HIV-1感染者CD73~+CD8~+ T细胞减少与T细胞异常活化的相关性研究

目的探讨HIV-1感染者外周血CD8~+T细胞上CD73的表达特点及其与T细胞异常活化和疾病进展的关系。方法研究入选65例HIV-1感染者和27例健康对照。通过流式细胞术检测研究对象外周血CD73~+CD8~+T细胞的频率和绝对计数,并将患者CD73~+CD8~+T细胞绝对计数和频率与其CD4~+T细胞计数、HIV-1载量以及CD38~+CD8~+T细胞频率进行相关性分析。结果与健康对照相比,HIV-1感染者外周血CD73~+CD8~+T细胞绝对计数和频率均明显降低(P均0.05);HIV-1感染者外周血CD73~+CD8~+T细胞绝对计数和频率与CD4~+T细胞计数呈正相关(r=0.555,P=0.001;r=0.342,P=0.005),与CD38~+CD8~+T细胞频率呈负相关(r=-0.384,P=0.002;r=-0.387,P=0.001);HIV-1感染者CD73~+CD8~+T细胞的绝对计数与HIV-1载量呈弱负相关(r=-0.261,P=0.035)。结论 HIV-1感染者外周血CD73~+CD8~+T细胞的减少不但与患者T细胞的活化程度呈显著负相关,而且与AIDS疾病进展相关。     

正常T细胞分泌激活因子基因多态性与HIV-1感染者病毒载量、CD+4细胞计数和CD+4/CD+8比值的关系

目的分析正常T细胞分泌激活因子(RANTES)启动子和内含子等位基因,对艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血CD+4细胞计数、CD+4/CD+8比值和病毒载量的关系,以期探讨RANTES单核苷酸多态性(SNP)和艾滋病(AIDS)发病的关系.方法用流式细胞仪和real time法对40例汉族HIV-1感染者测定外周血CD+4、CD+8细胞计数和病毒载量,应用PCR-RFLP法进行基因分型.结果对RANTES-403、-28和In1.1三个位点等位基因与外周血CD+4T淋巴细胞计数、CD+4/CD+8+比值和病毒载量的关系的分析表明,具有RANTESIn1.1 C/C和T/C基因型的感染者,与较高的病毒载量、较低的C+4T细胞计数和C+4/CD+8比值有关.In1.1 T/T与T/C、C/C基因型的log10病毒载量的差异有非常显著的统计学意义(P＜0.01),但是不同基因型之间CD+4T淋巴细胞计数和CD+4/CD+8细胞比值则无显著性差异.log10病毒载量和CD+4T淋巴细胞计数(r=-0.447,P＜0.01)、CD+4/CD+8比值(r=-0.369,P＜0.05)有显著的负相关关系.结论所研究人群中,具有RANTES In1.1C的基因型者,与较高的病毒载量、较低的CD+4T细胞计数和CD+4/CD8+比值有关,它们是反映AIDS进程的主要指标,可能加速AIDS发病进程;而RANTES-403和-28等位基因的影响则处于相对次要的作用.     

CXCR5~+CD8~+ T细胞在HIV感染中的免疫特征及其与疾病进展关系的研究

目的探讨HIV感染者外周血CXCR5~+CD8~+T细胞的频率、功能变化及其与病情进展的相关性。方法收集40例HIV感染者和15例健康对照者,采用流式细胞分析术检测其外周血CXCR5~+CD8~+T细胞频率及IFN-γ和IL-10表达,并分析其与血浆HIV载量和外周血CD4~+T细胞计数的相关性。结果与健康对照组相比,HIV感染组外周血CXCR5~+CD8~+T细胞频率上调(P0.05),且与外周血CD4~+T细胞计数呈弱正相关(r=0.349,P=0.027),与血浆HIV载量呈弱负相关(r=-0.377,P=0.040);HIV感染者外周血CXCR5~+CD8~+T细胞IFN-γ表达与血浆HIV载量呈负相关(r=-0.514,P=0.002);而CXCR5~+CD8~+T细胞IL-10的表达在HIV感染者中明显上调(P0.05),与外周血CD4~+T细胞计数呈弱负相关(r=-0.317,P=0.046),与血浆HIV载量呈正相关(r=0.670,P=0.002)。结论 HIV感染者外周血CXCR5~+CD8~+T细胞频率功能变化与疾病进展密切相关。     

HIV慢性感染者Vδ2T淋巴细胞的CD25表达与其凋亡及疾病进展的关系研究

目的 探讨HIV慢性感染者Vδ2 T淋巴细胞上CD25的表达与其频率、凋亡及HIV感染疾病进展的关系.方法 选择本院2012年3月-2013年4月门诊随访的HIV慢性感染者31例及健康对照者10例.31例HIV慢性感染者中,未接受高效抗反转录病毒治疗(highly active antiretroviral therapy,HAART)的患者10例(未治疗组),治疗3个月的患者10例(治疗3个月组),治疗6个月的患者11例(治疗6个月组).应用流式细胞术检测Vδ2 T淋巴细胞频率、凋亡率及CD25表达情况,观察未治疗组、治疗3个月组和治疗6个月组上述指标的变化,分析这些变化与CD4+T淋巴细胞计数和病毒载量的关系,并分析CD25表达与Vδ2 T淋巴细胞频率和凋亡率的相关性.结果 HIV慢性感染者Vδ2 T淋巴细胞上CD25表达与健康对照者相比显著增加,给予HAART 6个月可使其下调,但仍高于健康对照者.HIV慢性感染者Vδ2 T淋巴细胞上CD25表达具有随CD4+T淋巴细胞计数增加而下降的趋势,但相关性无统计学意义;其与未接受HAART患者的病毒载量相关性不显著.HIV慢性感染者Vδ2 T淋巴细胞频率与其CD25表达呈负相关,但其凋亡率与CD25表达相关性不显著.结论 HIV慢性感染者Vδ2 T淋巴细胞处于免疫激活状态,其异常免疫激活可能与其频率下降有关.6个月的HAART可部分降低其激活水平和凋亡率,但不能使其频率恢复.     

MSM HIV感染者外周血中ADCC反应水平与HIV-1感染早期病毒载量的关系

目的在艾滋病病毒（HIV）感染早期,观察HIV-1特异性抗体依赖的细胞毒性作用（ADCC）与病程进展的关系。方法利用HIV-1特异性多肽刺激和多色流式技术,对前期采集的、感染时间在1年以内的男男性行为人群（MSM）标本进行ADCC检测。结果共采集HIV-1感染者标本58份,CD4＋T淋病细胞计数与外周血病毒载量呈明显负相关（r=-0.281 6,P=0.032 3）。ADCC检测结果显示,病毒载量与HIV-1Pol特异性CD2＋IFN-γ＋细胞占CD3-细胞的比例呈显著的正相关（r=0.260 7,P=0.046 2）;而病毒载量与HIV-1Gp120特异性CD2＋CD107a＋细胞占CD3-[A1]细胞的比例呈显著负相关（r=-0.342 9,P=0.009 0）。结论在HIV-1感染早期,感染者体内即可产生针对Pol和Env蛋白的ADCC反应,其中针对Gp120蛋白的ADCC反应具有控制病程进展的作用。     

应用流式细胞术和原位杂交技术检测HIV-1感染者T淋巴细胞内病毒的初步研究

目的 建立检测艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血单核细胞内HIV-1的方法，并初步探讨其临床应用价值。方法 应用流式细胞仪和荧光原位杂交半定量检测记忆性T细胞(CD4^ CD45RO^ )内的HIV-1，同时测定HIV-1感染者外周血CD4^ T淋巴细胞绝对数和血浆病毒载量。结果 7例病人中6例有阳性结果，波动范围0～6．29％。细胞内病毒含量的结果与血浆病毒载量完全一致。结论 荧光原位杂交检测细胞内HIV-1的方法敏感性高，重复性好，检测速度快，可以成为评价艾滋病病程进展和抗病毒治疗的重要方法。     

人类免疫缺陷病毒感染后不同疾病阶段的胃黏膜病理改变

目的 评价胃黏膜中CD4~+T淋巴细胞群与外周血CD4~+T淋巴细胞及病毒载量的相关性.探讨HIV感染后不同疾病阶段患者的胃黏膜病理改变.方法 选取HIV感染者36例,根据全血CD4~+T淋巴细胞计数和临床症状,将研究对象分为HIV感染无症状者和AIDS患者两组,免疫组织化学方法检测CD4~+T淋巴细胞在胃黏膜中的表达,以直线回归分析、Spearman等级相关分析进行统计.结果 随着疾病的进展,HIV感染者胃黏膜腺体萎缩和间质增生逐渐加重,而黏膜中浸润炎性细胞及淋巴细胞进行性减少,并普遍存在淋巴细胞噬黏膜腺体现象.HIV感染者血清病毒载量与胃黏膜内CD4~+T淋巴细胞呈负线性相关(r=-0.336,P=0.01),全血CD4~+T淋巴细胞与胃黏膜中CD4~+T淋巴细胞呈正相关(r=0.5762,P<0.01).结论 HIV感染后,患者胃黏膜组织出现多种病理改变,并随着病程阶段的进展而加重,胃黏膜中CD4~+T淋巴细胞群与全血CD4~+T淋巴细胞计数和病毒载量的相关性即是这种改变的具体体现.     

HIV／AIDS患者血浆病毒载量及外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的：观察国内HIV／AIDS患者血浆病毒载量和外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞的变化，探讨这些变化的临床意义。方法：选择未经抗病毒治疗的HIV／AIDS患者124例，用bDNA法检测血浆病毒载量，并用流式细胞仪检测外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞。结果：AIDS患者的血浆病毒载量明显高于HIV感染者，血浆病毒载量与CD4^ 细胞计数呈显著负相关，但其最高峰位于CD4^ 细胞计数100／μl处，然后随着CD4^ 细胞计数的下降而减少。CD4^ T细胞计数为AIDS组＜HIV组＜正常对照组：HIV感染者的CD8^ T细胞计数显著高于正常组和AIDS组，而AIDS患者CD8^ T细胞数则随着CD4^ T细胞减少而下降。结论：血浆病毒载量随着疾病进展而显著升高，但在疾病晚期则有所降低。外周血CD4^ T细胞计数随着疾病的进展而进行性减少；CD8^ T细胞计数在感染早期显著升高，进入晚期则减少。在评价HIV感染者和AIDS患者病情时，应结合病毒载量、CD4^ 、CD8^ T细胞计数综合分析。     

HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4~+T淋巴细胞的变化特点

目的分析Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)急性期感染者肠道归巢CD4~+T淋巴细胞(简称CD4细胞)的变化特点及在HIV-1致病机制中的作用。方法共纳入26例HIV-1急性期感染者、31例HIV-1慢性期感染者和20例健康对照者。采用流式细胞仪检测三组样本的肠道归巢CD4细胞的比例和数量,并分析HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4细胞与CD4细胞之间的相关性。结果与健康对照者相比,HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4细胞的比例(平均值13.5%vs 11.0%,P0.05)和数量(平均值88.1vs 61.9,P0.01)均显著减少。HIV-1慢性期感染者肠道归巢CD4细胞的比例(平均值11.0%vs 8.1%,P0.01)和数量(平均值61.9vs 11.9,P0.000 1)均显著低于HIV-1急性期感染者。HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4细胞的数量与外周血CD4细胞(r=0.53,P=0.006)和CD4/CD8细胞比例(r=0.51,P=0.009)呈显著正相关,与血浆中HIV-1病毒载量(r=-0.70,P=0.000 6)和机体T细胞免疫活化水平(r=-0.57,P=0.003)呈显著负相关。结论肠道归巢CD4细胞的丢失可能在HIV-1急性期感染的致病机制中起作用。     

bDNA和NASBA法定量检测HIV-1病毒载量的比较研究

目的比较分支DNA杂交实验(branched DNA,bDNA)和核酸序列扩增实验(Nucleic acid sequence-based am-plification,NASBA)两种方法检测人类免疫缺陷病毒1型病毒(HIV-1)病毒载量间的一致性。方法对25例HIV感染者/艾滋病(Acquired immune deficiency syndrome,AIDS)患者血浆标本同时用bDNA法和NASBA法检测HIV-1病毒载量,并用流式细胞术检测患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞。结果bDNA法及NASBA法测得HIV-1病毒载量平均值分别为(4.398±0.580)log拷贝数/ml和(4.488±0.602)log拷贝数/ml,差异无统计学意义(t=1.210,P>0.05);两种方法检测出的病毒载量呈显著直线相关(r=0.8004,P<0.001),且与患者的CD4+T细胞数及CD4+/CD8+比值均呈显著直线负相关。结论bDNA法和NASBA法检测HIV-1病毒载量具有高度一致性,在实际工作中均可选用。     

应用流式细胞术检测HIV-1感染者外周血p24、gp41和gp120抗原表达的研究

目的分析HIV-1感染者外周血CD4^＋T淋巴细胞p24、gp41和gp120抗原的表达状况,探讨流式细胞术用于检测HIV-1感染的可行性。方法应用三色流式细胞术,对192例HIV-1感染者和29例健康者外周血CD4^＋T淋巴细胞表达的HIV-1 p24、gp41和gp120抗原进行检测。结果HIV-1 p24、gp41和gp120抗原阳性率HIV-1感染组与健康对照比较差异有统计学意义（P均〈0.01）;CD4^＋T细胞数〈200 cells/μl的HIV-1感染人群与CD4＋T细胞数〉200 cells/μl的人群比较差异有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）;静注吸毒途径感染人群与性途径感染人群比较差异有统计学意义（P〈0.01）。在HIV-1感染人群中,p24、gp41和gp120抗原阳性率四分位数25%75%区间范围分别为1.67%5.95%、1.61%8.12%和0.56%2.35%。结论流式细胞术简便、快速、敏感,可用于HIV-1感染检测。     

外周血淋巴细胞亚群在慢性HBV感染过程中表达的变化分析

目的探讨HBV感染患者外周血淋巴细胞亚群在疾病进展过程中的表达变化。方法选取2018年1月-2019年4月在天津市第二人民医院住院的慢性HBV感染患者共132例,其中慢性乙型肝炎患者47例,乙型肝炎肝硬化患者44例,乙型肝炎肝硬化相关原发性肝癌患者41例。另选取同期健康体检者42例作为对照组。采用流式细胞术检测4组外周血淋巴细胞亚群精准计数,比较4组外周血淋巴细胞亚群的表达水平。正态分布的计量资料,组间方差不齐采用Welch方差分析,两两比较采用GamesHowell检验。非正态分布的计量资料多组间及进一步两两比较采用Kruskal-Wallis H检验。计数资料组间比较采用χ2检验。相关性分析采用Spearman检验。结果与对照组和慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD3^+、CD4^+T淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组相比,肝癌组CD8^+T淋巴细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);与慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD8^+T淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组和慢性乙型肝炎组相比,肝硬化组和肝癌组CD19^+B淋巴细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。与对照组相比,肝硬化组和肝癌组CD16^+CD56^+NK细胞数量明显减少,差异均有统计学意义(P值均<0.05);与慢性乙型肝炎组比较,肝癌组CD16^+CD56^+NK细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。4组疾病进展与外周血CD3^+T淋巴细胞、CD4^+T淋巴细胞、CD8^+T淋巴细胞、CD19^+B淋巴细胞、CD16^+CD56^+NK细胞呈明显负相关(r值分别为-0.414、-0.503、-0.269、-0.435、-0.402,P值均<0.01)。结论随着疾病的进展,慢性HBV感染患者免疫状态发生变化。外周血淋巴细胞亚群精准计数能够反应机体的免疫状态,可作为慢性HBV感染临床病情演变、治疗效果及疾病预后的参考依据。     

Lung CD4 lymphocytes predict survival in asymptomatic HIV infection

BACKGROUND: Plasma viral load and blood CD4 counts are accepted indicators of severity of illness in patients with HIV-1. Lung CD4 counts have not been evaluated in asymptomatic HIV-1 patients as indicators of disease severity. OBJECTIVE: To determine if lung lymphocyte counts in asymptomatic subjects with HIV compare with plasma viral loads and blood CD4 counts in predicting survival. DESIGN: Retrospective, cross-sectional analysis. SETTING: Midwestern urban community, December 1996 to August 1998. PARTICIPANTS: HIV-seropositive subjects (n = 95) without AIDS-related pulmonary complications. MEASUREMENTS: Plasma viral load, blood hemoglobin and blood lymphocyte subtypes, lung lymphocyte subtypes from BAL, body mass index, and mortality. RESULTS: Eight of the 95 subjects (8.4%) had died at the 4-year follow-up. Lung CD4 counts were significantly related to mortality by univariable analysis (2.5 x 10(3)/mL vs 0.9 x 10(3)/mL, median values for survivors vs nonsurvivors, respectively, p = 0.010). Modeling using exact methods further showed lung CD4 counts to be a significant predictor of survival after individually adjusting for potential confounders, including plasma viral load and blood CD4 count. CONCLUSIONS: Lung CD4 counts in patients with HIV-1 infection may provide an independent predictor of survival.     

Loss of memory B cells impairs maintenance of long-term serologic memory during HIV-1 infection

Circulating memory B cells are severely reduced in the peripheral blood of HIV-1-infected patients. We investigated whether dysfunctional serologic memory to non-HIV antigens is related to disease progression by evaluating the frequency of memory B cells, plasma IgG, plasma levels of antibodies to measles, and Streptococcus pneumoniae, and enumerating measles-specific antibody-secreting cells in patients with primary, chronic, and long-term nonprogressive HIV-1 infection. We also evaluated the in vitro production of IgM and IgG antibodies against measles and S pneumoniae antigens following polyclonal activation of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients. The percentage of memory B cells correlated with CD4+ T-cell counts in patients, thus representing a marker of disease progression. While patients with primary and chronic infection had severe defects in serologic memory, long-term nonprogressors had memory B-cell frequency and levels of antigen-specific antibodies comparable with controls. We also evaluated the effect of antiretroviral therapy on these serologic memory defects and found that antiretroviral therapy did not restore serologic memory in primary or in chronic infection. We suggest that HIV infection impairs maintenance of long-term serologic immunity to HIV-1-unrelated antigens and this defect is initiated early in infection. This may have important consequences for the response of HIV-infected patients to immunizations.     

健康人群与HIV感染者和AIDS病人外周血组分差异分析

目的研究健康人群与HIV感染者/艾滋病病人细胞亚型和血常规相关指标的差异。方法应用FAC-SCalibur流式细胞仪,采用Multiset检测分析软件进行三色和四色流式检测;血常规检测应用ABX MICROS 60自动分析仪进行。结果三组人群CD3 T淋巴细胞、CD4 T淋巴细胞、CD4/CD8、NK细胞计数、CD4 5细胞、红细胞、血红蛋白、总淋巴细胞计数(TLC)、单核细胞计数等指标均表现出显著性差异(P<0.05)。三组人群CD4 T淋巴细胞与CD3 T淋巴细胞(r=0.541,P<0.001)、CD4/CD8(r=0.768,P<0.001)、CD4 5细胞、总淋巴细胞计数(r=0.455,P<0.001)、单核细胞计数(r=0.389,P<0.001)相关,有统计学意义。结论HIV对感染者血液细胞亚群的影响是广泛的,总淋巴细胞计数对于判断HIV感染者是否进入艾滋病期有参考价值。     

流式细胞术分析HIV-1高暴露持续血清阴性人群淋巴细胞亚群

目的了解经性传播途径高暴露不易感人群淋巴细胞亚群的差异,分析其与艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）不易感的关系,探讨经性途径高暴露HIV不易感的免疫基础。方法收集37例经性传播途径高暴露HIV-1持续血清阴性者（Highly exposed and persistently remain seronegative,简称HEPS人群）、65例HIV-1感染者（简称HIV阳性人群）及128例健康对照人群（简称HC人群）的抗凝全血,用流式细胞仪检测相关淋巴细胞亚群,并分析其相关性。结果HEPS人群与HC人群外周血淋巴细胞亚群差异没有统计学意义;HIV阳性人群外周血CD4^＋T淋巴细胞数量、CD4/CD8比值显著低于HEPS和HC两组人群（P〈0.001）,CD8^＋T淋巴细胞数量则显著高于该两组人群（P〈0.001）;HIV阳性人群外周血CD19^＋B淋巴细胞、CD16^＋CD56^＋NK细胞数量显著低于HEPS人群和HC人群。HEPS人群的CD19^＋B淋巴细胞数量与CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数量呈显著正相关,而CD16^＋CD56^＋NK细胞数量与其CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数量无相关性。结论经性途径高暴露HIV-1持续血清阴性人群的淋巴细胞亚群,和健康对照人群比较无显著性差异,HIV感染可明显降低CD4^＋T淋巴细胞、CD19^＋B淋巴细胞和CD16^＋CD56^＋NK细胞数量。     

RANTES production from CD4+ lymphocytes correlates with host genotype and rates of human immunodeficiency virus type 1 disease progression

Several chemokine and chemokine receptor parameters were measured in peripheral blood mononuclear cells obtained from patients before they became infected with human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1). After HIV-1 infection, the parameters were compared with plasma HIV-1 RNA levels and with rates of CD4(+) lymphocyte decline. Patients who were heterozygous for the Delta32CCR5 allele had significantly higher levels of RANTES production from their CD4(+) lymphocytes than did patients who did not carry the Delta32CCR5 allele (P=.01). Higher RANTES production levels from ex vivo-activated CD4(+)-enriched lymphocytes, but not CD8(+) lymphocytes, correlated with lower plasma HIV-1 RNA levels 9-12 months after infection (P= .01) and with slower rates of CD4(+) lymphocyte decline (P= .002). CCR5 expression levels on ex vivo-activated CD4(+) lymphocytes did not correlate with markers of disease progression. These results further support the hypothesis that chemokine production levels are associated with HIV-1 replication in vivo.