5-氮胞苷对HSG细胞的诱导凋亡作用

目的体外研究5-氮胞苷（5-azacytidine,5-azaC）对起源于人颌下腺闰管的HSG（human salivary gland,HSG）细胞的诱导凋亡作用,为应用5azaC对涎腺肿瘤进行治疗奠定理论和实验基础。方法用不同浓度的5-azaC处理HSG细胞,观察5-azaC在非毒性浓度下,能否诱导HSG细胞发生凋亡。结果加入5-azaC后48h,光镜下可见到少数细胞体积缩小,胞浆向外突起,类似出芽及发泡状;琼脂糖凝胶电泳结果显示经5-azaC作用72h的基因组DNA呈现出＂梯状＂图像,基因组DNA被内切酶切成了180bp～200bp及其整倍数的片断;流式细胞仪检测结果显示细胞在G1期前面出现亚二倍体峰;透射电镜结果显示5-azaC处理组细胞可见核内凋亡小体;免疫组化结果显示5-azaC可以抑制P53、Bcl-2和FAP-1的表达;Western blot结果显示5-azaC处理后可使FAP-1的表达降低。结论5-azaC在体外能诱导HSG细胞凋亡。     

5-azaC对HSG细胞增殖抑制的实验研究

目的:研究5-azaC对HSG细胞的作用,为5-azaC治疗涎腺肿瘤提供理论和实验基础。方法:通过体外生长曲线测定和体内移植实验检测5-azaC对HSG细胞的增殖抑制作用。结果:体外实验表明5-azaC可以抑制HSG细胞的增殖,5×10-6mol/L和10×10-6mol/L5-azaC对HSG细胞的增殖抑制率分别为85%和92%。与对照组相比,用5-azaC处理HSG细胞后再移植到裸鼠皮下,其致瘤性降低。结论:体内、体外实验表明5-azaC能抑制HSG细胞的增殖。     

TNF-α对HSG细胞作用的体外研究

目的体外研究TNF-α对导管起源的HSG（human salivary bland,HSG）细胞的增殖抑制作用,为TNF-α治疗涎腺肿瘤奠定理论和实验基础。方法通过形态学研究、生长曲线的测定、细胞分裂指数测定、嗜银蛋白染色分析、流式细胞仪、克隆形成率等观察TNF-α对HSG细胞的作用。结果光镜下培养的正常HSG细胞为多边形,细胞可连接成片。加入TNF-α后,部分细胞发生形变,脱落到培养液中。1ngl/L、10ngl/L和50ng/L TNF-α对HSG细胞增殖抑制率分别为5%、72%和81%;细胞分裂指数测定、嗜银蛋白染色分析、克隆形成率等结果表明细胞生长受到抑制;流式细胞仪结果表明HSG细胞主要被抑制在G1期。结论 TNF-α在体外能抑制HSG细胞的增殖。     

FAP-1在5-azaC诱导的HSG细胞凋亡中的作用

目的体外研究FAP-1在5-氮胞苷（5-azacytidine,5-azaC）诱导的HSG（human salivary gland。HSG,人涎腺导管细胞,起源于人颌下腺闫管细胞）细胞凋亡中的作用,为应用5-azaC对涎腺肿瘤进行治疗奠定理论和实验基础。方法HSG细胞转染FAP-1反义寡核苷酸前后分别用5-azaC处理,观察转染前后FAP-1表达的变化,同时观察5-azaC对转染前后细胞凋亡作用是否发生变化。结果在形态上转染后的细胞与转染前无明显区别,转染FAP-1反义寡核苷酸链的HSG细胞FAP-1表达较转染前减弱,转染后HSG细胞对5-azaC比转染前敏感,加入5umol／L5-azaC后,凋亡细胞数增加。结论FAP-1在5-azaC诱导的HSG细胞凋亡中起一定作用。     

五倍子对5种常见牙周细菌抑制作用的体外研究

目的：观察五倍子对5种常见牙周细菌的作用。方法：采用试管二倍稀释法，测定五倍子水提取物在体外厌氧环境对牙龈卟啉单胞菌，中间普氏菌，伴放线放线杆菌，具核俊杆菌和血链球菌的最小抑菌浓度（MIC），结果：五倍子对各实验细菌均有抑制作用。对牙周常见可疑致病菌牙龈卟啉单胞菌，伴放线放线杆菌，中间普错菌，具核梭杆菌的MIC值均为3．12％，对牙周有益菌血链球菌的MIC值则为12．5％，结论：浓度为3．12％的五倍子在不破坏牙周局部生态平衡的情况下可有效抑制牙周细菌的生长。     

红景天甙对体外培养腮腺癌细胞增殖的抑制作用

目的：体外研究红景天甙作用于腮腺癌腺样囊腺癌细胞（SACC-2）后，观察SACC-2细胞的增殖情况。方法：用免疫组化的方法检测红景天甙作用前后SACC-2细胞PCNA表达情况。结果：给予红景天甙组的SACC-2细胞PCNA阳性细胞数均较未加药组明显弱，即P〈0．01。结论：红景天甙能抑制SACC-2细胞增殖，可能作为腮腺癌治疗的药物之一。     

选择性环氧化酶-2抑制剂抑制人舌癌细胞增殖和浸润的体外实验研究

目的探讨选择性COX-2抑制剂Ethodolac对人舌癌细胞SAS的增殖和浸润能力的抑制作用。方法将人低分化舌鳞状上皮细胞癌细胞株(SAS)与不同浓度的选择性COX-2抑制剂Ethodolac共同培养,染色后测定595nm下的吸光度。比较不同浓度Ethodolac下的细胞增殖情况。同时,利用Boyden小室测定Ethodolac对SAS细胞浸润能力的影响。结果Ethodolac可以明显降低SAS细胞的增殖和浸润能力(P<0.05),作用效果呈现时间剂量依赖关系。结论本研究为COX-2在肿瘤发生、发展中的作用提供了一定依据,而且也通过COX-2选择性抑制剂Ethodolac对人舌癌细胞SAS增殖和浸润的抑制,提示选择性COX-2抑制剂在口腔癌的预防和治疗中的作用前景。     

毫米波对人舌鳞癌细胞增殖抑制作用的研究

目的　探讨毫米波对人舌鳞癌细胞增殖的影响。方法　用频率为 3 6.9GHz、功率密度为 5～ 2 5mW /cm2 的毫米波 (mmW )照射人舌鳞癌细胞。采用四唑盐比色试验 (MTT测定法 ) ,观察mmW对人舌鳞癌细胞增殖的影响。结果　mmW以时间依赖、非功率密度依赖方式抑制Tca8113细胞增殖 ( p <0 .0 1) ,导致癌细胞致死性变化。结论　mmW抑制人舌鳞癌细胞Tca8113增殖 ,可辅助治疗舌鳞癌。     

黄芩苷对变异链球菌UA159体外的抑制作用

目的 探讨黄芩苷对变异链球菌国际标准株UA159的体外抑制作用.方法 采用液体倍比稀释法结合酶标仪测OD600值测定黄芩苷对变异链球菌UA159的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).利用酶标仪测定不同浓度的黄芩苷药液中变异链球菌UA159的OD600值,绘制生长曲线...     

5-azaC对HSG细胞的诱导分化作用

目的 体外研究5-氮胞苷（5-azacytidine，5-asaC）对起源于人颌下腺闰管的HSG（human salivary gland，HSG）细胞的诱导分化作用，为应用5azaC对涎腺肿瘤进行分化治疗奠定理论和实验基础。方法 用不同浓度的5azaC处理HSG细胞，通过形态学观察和RT-PCR检测HSG细胞的分化程度。结果 加入5azaC后，细胞胞浆内出现颗粒状物质，而对照组则没有出现，RT-PCR产物电泳结果可见经过诱导的HSG细胞在mRNA水平表达α-唾液淀粉酶，未诱导的HSG细胞不表达α-唾液淀粉酶。结论 5azaC在体外能诱导HSG细胞分化。     

Caffeine increases the expression of cystatin SN in human submandibular acinar-like HSG cells

ObjectiveThe study aimed at evaluating in vitro the effect of caffeine on expression of cystatin SN, a potential marker of sensitivity to bitterness in humans.MethodsDifferentiation of human submandibular gland (HSG) cells was induced by culturing cells on Matrigel. Caffeine cytotoxicity was assessed over 3 days by the Resazurin test. Finally, effects of 5, 50 and 100 μM caffeine exposure on cystatin SN expression were explored over 3 days by ELISA.ResultsAt concentrations relevant to human adult plasma levels (5, 50 and 100 μM), caffeine did not affect cell viability whether cells were differentiated or not. Cystatin SN levels were overall higher in differentiated cells and increased with time in both conditions. There was a significant (p < 0.001) effect of caffeine on cystatin SN expression specifically in differentiated cells.ConclusionsThe HSG cell line proved to be a relevant tool to study in vitro the effect of caffeine at concentrations consistent with dietary intake in human subjects. The results suggest that salivary cystatin SN abundance may depend on caffeine intake, with possible consequences on taste sensitivity.     

体外培养的大鼠骨髓基质细胞的生物学特性

目的：研究体外培养的大鼠骨髓基质细胞的生物学特性及基成骨细胞表型特征。方法：分离大鼠四肢长骨髓基质细胞,常规和矿化培养液培养,测定细胞生长曲线,碱性成纤细胞生长因子（bFGF）、重组人骨形成蛋白－2（rhBMP-2)及矿化培养液对骨髓基质细胞性磷酸酶（ALP）活性的影响,观察矿化结节的形成。结果：大鼠骨髓基质细胞群体倍增时间（DT）为66．1h;在矿化液培养条件下细胞DT为50．3h。bFGF和rhBMP－2均不同程度增加骨髓基质细胞碱性磷酸酶的活性。矿化液有较明显的增加骨髓基质细胞碱性磷酸酶活性的作用,用茜素红染色法显示较多的深红色矿化结节。常规培养条件下大鼠骨髓基质细胞生长虽呈现密集单层,没有矿化结节形成。结论：大鼠骨髓基质细胞在体外可以稳定传代培养,在矿化培养液诱导培养条件下可以向成骨细胞分化,bFGF和rhBMP－2有助于骨髓基质细胞表现成骨细胞表型特征,提示骨髓基质细胞在骨移植研究领域有重要的应用价值。     

Characterization of human primary enamel organ epithelial cells in vitro

Tooth enamel is formed by ameloblasts, which are derived from the epithelial cells of the enamel organ. OBJECTIVE: The purpose of this study was to grow human ameloblast-like epithelial cells in culture. DESIGN: Human fetal tooth organs were isolated, and the cells were separated by digestion in collagenase/dispase. The cells were cultured in KGM-2 media with and without serum and at different calcium concentrations. The expression of enamel matrix proteins was analyzed by RT-PCR and cytokeratin 14 was detected by immunohistochemistry. The cells were further characterized by osteogenesis/odontogenesis-related DNA array. RESULTS: Cells isolated from the tooth organs grown in KGM-2 media containing 2-10% serum, were mixture of cobblestone and spindle shaped cells. Culturing these cells in KGM-2 with 0.05 mM calcium was selective for cobblestone ameloblasts-like cells (CAB), which were immunopositive for cytokeratin 14. Amelogenin, ameloblastin, enamelin, MMP-20 and KLK-4 were detected in CAB cells by RT-PCR. Osteogenesis SuperArray analyses could not detect the presence of typical molecules related to mesenchymal odontoblast or osteoblast lineage cells in these cultures. CONCLUSIONS: These studies showed that cobblestone-shaped ameloblast-like cells are selected from the tooth organ cells, by culture in KGM-2 media with 0.05 mM calcium.     

牙龈卟啉单胞菌膜泡诱导牙龈上皮细胞炎性反应的体外研究

目的建立牙龈卟啉单胞菌膜泡诱导牙龈上皮细胞炎性反应的体外模型，探讨牙龈卟啉单胞菌在牙周炎中的致病作用。方法用酶联免疫吸附法检测牙龈卟啉单胞菌膜泡对牙龈上皮细胞前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2）分泌的影响，以实时反转录聚合酶链反应法检测牙龈卟啉单胞菌膜泡对牙龈上皮细胞环氧化物酶（cyclooxygenase，COX）-2和白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-8基因表达的作用。结果牙龈卟啉单胞菌膜泡浓度依赖性地促进了牙龈上皮细胞PGE2的分泌，并使COX-2、IL-6、IL-8的mRNA表达水平显著上调。结论牙龈卟啉单胞菌膜泡诱导牙龈上皮细胞发生的细胞炎性反应，可能是牙周炎发生、发展的重要因素。     

传代的人牙髓成纤维细胞在体外培养下的增殖和表型变化

观察和比较了在ＤＭＥＭ加１０％ＦＣＳ；ＤＭＥＭ加１０％ＦＣＳ和５０μｇ／ｍｌＶｉｔＣ和１０ｍｍｏｌ／Ｌβ－磷酸甘油钠两种培养条件下，第５代人牙髓细胞的某些生物学特征，观察时间为３、９、１５、２１ｄ，通过ＣｏｎＡ和ＷＧＡ凝集素受体表达观察细胞的分化情况。结果表明第５代的人牙髓细胞可能是单一基因表型的细胞，其多层生长的能力减弱，牙髓细胞的凝集素受体（ＣｏｎＡ和ＷＧＡ）表达随培养时间延长未见明显改变。说明随着人牙髓细胞传代培养，人牙髓细胞的某些生物学特征发生了变化。     

不同低氧浓度对体外培养人牙髓干细胞生物学特性的影响

目的:探讨不同低氧浓度对体外培养人牙髓干细胞生物学特性的影响.方法:选择2019年1月-2020年1月收集的健康者完整拔除的下颌阻生第三磨牙,采用块酶消化法培养牙髓干细胞,置于3％O2(3％低氧浓度实验组)、5％O2(5％低氧浓度实验组)和21％O2(21％常氧浓度对照组)中培养7 d.用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡情...