重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察重组人白介素１０（ｒｈＩＬ－１０）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 ＶＳＭＣ并分别接受不同浓度ｒｈＩＬ－１０、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）的刺激,采用ＭＴＳ／ＰＥＳ 法确定ＶＳＭＣ的增殖状态并与对照组比较。结果　与对照组相比,ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ均对ＶＳＭＣ增殖具有明显的刺 激作用（Ｐ＜０．０５）。单独应用ｒｈＩＬ－１０对血管平滑肌细胞生长没有影响。在ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ分别刺激下,ｒｈＩＬ－１０均可 抑制ＶＳＭＣ的生长（Ｐ<０．０５）。结论　ｒｈＩＬ－１０可抑制细胞因子和生长因子诱导的ＶＳＭＣ增殖。     

哮喘患者肺泡巨噬细胞血栓素 A_2 前列环素、肿瘤坏死因子α、白介素 8、10 的释放及药物调节

测定２６例哮喘患者血浆及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）ＴＸＢ２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α、ＴＮＦα、ＩＬ－８、ＩＬ－１０的水平，并对其肺泡巨噬细胞（ＡＭ）进行加药培养。结果显示，哮喘患者血浆、ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＮＦα、ＩＬ－８水平明显高于正常人，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α与正常人无差异，ＢＡＬＦ中ＩＬ－１０水平低于正常人。患者ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２、ＴＮＦα水平与其ＦＥＶ１、Ｖ５０呈负相关。ＡＭ加入不同的药物培养后，与空白组比较，抗原组ＴＸＢ２、ＴＮＦα的释放增加；治疗浓度氨茶碱组ＴＮＦα释放下降，ＩＬ－１０的释放增强；地塞米松组ＴＸＢ２、ＴＮＦα的释放下降。ＩＬ－１０的释放增强；红霉素组ＴＮＦα、ＩＬ－８的释放下降。提示ＴＸＢ２、ＴＮＦα、ＩＬ－８在哮喘发病中起重要促炎作用，ＩＬ－１０起抗炎作用，氨茶碱、地塞米松、红霉素具有抑制巨噬细胞分泌促炎因子的作用，而抗原具有激发ＡＭ分泌促炎因子的作用。     

细胞因子对人肾小球系膜细胞表达细胞粘附分子的调控

研究白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）及肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα），对体外培养的人肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）和血管细胞粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）的调节作用。方法用ｒｈＩＬ－１β（２５ｎｇ／ｍｌ）或ｒｈＴＮＦα（１００ｎｇ／ｍｌ）与系膜细胞共同孵育４、８、１６及３２小时，然后用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测该细胞ＩＣＡＭ－１和ＶＣＡＭ－１的ｍＲＮＡ表达，并用细胞ＥＬＩＳＡ检测它们的蛋白质表达。结果未予任何刺激的对照组，系膜细胞仅低水平表达ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白质。ｒｈＩＬ－１β或ｒｈＴＮＦα刺激后，系膜细胞上这两种细胞粘附分子ｍＲＮＡ的表达，均迅速上调（仅ＴＮＦα刺激ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ表达高峰在８小时，其余均在４小时），蛋白质表达也显著增加（Ｐ＜０．００１））。结论细胞因子ＩＬ－１β及ＴＮＦα可能通过刺激肾小球系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１和ＶＣＡＭ－１而参与肾小球肾炎发病。     

大肠癌患者手术前后T细胞亚群和TNF—α水平的观察

用ＡＰＡＡＰ法，ＥＬＡＳＩ法检测３０例正常健康人群和２５例大肠癌病人的外周血Ｔ细胞亚群（Ｔ亚群）和血浆肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）并对其手术前后进行动态观察．结果：大肠癌患者术前ＣＤ３，ＣＤ４低于正常，ＣＤ８增高；ＣＤ４／ＣＤ８比值下降，ＴＮＦ－α水平增高；手术后第７ｄ，ＣＤ３，ＣＤ４改变不明显，ＣＤ８增高，ＣＤ４／ＣＤ８仍低下，ＴＮＦ－α有所下降，但仍持续较高水平；第１５ｄ，ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ４／ＣＤ８回升，ＴＮＦ－α下降近正常．通过Ｔ亚群及ＴＮＦ－α动态测定．结果表明，肿瘤患者机体存在免疫抑制，经减瘤后免疫抑制逐渐恢复，临床上可作为采用免疫治疗、疗效观察及估计预后的参考指标     

系统性红斑狼疮患者血浆中肿瘤坏死因子及白细胞介素8的检测意义

肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα,ＴＮＦα）和白细胞介素８（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｕ８,ＩＬ－８）是两种重要的炎症介质,又具有调节免疫、收缩血管、致发热作用〔１〕。系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种病因未明的难治性疾病,有多器官受累并有显著的血管炎改变。我们采用ＥＬＩＳＡ法检测了ＳＬＥ患者血浆中的ＴＮＦα、ＩＬ－８含量,旨在探讨ＴＮＦα、ＩＬ－８与ＳＬＥ的关系及其在发病中的作用。１　病例和方法１１研究对象　ＳＬＥ患者５２例,男２２例,女３０例。年龄１６～４８岁,平均３４．５岁。…     

E.coli DNA 对荷瘤小鼠血清中TNF-α、NO含量的影响

２４只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠中,８只作为正常对照组,其余１６只荷瘤后,随机分为两组,Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＮＡ治疗组和ＴＥＳ对照组。荷瘤后第４ｄ予ＤＮＡ治疗组、ＴＥＳ对照组小鼠皮下注射Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＮＡ（１００μｇ／ｍｌ）或ＴＥＳ（０．１ｍｏｌ／Ｌ）０．３ｍｌ／只,隔日１次,共５次,荷瘤后２１ｄ,摘眼球取血,制备血清,测定ＴＮＦ－α含量。结果显示：Ｅ．ｃｏｌｉ ＤＮＡ可调节荷瘤机体的ＴＮＦ－α、ＮＯ水平,防     

肺纤维化大鼠炎性细胞因子的对比研究

目的：了解肺纤维化大鼠肺局部细胞因子水平及其与肺泡巨噬细胞的关系。方法：对比观察支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）和肺泡巨噬细胞（ＡＭ）培养上清肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）的动态变化。二种细胞因子检测分别采用ＥＬＩＳＡ和生物活性法。结果：①ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α于第１ｄ增高，第３ｄ达高峰，其高峰时间先于ＡＭ源ＴＮＦ－α；ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α与其中中性粒细胞数呈正相关；②ＢＡＬＦ中ＰＤＧＦ与ＡＭ源ＰＤＧＦ同步于第７ｄ达高峰，与ＡＭ总数呈正相关。结论：ＡＭ释放高水平ＴＮＦ－α、ＰＤＧＦ；ＢＡＬＦ中也存在ＴＮＦ－α、ＰＤＧＦ，且呈动态变化；ＢＡＬＦ中ＴＮＦ－α可能还来自ＡＭ外的其它细胞，如ＰＭＮ，而ＢＡＬＦ中ＰＤＧＦ则可能主要来源于ＡＭ。     

细胞因子对再生障碍性贫血患者发病的影响

为探讨ＡＡ的免疫发病机制，阐明细胞因子在ＡＡ患者中变化的基础与临床意义，应用ＥＬＩＳＡ法及ＡＰＡＡＰ法对３８例初治ＡＡ患者及２０名正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生的Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８进行检测，同时观察外周血象、Ｔ细胞亚群及ＨＬＡ－ＤＲ表达。结果：ＡＡ患者外周血ＣＤ４减低，ＣＤ８增高，ＣＤ４／ＣＤ８减低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。ＡＡ患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关而与ＩＦＮα呈负相关，ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４呈负相关，ＴＮＦα与ＣＤ８呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关，ＩＬ－８与ＣＤ８及ＨＬＡ－ＤＲ呈负相关，证明细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在ＡＡ发病中起重要作用，激活的ＣＤ８细胞可以抑制造血，多种因素引起的细胞因子紊乱最终引发ＡＡ。     

血清IL—8和TNF—α水平与毛细支气管炎发病关系的研究

采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测７２例毛细支气管炎（简称毛支）患儿血清白细胞介素８（ＩＬ－８）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）水平，并以４０例正常小儿作对照。结果：（１）毛支组ＩＬ－８（１０１４±８２６ｎｇ／Ｌ）明显高于对照组（３１３±１５６ｎｇ／Ｌ），（Ｐ＜０．００１）；（２）毛支组ＴＮＦ－α水平亦高于对照组（分别为１９４±５２ｎｇ／Ｌ和１６８±２３ｎｇ／Ｌ，Ｐ＜０．０５）；（３）毛支组ＩＬ－８与ＴＮＦ－α之间无显著相关；（４）重症毛支组ＴＮＦ－α（２４５±４５ｎｇ／Ｌ）明显高于轻症毛支组（１６７±３４ｎｇ／Ｌ），（Ｐ＜０．０１）。提示：ＩＬ－８和ＴＮＦ－α可能与毛支的免疫发病机制及气道炎症有关；血清ＩＬ－８检测对于了解气道炎症和中性粒细胞活化状态可能有帮助；ＴＮＦ－α水平可预示病情严重程度，对于病情评估和指导治疗有较大价值。     

HBV—DNA阳性者TNF—α,T细胞亚群检测及意义

采用ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ,对４０例ＨＢＶＤΝＡ阳性,２０例ＨＢＶＤＮＡ阴性者进行ＴＮＦα及Ｔ细胞亚群的检测,结果表明：ＨＢＶＤＮＡ阳性者,ＴＮＦα、ＣＤ８Ｔ细胞显著升高,ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８的比值下降,ＴＮＦα与ＣＤ８Ｔ细胞有直接量的关系,即ＣＤ８Ｔ细胞增高,ＴＮＦα亦增高。由此可见,ＴＮＦ－α、Ｔ细胞亚群的检测对ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者的发病机理的探讨有一定意义。     

山莨菪碱对创伤性急性肺损伤防治作用的实验研究

为了探讨山莨菪碱（６５４－２）以创伤性急性肺损伤（ＡＬＩ）的防治作用及其可能的机制，观察６５４－２对创伤性ＡＬＩ兔血浆和支气管肺灌洗（ＢＡＬＦ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）和白细胞介素８（ＩＬ－８）含量的影响，同时进行了组织病理学的光镜和电镜检查，结果表明致伤前，后给予６５４－２，可使创伤性，ＡＬＩ兔血浆及ＢＡＬＦ中的ＴＮＦ－α，ＩＬ－８明显减少，肺组织损伤程度减轻，说明６５４－２能降低血浆及Ｂ     

IL-12、IL-7、IL-2协同诱导PBMC所产生的内源性细胞因子对其细胞毒活性的影响

应用细胞因子生物学检测法对ＩＬ－１２、ＩＬ－７、ＩＬ－２协同诱导的ＰＢＭＣ培养上清中的ＴＮＦ和ＩＬ－２进行了检测，同时观察了抗ＴＮＦ－α、抗ＴＮＦ－β和抗ＩＬ－２抗体对刺激细胞的细胞毒作用的影响。结果表明，ＩＬ－１２、ＩＬ－７、ＩＬ－２三种因子协同刺激ＰＢＭＣ可产生较高水平的ＴＮＦ，而抗ＴＮＦ－α单抗能显著抑制刺激细胞的杀瘤活性，提示内源性ＴＮＦ－α在介导该类细胞的细胞毒效应中起重要作用。     

IL—12,IL—7,IL—2协同诱导PBMC的产生的内源性细胞因子对？…

应用细胞因子生物学检测法对ＩＬ－１２、ＩＬ－７、ＩＬ－２协同诱导的ＰＢＭＣ培养上清中的ＴＮＦ和ＩＬ－２进行了检测，同时检察了抗ＴＮＦ－α、抗ＴＮＦ－β和抗ＩＬ－２抗体对刺激细胞的细胞毒作用的影响。结果表明，ＩＬ－１２、ＩＬ－７、ＩＬ－２三种因子协同刺激ＰＢＭＣ可产生较高水平的ＴＮＦ，而抗ＴＮＦ－α单抗能显著抑制刺激细胞的杀瘤活性，提示内生ＴＮＦ－α在介导该类细胞的细胞毒效应中起重要作用。     

TNF,IFN,MHCⅠ类分子基因“正反馈”式放大表达的重组腺病？…

目的 为使外源性ＴＮＦ,ＩＦＮ基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类ＭＨＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效应,构建在ＨＬＡ－Ｂ７启动子调控、ＩＲＥＳ连接下协同表达ＴＮＦα和ＩＦＮβ基因的重组腺病毒载体。方法和结果 从ｐＧＬ３Ｂ７ＴＮＦ及ｐＩＲＩＦ中切下Ｂ７ｐｒｏ－ＴＮＦ和ＩＲＥＳ－ＩＦＮβ基因片段,先后插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｓｋ（＋）,构建成ｐＢＬＢ７ＴＮＩＲＩＦ。回收ＴＮＦα－ＩＲＥＳ     

肿瘤坏死因子α基因转染人脑胶质瘤浸润淋巴细胞的实验研究

采用脂质体转染技术将能表达肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）基因的重组逆转录病毒质粒ｐＬ（ＴＮＦ－α）ＳＮ导入病毒包装细胞ＰＡ３１７，在细胞培养上清液中得到重组病毒，滴度为１．４×１０９ＣＦＵ／Ｌ。将此病毒上清液感染人脑胶质瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），用Ｇ４１８筛选出能表达标记基因ＮｅｏＲ的阳性克隆，ＥＬＩＳＡ法测得ＮｅｏＲ阳性ＴＩＬ培养上清液中存在ＴＮＦ－α，可达５３０ｎｇ／Ｌ，Ｌ９２９依赖细胞法并测出上清液中有ＴＮＦ－α生物学活性。结果表明，我们构建的重组逆转录病毒可介导ＴＮＦ－α基因在人脑胶质瘤ＴＩＬ中的表达     

幽门螺杆菌在不同培养基上生长情况的比较

探讨灵芝多糖（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ　ｌｕｃｉｄｕｍ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ Ｂ, ＧＬ－Ｂ）对小鼠腹腔巨噬细胞（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａｇｅ,ＰＭ）、肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ａｌｐｈａ, ＴＮＦα）、肿细胞 γ干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－γ,ＩＦＮγ）的产生及其ｍＲＮＡ表达的影响。方法;采集小鼠ＰＭ和脾淋巴细胞,体外给药,分离细胞培养上清。生物法测定ＴＮＦα。ＥＬＩＳＡ测定ＩＦＮγ;ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ的表达。结果：ＧＬ－Ｂ２５～４００ｍｇ·Ｌ~（－１）使正常小鼠ＰＭ培养上清中ＴＮＦα的活性升高,并呈剂量依赖关系,２４ ｈ达高峰,７２ ｈ后开始减少。 ＧＬ－Ｂ对小鼠 ＰＭ的 ＴＮＦα ｍＲＮＡ表达有显著促进作用。ＧＬ－Ｂ１２．５～２００ｍｇ~（－１）明显增加正常小鼠脾细胞培养上清中ＩＦＮγ产生。２４ｈ内随培养时间的延长而增加,４８ ｈ后开始减少。ＧＬ－Ｂ对ＩＦＮγｍＲＮＡ的表达有促进作用。结论：灵芝多糖ＧＬ－Ｂ明显促进小鼠ＰＭ及脾细胞 ＴＮＦα和 ＩＦＮβ ｍＲＮＡ的表达,增加 ＴＮＦα和 ＩＦＮβ的产生。     

抗CD_3McAb诱导外周血单个核细胞活化增殖的观察

目的：观察抗ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导人外周血单个核细胞（ＨＰＢＭＣ）活化增殖过程中的影响因素及抗ＣＤ３ＭｃＡｂ激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ细胞）免疫学特性的变化。方法：采用ＭＴＴ法和苔盼蓝染色法、ＩＬ－２依赖细胞株（ＣＴＬＬ细胞）增殖实验、ＴＮＦ－α（双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法）试剂盒以及间接免疫荧光法分别检测ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性、内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α的产生及ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＩＬ－２Ｒ等的表达。结果：抗ＣＤ３ＭｃＡｂ对ＨＰＢＭＣ有很强的丝裂原作用，该作用与其诱导浓度、时间及外源性ＩＬ－２的协同作用密切相关。ＣＤ３ＡＫ细胞可产生内源性ＩＬ－２、ＴＮＦ－α，ＩＬ－２Ｒ表达及ＣＤ８＋细胞百分率显著增多。结论：ＣＤ３ＡＫ细胞具有很强的增殖能力，但需要外源性ＩＬ－２的协同作用，增殖细胞以ＣＤ８＋细胞为主。     

导入TNF-αcDNA片断鼠LAK细胞对小鼠移植肿瘤治疗的初步观察

利用逆转录病毒中介的基因转移技术，将重组人ＴＮＦ－αｃＤＮＡ功能片断导入小鼠脾ＬＡＫ细胞中，然后用此细胞对荷瘤小鼠局部治疗，并以导入ＮｅｏＲ基因的ＬＡＫ细胞做对照。结果，经导有ＴＮＦ－α基因的ＬＡＫ细胞治疗的小鼠肿瘤明显变小，甚至消失，小鼠寿命亦明显高于对照组。说明ＴＮＦ－α基因的导入在小鼠体内具有明显的抗瘤效应     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能及抗T细胞单克隆抗体的…

观察了再生障碍性贫血１６５例的淋巴细胞比值，用ＡＰＡＡＰ法和ＥＬＩＳＡ法测定敢１３８例的Ｔ细胞亚群、８９例ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表态及１６例ＰＢＭＮＣ培养上清的ＴＮＦα水平，用抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体ＳＭＵ３和ＳＭＵ８治疗了ＡＡ患者６３例。结果表明，ＡＡ患者体内细胞免疫功能紊乱，表现为Ｔ细胞亚群比例换衡，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达增高，ＴＮＦα分泌增加。     

细胞融合肝癌疫苗体内抗肿瘤特异性及T细胞作用的初探

目的：观察大鼠ＢＥＲＨ－２肝癌细胞与自体激活Ｂ细胞的融合细胞作为疫苗抗肿瘤作用的特异性，并观察该肝癌疫苗体内抗肿瘤作用与Ｔ细胞亚群的关系。方法：（１）应用聚乙二醇（ＰＥＧ）融合大鼠ＢＥＲＨ－２肝癌细胞与激活Ｂ细胞制备细胞融合大鼠肝癌疫苗；（２）事先经该肝癌疫苗免疫的大鼠分别接种肝癌ＢＥＲＨ－２细胞和大鼠膀胱癌ＮＢＴ－Ⅱ细胞，观察该肝癌疫苗抗肿瘤作用的特异性；（３）该肝癌疫苗免疫大鼠之前或之后，以小鼠抗大鼠ＣＤ４单抗或抗ＣＤ８单抗多次注射，以清除大鼠ＣＤ４＋或ＣＤ８＋Ｔ细胞，随后观察大鼠的成瘤性。结果：ＢＥＲＨ－２细胞不能在经细胞融合大鼠肝癌疫苗免疫的大鼠体内致瘤，而ＮＢＴ－Ⅱ细胞可致瘤；事先清除ＣＤ４＋或ＣＤ８＋Ｔ细胞的大鼠经细胞融合大鼠肝癌疫苗免疫后仍能被肝癌ＢＥＲＨ－２细胞致瘤；而经该肝癌疫苗免疫的大鼠，清除了ＣＤ４＋细胞后不能被ＢＥＲＨ－２细胞致瘤，清除了ＣＤ８＋细胞后则可被ＢＥＲＨ－２细胞致瘤。结论：细胞融合大鼠肝癌疫苗有特异性抗肿瘤作用，这种作用与ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞有关