血站ALT初筛方法不同对血液检测合格率的影响分析

目的:探究血站ALT初筛方法不同对血液检测合格率的影响,从而能够有效的提升血站血液检查的合格率.方法:选取2014年1月-2015年6月本血站标本中的共800份,观察组的200例研究对象选取2014年1-6月1、2号献血车标本,应用速率法进行ALT初筛方法,对照组的200例研究对象与研究标本选取2015年1-6月3、4号献血车标本使用干式生化法进行ALT初筛,对两种不同的初筛方法的血液检测合格率进行比较分析.结果:观察组应用速率法进行ALT初筛方法,其血液检测的合格率为99％,对照组使用干式生化法进行ALT初筛,其血液检测的合格率为95％,差异具有统计学意义(P＜0.01);再对对照组标本采取速率法进行ALT初筛,其血液检测合格率为98％,差异有统计学意义(P＜0.01)结论:通过对血站献血车采血过程中使用两种不同的的ALT初筛方法进行比较,速率法较干式生化法更适用于采血车环境血液初筛,可以有效的提升血站的血液检测合格率,减少血液的报废率.     

微板丙酮酸氧化酶动力学法测定ALT活性的应用

目的评价微板丙酮酸氧化酶动力学法测定ALT活性的应用情况。方法应用微板丙酮酸氧化酶动力学法测定血清ALT，对其方法的线性、重复性进行比价，同时与乳酸脱氢酶紫外动力学法进行比较。结果线性试验相关系数r=0．999；批内复性试验低值与高值标本的CV值分别为6．02％、7．55％；批间重复性试验低值与高值标本的CV值分别为8．27％、8．16％；对比试验阴性符合率为100％，阳性符合率为99．19％。结论微板丙酮酸氧化酶动力学法适合血站用于ALT的检测。     

酶标速率法与赖氏法测定ALT的比较

本站1999年引进自动加样系统及温控酶标仪用于ALT的测定，由于酶标仪测定ALT影响因素较多，因此笔对酶标仪初筛ALT升高的标本用赖氏法复查对照，现将检测情况报告如下。     

1例ALT酶活性浓度过高致速率法漏检原因分析

随着检测要求的规范和提高，速率法在全国血站ALT检测中得到了较快的开展应用，目前一般血站(尤其是地市级以下血站)使用全自动带恒温孵育的酶标仪以速率法检测ALT，该法使用平底酶标板作为比色反应杯，操作简便，检测量大，结果准确，且利用了血站实验室普遍配置的酶标仪替代生化分析仪，节省了装备费用。但笔者在使用该法对献血者做ALT检测时发现了1例由于酶活力过高引起的漏检，报告如下。     

Reflotron P1us快速全血生化分析仪检测ALT在献血者初筛中的应用评价

目的 评价Reflotron Plus快速全血生化分析仪的性能及其在无偿献血初筛中测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）的应用意义。方法 用Reflotron Plus快速全血生化分析仪检测高中低三个定值质控血清，计算其批内、日间精密度；对10名随机献血者的指血、静脉全血和血浆进行ALT检测。与日立7080全自动生化仪的结果进行相关性比较。结果 Reflotron Plus的批内CV〈6．0％，日间CV〈6．2％：试剂性能稳定；与7080生化仪结果相关性良好。结论 Reflotron Plus快速全血生化分析仪操作简便、结果快速可靠。显著降低血液报废率。适宜应用在无偿献血前快速初筛检测ALT。     

献血者丙氨酸氨基转移酶初筛的效果评价与分析

目的：对街头献血者献血前进行丙氨酸氨基转移酶（ALT）初筛的效果进行评价。方法对盐城市中心血站2012年7～12月经干式生化分析仪ALT初筛合格的献血者34526人的血液复检结果进行统计,并与未实施ALT初筛的2011年和2010年同期血液复检结果进行梅毒（TP）、乙型肝炎（HBV）、丙型肝炎（HCV）、艾滋病（HIV）等疾病检出率对比分析。结果献血者献血前经ALT干式生化法初筛后,其ALT不合格率从2010年的2．28％、2011年的2．29％下降到2012年的1．26％,且差异具有统计学意义（P＜0．05）;HBV检测不合格率从2010年的0．21％、2011年的0．24％下降到2012年的0．17％,其中2010年与2012年差异无统计学意义（P＜0．05）,2011年与2012年差异有统计学意义（P＜0．05）;HCV检测不合格率从2010年的0．15％、2011年的0．12％下降到2012年的0．07％,且差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论献血者在献血前经过ALT干化学法初筛会大大降低因单纯ALT升高导致的血液报废,同时通过ALT的初筛也会不同程度地降低HBV、HCV检测不合格血液报废率。ALT干式生化法对献血者献血前进行初筛是可行的,适合于献血前的初筛应用和推广,这对节约宝贵血液资源,减少检测成本支出,进一步保障临床血液供应都具有十分重要的意义。     

丙氨酸氨基转移酶异常血液报废原因分析

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是血站行业作为预防输血后肝炎而长期使用的一项检测项目,我国血站基本标准中明确规定对献血者ALT的初筛采用酮体酚法,复检采用赖氏法。随着血液检测自动化的应用和无偿献血法规的全面实施,许多血站已将ALT检测改为酶动力学方法,即使用大型全自动生化仪或全自动酶标仪进行ALT的自动定量试验。采血方式较以往也有所变化,并且产生了较高的ALT血液报废率。ALT异常血液报废率升高是否与以上改变因素有关。对此,笔者从方法相关性、人群差异、血液采集方法等方面对报废的原因进行分析。     

ALT干式生化法在献血者初筛中的应用探讨

目的　探讨用ALT干式生化法对献血者进行初筛的可行性。方法　采用ALT梯度定值血清作为干式生化法的测定靶值 ,并分别用干式生化法与微板速率法对 114 1份无偿献血者血样进行ALT检测和比较。结果　干式生化法对ALT梯度定值血清检测 ,r=0 .9997,cv =2 .2 5 % ,114 1份标本的阳性检出率与微板速率法比较无显著性差异。结论　ALT干式生化法对全血ALT的检测具有方便、快速和准确度高的特点 ,适用于血站对无偿献血者的粗筛工作     

街头无偿献血干化学试纸法筛查ALT的效果评价

目的：评价干化学试纸法对无偿献血者献血前 ALT 初筛的应用效果。方法对5126份无偿献血者血液标本,分别采用干化学试纸法与速率法进行ALT检测。结果干化学试纸法和速率法对ALT的检测结果间无统计学差异。结论干化学试纸法筛查ALT,对环境要求宽泛,操作简便,结果准确,适合用于血站对街头无偿献血者的 ALT初筛工作。     

半自动生化分析仪在街头无偿献血中的应用

丙氨酸氨基转移酶(ALT)是血站为预防输血后肝炎而长期使用的检测项目。我国血站标准中明确规定，对献血者的ALT初筛用酮体粉法，复检用赖氏法。然而，街头献血由于时间和条件的限制，使用酮体粉初筛并不适合。因此，许多血站对街头献血者不做ALT初筛，从而造成一定量血液的报废。本站自2001年起，使用半自动牛化分析仪对街头     

两种糖化血红蛋白测定方法的相关性分析

目的探讨在全自动生化分析仅上用胶乳凝集法测定糖化血红蛋白（HbAlc）与糖化血红蛋白分析仪上用高效液相色谱法测定HbAle的可比性。方法收集糖尿病患者和健康体检者标本共柏例,分别在全自动生化分析仪上用胶乳凝集法、在糖化血红蛋白分析仪上用高效液相色谱法（HPLc）测定糖化血红蛋白,以HPLC为比对方法,对胶乳凝集法进行精密度试验、回收试验、干扰试验;对两种方法结果进行分析。结果胶乳凝集法批内平均CV为3．33％,批闻平均CV为4．02％,平均回收率为99．6％,胶乳凝集法与高效液相色谱法比较Y=0．998X-0．0813,r2=0．998。结论胶乳凝集法与HPLC法相关性较好,精密度能满足临床需要适用于临床常规自动分析。     

单底物一步速率法测定血清脂肪酶

介绍了一种测定血清脂肪酶的新方法，它采用一种人工合成的底物，一步速率法完成反应，具有简易，快速，灵敏，稳定，抗干扰力强等特点，经测试，批内精密度ＣＶ值在１．６％～１．８％，回收率在９５％以上，可满足临床需要，该法所得结果（Ｙ）与目前通用ＵＶ比浊法结果（Ｘ）相比，符合下述方程：Ｙ＝０．９６Ｘ－２．６（ｒ＝０．９９８）。     

二期发色底物法外周血单核细胞促凝活性测定

以国产标化组织凝血活酶为代标准液，依据外源凝血途径建立反应系统。ＦＡａ水解发色底物释放硝基苯胺，于４０５ｎｍ测定所得的吸光度与标准液中组织凝血活酶含量呈良好的双对数线性关系（ｒ＝０．９９８），此方法测定范围在１￣１０＾３凝血活酶单位之间；标准曲线的重复性好（ＣＶ＝５％），经ＰＢＭＣ标本测定显示，应用本方法检测ＰＢＭＣ ＰＣＡ符合实验要求。     

国产全自动生化检测系统的应用评价

目的参照我国全自动生化分析仪行业标准（讨论稿）和美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）检测系统性能评价方案，对我国自主研发的全自动生化检测系统进行分析性能的评价，探讨国产检测系统的临床应用价值。方法对上海丰汇公司FH400型全自动生化分析仪、配套试剂和校准品组成的检测系统（简称丰汇检测系统），根据项目的反应原理特征选择丙氨酸氨基转移酶（ALT，零级动力学法）、尿素（Urea，一级动力学法）、总蛋白（TP，二点终点法）和胆固醇（Chol，终点法）进行精密度、线性范围、抗干扰能力实验评价，并与日立全自动生化分析仪与罗氏诊断产品有限公司试剂检测系统作患者样本比对实验。结果丰汇检测系统ALT、Urea、TP和Chol的批内精密度变异系数（CV）中值分别为1．18％、1．35％、0．62％和0．39％，高值分别为0．84％、0．97％、0．34％和0．41％。患者样本比对实验4个项目的相关方程和相关系数（r）分别为ALT：Y：1．068X-0．797，r=0．999；Urea：Y=1．006X＋0．181，r=0．999；TP：Y=0．989X＋0．629，r=0．997；Chol：Y=1．001X-0．128，r=0．998，其在医学决定水平处的偏倚均低于美国临床实验室改进修正法案（CLIA’88）允许误差范围。线性范围和抗干扰能力[维生素C（VitC）、总胆红素（TBil）、血红蛋白（Hb）和乳糜液]基本符合厂家的声明。结论被评价的丰汇检测系统各项分析性能满足临床使用要求，检测成本较低，有较高的临床应用价值。     

ROC曲线对ELISA检测丙型肝炎抗体阳性判断值的确定和分析

目的采用受试者工作特征(ROC)曲线确定和分析2种不同酶免分析系统酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙型肝炎抗体(抗HCV)的阳性判断值(Cut-off)。方法收集202份血清,用重组免疫印迹法(RIBA)确认抗HCV,同时采用国产addcare ELISA 1100全自动酶免分析系统(简称addcare ELISA 1100)和进口TECAN+FAME组合的酶免分析系统(简称TECAN+FAME酶免系统)检测抗HCV,对吸光度(A)值绘制ROC曲线,得出ELISA检测抗HCV在本实验室的最佳Cut-off值。结果以RIBA结果为金标准,ROC曲线分析结果显示,addcare ELISA 1100检测抗HCV的最佳Cut-off值为0.448,敏感性为99.3%,特异性为96.7%,约登指数为0.960,ROC曲线下面积为0.998,TECAN+FAME酶免系统检测抗HCV的最佳Cut-off值为0.406,敏感性为99.3%,特异性为96.7%,约登指数为0.960,ROC曲线下面积为0.998。结论采用ROC曲线分析得到两种不同酶免分析系统ELISA检测抗HCV的Cut-off值分别为0.448和0.406,检测抗HCV的"灰区"分别设定为0.140~0.448和0.140~0.406,均可优化检测性能。     

Improved alanine aminotransferase assay using the microtiter plate

New procedures and new devices have been developed to improve the alanine aminotransferase (ALT) assay by using microtiter plates with 96 wells. Sera for ALT determination and reagents are distributed with a computer-controlled multiple syringe for simultaneous filling of the 96 wells. The volumes simultaneously distributed by this new multiple syringe show very little variation. The coefficient of variation (CV) is 0.6 percent (n = 96). Repeated filling of the wells with this syringe results in good reproducibility of distributed volumes (CV = 0.5%, n = 10). The temperature of sera, reagents, and mixtures, even during photometry, is actively regulated (down or up) to 25 degrees C in special chambers. Thus, the temperature varies minimally +/- 0.05 degrees C. ALT values in the low normal range as well as the high pathologic range show little variation (CV less than 2.3%) in aliquots of the same sample simultaneously or subsequently examined by the new procedure and with new devices. There is good correlation between the improved method using microtiter plates and the conventional methods (r greater than 0.9900, ALT values from 1-154 U/L). False-low and false-high values are excluded by computerized evaluation of many single determinations during the kinetic reactions in each sample. The new method is precise as well as simple, saves time, and may become important for the determination of other serum constituents on the basis of kinetics.     

血清尿素丙酮酸氧化酶测定新方法的研究及应用

目的建立一种血清尿素测定的新方法和临床应用。方法应用脲酶、丙酮酸氧化酶、丙酮酸激酶与色原系统2，4-二氯苯酚、4-氨基安替比林，进行血清尿素浓度的酶法测定。结果磷酸盐缓冲液最适浓度为50mmol、pH7．2，最大吸收峰为510nm，线性范围为0～42mmol／L，显色稳定。精密度：批内（n=20）CV为1．89％～3．21％，批间（n=20）CV为1．96％～3．45％，回收率为96．2％～104．2％，平均回收率为99．5％。与酶偶联速率法比较，相关系数r=0．995，回归方程Y=1．023x＋0．38，两法高度相关，正常参考值范围为儿童组2．20～8．50mmol／L，少年组2．60～8．60mmol／L，成人组2．85％～8．95mmol／L。结论本法具有高度的特异性和准确性，其操作简便、灵敏快速、标本用量少、结果稳定，适用于全自动、半自动生化分析仪，更适用于中小医院，有较大的推广使用价值。     

Stratus CS cardiac troponin I method: performance characteristics including imprecision at low concentrations

OBJECTIVES: Define performance characteristics of the Stratus CS cardiac troponin I (cTnI) assay in routine practice. METHODS: Imprecision at low cTnI values was assessed according to NCCLS EP5-A. Linearity was assessed by regression analysis; the reference interval was determined in 345 healthy individuals. Minimum detectable concentration (MDC) was assessed with 20 replicates of zero calibrator, and method correlation and bias (n = 77) were by Passing-Bablok regression and Bland-Altman plot. RESULTS: cTnI of 0.06 microg/l corresponded to the 10% CV; the 99th percentile of the reference population was 0.07 microg/l. Linearity extended from 0 to 50.0 microg/l and the MDC was 0.010 microg/l. The method comparison equation was Stratus CS = 1.00 (Dimension RxL)-0.02 microg/l with no bias. CONCLUSIONS: The Stratus CS cTnI assay in routine practice has performance characteristics appropriate for clinical use, including good correlation to a central laboratory cTnI method and imprecision of a high sensitivity troponin method with a CV of <10% at the 99th percentile of the reference population.     

以N-甲基葡胺为磷酸化受体测定血清碱性磷酸酶的实验探讨

目的评估以N-甲基葡胺作为磷酸化受体缓冲液测定血清碱性磷酸酶(ALP)活性的方法。方法通过对试剂的合理组合和实验条件的优选,建立基于N-甲基葡胺的血清ALP测定方法,并与基于其他缓冲液的推荐方法进行对比。结果精密度,批内:CV=0.62%,批间:CV=2.3%;线性范围至少可达到2 073 U/L;分别与以2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP,X1)和二乙醇胺(DEA,X2)为磷酸化受体的ALP测定法比较:Y=1.29X1 13.25,r=0.999;Y=0.65X2 19.19,r=0.998。健康成人参考区间为44~133 U/L[(80.33±20.97)U/L]。结论N-甲基葡胺可替代AMP或DEA作为磷酸化受体缓冲液用于临床血清ALP活性的常规测定。     

Study of serum argininosuccinate lyase determination for diagnosis of liver diseases

The objectives of this research were to establish an automatic analysis method for the determination of serum argininosuccinate lyase (ASL) and to investigate the value of serum ASL test in the diagnosis of various liver disorders. According to the chemical reaction catalyzed by ASL, an enzyme-coupled reaction system was designed, and a methodology evaluation of this method was performed. A total of 291 patients with various liver diseases, 247 patients with nonliver disease and 32 healthy controls, were recruited, their serum levels of ASL and traditional hepatopathy markers, including alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), gamma-glutamyltransferase (GGT), lactate dehydrogenase (LDH), alkaline phosphatase (ALP), and total bilirubin (TBil), were all determined, and their diagnostic values in liver diseases were analyzed and compared. Liver biopsy and the score of histopathological inflammation grading were performed in 31 patients with hepatopathy to explore the correlation between serum ASL level and hepatic histopathological change. A continuous monitoring assay method of serum ASL activity was established, which could be performed with automatic biochemistry analyzer. Methodological evaluation exhibited that the precision of this method was good indicated by the 4.0% intraassay coefficient of variation (CV), and 5.9% interassay CV. The mean recovery was 100.5%, linear range was from 0 to 167.7 U/L, and the lowest detection limit was approximately 0 U/L. All of the tested hepatopathy markers listed above were significantly increased in the liver disease group. However, levels of traditional markers of hepatopathy were all significantly increased at different degrees (all P<0.001) in patients with nonliver diseases; in contrast, there were no significantly increased ASL levels in all non-hepatopathy groups (P=0.335). The receiver operating characteristic (ROC) curve showed that the sensitivity and specificity of ASL were 100% and 91.1% (cutoff value=8 U/L), respectively, in the assessment of liver diseases. In contrast, ALT levels were 97.6% and 24.7%, and AST levels were 83.8% and 28.3% (both cutoff values=40.0 U/L), respectively. A positive correlation (r=0.417, P=0.019) was observed between serum ASL levels (86.9+/-26.5) and scores of histopathological inflammation grading (SHIG) (9.83+/-3.36). The sensitivity and specificity of ALS is much higher than that of ALT and AST for the diagnosis of liver diseases. ASL may be a more valuable marker for estimating hepatopathy.