肺癌与人类巨细胞病毒感染关系的初步研究

目的：探讨肺癌与人类巨细胞病毒（HCMV）感染的关系。方法：对88例肺癌及117例肺非癌患者，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清HCMV－IgG，IgM抗体，用聚合酶链反应（PCR）法检测尿HCMV－DNA。同时检测其中64例肺癌及67例肺非癌患者的病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA。对肺癌组中抗癌化疗的患者于每一化疗周期复查血清HCMV－IgM，尿HCMV－DNA。结果：肺癌组血清HCMV－IgM阳性率26．1％，病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA阳性率26．6％，均显著高于肺非癌组（P＜0．01）；血清HCMV－IgG及尿HCMV－DNA阳性率两组未见明显差别。42例肺癌到化疗第二周期时，血清HCMV－IgM16例由阴性转阳性，尿HCMV－DNA6例转阳性。结论：肺病与HCMV感染有统计学上的相关性；抗癌化疗使肺癌患者HCMV活动性感染明显增多，值得重视。     

血清和支气管肺泡灌洗液中DNA聚合酶对肺癌诊断价值

应用~(125)Ⅰ标记dTTP(三磷酸脱氧胸苷)方法,检测了30例正常人、30例良性肺疾病和40例肺癌患者血清DNA聚合酶(DNA—P)水平,同时还检测了30树良性肺疾病和30例肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中DNA—P水平。结果表明,DNA—P对肺癌诊断的敏感度和特异度:血清分别为70％和87％,BALF分别为73％和73％;DNA—P与肺癌的分期和疗效相关。上述结果提示DNA—P可作为肺癌较好的标记物应用于临床。     

血清 CEA、SCC、cYFRA21-1、ProGRP 检测在肺癌诊断中的应用研究

目的：探讨胚胎性癌抗原（CEA）、鳞状细胞癌抗原（SCC）、细胞角蛋白19片段抗原21-1（CYFRA21-1）和胃泌素释放肽前体（ProGRP）4项肿瘤标志物检测在肺癌诊断中的应用价值。方法选取我院170例患者为研究对象,其中100例确诊为肺癌患者为肺癌组,70例肺良性疾病患者为肺良性疾病组,另选50例健康人为正常对照组。分别检测三组研究对象血清 CEA、SCC、CYFRA21-1和 ProGRP 含量,探讨肿瘤标志物检测在肺癌诊断中的价值。结果肺癌组血清 CEA、SCC、CYFRA21-1、ProGRP 4项指标含量均升高,且高于肺良性疾病组和正常对照组（ P ＜0．05）;肺良性疾病组上述4项指标均高于正常对照组（ P ＜0．05）。 CEA在肺腺癌组的阳性率高于鳞癌组（ P ＜0．01）及小细胞肺癌组（ P ＜0．01）。 SCC在肺鳞癌组的阳性率高于肺腺癌组（ P ＜0．01）。 CYFRA21-1在肺鳞癌组的阳性率高于肺腺癌组（ P ＜0．01）和小细胞肺癌组（ P ＜0．01）。 ProGRP在小细胞肺癌组的阳性率高于肺鳞癌组（ P ＜0．01）和肺腺癌组（ P ＜0．01）。结论 CEA、SCC、CY-FRA21-1和ProGRP 4项肿瘤标志物检测有助于提高肺癌的诊断率,对肺癌病理分型也有一定参考价值。     

肺癌组织P21waf1蛋白表达与细胞增殖的关系

目的 :了解肺癌组织P2 1waf1蛋白表达特点 ,研究其与肺癌细胞增殖的关系。方法 :运用免疫组织化学技术 ,检测 76例肺癌组织P2 1waf1和PCNA蛋白表达状况 ,并与肺良性疾病比较 ,分析两种蛋白表达是否相关。结果 :①肺癌组织P2 1waf1与PCNA蛋白表达阳性率分别为 75 %和 80 .2 6 % ,明显高于肺良性疾病组织 (分别为 35 .5 9%和 39.98% ,P <0 .0 0 1)。②肺癌组织P2 1waf1和PCNA蛋白表达与肺癌分期和分化无关。③肺鳞癌PCNA蛋白表达阳性率为 89.6 6 % ,明显高于小细胞肺癌 (4 7.0 6 % )。④肺癌组织P2 1waf1与PCNA蛋白表达无关 ,而肺良性疾病组织中两种蛋白表达相关。结论 :①肺癌P2 1waf1蛋白表达明显上调 ,细胞增殖程度也很高。②肺鳞癌细胞DNA损伤修复能力可能高于小细胞癌。③肺良性疾病细胞增生处于P2 1waf1蛋白控制之下 ,而肺癌细胞则已失去这一控制。     

巨细胞病毒对人群发生高血压的影响

目的：探讨巨细胞病毒对人群发生高血压的影响。方法收集2011年2月至2013年6月来我院接受治疗的168例高血压患者的血液标本作为观察组,同时收集160例体检正常者的血液标本作为对照组。检测并比较两组患者血浆标本中的巨细胞病毒特异性中和抗体、巨细胞病毒特异性IgG和IgM及巨细胞病毒UL93 DNA。结果观察组患者巨细胞病毒UL93DNA、巨细胞病毒特异性IgG和IgM的阳性率分别为73.21%、70.83%和4.20%,对照组患者分别为57.50%、49.38%和2.50%,观察组患者巨细胞病毒UL93DNA和IgG的阳性率高于对照组(P<0.05),而两组间巨细胞病毒特异性IgM阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者血浆巨细胞病毒特异性中和抗体的几何滴度平均为(40.12±19.89),对照组为(59.96±24.85),两组患者间差异有统计学意义(P<0.05)。结论高血压患者的巨细胞病毒感染率高于健康人群,高血压患者巨细胞病毒特异性中和抗体水平降低明显,这均表明巨细胞病毒感染与人群发生高血压存在相关性。     

非小细胞肺癌 BALF 中 RAR-β基因甲基化与p53突变检测及相关性研究?

目的：探讨非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中 RAR-β基因甲基化与 p53基因突变检测的临床意义及二者的相关性。方法收集非小细胞肺癌患者(肺癌组)85例及良性疾病患者(良性疾病组)70例的 BALF 标本,采用甲基化特异性 PCR(MSP)方法检测 BALF 中的 RAR-β基因甲基化,PCR 结合 DNA 测序法检测 p53基因突变。结果肺癌组 BALF 中RAR-β基因甲基化率及 p53基因突变率分别为49.4%、36.5%,均显著高于良性疾病组(P <0.01);(Ⅰ+Ⅱ)期 RAR-β基因甲基化率(32.5%)高于同期 p53基因突变率(12.5%)(P <0.05);(Ⅲ+Ⅳ)期 RAR-β基因甲基化率及 p53基因突变率均显著高于(Ⅰ+Ⅱ)期(P <0.01);发生 RAR-β基因甲基化的肺癌患者 p53基因突变率更高(P <0.01);发生 p53基因突变的肺癌患者RAR-β基因甲基化率更高(P <0.01)。结论检测非小细胞肺癌患者 BALF 中 RAR-β基因甲基化与 p53基因突变有助于肺癌的诊断。     

血常规在儿童巨细胞病毒活动性感染辅助诊断中的价值研究

目的探讨血常规在儿童巨细胞病毒活动性感染辅助诊断中的价值,为降低巨细胞病毒活动性感染漏诊率找出一条新的途径,以利于患者的进一步确诊和规范治疗。方法对在我科诊治的173例疑似巨细胞病毒导致的下呼吸道感染患儿行尿HCMV—DNA检测,根据检测结果分为阳性组和阴性组,对二组患儿的血常规进行统计学分析,比较二组间差异有无统计学意义。结果173例患儿中尿HCMV—DNA检测结果为阳性的有108例、阴性65例,阳性组与阴性组的血红蛋白、白细胞计数、淋巴细胞计数、血小板计数差异均有统计学意义（P〈0．01）,二组红细胞计数、中性粒细胞数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论儿童巨细胞病毒活动性感染常表现为血红蛋白降低、白细胞升高、淋巴细胞升高、血小板升高等“三高一低”表现,因此,血常规可以作为儿童巨细胞病毒活动性感染的辅助诊断依据。     

血清CA125及NSE测定对肺癌的诊断价值

目的 :观察血清CA12 5、NSE测定对肺癌的诊断价值。方法 :采用放射免疫分析法对 5 1例肺癌患者和 32例肺良性疾病患者和 6 8例健康人进行血清CA12 5、NSE水平测定。结果 :发现肺癌患者血清CA12 5、NSE水平明显高于肺良性疾病组和正常对照组 (P <0 .0 0 1) ;其增高的程度与肺癌TNM分期具有一定的相关性。血清CA12 5及NSE测定诊断肺癌的敏感性为 6 2 .72 %及 4 9.0 2 % ;特异性为 99%及 98%。结论 :联合检测血清CA12 5及NSE对肺癌的诊断、分期及疗效判断具有重要的临床价值。     

CEA、CA125联合检测在肺癌诊断及预后评估中的价值

目的探讨癌胚抗原(CEA)和糖类抗原125(CA125)联合检测在临床肺癌诊断和预后评估中的价值。方法选择2012年3月至2015年5月郑州市第三人民医院收治的肺癌患者120例作为肺癌组,选取同期收治的肺良性疾病患者60例作为肺良性组,采用化学荧光法检测两组患者血清CEA和CA125,记录并比较两组患者CEA、CA125水平及阳性率。结果肺良性疾病组CEA和CA125水平显著低于肺癌组,差异具有统计学意义(P<0.05)。肺癌组两项指标单独检测及联合检测阳性率均高于肺良性疾病组,肺癌组两项指标联合检测阳性率高于两项指标单独检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CEA、CA125联合检测在肺癌诊断及预后评估中具有重要的临床意义。     

非小细胞肺癌中高危型人乳头瘤病毒感染的检测

目的通过检测人乳头瘤病毒（HPV）16／18型在非小细胞肺癌中的感染状况，初步探讨高危型HPV感染与肺癌发生的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）检测44例非小细胞肺癌及18例肺良性病变组织中HPV16／18两型DNA相关序列，同时采用免疫组织化学SP法检测HPV16／18E6癌蛋白表达情况。结果非小细胞肺癌组及肺良性病变组中高危型HPVDNA阳性率分别为43．18％（19／44）和5．56％（1／18），差异有显著性意义（P〈0．05）。肺癌组E6癌蛋白的检出率为36．36％（16／44），对照组未发现阳性病例（0／18），差异有显著性意义（P〈0．05）。统计分析显示：高危型HPV感染与肿瘤临床分期（Ⅰ～Ⅱ期）、吸烟史有关，与其他因素（年龄、性别、病理分型、肿瘤发生部位、淋巴结转移）无关。结论非小细胞肺癌的发生可能与HPV16／18型感染有关；免疫组化检测E6癌蛋白简便可信，可作为检测高危型HPV感染的常规方法。     

肺癌组织中结核菌L型的检出与意义

目的 探讨结核菌Ｌ型与肺癌的可能关系。方法应用改良抗酸染色法及免疫酶染色法,对９６例经纤维支气管镜活检标本及２０例手术切除肺标本进行结核菌及其Ｌ型检测,结果：９３例肺癌组织抗酸染色及免疫酶染色阳性率分别为３８．７１％和５１．６１％,均高于非肺癌非肺结核（对照）组（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）,抗酸染色所检出的结核菌除１例为典型杆菌外,其余都为Ｌ型,免疫酶染色阳性中,有２９．７１％阳性颗粒见于癌细胞     

DETECTION OF HUMAN CYTOMEGALOVIRUS INFECTION BY DNA-DNA HYBRIDIZATION

A rapid detection method has been established to identify human cytomegalovirus (HCMV) in specimens of urine and white blood cells with use of DNA-DNA hybridization technology. Since radioactive labels should be avoided if possible, the DNA-DNA hybridization procedure has also been modified to employ biotin labelled probe. Preliminary experiments for sensitivity and specificity showed that hybridization with the probe HCMV DNA EcoRI J fragment could detect 0.9 pg (~(32)P-probe) or 90 pg (biotin-probe) homologous DNA; 60 cells (~(32)P-probe) or 325 cells (biotin-probe) of HCMV infected fibroblasts, and 0.3125 TCID_(50) HCMV-AD_(169). The labelled probe failed to hybridize to DNA from ather herpesviruses, uninfected human lung fibroblasts and human placental DNA. Some specimens have been detected for HCMV by DNA hybridization with ~(32)P-probe. Of 76 urine specimens and 46 white blood cell specimens from 51 newborn infants with clinically suspected cogenital HCMV infection, 11 (12%) and 9 (19%) were positive for HCMV DNA, respectively. Of 11 white blood cell specimens from normal women of childbearing age and 47 white blood cell specimens from blood donors, 6 (55%) and 30 (63%) were positive for HCMV DNA, respectively.     

用聚合酶链反应检测宫颈癌组织中人巨细胞病毒DNA相关序列

为建立检测人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染的ＰＣＲ方法并探讨ＨＣＭＶ与宫颈癌的关系，从石蜡包埋和活检宫颈癌组织中提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应体外扩增ＨＣＭＶＥｃｏＲＩＤ片段上一段长１５２ｂｐ的核酸序列，再用地高辛末端转移酶标记法标记和扩增片段互补的ＨＣＭＶ寡核苷酸探针，用该探针证实扩增片段的特异性。检测宫颈癌标本４３例，阳性率为２５．６％（１１／４３），正常宫颈组织８例，阳性率为０。宫颈癌标本阳性率高于正常宫颈标本，提示ＨＣＭＶ与宫颈癌的发生有关。     

聚合酶链反应检测患儿尿标本中的巨细胞病毒DNA

本文建立了聚合酶链反应(PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)方法,探讨了该方法的某些实验条件。用PCR检测24例临床患儿尿标本。证明PCR方法特异、敏感、简便而快速。同科不同属病毒如HSV、EBV等以及人源正常细胞均无假阳性结果:最小检出量可达0.1fg DNA,相当于6个基因拷贝;用水浴箱手控时间即可进行PCR循环,30次循环仅需97min30s;PCR和DNA杂交检测尿标本中HCMV阳性例数分别为20和14例。该结果证明HCMV感染儿童的广泛性和严重性,初步表明儿童肾病综合症与HCMV有关。     

生物素标记组合探针杂交检测患儿尿液以诊断巨细胞病毒感染

利用 HCMV AD 169株的克隆 DNA 片段制成生物素标记的组合探针进行临床标本的 HCMV DNA 的杂交检测,此探针特异性强,不与其它类 DNA 发生非特异性杂交,可检出25pg 同源 DNA,100～500个 HCMV 感染细胞或2.57LgTCID50 HCMV 病毒悬液.杂交法结果与病毒分离结果符合率极高.初步用于临床尿标本检测得出,先天畸型,乳儿肝炎及激素治疗三组患儿中,HCMV 的排毒率分别为100%(3/3),61%(11/18)和75%(3/4).提示 HCMV 可能是临床部分患儿的重要致病源.同时表明杂交法对 HCMV 感染的检测是快速、特异及敏感的.     

Detection of DNA Aneuploidy in Exfoliated Airway Epithelia Cells of Sputum Specimens by the Automated Image Cytometry and Its Clinical Value in the Identification of Lung Cancer

Lungcanceristhemostcommoncauseofcancerdeathintheworld ,andtheoverallfive yearsurvivalrateforpatientswithlungcancerisbelow 13% [1] .Screeningforhigh riskindividualsanddiagnosisoflungcancerappearalogicalapproachtoreducethedeathrate .Comparedtotheexamination…     

反转录聚合酶链反应检测胃癌病人中心静脉血CK20mRNA表达及其临床意义

目的：运用巢式反转录聚合酶链反应（nest RT—PCR）技术，探讨细胞角蛋白20（CK20mRNA）在胃癌病人中心静脉血的表达及其临床意义。方法：nest RT—PCR检测胃癌病人中心静脉血及良性疾病病人中心静脉血CK20mRNA，表达情况与临床病理因素进行分析。结果：64例胃癌病人34例CK20mRNA阳性，阳性率为53．1％，良性病病人16例均阴性；胃癌病人血液CK20mRNA的阳性率与肿瘤大小、腹腔和肝转移、临床分期相关（P〈0．05），与病理组织学类型无相关性（P〉0．05）；8例早期胃癌病人中2例CK20mRNA阳性。结论：扩增CK20mRNA的nest RT—PCR方法是检测胃癌病人中心静脉血微转移敏感而特异的方法。     

人巨细胞病毒UL135基因在临床低传代分离株中的多态性研究

目的：研究人巨细胞病毒（HCMV）UL135基因编码序列在临床低传代分离株中的多态性，探讨HCMV基因多态性与其感染引起不同临床疾病之间的关系。方法：对29株经荧光定量PCR方法检测HCMV．DNA为阳性的临床低传代分离株的细胞培养上清液进行HCMVUL135全序列PCR扩增，并对PCR扩增阳性的25例标本进行序列测定及分析。结果：29株临床低传代分离株有25株PCR扩增阳性。25株分离株UL135开放读码框架（0RF）长度均与Toledo株相同，其核苷酸的变异率为0．1％-2．6％。与Toledo株相比，部分分离株具有氨基酸翻译后修饰位点的新增或缺失。25株临床分离株UL135蛋白质二级结构预测结果显示了第28位、313—317位、161—163位、171位氨基酸均有蛋白质结构二级的改变。结论：25株HCMV临床低传代分离株UL135基因及其编码产物的氨基酸序列比较保守，但仍存在一定程度的多态性，未发现UL135基因的变化与HCMV先天感染导致的不同疾病存在着相关联系。