尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制

目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素（Ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ,ＵⅡ）在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 （１）采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＵⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的影响,应用不同阻断剂观察ＵⅡ诱导细胞ＤＮＡ合成的信号转导通路。（２）采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针,测定ＵⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 （１）ＵⅡ呈浓度（１０＾－１０～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）依赖性刺激ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时,为对照组的７倍（Ｐ〈０．０１）;（２）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）阻断剂Ｈ７、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）阻断剂ＰＤ９８０５９及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制ＵⅡ刺激的ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,其抑制率分别为２９％（Ｐ〈０．０５）,４５％（Ｐ〈     

溶血磷脂酸刺激兔血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

目的：探讨溶血磷脂酸（ＬＰＡ）刺激兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的信号转导途径，方法：在培养的家兔血管平滑肌细胞上，测定＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＬＰＡ呈浓度依赖地刺激＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，并平行地激活ＭＡＰＫ二间呈显正相关，乙二醇－双（氨基乙酯）－四乙酸（ＥＧＴＡ）尼卡地平，ｒｙａｎｏｄｉｎｅｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎｈｅｒｂｉｍｙｃ     

^3H—TdR参入DNA技术在组织培养中的应用

探讨＾３Ｈ－ＴｄＲ参入ＤＮＡ技术在组织培养中的合理应用。测定１６周龄ＳＨＲ和ＷＫＹ大鼠培养的胸主动脉血管平滑肌细胞的自然增长曲线以及接种后６０ｈ期间，每隔４－６ｈ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的变化。ＳＨＲ大鼠ＡＳＭＣ分裂增殖能力比ＷＫＹ强，在１５％ＦＢＳ－１６４０培养基作用下，１－６０ｈ期间，ＳＨＲ ＡＳＭＣ ＾３Ｈ－ＴｄＲ高峰参入率在２０－２４，５０－５５ｈ之间，ＷＫＹ的高峰参入率在４０－５０ｈ之间。     

自发性高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统的关系

目的以２０周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）胸主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）为模型，探讨ＳＨＲＡＳＭＣ异常增殖和自身肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）的关系。方法用３Ｈ－ＴｄＲ参入量和倍增时间（ＤＴ）反映ＡＳＭＣ的增殖能力，放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）浓度，紫外分光光度法测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性。结果（１）ＳＨＲＡＳＭＣ３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ，ＤＴ显著短于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。基础状态下，ＳＨＲＡＳＭＣ合成ＡｎｇⅡ、ＡＣＥ以及分泌ＡｎｇⅡ的量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１）。（２）在含２％ＦＣＳ的培养基中，１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲ、ＷＫＹ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量分别提高到对照组的３．３倍、２．２倍（Ｐ＜０．０１），ＳＨＲＡＳＭＣ在不同浓度ＡｎｇⅡ刺激时的３Ｈ－ＴｄＲ参入量显著高于ＷＫＹ（Ｐ＜０．０１），１０－６ｍｏｌ／ＬＡｎｇⅡ使ＳＨＲＡＳＭＣ细胞数增加７２．５±２３．１％（Ｐ＜０．０１），ＷＫＹＡＳＭＣ细胞数无显著增加，１０倍浓度ＡｎｇⅡ的Ｓａｒａｌａｓｉｎ对ＳＨＲ、ＷＫＹ３Ｈ－ＴｄＲ参入的抑制率分别为６６．７±３．３％，４４．７±９．９％（Ｐ＜０．０１）     

PDGF在缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机理初探

目的：研究缺氧性肺动脉高压肺血管结构改建中肺血管平滑肌细胞增殖的机理。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入和核酸分杂交技术观察了缺氧对肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）增殖及血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ链，－Ｂ链，α，β亚基受体基因表达的影响，结果：低氧６ｈ使ＰＡＳＭ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入减少（Ｐ〈０．０５），无氧６ｈＰＡＳＭ的＾３Ｈ－ＴｄＲ参入均较常氧对照组明显增多Ｐ〈０．００１，而缺氧１２ｈ则促进参入，至     

丝裂素活化蛋白激酶介导同型半胱氨酸诱导的血管平滑 …

目的；研究同型半胱氨酸（ＨＣＹ）促进血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖及其机制。方法：采用同位素技术测量＾３Ｈ－ＴｄＲ参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＨＣＹ促进ＶＳＭＣ增殖，同时ＨＣＹ增加ＭＡＰＫ活性，二者均具有剂量效应关系，而且二者之间呈显著正相关。结论：ＨＣＹ促进ＶＳＭＣ增殖，可能是通过增加ＭＡＰＫ活性的途径实现的。     

内源性一氧化碳对大鼠主动脉球囊损伤后新生内膜形成及丝裂素活化蛋白激酶活性的影响

目的：探讨内源性血红素加氧酶（ｈｅｍｅｏｘｙｇｅｎａｓｅ,ＨＯ）／ 一氧化碳（ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ,ＣＯ） 系统对大鼠主动脉球囊损伤后新生内膜形成及丝裂素活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ, ＭＡＰＫ） 激活的调节作用。方法：采用大鼠主动脉内膜球囊拉伤模型,观察ＨＯ 抑制剂锌卟啉９（ｚｉｎｃ ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎＩＸ,ＺｎＰＰ９）或其底物血红素左旋赖氨酸盐（ｈｅｍｅＬｌｙｓｉｎａｔｅ,ＨＬＬ）对血管壁细胞３ＨＴｄＲ掺入和ＭＡＰＫ 活性的影响,同时观察血管平滑肌ＨＯ活性和ＣＯ 生成的变化。结果：内膜拉伤后２ 周血管３ＨＴｄＲ 掺入和ＭＡＰＫ 活性明显增加,同时ＨＯ 活性和ＣＯ 的产生增加;ＺｎＰＰ９ 使血管的３ＨＴｄＲ掺入和ＭＡＰＫ 活性增加更为明显（ 分别比单独拉伤组增加３４ ．６％ 和３９．２％ ,均为Ｐ＜ ０．０１） ;而ＨＬＬ 使血管的３ＨＴｄＲ 掺入和ＭＡＰＫ 活性则明显降低（ 比单独拉伤组分别减少２９．４５ ％ 和３３．６ ％ ,均为Ｐ＜ ０．０１） 。结论：ＨＯ 活性上调或ＣＯ 产生增加是血管对机械拉伤的一种保护性应激反应;内源性ＨＯ／ＣＯ 系统直接     

大鼠小肠上皮细胞培养体系的建立及其影响因素的探讨

作者引进并建立了大鼠小肠上皮细胞（ＩＥＣ－６）的培养传代和活性检测的实验方法，且对几种影响因素进行了探讨，实验发现，ＩＥＣ－６在一定密度范围内与＾３Ｈ－ＴｄＲ参入量呈正相关变化；培养７２ｈ以内，参入量随时间延长而增加，＾３Ｈ－ＴｄＲ，５５．５Ｋｂｑ／孔内，计数值与剂量间呈线性关系，胎牛血清浓度以１０％为宜，但不加胰岛素组显著降低，ｐＨ值以７．２６最好，ＩＥＣ－６在４～２６Ｇｙ照射范围内，剂量效应呈     

大鼠胸主动脉球囊成形术后血管壁丝裂素活化蛋白激酶活性的变化

目的；丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）与大鼠胸主动脉内皮剥脱术后平滑肌细胞（SMC）增殖的关系。方法：将剥脱术后的Wistar大鼠随机分为两组（n＝6），分别于术后7天和14天时处死取材，其血管条分别做3H－TdR参入和MAPK活性测定，并与假手术组相比较。结果：剥脱术后7天和 14天与假手术组相比，3H－TdR参入分别是后者的 2.6倍和 2． 0倍（P＜0. 01），MAPK活性分别为 7.6倍和 2. 4倍（P＜0．01）。结论：大鼠胸主动脉球囊内皮剥脱术后血管SMC发生增殖，同时MAPK活性明显升高，说明MAPK与内皮损伤后的血管壁SMC增殖有关。     

多抗甲素对淋巴细胞免疫功能的影响

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ及＾１４Ｃ－ＵＲ参入淋巴细胞的双标记方法，在体外培养条件下，研究多抗甲素对人淋巴细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ合成功能的影响。结果表明，在多抗甲素的浓度为０．１－１０ｍｇ／Ｌ，可显著增强淋巴细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ的能力呈现抑制作用，＾３Ｈ及＾１４Ｃ标记物的参入计数减少。     

原癌基因c—fos和c—jun在血管平滑肌细胞增殖调控中的作用

体外培养大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）。通过＾３Ｈ－ＴｄＲ参入实验和ＲＮＡ印迹分析，观察内皮素－１对ＶＳＭＣＤＮＡ合成，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ表达及ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ对ＶＳＭＣ增殖的影响，结果表明，内皮素－１作用于ＶＳＭＣ１２小时，＾Ｈ－ＴｒＲ参入开始增加，２４小时达到峰值，在内皮素－１作用下，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ的表达活性的３０分钟达到高峰３小时后恢复到原来水平，将可合成ｃ－     

摘除颌下腺对大鼠胃粘膜DNA和蛋白质合成速率的影响

摘除颌下腺后第３周，取胃粘膜组织进行＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（＾３ＨＴｄＲ）Ｔ ＾３Ｈ－亮氨酸（＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ）参入实验。结果表明，＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ的参入量均较对照组明显降低，而颌下腺摘除大鼠经口补充外源性表皮生长因子（ＥＧＦ）后，＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕｃｉｎｅ的参入量均明显回升。提示，颌下腺对维持胃粘膜ＤＮＡ和蛋白质合成速率具有重要作用，而这一作用的发挥可能与颌     

溶血磷脂酸刺激兔血管平滑肌细胞增殖的信号转导途径

目的：探讨溶血磷脂酸（ＬＰＡ）刺激兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的信号转导途径。方法：在培养的家兔血管平滑肌细胞上，测定３Ｈ胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＬＰＡ呈浓度依赖地刺激３ＨＴｄＲ参入，并平行地激活ＭＡＰＫ，二者间呈显著正相关。乙二醇双（氨基乙酯）四乙酸（ＥＧＴＡ）、尼卡地平、ｒｙａｎｏｄｉｎｅ、ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ、ｈｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ不影响ＬＰＡ促ＶＳＭＣ增殖作用。ＰＱ０９８０５９、Ｈ７、佛波酯（ＰＭＡ）及百日咳毒素（ＰＴＸ）均可抑制ＬＰＡ的促增殖和激活ＭＡＰＫ作用。结论：ＬＰＡ浓度依赖地促进ＶＳＭＣ增殖，其细胞内信号转导与ＰＴＸ敏感的Ｇ蛋白介导的蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）和ＭＡＰＫ途径有关。     

重组合异种骨移植同源抗源刺激对脾细胞上清液中IL—2的影响

为探讨重组合异种骨（ＲＲＸ）移植对机体免疫功能的影响，以ＲＢＸ、牛ＢＭＰ、经处理的同源松质骨粒、羟基磷灰石移植建立４组ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠股后肌袋模型，术后２、７１７、２８、４２天杀鼠取脾细胞，留取上清液，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法对体内植骨及体外同源抗原刺激后ＩＬ－２生物学活性进行了研究。结果表明：①ＲＢＸ（ＢＭＰ）移植后２天ＩＬ－２一过性升高；②术后７、１４天ＩＬ－２水平显著降低；③体外抗原刺激各时间点     

多抗甲素对肿瘤患者淋巴细胞免疫功能影响

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ及＾１４Ｃ－ＵＲ参入淋巴细胞的双标记方法，观察了淋巴细胞转化试验中细胞ＤＮＡ及ＰＮＡ的合成功能。结果表明，肿瘤患者在多抗甲素治疗前淋巴细胞的参入计数显著低于正常人，治疗后显著高于治疗高，但仍低于正常人。     

丝裂素活化蛋白激酶介导同型半胱氨酸诱导的血管平滑肌细胞增生

目的：研究同型半胱氨酸（ＨＣＹ）促进血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的增殖及其机制。方法：采用同位素技术测定３ＨＴｄＲ参入和丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：ＨＣＹ促进ＶＳＭＣ增殖，同时ＨＣＹ增加ＭＡＰＫ活性，二者均具有剂量效应关系，而且二者之间呈显著正相关。结论：ＨＣＹ促进ＶＳＭＣ增殖，可能是通过增加ＭＡＰＫ活性的途径实现的     

Irbesartan对内皮剥脱后血管平滑肌细胞增生的影响

观察新的非肽类血管紧张素Ⅱ的１型受体拮抗剂对血管平滑肌细胞增生的影响。方法：大鼠髂动脉球囊内皮剥脱术后ＶＳＭＣ过度增生模型，采用＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入，。免疫组化染以检测ＶＳＭＣ中增殖细胞核抗遥表达及图象分析血管壁形态学变化的方法。     

IL—12,IL—7分别与IL—2协同对人PBMC增殖和细胞毒作用影 …

应用同位素＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和＾３Ｈ－ＴｄＲ释放法比较了重组ＩＬ－１２、ＩＬ－７单独或分别ＩＬ－２协同对健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的体外增殖和母舔生的影响。结果表明，ＩＬ－７单独即可促进ＰＢＭＣ增殖分化和诱导产生细胞毒活性，与ＩＬ－２协同可使２各作用均增强，并高于单独用ＩＬ－２时的效应。ＩＬ－１２单独不能经起ＰＢＭＣ增殖但可诱导ＰＢＭＣ产生细胞毒活性，与ＩＬ－２协同可使唤种效应明显增强。     

c—myc反义寡核苷酸对低氧内皮细胞条件培养液诱导的肺血管？…

应用细胞培养、核酸斑点杂交、Ｈ＾３－胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入、免疫细胞化学、图像分析等技术观察ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸（ＯＤＮｓ）对低氧内皮细胞条件培养液（ＨＥＣＣＭ）诱导的大鼠肺血管周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量的影响。结果表明,ＨＥＣＣＭ显著促进周细胞ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达、ＰＣＮＡ表达（Ｐ〈０．０１）及＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增加（     

钙激动剂对心肌肥大有关信号转导的作用

目的 探讨钙激动剂对心肌细胞丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性,ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白核转位表达,及蛋白核酸合成的影响。方法 应用血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）刺激原代培养的心肌细胞钙内流,雷尼丁（ＲＹ,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）刺激胞内钙释放;刺激５ｍｉｎ时测ＭＡＰＫ活性,免疫组化方法检测刺激５、１０、２０、３０ｍｉｎ时ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白定位表达;＾３Ｈ－Ｌｅｕ和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测刺激２４ｈ心肌细胞蛋白核酸合成。结果 ＡｎｇⅡ和ＲＹ刺激心肌细胞５ｍｉｎ时ＭＡＰＫ活性均明显增高,与对照心肌细胞相比差异显著（Ｐ〈０．０１）。免疫组化结果显示,ＲＹ刺激心肌细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白核转位表达早于ＡｎｇⅡ。ＡｎｇⅡ和ＲＹ刺激２４ｈ,心肌细胞蛋白核酸合成显著增高,与对照组心肌细胞相比差