人衰老成纤维细胞c-fos基因对DNaseⅠ的敏感性分析

目的：研究人衰老成纤维细胞c-fos基因染色质结构状态。方法：DNaseⅠ敏感性分析法。结果：衰老细胞c-fos基因在表皮生长因子（EGF）诱导后对DNaseⅠ的敏感性无明显变化，而年轻细胞对DNaseⅠ的敏感性显著升高。结论：衰老细胞的c-fos基因可能在异染色质上，处于关闭状态，因而不易为EGF所诱导。     

人衰老成纤维细胞c—myc原癌基因的损伤修复

目的；观察人衰老成纤维细胞特异因基ｃ－ｍｙｃ的损伤修复，方法采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法。结果；衰老细胞能有效地修复ｃ－ｍｙｃ基因。结论；衰老细胞有效地修复对细胞存亡至关重要的基因。     

人衰老成纤维细胞c-myc原癌基因的损伤修复

目的：观察人衰老成纤维细胞特异因基c-myc的损伤修复。方法；采用Southern杂交法。结果：衰老细胞能有效地修复c－myc基因。结论：衰老细胞能有效地修复对细胞存亡至关重要的基因。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是近年来研究较为热门的生物因子,为具有多种功能的多肽生长因子,能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞的增殖,是体内重要的创伤愈合因子之一。bFGF有主动诱导分化和加速生长作用,可以促进牙周膜成纤维细胞的分化和增殖,促进牙周组织的修复和再生。     

碱性成纤维细胞生长因子对肌成纤维细胞的作用及其对创面愈合的影响

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对烧伤创面内肌成纤维细胞转归的影响 ,深入探讨bFGF在组织修复中的作用机制。方法　利用大鼠 30 %深Ⅱ°烫伤模型 ,采用原位杂交与免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合时组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 (caspase- 3)mRNA和蛋白的表达情况 ,并运用免疫组化法观察α -平滑肌肌动蛋白 (ASMA)、转化细胞生长因子 - β1(TGF -β1)的变化情况 ,并对照观察创面应用外源性bFGF后以上各项指标的变化。 结果　创面组织中 β -平滑肌肌动蛋白的表达早期变化不明显 ,伤后第 7天明显升高并达到高峰 ,随后逐渐减弱。创面外用bFGF ,伤后 7～ 14dASMA的表达明显增强。伤后 3h开始 ,TGF - β1的表达逐渐升高 ,至 14d略有所下降。外有bFGF后TGF - β1的表达明显增加 ,并强于单纯烫伤组。伤区局部加用外源性的bFGF ,caspasemRNA和蛋白的表达规律与单纯烫伤组相似 ,呈现先升高后降低 ,再升高样的变化。但第一次峰值低 ,第二次的峰值高于单纯烫伤组。结论　肌成纤维细胞数量的增加与凋亡过程是创面愈合的重要环节。外源性应用bFGF可能够通过提高TGF - β1的分泌 ,进而协同其他生长因子对肌成纤维细胞形成和凋亡发挥作用 ,最终影响愈合的结局。     

碱性成纤维细胞生长因子与瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白代谢的研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白代谢的影响.方法 选择2012年1～10月我院收治的20例增生性瘢痕组织患者,手术切除组织留取和制作标本,选择不同浓度的bFGF对标本进行干预,分别测定标本羟脯氨酸（HPr）、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白（CoⅠ、CoⅢ）mRNA的变化,并记录对细胞基质金属蛋白酶1（MMP-1）的调控作用.结果 0 pg/L组、50 pg/L组、100 pg/L组、500 pg/L组,HPr、CoⅠ、CoⅢmRNA变化不明显,组间均无明显差异（均P＞0.05）;0 pg/L组MMP-1为（22.21±2.52） μg/L,明显低于其他三组,100 pg/L组MMP-1为（35.62±3.23） μg/L,明显高于其他三组,为含量最高组,可看出,MMP-1含量随着碱性成纤维细胞生长因子浓度的增加而不断上升,并且在100 pg/L浓度时,上升最明显.结论 碱性成纤维细胞生长因子对CoⅠ、CoⅢ、HPr含量影响不显著,不会促进瘢痕组织形成,同时可增加MMP-1含量,发挥对胶原蛋白的降解作用.     

衰老真皮成纤维细胞胶原基因调控研究

目的 针对衰老真皮成纤维细胞胶原基因表达减少的特点，应用胎儿皮肤源性活性蛋白（ＳＣＦ）进行调控，以增加胶原基因的表达。方法 应用真皮成纤维细胞增养、胶原基因ｍＲＮＡ裂隙杂交和图像分析技术，观察胎儿皮肤源性活性蛋白对真皮胶原基因的调控作用。结果 以Ａｃｔｉｎ作为对照，ＳＣＦ对老年人成纤维细胞胶原基因有明显的调控作用，可以使Ⅰ、Ⅲ型胶原基因表达增加，处理后，Ⅰ型胶原基因表达增加１５０％，Ⅲ型胶原基因增     

CTGF对人牙周膜成纤维细胞VEGF表达影响

目的 探讨结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对人牙周膜成纤维细胞VEGF表达的影响.方法 通过组织培养获得人牙周膜成纤维细胞(HPLFs);第5代HPLFs实验组细胞加入不同浓度CTGF(5、10、50、100 ng/mL),对照组加入等量的蒸馏水,培养48 h后,收集细胞爬片,免疫组化及计算机图像处理系统检测检测HPLFs中VEGF表达变化.结果 通过组织培养获得细胞抗波形丝蛋白阳性,抗角蛋白阴性,为中胚层来源的成纤维细胞,符合HPLFs的形态学及免疫学特征.CTGF终浓度为5～100 ng/mL,实验组VEGF表达强度高于空白对照组.CTGF终浓度为10 ng/mL时VEGF表达强度增幅最大.结论 CTGF干预可有效上调HPLFs中VEGF表达.     

c—erbB—2基因对小鼠成纤维细胞生长特性的影响

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２基因对细胞增殖的影响。本实验通过构建ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的表达载体一转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，观察了转染细胞的生长特性。发现其对数生长期提前，群体倍增时间缩短，并且其克隆形成率，软琼脂集落形成能力，及裸鼠致瘤能力均明显高于对照组。     

人碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达质粒的构建

目的：构建人碱性成纤维细胞生长因子（ｈｂＦＧＦ）基因真核表达质粒,为深入研究ｈｂＦＧＦ在组织修复中的分子调节机制及临床应用提供物质基础。方法：含ｈｂＦＧＦ ｃＤＮＡ的ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒于大肠杆菌ＪＭ１０９内扩增;提取及纯化ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒;经ＤＮＡ序列分析所含ｈｂＦＧＦ ｃＤＮＡ;限制性酶切ｈｂＦＧＦ ｃＤＮＡ片段,连接酶连接到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｎｅｏ内,克隆出真核表达质     

重组人碱性成纤维细胞生长因子对创面愈合的影响

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子(Rsecombinanthumanbasicfibroblastgrowthfactor,rhbFGF)对烧伤、手术取皮区和慢性创面愈合的影响,并探讨用药方法。方法将163例各种创面患者按创面类型分为3组:烧伤创面组62例、手术取皮区创面组36例和慢性创面组65例。在常规治疗同时,加用rhbFGF治疗。烧伤创面组和手术取皮区创面组采用随机自身对照法,慢性创面组采用相同个体治疗前后创面情况对照。分别观察创面愈合时间、用药前后血尿常规、肝、肾功能变化及不良反应。结果烧伤创面组及手术取皮区创面组用药区创面完全愈合时间较对照区缩短(P<0.01,P<0.05),慢性创面组用药区创面愈合时间较对照区缩短(P<0.01)。结论rhbFGF具有促进烧伤、皮肤外伤、慢性创面愈合的作用,尤其对深Ⅱ度烧伤、严重皮肤外伤(中厚皮片取皮伤)、慢性创面促进愈合作用更为显著。     

可见光对培养的人视网膜色素上皮细胞内碱性成纤维细胞生长因子、成纤维细胞生长因子受体1、B细胞淋巴瘤，白血病-2基因及caspase-3的影响

目的：观察可见光诱导的培养人视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡中，RPE细胞内碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、成纤维细胞生长因子受体I（FGFRl）、B细胞淋巴瘤，白血病-2基因（bcl-2）及caspase-3的表达变化。方法：建立可见光诱导培养的人RPE细胞凋亡的模型，通过细胞免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应fRT—PCR）、酶联免疫测定等方法，对培养的人RPE细胞内bFGF和其受体FGFR1的mRNA表达变化、Bcl-2表达改变以及caspase-3的活性变化进行了检测。结果：（1）光照后6及12h，培养的人RPE细胞胞质内Bcl-2蛋白的表达有-定的下降趋势，但与无光照组之间差异无显著性意义（P〉0．05）。光照后24h，Bcl-2蛋白表达下降明显fP〈0．01）。bcl-2mRNA的表达与上述蛋白表达变化相似，但早在光照12h后已能检测到其表达下降；（2）光照后6hbFGF及FGFRl的表达尚无明显改变（P〉0．05），随着时间延长，其表达增加的差异具有显著意义（P〈0．05）；（3）光照后caspase-3活性随时间延长而明显增加，与未光照时比较，光照结束后6、12及2gh活性差异有显著意义（P〉0．05）。12和24h间差异无显著意义（P〉0．05）。结论：可见光照诱导培养的人RPE细胞凋亡时，RPE细胞内bcl-2表达下降．内源性bFGF及FGFRI上调，caspase-3活性增高。     

rhIGF-Ⅰ微球对人牙周膜成纤维细胞作用的实验研究

目的:探讨重组人胰岛素样生长因子-Ⅰ明胶微球(recombinant human insulin-like growth factor-Ⅰ-gelatin mierospheres,rhIGF-Ⅰ-GMs)保存rhIGF-Ⅰ生物活性的情况及其对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts.HPDLFs)生物学活性的影响.方法:改良乳化冷凝聚合法制备rhIGF-Ⅰ-GMs.ELLS法测定其载药特性;体外培养HPDLFs,rhIGF-Ⅰ和rhIGF-Ⅰ-GMs梯度含量分别作用于HPDLFs,酶动力学方法及ELISA法动态观察其碱性磷酸酶(alka-line phosphatase,ALP)活性及对合成纤维结合蛋白(fibronection,Fn)的影响.结果:微球表面光滑圆整,微球载药量和包封率分别为930 ng/g和93.0%;培养1 d后,对照组、rhIGF-Ⅰ组和rhIGF-Ⅰ-GMs组人牙周膜成纤维细胞ALP活性和合成Fn均无显著性差异(P>0.05);3 d后,各组人牙周膜成纤维细胞ALP活性和Fn的合成依次为rhIGF-Ⅰ-GMs组>rhIGF-Ⅰ组>对照组,rhIGF-Ⅰ-GMs组和rhIGF-Ⅰ组比较,有显著性差异(P<0.01).结论:rhIGF-Ⅰ-GMs及其冻干粉剂制备良好;rhIGF-Ⅰ-GMs通过对rhIGF-Ⅰ的缓释作用,可较长时间地增强HPDLFs的ALP活性和促进Fn的合成.     

成纤维细胞生长因子对腋臭术后创面的影响

目的：探讨成纤维细胞生长因子对腋臭术后创面恢复的影响。方法：我科2004年1月～2007年12月门诊腋臭手术患者共857例，其中40例术后均出现局部皮瓣青紫、表皮脱落、切口愈合不佳（其余患者恢复良好），分为治疗组20例；对照组20例，对照组予以常规术后处理；治疗组予以成纤维细胞生长因子局部湿敷。结果：对照组愈合时间为16—24天，平均18．6天，3月后疤痕宽度5mm；治疗组愈合时间为12～15天，平均为13．8天，3月后疤痕宽度2．5mm。结论：小切口治疗腋臭术后应用成纤维细胞生长因子，能缩短愈合时间，减轻术后疤痕。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子对烧伤创面植皮存活的影响

目的：观察重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF)对烧伤创面植皮存活的影响。方法：对22例深度（深Ⅱ度、Ⅲ度）烧伤病人手术治疗，行切痂或削痂后喷用rh-bFGF后立即移植自体皮片，选择20例对照组深度（深Ⅱ度、Ⅲ度）烧伤病人手术治疗，行切痂或削痂后立即移植自体皮片。结果：rh-bFGF治疗组植皮成活率明显提高，组织学检查发现bFGF治疗组植皮下有大量毛细胞管和成纤维细胞增生；其成活率均明显高于对照组（P＜0．01），成活时间明显早于对照组。结论：深度烧伤病人采取削痂或切痂植皮术中应用rh-bFGF可提高植皮成活率，有利于创面早期愈合。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对癫痫持续状态大鼠海马c-fos表达的影响

目的：通过戊四氮癫痫持续状态大鼠模型,观察外源性碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对癫痫大鼠海马组织内c—fos表达的影响。方法：建立SD大鼠戊四氮（PTZ）诱导癫痫持续状态模型,生理盐水（NS）注射作为对照,皮下注射bFGF进行干预,分4组：即NS组、NS＋bFGF组、PTz组、Frrz十bFGF组。选择处理后第3、7、14天3个时间点进行观察,采用免疫组化SABC法检测c-fos。结果：发作后3、7、14dPTZ组海马组织c—fos较NS组有显著升高（P〈0．01）,以发作后14d升高更为明显,眦＋bFGF组各时间点c-fos较PTZ组下降（P〈0．05）;c-fos含量在P1lZ组各时间点亦大于NS组（P〈0．05）,以发作后14d升高较为显著;NS＋bFGF组发作后各时间点c-fos较PTZ组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：大鼠癫痫持续状态后一定时间内c—fos表达增加,bFGF能够降低大鼠癫痫发作后c—fos表达,减少神经元的损害。     

人心肌肥大时碱性成纤维细胞生长因子的表达

1　对象和方法1.1　对象　收集第三军医大学新桥医院心血管外科 1997/1998体外循环手术标本 32例 ,其中风湿性心脏病左室心肌(乳头肌 )标本 16 (男 7,女 9)例 ,平均年龄 42 (2 4～ 5 0 )岁 ,心功能 级 ;法乐四联征或三联征右室心肌标本 16 (男 9,女 7)例 ,平均年龄 11(6～ 15 )岁 ,心功能 级 .另取无心脏疾病的意外死亡者左、右室肌各 5例为对照 .1.2　方法　常规保存心肌标本 .1b FGF原位杂交组织化学检测 :取冻存标本作冰冻切片 ,40 m L· L- 1多聚甲醛固定 30min.BFGF质粒经扩增 ,Eco R /Sal I酶切回收 ,随机引物法标记探针 ,作…     

RT—PCR检测血管外膜成纤维细胞中肝细胞生长因子及其受体基因的表达

目的 以Ｗｉｓｔａｒ大鼠和ＳＤ大鼠为研究对象,从分子水平研究肝细胞生长因子和ｃ－ｍｅｔ在血管外膜成纤维细胞中的表达及其意义。方法 （１）用套式聚合酶链反应及经典ＰＣＲ检测ＨＧＦ及其受体－ｃ－ｍｅｔ基因在血管外膜成纤维细胞中的表达。（２）测定ｃ－ｍｅｔ基因ＰＣＲ产物的ＤＮＡ序物。结果 （１）ＰＣＲ产物电泳显示ｃ－ｍｅｔ基因在大鼠血管外膜成纤维细胞中有表达。（２）ｃ－ｍｅｔ基因ＰＣＲ产物的序列经ＤＮＡ     

生长因子的寡核苷酸对成纤维细胞增生的影响

目的 :观察一些生长因子有义和反义寡核苷酸对成纤维细胞增生的影响。方法 :采用细胞增生试验。结果 :1酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)的寡核苷酸和表皮生长因子 (EGF)的寡核苷酸以抑制细胞增生为主。2碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)的有义寡核苷酸对成纤维细胞增生有抑制作用 ,但其反义寡核苷酸却有促进成纤维细胞增生的倾向。结论 :此实验提示反义寡核苷酸可以作为药物用于某些疾病的治疗 ,但其可能通过多种机理起治疗作用