60Co-γ射线辐照灭菌对康尔心胶囊指纹图谱和有效成分含量的影响

摘要：目的:探索60Co-γ射线辐照灭菌对康尔心胶囊有效成分的影响及辐照前后指纹图谱的变化,为康尔心胶囊辐照灭菌提供指导依据。方法:采用YMC-Pack ODS-A C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,检测波长为230 nm（三七皂苷R1、丹酚酸B、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1）、270 nm（丹参酮ⅡA）;建立康尔心胶囊HPLC指纹图谱,比较60Co-γ射线辐照对活性成分三七皂苷R1、丹酚酸B、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和丹参酮ⅡA的影响。结果:60Co-γ射线辐照前后康尔心胶囊中三七皂苷R1、丹酚酸B、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和丹参酮ⅡA含量差异无统计学意义（P>0.05）,辐照灭菌后指纹图谱中7,8,26,33号色谱峰消失。结论:60Co-γ射线辐照灭菌法对康尔心胶囊5个成分含量及指纹图谱影响很小,可作为康尔心胶囊的有效灭菌手段。     

HPLC法测定三七药材中3种皂苷的含量

目的采用高效液相色谱法同时测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量.方法采用luna C18(2)分析柱;以(A)乙腈-(B)0.05%磷酸二元线性梯度洗脱:0～8 min(20%A∶80%B),8～20 min(20%A～40%A)∶(80%B～60%B),20～30 min(40%A～20%A)∶(60%B～80%B),检测波长203 nm.结果测得三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的回收率分别是(97.7±1.6)%、(98.6±1.1)%、(99.2±0.8)%.线性范围分别是:三七皂苷R112～150 μg·mL-1(r=0.9990)、人参皂苷Rg140～500 μg·mL-1(r=0.999 4)、人参皂苷Rb144～550 μg·mL-1(r=0.999 7).结论采用高效液相色谱梯度洗脱法能将多种皂苷很好地分离检测,方法准确可靠,重复性好,结果稳定.     

HPLC测定益气复脉口服液中红参的含量

目的 建立HPLC测定益气复脉口服液的有效成分红参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1总含量的方法.方法 色谱柱YMC ODSA柱,(150 mm×4.5 mm,粒径5 μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为203 nm,柱温为25 ℃.结果 人参皂苷Rg1在0.4008～2.0040 μg范围内(r=0.9998)、人参皂苷Re在0.4188～2.0940 μg范围内(r=0.9998)、人参皂苷Rb1在1.1880～5.9400 μg范围(r=0.9998)线性关系良好;RSD分别为2.10%、1.86%、2.33%; 加样回收率分别为100.16%、102.94%、96.12%.结论 本方法准确、重复性好,可用于该制剂中红参的质量控制.     

高效液相色谱法测定复方血栓通胶囊中三七总皂苷的含量

目的建立复方血栓通胶囊中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Rb1含量测定的HPLC法。方法采用Venusil-XBP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)和水(B)为流动相梯度洗脱,流动相梯度0～12 min为A∶B=20∶80(V/V),12～16 min为A∶B=(20～36)∶(80～64)(V/V)。流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,检测波长203 nm。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1线性范围分别为0.39～8.57μg、1.43～32.96μg、1.72～41.53μg,平均加样回收率分别为(99.50±1.26)%、(99.40±1.31)%、(100.10±1.53)%,RSD分别为1.14%、1.07%、0.91%。结论该方法操作简便、结果准确可靠、灵敏度高,重复性好,能有效控制复方血栓通胶囊的质量。     

RP-HPLC梯度洗脱法测定三七胶囊中三七皂苷R1和人参皂苷Rb1及人参皂苷Rg1的含量

目的:研究三七胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Rg1的含量测定方法,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法:用岛津Shim-packC18分析柱,乙腈-水梯度洗脱,0～6 min(24:76),6～15 min(27:73→40:60),流速:1.0 ml.min-1,检测波长:203 nm,柱温:35℃,进样量:20μl。结果:三七皂苷R1在0.38～3.80μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为100.3%,RSD为1.08%;人参皂苷Rb1在1.50～15.00μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为99.9%,RSD为1.03%;人参皂苷Rg1在1.46～14.60μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9992),平均回收率为99.8%,RSD为1.03%。结论:该方法能将多种皂苷很好的分离检测,而且方法简便、快速、重现性好、准确可靠,可用于三七胶囊的质量控制。     

RP-HPLC法同时测定保心宁胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量

目的采用HPLC梯度洗脱法同时测定保心宁胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量。方法采用ODS-C18柱,流动相为乙腈（A）-水（B）（0~12 min,A：19%;12~60 min,19%~36%;60~70 min,36%）;检测波长为203 nm;流速：1.0 ml.min-1。结果三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.764~6.365μg（r=0.9999）、0.633~5.275μg（r=0.9999）、0.699~5.825μg（r=0.9999）,平均加样回收率分别为99.88%（RSD=0.55%）、99.97%（RSD=0.23%）、100.04%（RSD=0.15%）。结论该方法易行、准确可靠,可用于保心宁胶囊的质量控制。     

HPLC-ELSD法测定消栓通络胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

目的 采用高效液相色谱蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定消栓通络胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量.方法 以乙腈-水为流动相梯度洗脱(0～12 min,水80％-65％),Hypersil ODS柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,流速为1.0 mL·min-1,ELSD参数:漂移管温度:45℃,载气流量:1.5L·min1.结果 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的回收率分别为96.7、96.4％和97.7％,RSD分别为1.6％、1.4％和2.2％.结论 该方法简便、快速、重现性好,可用于消栓通络胶囊的质量控制.     

搜风通胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1和Rb_1的含量测定

目的建立以高效液相色谱法(HPLC)测定搜风通胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含量的方法。方法采用色谱柱Hypersil ODS C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B),进行梯度洗脱(0～12min,19%A,12～60min,19%～36%A),流速:1.0mL/min,柱温:30℃,检测波长:203nm。结果三七皂R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.107～2.638μg(r=0.9998)、0.428～10.623μg(r=0.9999)和0.424～10.526μ(gr=0.9997);平均加样回收率分别为98.33%(RSD=1.16%)、98.22%(RSD=1.60%)和97.78%(RSD=0.98%)。结论本方法简便、准确、重现性好,可用于搜风通胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含量的测定。     

HPLC法同时测定野三七中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1、Rd的含量

目的：建立同时测定野三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Rd四种三萜皂苷成分含量的高效液相色谱方法。方法：采用Agilent Zorbax SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-水（B）,梯度洗脱（0～5 min,15%A→20%A,5～30 min,20%A→23%A,30～50 min,23%A→40%A,50～55 min,40%A→40%A）,流速1 ml·min-1,检测波长203 nm,柱温30℃。结果：三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Rd分别在0.122～2.440μg、0.524～10.480μg、0.454～9.080μg及0.370～7.400μg范围内呈良好线性关系（r〉0.999 7）;野三七药材中4种三萜皂苷成分的平均回收率（n=6）分别为98.83%、99.28%、100.82%、99.06%;RSD分别为1.34%、1.05%、1.14%、1.53%。结论：该方法简便、准确,分离效果好,首次用于野三七药材的质量评价。     

高效液相色谱法测定愈伤灵胶囊中三七皂苷R1与人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1含量

目的 研究愈伤灵胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量测定方法,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据.方法 用岛津WondaSil C18色谱柱、乙腈-水梯度洗脱,0～12min(19∶81),12～60 min(19∶81→36∶64),60～71 min(36∶64→19∶81),流速:1.0ml·min-1,检测波长:203 nm,柱温:30℃.结果 三七皂苷R1在0.0996～1.9920 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999997),平均回收率为99.9683％,相对标准差为1.3561％;人参皂苷Rg1在0.4244～8.4880 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999998),平均回收率为99.9417％,相对标准差为0.2706％;人参皂苷Rb1在0.3923～ 7.8460μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999998),平均回收率为99.3933％,相对标准差为0.7303％.结论 该方法简便、快速、重现性好,准确可靠,可作为愈伤灵胶囊的质量控制方法.     

NP-HPLC法测定三七药材中总皂苷含量

目的:建立正相高效液相色谱法同时测定三七药材中人参皂苷Rg1,Re,Rb1,三七皂苷R14种成分的含量测定方法,并对不同规格三七药材中三七总皂苷的含量进行比较.方法:采用正相高效液相色谱法,色谱柱用Phenomenex NH2色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈—水(82:18),等度洗脱,检测波长...     

三七总皂苷主要成分对人肝微粒体CYP3A4酶的抑制作用研究

目的：研究三七总皂苷主要成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对人肝微粒体CYP3A4酶的体外抑制作用.方法：采用人肝微粒体体外孵育法,在孵育体系中分别加入不同浓度的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1与探针底物睾酮共孵育,用LC-MS /MS 法测定代谢产物6β-羟基睾酮的生成量反映CYP3A4酶活性的影响.结果：人参皂苷Rg1在2～1 000 μmol·L-1的测试浓度范围内对CYP3A4未见剂量相关的抑制作用;人参皂苷Rb1在2～200 μmol·L-1的测试浓度范围内对CYP3A4未见剂量相关的抑制作用,在1 000 μmol·L-1的测试浓度下对CYP3A4具有轻微抑制作用;三七皂苷R1在2～1 000 μmol·L-1的测试浓度范围内对CYP3A4的IC50为126 μmol·L-1（＞100 μmol·L-1）.结论：三七总皂苷3个主要有效成分单体对CYP3A4酶的体外抑制作用不同,人参皂苷Rg1无抑制作用,人参皂苷Rb1高浓度下有轻微抑制作用,三七皂苷R1有弱抑制作用,三七总皂苷制剂与CYP3A4酶代谢相关的药物之间产生相互作用的可能性低.     

三七总皂苷中代表性皂苷含量测定方法学的建立及稳定性研究

目的 建立同时测定三七总皂苷中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1 和人参皂苷Rb1 三种成分的含量测定方法,并对其各种状态下的稳定性进行研究.方法：以乙腈-水系统作为流动相,采用高效液相-梯度洗脱法,同时测定三七总皂苷中三种成分的含量,并考察方法的专属性、线性、精密度和回收率;测定四种pH值溶液中三种皂苷成分的稳定性以及在高温、高湿和强光照射条件下,三七总皂苷粉末中三种皂苷成分的稳定性.结果：方法学验证结果显示,在选定的梯度洗脱条件下,方法专属性良好,三种皂苷可有效分离和定量;在各自的线性范围内线性良好;精密度RSD 值均小于2%;三种皂苷的平均回收率分别为（98.98 ± 0.60）%、（98.86 ± 0.34）%和（100.19 ± 0.64）%,方法准确性良好.稳定性研究结果显示,在溶液状态下,三种皂苷的稳定性趋势基本-致,稳定性与pH值密切相关,在pH 1.2 溶液中药物迅速降解,24 h 含量即降低了约80%;而在pH 4.5 溶液、pH 6.8 溶液以及水中,三种成分的稳定性均良好,24 h 内含量未发生明显变化;而在三七总皂苷粉末中,三种代表性皂苷对湿、热和光照均不敏感,10 d 内含量基本保持稳定;但是在高湿条件下,粉末有-定的吸湿性.结论：所建立的液相方法准确、可靠,溶液状态下三七皂苷R1、人参皂苷Rg1 和人参皂苷Rb1 的稳定性与pH密切相关,随pH的降低稳定性变差,而在固体状态下则稳定性良好.     

HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量

目的建立复方丹参片中三七有效成分的含量测定方法。方法采用HPLC法测定本品中三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1线性范围分别依次为0.850～8.524、0.922～9.013、0.377～3.317μg;平均回收率分别为101.1%、101.2%、103.2%,RSD分别为1.5%、1.6%、1.8%。结论本方法简便可靠,结果稳定,可用于丹心舒胶囊中三七的有效成分的含量测定。     

三七总皂苷中各组分含量测定方法的改进

目的用薄层扫描法(TLSC)和高效液相色谱法(HPLC)测定三七总皂苷中人参皂苷Rb1(Rb1)、人参皂苷Rg1(Rg1)和三七皂苷R1(R1)3种主要成分的含量,并对两种方法进行比较,为修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供依据。方法TLSC法用正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,27%硫酸无水乙醇溶液为显色剂,测定波长λs=535 nm,λR=460nm;HPLC法用C18色谱柱,以乙腈-水线性梯度洗脱,0 min(25∶75)~15 min(45∶55);流速1.5 ml.min-1;测定波长200 nm。结果TLSC法测得三七总皂苷原料中Rb1、Rg1、R1的含量分别为31.07%、23.30%、9.35%;HPLC法测得三七总皂苷原料中Rb1、Rg1、R1含量分别为30.46%、22.65%、5.83%。结论HPLC法能将多种皂苷很好地分离并检测,简便快速,减少了误差。其准确度和测定结果的稳定性均优于TLSC法。     

富集纯化前上样液参数影响三七皂苷类成分的研究

目的 考察富集纯化前上样液参数pH值、氯化钠浓度、时间等对三七皂苷类成分的影响.方法 用UV、TLSC分别测定3种不同上样液在不同时间段的三七总皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量.结果 3种上样液放置72 h后,人参皂苷Rg1含量均增加(P＜0.01);三七皂苷R1含量均减少(P＜0.05);人参皂苷Rb含量变化无差异;pH5.5上样液和pH 7.0上样液中的总皂苷含量均增加(P＜0.05),pH5.5且含4％氯化钠的上样液中总皂苷含量无明显变化.结论 在富集纯化过程中,上样液的pH值、无机盐浓度和时间对皂苷类成分含量变化有影响.     

西洋参中人参皂苷Rg1人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量测定

［摘要］目的用快速分离液相色谱法分离测定西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量。方法采用ZOBAX SB C18柱（4.6 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相：乙腈（A） 0.1%磷酸（B）,梯度洗脱（0～25min,5%A→20%A;～35min,20%A→40%A）;流速：2.0 mL•min 1,测定波长：203 nm,柱温：35 ℃。结果人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.12～2.49,0.61～12.15,1.42～28.48 μg,相关系数分别为0.999 8,0.999 6,0.999 9;平均加样回收率（n=6）分别为97.8%,98.1%,98.3%;RSD分别为1.0%,0.8%,0.4%。结论该方法具有快速、准确、重复性好等特点,适合于西洋参的含量测定。     

RP-HPLC同时测定复方三七制剂中的人参皂苷Rg1、Rb1

目的 建立复方三七制剂中人参皂苷Rg1、Rb1含量测定的方法.方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Phenomenex C18(250 mm x4.6 mm,5 μm);流速1.0 ml·min-1;检测波长203 nm;柱温30℃;流动相为乙腈-水(梯度洗脱).结果 人参皂苷Rg1的线性范围为0.2124～2.1240 μg(r=0.9999),平均回收率为100.24%,RSD=1.14%(n=9);人参皂苷Rb1的线性范围为0.2108～2.1080μg(r=0.9999),平均回收率为99.71%,RSD=0.79%(n=9).结论 所建方法简便、准确,重复性好,可同时测定复方三七制剂中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量.     

Self-micelle formation and the incorporation of lipid in the formulation affect the intestinal absorption of Panax notoginseng

The purpose of this research is to evaluate the effect of self-micelle formation and incorporation of lipid in the formulation on absorption of ginsenosides Rg1 and Rb1 from intestinal tract in rats. Ginsenosides Rg1 and Rb1 were extracted from Panax notoginseng saponins (PNS). The critical micellar concentration (CMC) of PNS in deionzied water was determined to be 0.339 mg/ml. At normal physiological ionic strengths, PNS was salted out from the solution above the CMC. The particle size of the micelle grows as PNS concentration increases. By in situ injection to a closed loop of the rat jejunum, AUC0-6h obtained after administration of low concentration solution (12 mg/ml) was 3.61 times for ginsenoside Rg1 and 3.84-folds for ginsenoside Rb1 compared with high concentration solution (120 mg/ml). The release rate of ginsenosides in aqueous medium was too slow to complete in 24h, especially for Rb1. The data suggested that the self-micelle formation tendency in ginsenosides might prevent them from permeation or absorption through the cell membrane of gastrointestinal (GI) tract. To inhibit the formation of micelles, lipid was incorporated in the PNS formulation. The intraduodenal bioavailability in rats showed that the bioavailability was enhanced remarkably relative to the aqueous solution. AUC 0-infinity of ginsenoside Rg1 and Rb1 in the lipid-based formulation were 207.52+/-53.95 and 1961.72+/-686.60 microg ml(-1) h, compared with 7.87+/-2.85 and 148.58+/-36.73 microg ml(-1) h, respectively from its aqueous solution. These findings suggested a new strategy to increase the absorption of amphiphilic saponins.