ABO血型鉴定中人源抗体的应用与评价

目的 评价ABO血型鉴定中单克隆定型试剂及人源抗-A/B在吸收放散试验中的应用。方法 单克隆定型试剂及人源抗-A/B与标准A、B、O、AB 4种表型红细胞在4℃、室温、37℃条件下反应比较特异性；与A1/B细胞反应的效价、凝集时间及凝集强度评价亲和力；对29例正反定型不符的标本进行检测，评价单克隆定型试剂及人源抗-A/B在吸收放散试验中对弱抗原的检出能力。结果 人源抗-A/B特异性及亲和力较低，单克隆定型试剂有交叉反应性，人源抗-A/B在吸收放散试验中可以检出大部分的弱抗原，且不存在交叉反应性。结论 在ABO血型鉴定试验中，人源抗-A/B结合吸收放散试验可以作为鉴定ABO弱抗原的补充，血清学试验中选择合理的试剂及相应的方法学，才能得出准确结果，确保临床输血安全。     

抗A和抗B血型定型试剂稳定性观察及对亚型检测的影响

目的检测国产单克隆抗A(B)试剂质量,观察对ABO亚型检测的影响。方法测定四个厂家"单抗A、抗B"试剂效价、亲和力等,并检测稀有的ABO亚型红细胞与单克隆试剂反应情况,同时用人源抗A、抗B试剂作对照。结果所有厂商的试剂均符合国家标准,单克隆抗体仍有漏检ABO亚型现象。结论目前市场销售的单克隆抗A、抗B血型定型试剂,质量基本可靠,但应定期测定其效价、亲和力,受检者ABO血型检测必须用ABO反定型试验复核。     

抗-M引起ABO血型正反定型不符一例

献血者胡某,女,22岁,无输血史和妊娠史,2005年8月在我站献血车上体检和化验初筛合格后献血200 m l。实验室检查发现ABO血型正反定型不符,进一步鉴定发现存在盐水反应性抗-M抗体。一、材料和方法1.试剂抗-A、抗-B血型试剂、ABO反定型细胞、谱细胞(上海血液生物医药公司);抗-Lea、抗-AB血型试剂(美国Immucor公司);抗-M、抗-C血型试剂(TITUS公司);抗-D血型试剂(Lorne公司)。2.方法血型鉴定、抗体鉴定、抗体效价测定的操作均按《中国输血技术操作规程》进行。二、结果1.红细胞血型鉴定献血员血型正定型为A型Rh阳性,NN,反定型与Ac、B…     

罕见的B(A)表型血清学及基因检测

目的对1例B(A)表现型用血清学及基因检测进行鉴定。方法使用2个厂家的单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;Diamed凝胶系统;人源抗-A、抗-B、抗-H血型试剂和试剂红细胞,用常规血清学方法对被检血样进行ABO血型定型。采用吸收放散方法;分子生物学PCR-RFLP方法;ABO基因第6、7外显子的PCR产物正反向测序方法进一步分析。结果被检血样红细胞及血清经2种单克隆抗-A、抗-B和试剂红细胞进行抗原抗体鉴定:正定型结果不一致;正反定型结果不符合。用吸收放散方法,人源抗-A、抗-B、抗-H;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂和Diamed凝胶系统检测:有弱A抗原、强H抗原检出;PCR-RFLP基因分型:检出B/O基因;基因克隆测序证实为:B(A)700/O*02。结论证实该例为B(A)700/O*02。     

B亚型产生抗-B1抗体1例分析

目前已检出的B亚型较A亚型少,本中心血型参比室在进行ABO血型鉴定时发现B亚型产生抗-B1抗体1例,现报告如下。 1病历摘要 献血者,男,36岁。于2008-07-03在我中心采血屋无偿捐献全血400ml,献血后无不良反应。检验科在对血袋辫进行血型复检时,发现该血袋辫标本正定型为0型,反定型为B型,正反定型不符,遂将此标本送本中心血型参比室进行ABO血型鉴定。抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H单克隆血清及ABO试剂红细胞均由上海血液生物医药有限责任公司提供。ABO血型正反定型、吸收放散试验及血型物质检测试验参照文献[1]。正反定型结果见表1。     

免疫磁珠试剂在ABO血型反定型检测中的应用

人ABO血型是由红细胞抗原和血(浆)清中抗体决定的,用抗-A和抗-B试剂检测红细胞抗原称之正定型,用A型和B型红细胞检测血清中抗体称之为反定型.正常健康人的ABO血型正反定型应相符合[1],即A型人红细胞上有A抗原,血清中有抗-B抗体;B型人红细胞上有B抗原,血清中有抗-A抗体;AB型人红细胞上有AB抗原,血清中无ABO血型抗体;O型人红细胞上无A和B抗原,血清中有抗-A,抗-B抗体.对于临床病人ABO血型正反定型结果经常出现不相符合现象,分析追踪其不相符原因,可以正确地判断血型和选择血型相容的血液进行输血.目前,ABO血型正反定型已是临床常规检测项目,卫生部要求每名就医患者都需要进行正反定型.     

无偿献血者ABO血型正反定型不符原因分析

目的分析无偿献血者ABO正反定型不符原因,采取应对措施。方法采用血型血清学方法,有条件者收集其家系资料,做分子生物学鉴定。结果 62例血型正反定型不符原因分别为29例ABO亚型,4例抗体效价下降,10例IgM性质的不规则抗体,市售反定型试剂陈旧致检出抗体效价弱10例,单克隆试剂亲合力过高致假阳性4例,5例人为因素。结论 ABO正反定型不符时一定要做血型血清学鉴定,有条件者做家系调查及分子生物学鉴定;血站加强人员培训,规范操作,加强试剂确认,完善血型正反定型,避免人为、试剂因素,防止亚型及有意义不规则抗体的漏检和假阴阳性的发生,保证输血安全。     

单克隆抗-A（B）试剂质量鉴定与分析

目的 :检测国产单克隆抗 A(B)试剂质量 ,观察对 ABO血型检测的影响。方法 :测定四个厂家单克隆抗 - A(B)试剂效价、亲和力等 ,并检测稀有的 ABO亚型红细胞与单克隆试剂反应情况。结果 :合格的仅有一个厂商的产品 ,但其仍有漏检稀有的 ABO亚型现象 ,另有一家仅在距出产 2个月内合格 ,其它均不合格原因主要为效价、亲和力。结论 :目前临床实验室所用的单克隆抗 - A(B)试剂 ,可能存在一些质量问题 ,应定期测定其效价、亲和力 ,血型鉴定必须用 ABO反定型试验复核。     

ABO血型正 反定型不一致时的解决策略探讨

目的研究患者ABO血型正、反定型不一致的原因并对解决策略进行探讨。方法对34例正、反定型不一致标本采用试管法在不同环境温度条件下进行ABO血型正、反定型试验;对红细胞自凝的标本用2-巯基乙醇处理后再行正定型试验;对患者血清进行抗体筛选试验和抗体特异性鉴定试验,根据抗体鉴定结果选用试剂红细胞行反定型试验;经以上处理后正、反定型仍不一致者则对标本红细胞进行吸收放散试验以确定ABO血型。结果 34例正、反定型不一致的结果为:冷凝集9例,抗体丢失或减弱8例,红细胞抗原减弱7例,红细胞自凝4例,ABO血型亚型2例,抗-E抗体2例,非特异性抗体1例,获得性"类B"1例。结论当患者标本出现ABO血型正、反定型不一致时,应根据可能的原因采取科学策略进行相关确认试验,以便快速准确地鉴定出ABO血型,从而保证患者输血安全。     

1例类孟买ABmh血型的鉴定

类孟买血型是一种罕见的血型,血清学表现与常规ABO血型有很大差异。在我站无偿献血人群中,1例红细胞与抗A、抗B均不凝集,血清凝集ABO细胞。经进一步检测,证实为类孟买ABmh血型,现报告如下。1材料与方法1.1标本来源献血者,胡某,21岁,籍贯福建蒲田市,在血型鉴定过程中,其正反定型符合O型,但血清凝集O型红细胞。重新采集外周静脉血,收集唾液,进一步做血清学试验。1.2试剂试剂红细胞和标准抗血清(上海血液中心),鼠抗人单克隆抗-Lea、抗-Leb抗体(加拿大Titus公司)。1.3ABO定型正定型中增加抗-A1、抗-AB、抗-H,反定型增加自身细胞,血清学…     

Comparison of monoclonal and polyclonal anti-P1 reagents

Whereas monoclonal reagents for ABO, Rhesus, Kell, Kidd, Lewis and MNS antigens are widely used in blood grouping laboratories and have been well evaluated, little attention has been given so far to monoclonal anti-P1 reagents. Therefore it was the aim of our study to examine the suitability of monoclonal anti-P1 reagents for routine use in comparison to polyclonal anti-P1 reagents. 10 polyclonal anti-P1 reagents (9 from goat, 1 from rabbit) and 5 monoclonal anti-P1 reagents (4 with clone 650, 1 with clone OSK17) were tested by the tube-spin-method at room temperature (incubation time as prescribed by the manufacturer) using untreated P1+ red blood cells (RBCs) for titration and untreated P1- RBCs as negative controls. P1- RBCs with a positive direct anti-globulin test (DAT+) (coated with incomplete anti-D) and sialidase-treated P1- RBCs (T+) were used to recognize false positive reactions. 3 monoclonal anti-P1 reagents had a titer of < or = 1 with P1+(weak) RBCs, but all polyclonal anti-P1 reagents showed a titer > or = 2. Negative controls (untreated P1- RBCs) were inconspicuous. 7 polyclonal and 1 monoclonal anti-P1 reagents showed false positive reactions with P1- DAT+ RBCs. All polyclonal and 1 monoclonal (containing clone OSK17) reagent showed false positive reactions with P1- T+ RBCs. As several monoclonal anti-P1 reagents are less suitable for routine use than polyclonal anti-P1 reagents, quality control of anti-P1 reagents should be intensified.     

IgA类和IgM类单克隆抗体血型定型试剂临床应用比较研究

目的比较IgA类和IgM类血型定型试剂临床使用的异同。方法分别检测、比较IgA类和IgM类血型定型试剂的主要指标,并用于大批量血液样本的血型定型,将定型结果互相比较,并用正反定型法验证。结果各项指标均符合血型定型试剂要求,血型定型结果的准确率和各主要亚型的检出率没有差异,IgM类试剂的亲和力较强,凝集效果相对较好。结论IgA类试剂和IgM类试剂一样,均可用作血型定型试剂,但IgM类能更快速、方便地判读结果。     

罕见B（A）血型的检测及其安全输血探讨

本研究探讨稀有B（A）血型的遗传特性、鉴定方法和输血策略.采用血型血清学方法、PCR-SSP方法基因定型和ABO血型第6、7外显子直接测序的方法进行B（A）血型鉴定,并分析该家系的血型遗传特点和分子机制;同时对B（A）型献血者和用血者进行配合性试验和临床输血研究.结果表明,该家系调查发现3例血清学结果正反定型结果不符,均为血清学结果为正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B（A）04/O01型,1袋B（A）型红细胞输注给1例B型患者后临床有轻度的输血反应,B（A）型患者输注O型洗涤红细胞后患者未出现输血反应.结论：对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可以用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,B（A）型血液不能给B型或AB型患者输注,B（A）血型患者输血时应采取配合性成分输血或自身输血.     

中国汉族人群检出新的B(A)641T>C等位基因

目的明确稀有ABO表现型的遗传学基础。方法对ABO血清学常规定型正反不一致的样本,采用PCR-RFLP方法作初步基因分型,对8例血清学表现为AwB,而基因分型具有O基因的个体,进行ABO基因第6和7外显子PCR产物的TA克隆及核苷酸序列测定。结果8例样本除1对为母女关系外,其余无任何亲缘关系,血清学表现相似,红细胞上含有接近正常的B抗原和少量A抗原,H抗原含量较正常B细胞显著增高,血清中存在抗-A,初定为AwB,基因分型均为BO。克隆测序表明除具有正常O1或者O1V基因外,他们的B基因第7外显子在正常B等位基因的基础上,均发生单碱基突变,4例发生nt700C>G点突变,导致Pro234Ala,2例无关个体为nt640A>G点突变,导致Met214Val,1对母女均表现nt641T>C点突变,导致Met214Thr。证实所有8例样本真正血型应为B(A)表现型,其基因型均为B(A)/O型。结论在中国汉族人群中检出3种B(A)血型,除了已在我国台湾首先被发现的B(A)700C>G和笔者以前报道的B(A)640A>G之外,新发现1种B(A)641T>C等位基因。     

长效反定型红细胞试剂的研究

目的：通过研究实验探索最佳的醛化剂浓度及醛化时间对红细胞进行醛化处理,以获得保存效期长、凝集效果佳的反定型红细胞试剂。方法：分别以0.5%、0.1%、0.05%的戊二醛对洗涤后的红细胞进行1分钟、3分钟、5分钟、10分钟的醛化,配制成5-10%的醛化反定型红细胞试剂,分别与购买的商品化反定型红细胞试剂,单克隆抗A、抗B正定型试剂进行对比试验,同时在2-8℃冰箱放置进行稳定性试验。结果：用0.1%的戊二醛醛化红细胞可以获得最佳的稳定性与凝集效果的平衡,在12个月的保存试验期内试剂稳定,与商品化的反定型红细胞试剂及正定型的对比实验中,二者的结果完全相符。结论：0.1%的戊二醛醛化反定型红细胞试剂具有良好的稳定性及凝集效果,可以用于ABO血型的反定型,同时用醛化的方法制备稳定而又凝集效果佳红细胞试剂也是一条值得探索的途径。     

BECKM AN PK7300全自动血型检测系统可疑结果的原因分析

目的：探讨BECKMAN PK7300全自动血型检测系统在血站实验室用于血型筛查时出现结果可疑的原因以及应用中的注意事项。方法选取天津市血液中心2015年5月至2015年8月ABO及Rh血型经微板法鉴定后的无偿献血者的标本14417例,再由PK7300进行检测,统计分析ABO及Rh血型结果判读的正确率、错误率以及对可疑结果的原因进行分析。结果ABO血型结果一次性判读正确率为99．01％,失败率0．99％（其中正反定型不符0．48％）,无错误判读;Rh（D）血型正确判读率100％。结论 BECKMAN PK7300全自动血型检测系统结果准确可靠,实现了血型检测的自动化、标准化,减少人为因素对实验的影响,反应图像可长期保存,保证结果的可溯性,节约成本,适用于血站实验室血型批量化检测需要。     

α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因742C>T突变导致A2亚型

本研究探讨2例ABO亚型A2B的分子机制。利用单克隆抗体检测先证者红细胞ABO血型抗原,用标准A、B、O细胞检测先证者血清中的ABO抗体,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增先证者ABO基因的第5至7外显子序列,其PCR产物经酶切后直接测序分析。同时,PCR产物经TOPO TA克隆到质粒载体中获得单链,对所得克隆进行ABO基因第6、7外显子双向测序分析。结果表明,先证者红细胞有A、B抗原,同时其血清中存在抗A1抗体。直接测序分析发现,第261位无缺失,第297位A/G、467C/T、526C/G、657C/T、703G/A、742C/T、796C/A、803G/C、930G/A杂合。克隆测序得到B101和1个新的A等位基因。与A102相比,新A等位基因仅在第742位C→T突变,导致第248位精氨酸变成色氨酸,新等位基因已被正式命名为A213。结论 :α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因第742位C→T突变导致产生A2表型,表型个体血清中可含有抗A1抗体。     

Blood bank reagents: some problems related to preservatives and dyes

Occasionally the additives used for the storage, preservation, and coloring of blood bank reagents are a source of anomalous a-glutination reactions. Discrepancies in ABO cell and serum grouping or agglutination of cells used for both antibody detection and identification may be related to the presence of these materials in blood bank reagents. These substances include acriflavin and other dyes; antibiotics, such as penicillin and neomycin; EDTA; caprylate; and occasionally saline. The literature is reviewed regarding this problem.