相似,经常被用来研究DR的发病机制及进行新型抗DR药物的临床前评估。小鼠体型小、动物成本低、容易操作及诱导成功率高,是研究DR的最佳模型动物之一。建立小鼠DR模型时仍存在许多问题,例如模型的再现性以及STZ的动物致死性等。通过查阅文献发现,在使用STZ构建动物DR模型时,应当注意几个关键因素,如STZ的制备、给药剂量、给药途径、饲养方式,各类动物的年龄、体质量和性别等。本综述分析了STZ致DR的机制,指出了STZ诱导小鼠DR模型的关键环节,介绍了降低STZ致死率的方法。     

非胰岛素依赖型糖尿病大鼠模型制备的实验研究

目的：建立晨胰镐素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）模型,用于糖尿病研究。方法：给予新生大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素,９周后检测糖耐量,血胰岛素水平等,并进行组织形态学检查。结果：造模大鼠体重正常,饮水量和饮食量明显增多,空腹血糖,血胰岛素水平正常,但口服葡萄糖糖耐量低下、胰岛素分泌水平低下,第１时相分泌明显减弱,并有延时分泌现象,病理学检查,造模大鼠胰岛体积明显缩小,β细胞减少。结论：新生大鼠一次性腹腔     

链脲佐菌素诱发性糖尿病大鼠早期视网膜病变模型的建立

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病(DM)大鼠早期视网膜的形态学改变,评价该方法作为早期糖尿病视网膜病变(DR)动物模型的可行性。方法 64只体质量(180±20)g的雄性SD大鼠随机均分为CON组、DM组(n=32),DM组按60mg/kg体质量腹腔注射1%STZ1次建立DM大鼠模型;CON组腹腔注射等量柠檬酸缓冲液作为对照。注射前DM组、CON组平均体质量、血糖水平差异均无统计学意义。DM成模后每周测量各组体质量、血糖等一般生理指标。成模后第10周,各组随机抽样对视网膜组织进行H-E染色、FITC-dextran灌注视网膜血管铺片及透射电镜超微结构观察。结果 STZ腹腔注射诱导DM成模率100%。STZ腹腔注射后,DM组体质量增加不明显,后期甚至有所减轻;CON组体质量逐步增长,10周时DM组体质量明显低于CON组[(169.9±26.9)gvs(439.2±23.5)g,P<0.001]。STZ腹腔注射72h后,DM组血糖明显高于CON组[(26.63±4.54)mmol/Lvs(6.37±0.49)mmol/L,P<0.001],至第10周DM组血糖均>16.7mmol/L,CON组保持在5.6～...     

大鼠糖尿病痛过敏模型的建立

用腹腔注射链尿佐菌素（ＳＴＺ）建立糖尿病大鼠模型，然后观察其体重、血糖和运动神经传导速度（ＭＩＮＣＶ）的变化，并以伤害性爪回缩反射和甩尾痛指标测量痛阈。结果表明，腹腔注射ＳＴＺ后，大鼠血糖升高（血糖〉１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ），体重增长迟缓，ＭＮＣＶ减慢，实验至第１周时，甩尾反向潜伏期（ＴＦＬ）显著缩短，第２周时，伤害性爪回缩阈值（ＮＰＷＴ）明显降低。上述结果提示，大鼠已产生糖尿病，并处于痛过敏状态。     

链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型方法学考察

目的 对腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型的方法学进行考察.方法 健康雄性Wistax大鼠,按60 mg/kg剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素溶液,72 h后,断尾采集空腹静脉血,用葡萄糖氧化酶法测定血糖.结果 一次性腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型成功率达到75%,其血糖平均值为(19.46±2.53)mmol/L.模型大鼠血糖值在14 d内RSD小于1129%.结论 链脲佐菌素建立糖尿病动物模型过程中动物死亡率低、造模成功率高、稳定性好,是目前较好的一种建立糖尿病模型的药物.     

不同剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型稳定性观察

目的观察不同剂量链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病大鼠模型的稳定性,并探讨理想糖尿病大鼠模型的制备方法。方法雄性SD大鼠50只按照完全随机方法分为对照组和STZ各剂量组（50mg／kg、55mg／k、60mg／kg、65mg／kg）,分别按体重计算STZ注射剂量,一次性腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,分别于造模前、造模后各时间点观察大鼠的一般状况,检测各组大鼠的空腹血糖,血糖值〉22．1mmol／L为造模成功。结果60mg／kgSTZ组在建模72h后血糖值均高于22．1mmol／L,持续观察8周,血糖值始终波动在建模初期高血糖水平,未见转复,并出现典型的“三多一少”症状。胰腺苏木精-伊红染色符合糖尿病动物的病理学改变,且死亡率相对较低。结论采用腹腔单次注射60mg／kgSTZ建立1型糖尿病大鼠模型,具有建模方法简便、稳定性高、死亡率低,胰岛B细胞损害特异性高等优点,可应用于糖尿病研究的多个领域。     

实验性糖尿病大鼠早期视网膜电图的变化

目的: 观察实验性糖尿病早期对大鼠视网膜电图的影响. 方法: 链脲佐菌素诱导的糖尿病组大鼠和日龄相匹配的对照组正常大鼠,采用国际临床视觉电生理学会推荐的标准化方案,在糖尿病早期阶段(5 wk内)对其进行杆细胞反应、最大反应、振荡电位、明适应视网膜电图和20 Hz闪烁反应5个项目的检查. 结果: 在诱导糖尿病前和建模后1 wk时,糖尿病组大鼠与对照组相比未发现视网膜电图的异常;在建模后2 wk和5 wk时,糖尿病组杆细胞反应b波、最大反应 b波、振荡电位O2波和明适应视网膜电图b波的潜伏期都比对照组相应各波的潜伏期显著延长;两组大鼠各波的幅值始终未发现显著改变. 结论: 糖尿病大鼠在早期阶段杆细胞反应b波、最大反应b波、振荡电位O2波和明适应视网膜电图b波的潜伏期显著延长,这有可能成为监测糖尿病视网膜病变早期发展的指标.     

链脲佐菌素建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型的剂量研究

目的 观察不同剂量链脲佐菌素( streptozotocin,STZ)建立1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus,TIDM)大鼠模型,探讨STZ建立TIDM动物模型的理想剂量.方法 健康雄性SD大鼠38只,随机分为3组,分别给予55mg/kg( STZ55组)、65 mg/kg(STZ65组)STZ及等体积柠檬酸盐缓冲液(对照组)一次性腹腔注射,监测各组大鼠成模率、死亡率、体重、空腹血糖,4周后处死动物测血清胰岛素水平、检测胰腺病理.结果 对照组未见血糖升高及动物死亡,STZ55组、STZ65组成模率分别为75.0％、87.5％,死亡率分别为12.5％、25.0％.两组成模后的大鼠均出现多饮多食多尿及体重减轻,与同期对照组相比,STZ55组和STZ65体重均显著降低(均P＜0.05),但STZ55的体重先降低后升高,而STZ65组体重持续降低.造模后STZ55、STZ65组空腹血糖均较同期对照组显著升高(均P＜0.05),第2周后STZ55组血糖有所降低,STZ65组仍维持在较高水平.与对照组相比,两组血清胰岛素(insulin,INS)水平均显著降低(均P＜0.05),且STZ65组较STZ55组INS水平更低(P＜0.05).胰腺病理切片HE染色结果揭示STZ65组较STZ55组胰岛减小、结构破坏更明显.结论 SD大鼠一次性腹腔注射STZ65 mg/kg,死亡率较低,成模率较高,模型稳定,是建立SD大鼠TIDM模型的理想剂量.     

糖尿病早期大鼠视网膜功能的电生理学研究

目的:观察糖尿病大鼠早期视网膜功能的改变,指导临床对糖尿病视网膜病变(DR)的防治。方法:用图形视网膜电图(PERG)和闪光视网膜电图(FERG)分别记录正常和链脲菌素诱导的糖尿病大鼠8周以内PERG-q波及FERG-b波潜时,并进行统计学分析。结果:糖尿病大鼠在1周时PERG-q波和FERG-b波的潜时与正常大鼠相比都显著延长(P<0.001),并且PERG-q波潜时在3天时就发生显著改变(P<0.001),早于FERG-b波潜时的改变(发生在1周)。结论:糖尿病大鼠早期在发现眼底可见的视网膜病变之前就有神经功能的异常,并且糖尿病对视网膜组织的损害首先是发生在神经节细胞,进而神经节细胞以前的视网膜功能受损。     

糖尿病大鼠视网膜病理模型的建立

目的 :建立链脲佐菌素 ( streptozocin,STZ)糖尿病大鼠视网膜病理模型。方法 :建立糖尿病大鼠模型 ,随机分为正常对照组 ( M)、糖尿病 1个月组 ( M1)、3个月组 ( M3 )和 5个月组 ( M5)。分别观察视网膜铺片及石蜡切片变化。结果 :普通石蜡切片中 M、M1未见异常改变 ,从 M3 开始出现异常改变 ,以 M5最明显。表现为视网膜水肿 ,尤其内核层。细胞排列紊乱 ,内核层血管周围水肿更明显 ,节细胞数量减少 ,静脉扩张、渗出 ,并有出血。视网膜消化铺片 :1周细胞数量 :糖尿病 M1组与 M组相比差异无显著性 ( P>0 .0 5 ) ,而 M3 组及 M5组与 M组相比明显减少 ( P<0 .0 1 ,P<0 .0 0 1 )。 2毛细血管形态 :以 M5组时病变最重 ,可见毛细血管栓塞、无细胞毛细血管及毛细血管无灌注。结论 :STZ糖尿病大鼠视网膜病变可以代表人类糖尿病视网膜病变的背景期病理改变     

延长糖尿病模型大鼠生存期对糖尿病视网膜病变的影响

目的延长糖尿病模型大鼠生存期,动态观察糖尿病视网膜病变(DR)的形成和发展过程。方法雄性SD大鼠70只,随机分成对照组(20只)和模型组(50只),采用链脲佐菌素(STZ)60 mg/(kg.bw)体重腹腔1次注射造模,分别于69、、12月时处死取眼球,采用视网膜微血管消化铺片技术观察糖尿病视网膜病变的微血管形态学改变。结果糖尿病大鼠DR样病变随着病程的延长病变呈多样性改变,以12月DR出现的小动脉硬化尤为严重。结论糖尿病大鼠生存期的延长对糖尿病视网膜病变的研究有着积极的意义。     

STZ糖尿病大鼠视网膜病变模型的再评价

目的 本研究旨在对链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠视网膜病变糖尿病进行系统性的再评价.方法 雄性SD大鼠75只,随机分为空白组（30只）和糖尿病组（45只）.采用一次性大剂量腹腔注射STZ60mg/kg的方法制备糖尿病模型,监测6个月,动态考察大鼠的体重、血糖变化,同时测定大鼠的血液流变学参数.视网膜铺片法观察视网膜形态学变化,免疫组化法考察血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、色素上皮细胞衍生因子（pigment epithelium derived factor,PEDF）表达的变化,Western blotting法观察内皮细胞紧密连接蛋白（occludin）、细胞间粘附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,缩写ICAM-1）表达量的变化,分光光度法测定醛糖还原酶（aldose reductase,AR）活性的改变.结果 与空白组相比,STZ大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均增加.视网膜血管基底膜增厚,毛细血管退化,有闭锁现象,静脉扩张明显,周细胞数量明显减少.其视网膜中的VEGF表达增加（IOD/area 0.66±0.28,空白组0.25 ±0.03）,PEDF表达减少（IOD/area0.07±0.06空白0.19±0.04）,与血-视网膜屏障相关的occludin蛋白表达下降70％,炎症因子ICAM-1增加2.58倍,AR活性升高3倍.结论 STZ糖尿病大鼠视网膜病变发生在多个位点,借助该模型对糖尿病视网膜病变的研究可以从多层次、多角度进行.     

糖尿病肾病微量白蛋白尿与糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的：了解糖尿病肾病（DN）患者尿微量白蛋白排泄率（UAER）与视网膜病变（DR）的关系.方法：200例糖尿病肾病患者,依尿微量白蛋白排泄率分成3个组A组：正常白蛋白尿组（n=25,24小时微量白蛋白≤30mg·L-1）,B组：微量白蛋白尿组（n=100.微量白蛋白尿30～300mg·L-1）,C组：大量白蛋白尿组（n=75,＞ 300mg·L-1）.凌晨抽空腹静脉血,测血肌酐（Cr）、总胆固醇（TC）,C反应蛋白、空腹血糖及餐后2h的血糖,4小时尿白蛋白定量（24 h UAER）测定及眼底检查等检查,分析肾病微量白蛋白尿与糖尿病视网膜病变的相关性.结果：微量白蛋白尿与空腹血糖明显正相关（p＜0.001）,与餐后2h的血糖明显正相关（p＜0.001）,与C反应蛋白,胆固醇,血肌酐无相关性（p值均＞0.05）.A、B、C三组单纯性视网膜病变检出率分别为13.2％、29.9％和42.8％,增殖性视网膜病变检出率分别为19.1％、41.5％和51.6％,提示糖尿病视网膜病变随微量白蛋白尿的增加而加重（p＜0.001）.结论：糖尿病患者尿微量白蛋白及视网膜病变的检测有助于糖尿病微血管病变的早期诊断.     

北京眼病研究的5年糖尿病视网膜病变进展分析

目的 比较北京眼病研究中糖尿病视网膜病变随访5年进展和未进展的病例,分析糖尿病视网膜病变进展的危险因素。 方法 回顾性、纵向、病例对照研究。回顾北京眼病研究中已知糖尿病史、参加随访的、有可分级眼底立体相的170例,按糖尿病视网膜病变是否进展分成进展组与稳定组,稳定组中按是否有糖尿病视网膜病变分为糖尿病视网膜病变组和非糖尿病视网膜病变组。受检者在01年基线和06年随访调查时接受了问卷调查以及眼科检查。问卷调查内容包括一般情况,全身及眼部疾病史和其治疗史,吸烟饮酒史以及家族史。基线眼科检查包括视力,屈光度数,非接触眼压,眼底照相,随访调查时增加了血生化检查以及身高、体重以及血压的测量。应用SPSS13.0统计学软件进行数据分析。两组病例的计数资料采用χ2检验;计数资料采用两组独立样本的非参数检验;各调查因素对疾病是否进展采用二分类的Logistic回归分析,以P<0.05作为差异有统计学意义。结果 进展组农村病例比例高于稳定组,进展组职业为农民的比例高于稳定组,进展组文化程度低于稳定组,进展组有高血压病史的比例高于稳定组,有统计学差异（p=0.000,0.01,0.002,0.04）;稳定组中糖网组男性比例低于非糖网组,糖网组农村病例比例高于非糖网组,糖网组职业为农民的比例高于非糖网组,糖网组文化程度低于非糖网组,糖网组有高血脂病史的比例低于非糖网组,糖网组的病程长于非糖网组,糖网组胰岛素治疗的比例高于非糖网组,糖网组BMI指数高于非糖网组,糖网组近视度数低于非糖网组,糖网组有白内障手术史的比例高于非糖网组,糖网组视网膜小动脉狭窄的比例高于非糖网组（p=0.017,0.008,0.001,0.001,0.004,0.005,0.008,0.08,0.01,0.001,0.05）。二分类Logistic回归分析显示：在进展组中,农村(OR:5.43),高血压病史是糖网进展的独立危险因素(OR: 3.85),在稳定组中,教育水平(OR:0.30),糖尿病治疗方式(OR:10.24)以及白内障手术史(OR:9.14)是糖尿病视网膜病变发生的危险因素。结论 在基于人群的北京眼病研究中,有糖尿病视网膜病变的人群5年进展率为35%,有糖尿病史的人群5年进展率为21%。 糖尿病视网膜病变的进展与农村以及高血压病史显著相关。 改善农村的医疗环境,治疗高血压对控制糖尿病视网膜病变的进展、减少严重威胁视力的糖尿病视网膜病变很有意义。     

糖尿病视网膜病变筛查方法分析

目的 通过对散瞳直接或间接眼底镜检查、眼底照相及眼底荧光造影3种检查方法,对疑似糖尿病视网膜病变患者进行检查和评估比较,优化检查程序和方法.方法 对2009-02～2011-02间,就诊我院门诊和住院确诊的496例糖尿病患者进行散瞳直接或间接眼底镜检查、眼底照相及眼底荧光造影检查.眼底病专科医师阅片进行诊断,以眼底血管...     

STZ诱导糖尿病肾病大鼠模型的建立

目的建立糖尿病大鼠动物模型,探讨其肾脏损害规律。方法用STZ65mg/kg一次性腹腔内注射方式制作糖尿病大鼠模型,设立空白对照组,饲养14周,期间观察大鼠血糖、尿糖及一般情况变化,实验结束时测定血肌酐、尿素氮、尿蛋白、尿白蛋白排泄率,取肾作病理及超微病理检查。结果模型组大鼠出现血肌酐、尿素氮、尿蛋白、尿白蛋白明显升高,出现肾脏肥大,病理显示明显的肾小球、肾小管病变。结论STZ诱导糖尿病大鼠肾脏表现肾小球及小管间质损害,可以用作糖尿病肾病研究的动物模型。     

可明胶囊治疗单纯型糖尿病性视网膜病变的疗效观察

目的观察可明胶囊治疗单纯型糖尿病性视网膜病变(DR)的疗效.方法将60例单纯型DR患者随机分为2组,每组30例.对照组患者接受常规的对症、支持治疗;实验组患者在常规治疗基础上服用可明胶囊.比较2组患者治疗开始时、治疗后1个月和2个月的视力及眼底病变情况.结果实验组患者治疗后1个月及2个月的视力及眼底病变的改善均优于对照组(均P＜0.05);2组患者均未出现明显毒副反应和副作用.结论可明胶囊治疗单纯型DR的疗效显著,安全性高,是治疗该病的有效药物.     

糖尿病视网膜病变患者血浆血栓调节蛋白水平研究

目的：观察患有不同程度视网膜病变的糖尿病患者血浆血栓调节蛋白（thrombomodulin,TM）的变化,了解这种因子在糖尿病视网膜病变发病中的意义。方法：将糖尿病患者按眼底视网膜病变程度分为3组：无糖尿病视网膜病变期（no diabetic retinopathy,NDR）20例,单纯型糖尿病视网膜病变期（simple diabetic retinopathy,SDR）20例,增殖型糖尿病视网膜病变期（proliferative diabetic retinopathy,PDR）20例,以及相应年龄段的健康正常人作为对照组（CONTROL）30例,分别用ELISA方法测定血浆TM浓度。观察各组变化,同时研究TM与病程、血糖、血脂、血黏度、纤维蛋白原、肾功能、血压的相关性。结果：①NDR、SDR、PDR3组血浆TM水平均明显高于正常对照组（P〈0．05）,而且PDR组血浆TM水平高于SDR组（P〈0．05）,SDR组血浆TM水平高于NDR组（P〈0．05）;②血浆TM分别与病程、空腹血糖、糖化血红蛋白、胆固醇、低密度脂蛋白、血肌酐、纤维蛋白原、全血低切黏度、血浆黏度呈显著正相关。结论：糖尿病患者血中TM水平反映了血管内皮细胞受损程度,随着内皮细胞损伤程度加重,TM值上升,糖尿病视网膜病变的程度逐渐加重。眼底出现了增殖型视网膜病变。     

糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变关系研究进展

糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变是糖尿病微血管病中最常见的两种并发症。由于二者同属糖尿病微血管并发症,发生机制和发生时间具有相似性,但也有异质性。一种并发症的出现可预测另一种并发症的发生、发展。认清二者关系可以在一系列相关征象出现时,提示糖尿病微血管疾病的发生、发展情况,便于更早的诊断、治疗,减少并发症的危害。