程序性死亡因子配体1在肝细胞癌中的表达及意义

近年来以阻断PD-1/PD-L1通路为基础的免疫治疗在黑色素瘤、肺癌等恶性肿瘤中取得令人鼓舞的进展,其在肝细胞癌中的研究也在逐渐展开。介绍了PD-1/PD-L1作用机制、肝细胞癌组织中PD-L1的表达情况以及其在肝细胞癌治疗领域的基础及临床研究。认为PD-L1在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,有望成为判断肝细胞癌预后的独立指标,PD-1/PD-L1通路的发现为肝细胞癌的免疫治疗提供了新的靶点。     

神经生长因子在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 观察神经生长因子(NGF)在原发性肝癌组织中的表达及在患者血清中的含量,了解血清NGF水平与肝癌临床病理特征的关系. 方法 26例肝细胞癌及对应癌旁组织,采用半定量PCR、免疫印迹及免疫组织化学分析NGF mRNA和蛋白的表达及其分布.健康对照者、慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者共150例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清NGF的水平,分析其临床意义.两组之间差异的显著性比较用t检验、Mann-Whitney U检验,多组之间差异的显著性比较应用Kruskal-Wallis H检验.数据均采用SPSS 11.5统计软件处理.结果 肝癌组织中NGF在mRNA及蛋白水平的表达高于癌旁组织,NGF主要分布于肝细胞胞质.血清NGF水平:肝癌组、肝硬化组、慢性肝炎组患者和正常对照组分别为(33.86±16.11)pg/ml、(20.57±9.73)pg/ml、(13.20±6.23)pg/ml和(11.13±6.12)pg/ml,肝癌组、肝硬化组显著高于慢性肝炎组患者和正常对照组,x2值分别为39.119和12.041,P值均＜0.01.肿瘤直径大于5cm及TNM分级为Ⅲ、Ⅳ级的肝癌患者血清NGF的水平高于肿瘤直径小于5cm及TNM分级为Ⅰ、Ⅱ级的患者.结论 NGF在肝癌组织中高表达,肝癌患者血清NGF水平明显升高,与肿瘤体积和TNM分级相关,提示NGF在肝癌的发生和发展过程中可能发挥一定作用,血清NGF有助于肝癌患者的病情评估和预后估计.     

VEGF、LYVE-1在肝癌组织中的表达与意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、淋巴管内皮透明质酸受体(LYVE)-1在肝癌组织中表达与意义。方法采用免疫组织化学法检测32例肝癌组织、23例肝癌旁组织和19例正常肝脏组织中VEGF、LYVE-1的表达。结果肝癌组织与癌旁组织中VEGF与LYVE-1阳性率均显著高于正常组织,而癌旁组织LYVE-1表达高于其他两组(P<0.05);低未分化,Ⅲ^Ⅳ期和有淋巴结转移的肝癌组织中VEGF与LYVE-1的表达水平分别比高中分化,ⅠⅣ期和有淋巴结转移的肝癌组织中VEGF与LYVE-1的表达水平分别比高中分化,Ⅰ^Ⅱ期和无淋巴结转移组高,且两者表达呈显著正相关(r=0.383,P<0.05)。结论 VEGF与LYVE-1的表达在肝癌中具有重要意义,两者可能在肝癌的发展及转移过程中起重要作用。     

程序性死亡受体1/程序性死亡受体配体1通路在1型糖尿病中的研究进展

T1DM是胰岛β细胞损伤导致的Ins绝对缺乏的自身免疫性疾病。程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)通路,负性调节T细胞功能维持机体自身免疫稳态,在T1DM发生发展中起重要作用。本文综述PD-1/PDL-1通路在T1DM中的研究进展。     

抗病毒治疗慢性丙型肝炎患者T细胞表面程序性死亡1和程序性死亡配体1的表达

目的 观察慢性丙型肝炎(CHC)患者抗病毒治疗24周时外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞(T细胞)表面表面程序性死亡1 (PD-1)和程序性死亡配体1(PD-L1)表达水平,分析其与抗病毒治疗临床转归的关系.方法 24例CHC患者,均采用聚乙二醇干扰素α-2a (Peg-IFN α-2a)每周皮下注射一次,联合利巴韦林800 ～ 1200 mg/d,治疗24 ～ 48周.采用流式细胞术和实时荧光定量检测患者治疗前、治疗4、12、24周外周血CD4+和CD8+T细胞表面PD-1、PD-L1表达水平和外周血HCV RNA,全自动生化分析仪检测ALT.采用SPSS16.0软件.两样本计量结果分析采用t检验,治疗前后的计量结果采用重复测量的单因素或两因素方差分析,所有检验为双侧检验. 结果 CHC患者治疗后4周HCV RNA阴性者19例,CD4+和CD8+T细胞表面PD-1的表达率在治疗前分别为18.6％±6.1％和16.6％±13.8％,治疗24周时分别为10.3％±7.7％和9.4％±4.6％,治疗前后比较,PD-1的表达明显下降,F值为12.406和4.955,P值为0.002和0.039,差异有统计学意义.CD8+T细胞表面PD-L1的表达率在治疗前为17.5％±13.7％,治疗4、12、24周时分别为25.9％±11.1％、29.6％±15.1％、32.0％±15.7％,治疗后明显升高,F值分别为9.063、8.365、9.736,P值均＜0.01.治疗4周时,HCV RNA阳性者5例,仅发现CD8+T细胞表面PD-L1的表达治疗24周(39.2％±15.6％)与治疗前(17.4％±16.7％)比较明显升高,F=10.292,P=0.033.持续病毒学应答者20例:CD4+T细胞表面PD-1的表达在治疗4、12、24周分别为14.4％±7.5％、14.0％±6.9％、10.7％±7.6％,治疗前为20.2％±7.5％,与治疗前比较明显下降,F值分别为6.133、5.541、14.780,P＜0.05或P＜0.01.CD8+T细胞表面PD-1的表达在治疗12、24周分别为10.2％±4.6％和10.1％±4.9％,治疗前为16.8％±13.4％,治疗前后比较,PD-1的表达在治疗后明显下降,F值为4.964和4.613,P值均＜0.05.CD8+T细胞表面PD-L1的表达在治疗12、24周分别为30.8％±16.6％和35.2％±16.5％,治疗前为19.0％±14.5％,治疗后明显升高,F=6.442,P=0.020和F=12.349,P=0.002.复发组4例,各治疗时间点PD-1和PD-L1与治疗前比较,差异无统计学意义.结论 快速有效的抗病毒治疗可以下调CHC患者外周血CD4+和CD8+T细胞表面PD-1的表达,上调CD8+T细胞表面PD-L1的表达.CHC患者外周血CD4+和CD8+T细胞表面PD-1和PD-L1表达水平的变化可能与患者抗病毒治疗临床转归存在关系.     

GP73在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨高尔基体糖蛋白73(GP73)表达诊断肝癌的价值。方法采用免疫组织化学染色SP法检测60份肝癌组织、癌旁组织及24份正常肝组织中GP73表达;分析GP73表达与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织GP73阳性率显著高于正常肝组织(P<0.05)。GP73表达与Child-Pugh分级呈正相关(P<0.05),在肝外转移和HBV感染中表达亦显著增强(P<0.05),与性别、年龄、AFP、肿瘤大小、肝硬化和门脉癌栓无明显相关性。结论 GP73与肝癌的发生发展有关。     

程序性细胞死亡受体1配体及可溶性程序性细胞死亡受体1配体对肝细胞癌预后的预测价值与争议

目前针对肝细胞癌(以下简称肝癌)的治疗手段多样,包括手术治疗、介入治疗、免疫治疗等,尽管如此,肝癌患者的5年生存率也仅为12.5%。影响肝癌预后的因素一直以来都是研究的焦点。近几年,随着程序性细胞死亡受体1 (PD-1)抑制剂在治疗肝癌方面的研究逐渐深入,作为其配体的PD-L1及可溶性PD-L1(s PD-L1)在肝癌免疫逃逸中的作用及预后预测价值也开始得到广泛关注与研究。重点阐述了现阶段PD-L1和s PD-L1作为免疫标志物在评价肝癌预后中的争议、共识及进展。     

p53、c-Myc在血吸虫感染的原发性肝癌患者肝癌组织中的表达及意义

目的 对有血吸虫感染的肝癌患者肝癌组织p53、c-Myc蛋白的表达及其与肝癌生物学行为进行研究,探讨血吸虫感染与肝细胞癌的关系.方法 58例原发性肝细胞癌患者分为两组:原发性肝细胞癌伴有血吸虫病组(HCS组)23例和原发性肝细胞癌不伴有血吸虫病组(HC组)35例.采用免疫组织化学sP法检测所有患者的p53、c-Myc蛋白表达;同时对p53、c-Mye与肝细胞癌的多种临床病理参数的相关性进行分析.结果 p53蛋白阳性表达率在两组中分别为73.9%(17/23)和31.4%(11/35).存在显著性差异(P<0.01);而c-Myc蛋白阳性率在HCS组和HC组中无显著性差异(P>0.05).p53及c-Myc在肝癌组织中的检出率与肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度明显相关(P<0.05或0.01).结论 血吸虫感染对肝癌组织中p53突变蛋白的过量表达有一定的促进作用.p53及c-Myc在肝癌组织中的检出率与代表肿瘤不良生物学特征的指标肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度明显相关.联合检测p53、c-Myc在肝细胞癌中的表达,可作为估价肝细胞癌生物学行为的参考指标.     

NHE1 mRNA在肝癌组织的表达及意义

目的 探讨钠氢交换蛋白1（NHE1）mRNA在原发性肝细胞肝癌组织及癌旁组织的表达及意义。方法采用RT—PCR检测诊断为HCC患者34例的肝癌及癌旁组织中NHE1mRNA的表达情况。结果所有肝癌组织和癌旁组织NHE1均有表达,相对表达量分别为2．892±0．882和0．802±0．206,两者存在显著性差异（P〈0．001）。作为对照的21例肝组织NHE1的相对表达量为0．872±0．186。肝癌组织与对照肝组织比较存在显著性差异（P〈0．001）;癌旁组织与对照肝组织比较差异无统计学意义（P〉0．10）。将从同一患者取材的肝癌组织和癌旁组织检测到的NHE1mRNA的表达量进行配对t检验,两者间存在显著性差异（P〈0．001）。结论NHE1mRNA在肝癌组织的表达增高,可能在肝癌的发生中起一定的作用。     

急性肝功能衰竭大鼠模型中程序性死亡-1及其配体的表达

目的 探讨程序性死亡-1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)在急性肝功能衰竭大鼠模型中的表达变化及其在肝脏急性炎性损伤中的作用.方法 SD大鼠分为2组:正常组6只,模型组30只,以D-氨基半乳糖(D-Gal)诱导急性肝功能衰竭大鼠模型.造模后分别在12、24、48、72和120 h取大鼠血及肝脏标本,采用RT-PCR法检测肝组织中PD-1 mRNA、PD-L1 mRNA的表达.计量资料组间比较用t检验,相关性检验用Pearson直线相关分析.结果 造模后12 h,大鼠血ALT、AST明显升高,分别为(217.3±33.7)U/L和(397.2±101.3)U/L,显著高于正常组的(30.5±3.1)U/L和(78.6±4.2)U/L,差异有统计学意义(t=-8.921,-6.121,均P＜0.01),至48 h达高峰.造模后12 h,模型组大鼠PD-1 mRNA表达(0.385±0.074)高于正常组(0.097±0.009),差异有统计学意义(t=-7.725,P＜0.01),48 h达高峰(0.927±0.132),72 h则明显下降.PD-L1mRNA在正常大鼠肝组织中表达很少,模型组PD-L1 mRNA水平逐渐升高,48 h达高峰(0.593±0.105)(t=-10.076,P＜0.01).造模后大鼠PD-1、PD-L1表达水平与血清ALT水平呈正相关(r=0.807,0.792,P＜0.01).结论 PD-1/PD-L1表达在急性肝功能衰竭大鼠肝脏炎性损伤中可能起重要作用.     

Clinical significance of programmed death 1/programmed death ligand 1 pathway in gastric neuroendocrine carcinomas

BACKGROUND Recently, more and more studies have demonstrated the pivotal role of programmed death 1/programmed death ligand 1(PD-1/PD-L1) pathway in the immune evasion of tumors from the host immune system. However, the role of PD-1/PD-L1 pathway in gastric neuroendocrine carcinomas(G-NECs) remains unknown.AIM To investigate the expression of PD-1/PD-L1 and role of PD-1/PD-L1 pathway in G-NECs, which occur rarely but are highly malignant and clinically defiant.METHODS We investigated the expression of PD-L1 on tumor cells and PD-1^+, CD8^+, and FOXP3^+ T cell infiltration by immunohistochemistry in 43 resected G-NEC tissue specimens. The copy number alterations of PD-L1 were assessed by qRT-PCR.RESULTS Most of the G-NECs tumor cells exhibited a near-uniform expression pattern of PD-L1, while some showed a tumor-stromal interface enhanced pattern. Of the 43G-NECs, 21(48.8%) were classified as a high PD-L1 expression group, and the high expression of PD-L1 was associated with poor overall survival(OS). The high expression of PD-L1 was correlated with abundant PD-1^+ tumor infiltrating lymphocytes(TILs) instead of CD8^+ TILs and FOXP3^+ regulatory T cells(Tregs).Our analysis also suggested that the infiltration of CD8^+ TILs tended to be a favorable factor for OS, although the difference did not reach the statistical significance(P = 0.065). Meanwhile, PD-L1 was significantly overexpressed in cases with copy number gain as compared with those without.CONCLUSION Our data demonstrated for the first time that high expression of PD-L1 in GNECs is associated with a poor prognosis, while the high expression may be due to the copy number variation of PD-L1 gene or stimulation of TILs. These results provide a basis for the immunotherapy targeting PD-1/PD-L1 pathway in GNECs.     

原发性肝癌C-kit和SCF基因的表达及意义

探讨C -kit、SCF基因编码的蛋白在肝癌(HCC)组织中的表达及其临床病理意义。采用免疫组化SP法检测92例肝癌中C -kit、SCF蛋白表达,同时取对应的癌旁肝组织及30例良性肝病组织作对照。结果显示,HCC中有较强的C -kit和SCF蛋白表达,癌旁组织呈弱表达,良性肝病组织则呈阴性表达。C -kit、SCF阳性率肝癌组织与癌旁组织、良性肝病组织比较差异有非常显著意义(P均<0 . 0 1)。C -kit、SCF蛋白表达与AFP异常、肝癌分级、门脉癌栓有关。C -kit、SCF蛋白过表达可能在原发性肝癌的发生、发展中发挥作用。     

Prognostic value of programmed cell death ligand-1 expression in breast cancer: A meta-analysis

Background:The correlation between programmed cell death-ligand 1 (PD-L1) which may affect T cell to form the immune tolerance and breast cancer (BC) still maintains to be uncovered. This meta-analysis was about to explore PD-L1 expression as well as its prognostic role in BC.Methods:First of all, we performed 3 databases: PubMed, Embase, and Web of Science to explore publications between January of 2015 and January of 2020. Strict inclusion and exclusion criteria were conducted: immunohistochemistry shall be used to detect target molecule expression and at least 1 survival indicator and related data we need should be included. The hazard ratio and 95% confidence interval were pooled related with survival as well as clinicopathological parameters. The effects of PD-L1 in differed aspects like sample size and age of each cohort were demonstrated by subgroup analyses as well as sensitivity analyses which may complain the potential source of heterogeneity. P < .05 indicates factors were charge of the heterogeneity of prognosis. Begg and Egger tests were used to identify publication bias.Results:We identified 12 studies containing a blanket of 4336 patients with BC for whom PD-L1 positive tumor cells were related with higher tumor stage, lymph node metastasis, estrogen receptor negativity, human epidermal growth factor receptor 2 positivity, luminal B and triple negative BC molecular subtype and high nuclear-associated antigen Ki- 67 expression. Meanwhile, compared to patients with PD-L1 negative expression, PD-L1 positivity associated with worse overall survival (Hazard ratio [HR]:1.43; 95% CI:0.98–2.10; P < .001) and might have no obvious tight connection with disease free survival (HR:1.40; 95% CI:1.11–1.78; P = .101) and recurrence free survival (HR:2.36; 95% CI:1.04–5.34; P = .145). The outcome of the meta-analysis was confirmed to be credible by sensitivity analysis. Publication bias was not existed indicated (P = .640).Conclusion:Positive PD-L1 expression has a worse clinical outcome in patients with BC demonstrated by our meta-analysis. Being urgent to catch attention to the role of PD-L1 in BC, it may be considered as prognostic marker of immune microenvironment for improving therapy efficacy.     

Pin1和paxillin蛋白在肺癌组织中的表达及临床意义

［摘要］　目的　 探讨Pin1和paxillin蛋白在肺癌组织及癌旁正常肺组织中的表达差异,并分析二者与临床病理特征的相关性。方法　 收集2018年6月至2022年9月广州医科大学附属第二医院收治的208例原发性肺癌患者的病历资料和病理组织,采用免疫组化染色（SP法）检测组织中Pin1和paxillin的表达,分析其与临床病理特征的关系。Western blot检测多个肺癌细胞系细胞中Pin1和paxillin蛋白表达水平。应用Kaplan-Meier生存曲线评估Pin1和paxillin表达与患者预后的关系。结果　 肺癌组织中Pin1和paxillin的表达水平高于癌旁正常肺组织,差异有统计学意义（P<0.05）。Pin1蛋白表达与T分期、淋巴结转移和临床分期具有相关性（P<0.05）;paxillin蛋白表达与组织学类型、淋巴结转移具有相关性（P<0.05）。Spearman秩相关分析结果显示,肺癌组织中Pin1与paxillin蛋白表达呈正相关（r_s=0.455,P<0.001）。Western blot结果显示,Pin1和paxillin在不同肺癌细胞株中表达高低不一。paxillin低表达组患者的生存预后显著优于paxillin高表达组（P<0.05）,Pin1表达水平则与肺癌患者生存预后无显著关联（P>0.05）。结论　肺癌组织中Pin1和paxillin蛋白表达升高,与临床病理特征相关。肺癌组织中Pin1与paxillin表达呈正相关,且paxillin表达水平可作为肺癌患者预后的重要判断指标之一。     

假基因DUXAP8在肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨DUXAP8在肝癌中的表达和临床意义,并探讨可能的作用机制。方法收集TCGA数据库中截至2019年6月的肝癌表达数据及临床资料,筛选出同时满足在癌组织与癌旁组织差异表达且影响患者预后的lncRNA。分析DUXAP8表达水平与肝癌患者临床病理特征以及预后的相关性。利用GO和KEGG通路富集方法分析与DUXAP8相关的基因生物功能及其可能参与的生物过程。利用STRING数据库和Cytoscape进行蛋白质相互作用分析并筛选关键基因,然后对关键基因的表达量及其预后情况进行分析并进行文献检索分析。肝癌组织和癌旁组织DUXAP8表达比较采用Wilcoxon秩和检验和Wilcoxon符号秩和检验。不同临床病理特征的患者DUXAP8表达水平比较采用Wilcoxon秩和检验。利用Kaplan-Meier法绘制生存曲线并采用log-rank检验进行组间比较;采用Cox回归分析预后影响因素。Pearson相关法分析DUXAP8的相关基因。结果非配对样品及配对样品肝癌组织和癌旁组织中DUXAP8的表达水平存在显著差异(P值均<0.001),肝癌组织中DUXAP8表达明显升高。在不同年龄、T分期的患者中DUXAP8表达差异显著(P值均<0.05),年龄≥60岁或T分期等级为T3或T4,DUXAP8表达量较高。单因素分析显示,临床分期、T分期、DUXAP8表达量与患者总生存期相关(P值均<0.001),多因素Cox回归分析结果显示,临床分期晚[风险比(HR)=1.648,95%可信区间(95%CI):1.330~2.709,P<0.001]、高DUXAP8表达仍是预后差的独立危险因素(HR=1.849,95%CI:1.262~2.713,P<0.01)。DUXAP8高表达的样本中,富集了与维持肿瘤细胞的增殖和细胞周期等相关的基因。TOP2A、KIF2C、TTK、PLK1、CDCA8、CDC20、NCAPG、BUB1B、BUB1和CCNA2为DUXAP8相关靶基因的Hub基因,主要参与细胞有丝分裂和细胞周期等过程,是肝癌患者预后不良的相关因素(P值均<0.05)。结论DUXAP8高表达是肝癌患者预后不良的危险因素,DUXAP8可能通过影响细胞增殖、周期等过程促进肝癌的发生发展。     

肝癌家族史与肝癌关系的20年前瞻性队列研究

目的 探讨肝癌高发区肝癌家族史与肝癌发生的关系.方法 用1992年在江苏省启东市建立的由1 438名参加者组成的肝癌前瞻性研究队列,分析1992年5月至2012年11月20年间一级亲属肝癌家族史与肝癌发生的关系.率的组间差异比较采用x2检验,均数差异比较采用t检验,危险度评估计算相对危险度(RR)及95％可信区间(CI).结果 队列合计随访25 753人年.有一级亲属肝癌家族史[FH(+)]325人,发生肝癌69例,发病率1 244.36/10万人年;无一级亲属肝癌家族史[FH(-)]1 113人,发生肝癌103例,发病率509.70/10万人年,两组差异有统计学意义(x2=35.40,P＜0.01),RR=2.44,95％ CI为1.80 ～ 3.31.FH(+)/HBsAg(+)、FH(-)/HBsAg(+)、FH(+)/HBsAg(-)、FH(-)/HBsAg(-)组肝癌累积发生率分别为32.21％、19.80％、1.71％、0.65％.FH(+)/HBsAg(+)者发生肝癌的危险性显著高于FH(-)/HBsAg(+)者(x2=12.97,P＜0.01),RR=1.75,95％CI为1.29 ～ 2.38;与HBsAg(-)/FH(-)者相比,RR高达59.59.HBsAg(-)/FH(+)者的肝癌发病率是HBsAg(-)/FH(-)人群的2.60倍,但差异无统计学意义(x2=1.310,P=0.252).母亲患肝癌者的肝癌发病率显著高于父亲患肝癌者(x 2=4.393,P=0.036),RR=1.86,95％ CI为1.03 ～ 3.36.FH(+)肝癌患者中,56.52％ (39/69)的发病年龄小于50岁,与FH(-)肝癌(40.78％,42/103)相比,差异有统计学意义(x 2=4.111,P=0.043).结论 一级亲属肝癌家族史与肝癌发生密切相关,在肝癌发生中与HBsAg存在协同作用.肝癌发生的遗传学机制值得进一步深入研究.