妊娠兔心肌梗死后外周血干细胞变化及其与雌二醇的关系

目的研究妊娠兔结扎冠状动脉后外周血干细胞变化及其与雌激素的关系。方法实验分3组:妊娠心肌梗死组、非妊娠心肌梗死组及妊娠假手术组。妊娠组于怀孕第10天结扎冠状动脉左室支建立心肌梗死模型。通过流式细胞计数仪检测外周血CD90阳性细胞比例,同时测定血清雌二醇浓度。术后4周检测血流动力学指标。并使用ImageJ 1．31软件测量心肌梗死面积。结果妊娠心肌梗死组左室收缩末压、 dp／dtmax均高于非妊娠心肌梗死组。而左室舒张末压及 -dp／dtmax均低于非妊娠心肌梗死组。非妊娠心肌梗死组各时间点外周血CD90 细胞均低于妊娠组和妊娠假手术组 (P<0．01),且峰值在心梗后第5天,而妊娠心肌梗死组术后1 d外周血CD90 细胞升高最显著(P<0．05)。妊娠心肌梗死组和妊娠假手术组外周血CD90 细胞随孕期逐渐增加,至孕末达高峰,产后迅速下降。相应时间点血清雌二醇浓度妊娠兔显著升高。非妊娠心肌梗死组心梗后,血清雌二醇浓度元明显变化;妊娠组与妊娠假手术组血清雌二醇浓度随孕期逐渐增加,至孕末达高峰;血清雌二醇浓度与CD90 细胞比例呈显著正相关(r=0．725;P<0．01)。与非妊娠心肌梗死组相比,妊娠心肌梗死组梗死面积较小(22．17±6．34％ vs 38．86±5．97％;P<0．05)。结论妊娠兔外周血干细胞明显升高;并随孕期增加,至孕末达高峰。产后10 d恢复正常,其外周血干细胞数量与血清雌二醇浓度成正相关。妊娠兔心肌梗死后,干细胞动员提前发生心肌梗死面积小,且心脏收缩及舒张功能优于非妊娠者。     

人趋化素样因子1基因转移对心肌梗死大鼠外周血CD34+细胞的影响

目的:探讨人趋化素样因子1(chemokine-like factor 1,CKLF1)基因转移动员大鼠骨髓CD34 细胞的作用和在心肌梗死情况下对外周血CD34 细胞数量变化的影响.方法:肌肉电转不同剂量CKLF1质粒,构建大鼠急性心肌梗死模型,检测基因转移后不同时间外周血CD34 细胞的数量,分析CD34 细胞数与CKLF1质粒的量效关系和时间动力学的变化.结果:逆转录聚合酶链反应和免疫荧光染色均能检测到CKLF1的表达.CKLF1基因转移引起大鼠外周血CD34 细胞的数量增加,在基因转移第5至7天达高峰,其中CKLF1质粒100 μg组的峰值最高,分别为基因转移前的3.88倍和空质粒组的3.34倍(P＜0.01).对心肌梗死大鼠CKLF1基因转移增加了心肌梗死后第1天外周血CD34 细胞数的升高,其中100 μg组最明显(14.61×106/L vs 7.85×106/L, P＜0.01).结论:CKLF1能动员骨髓CD34 细胞及在心肌梗死情况下增加外周血CD34 细胞的数量,其中CKLF1质粒100 μg效果最明显.     

趋化因子和CD34+干细胞联合移植对梗死后大鼠左室重塑影响的实验研究

目的 探讨趋化因子SDF-1联合同种异体CD34+干细胞移植对心肌梗死后大鼠左室重塑的影响.方法 wistar雄性大鼠38只,随机分成3组:SDF-1联合干细胞移植组(13只);急性心肌梗死对照组(13只):假手术组(12只).移植组和对照组结扎左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模型.另选同种异体大鼠13只,粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员后免疫磁珠法分离外周血CD34+干细胞,在梗死模型制作后7 d,经静脉联合趋化因子SDF-1注入到移植组大鼠体内,对照组和假手术组注入等量磷酸盐缓冲液(PBS).分别于心梗术前、干细胞移植术后1周和4周行心脏超声检查,术后4周检测心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和胶原含量.结果 心肌梗死后4周,与对照组比较,移植组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(FS)明显提高(P<0.01),左室收缩末直径(LVESD)、左室舒张末直径(LVEDD)明显减小(P<0.01);移植组心肌组织AngⅡ、胶原含量也有不同程度下降(P<0.05).结论 经静脉联合移植趋化因子SDF-1和外周血干细胞是安全可行的,它能有效地改善心功能,抑制心室重塑,为造血干细胞在心血管疾病中的应用提供理论依据.     

川芎嗪对小鼠外周血造血干细胞动员作用的研究

目的:探讨川芎嗪对小鼠外周血造血干细胞的动员作用及其对小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞粘附分子的影响.方法:30只BALB/c小鼠,随机分为3组,川芎嗪组(50 mg·ks-1·d-1)、rhG-CSF组(250μg·kg-1·d-1)、生理盐水组,腹腔注射dl-7,每日1次,第8天,采用外周血WBC、MNC计数、流式细胞术、造血祖细胞体外培养、免疫细胞化学等检测各组给药后对外周血WBC、MNC、CD34+细胞、CD49d阳性胞、CFU-GM、CFU-MK、CFU-E的产率及小鼠骨髓基质细胞VCAM-1阳性细胞百分率的影响.结果:川芎嗪组给药第7天外周血WBC、MNC数量达到高峰,分别为给药前的3.2倍和3.9倍;川芎嗪组外周血CD34<+>、CD49d阳性细胞及骨髓基质细胞VCAM-l阳性细胞百分率分别为(0.86±0.42)%、(12.91±2.84)%和(48.47±7.87)%,均明显高于生理盐水组(P<0.05);川芎嗪组CFU-GM、CFU-MK和CFU-E产率分别为(11.70±3.23)%、(11.20±2.88)%和(24.50±8.io)%,均明显高于生理盐水组(P<0.01).结论:川芎嗪对小鼠外周血造血干细胞有一定的动员作用,且这一作用可能与其上调小鼠外周血细胞和骨髓基质细胞粘附分子的表达有关.     

急诊PCI的急性心肌梗死患者外周血CD34~+、CD117~+及CD34/CD117~+干细胞的变化

目的:探讨急诊PCI的急性心肌梗死(AMI)患者外周血CD34+、CD117+及CD34/CD117+干细胞数的变化及影响因素。方法:采集急诊PCI的AMI患者入院12h、第3天及第5天的外周静脉血,应用流式细胞仪检测CD34+、CD117+及CD34/CD117+干细胞的水平。同时行CK-MB、肌钙蛋白I、血脂及心脏超声等的测定。结果:①急诊PCI的AMI患者外周血CD34+细胞在心梗后逐渐升高,第3天时最为明显;CD117+及CD34/CD117+干细胞亦有所升高,但无明显统计学差异。②AMI患者入院12h内的外周血CD34+细胞明显低于年龄及性别匹配的健康对照组;CD117+及CD34/CD117+细胞水平与对照组差异不明显。入院第3天的CD117+干细胞明显高于对照组。③吸烟、高血压及糖尿病等危险因素个数与心梗后CD34+细胞有明显正相关关系,年龄等因素与其无关。结论:急诊PCI的AMI患者,PCI术开通梗死相关冠脉会导致短期内外周血中CD34+干细胞的降低。     

乌司他丁对脓毒症患者C-反应蛋白及血管内皮生长因子表达的影响

目的研究乌司他丁对脓毒症患者C-反应蛋白(CRP)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法40例脓毒症患者随机分为常规治疗组和乌司他丁组各20例,两组均予以抗休克和病因治疗.在此基础上,乌司他丁组加用乌司他丁(20万U,每8小时1次,治疗7d),观察治疗前和治疗后的外周血CRP、VEGF与急性生理与慢性健康评分(APACHE I )的动态变化.结果治疗前两组外周血CRP及VEGF差异无统计学意义.常规治疗组第7天外周血CRP及VEGF分别为(59±28)ng/L,(97±28)ng/L;乌司他丁组治疗第7天外周血CRP及VEGF分别为(31±16)ng/L,(41±10)ng/L.乌司他丁组治疗后第7天的外周血CRP及VEGF较治疗前明显下降(P<0.05),且较常规治疗组下降明显(P<0.05).乌司他丁组治疗后第10天的APACHE I 评分[(11±6)分]明显低于常规治疗组[(15±7)分](P<0.05).结论乌司他丁可以降低脓毒症患者外周血CRP、VEGF与APACHE I 评分的水平,改善预后,其作用机制可能是通过降低血中的VEGF表达水平.     

化疗+G-CSF方法动员外周血干细胞时骨髓及外周血相关细胞亚群的动态变化

目的探讨应用化疗 G-CSF方法动员外周血干细胞时,恶性血液病患者的骨髓及外周血CD34 细胞和T细胞亚群的变化特点.方法 16例拟行自体外周血干细胞移植患者,在应用化疗 G-CSF方法动员外周血干细胞期间,应用流式细胞仪测定骨髓及外周血CD34 和T细胞亚群动态变化情况.结果 1.恶性血液病患者在应用G-CSF前,骨髓中CD34 细胞的初始值为(0.52±0.31)%.应用G-CSF 48 h后,CD34 细胞测定值为(1.22±0.42)%,较前有明显增加(P＜0.001).CD34 细胞的高峰值出现在应用G-CSF 96 h后,为(2.23±0.34)%,较未应用G-CSF时差异显著(P＜0.001).2.恶性血液病患者在应用G-CSF前,外周血CD34 细胞测定值为(0.39±0.27)%.在应用G-CSF 72 h后外周血中CD34 细胞的测定值为(1.29±0.64)%,较前有明显增加(P＜0.001).应用G-CSF96 h后,CD34 细胞的测定值达高峰,为(1.41±0.73)%,较未应用G-CSF前差异显著(P＜0.001).3.无论是否应用G-CSF,恶性血液病患者的T淋巴细胞亚群比例均处于倒置状态,应用G-CSF后随CD34 细胞的逐渐增加,T淋巴细胞亚群变化不明显(P＞0.05).结论恶性血液病患者,在应用化疗 G-CSF动员外周血干细胞时,其骨髓及外周血CD34 细胞和T细胞亚群的动态变化各有其特点.     

ICAM-1在急性心肌梗死后干细胞上调过程中的作用

目的 观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在大鼠急性心肌梗死后外周血成体干细胞上调过程中的作用.方法 16只SD大鼠开胸结扎左前降支(LAD)近端,制作急性心肌梗死模型,分为对照组(n=8)和实验组(n=8).另取2只大鼠的心脏做正常心肌组织切片对照.实验组从尾静脉注入大鼠ICAM-1单克隆抗体,对照组未注射任何试剂.两组大鼠分别在术后1、3、7和14 d抽取尾静脉血.采用ELISA法检测血清中ICAM-1浓度变化,流式细胞仪检测外周血中CD34细胞阳性率,比较两组各时间点ICAM-1浓度和CD34细胞阳性率的变化.结果 实验组外周血中ICAM-1浓度较对照组明显下降,第7天达到最低值(59.01±2.22)pg/mL;其中第7、14天时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).实验组外周血中CD34细胞阳性率较对照组明显上升,第7天时达到最高值(12±2.11)%;其中第3、7、14天时与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 初步显示ICAM-1在大鼠急性心肌梗死后抑制了外周血成体干细胞的上调.     

G-CSF对不同人群CD34+细胞及T细胞亚群影响的动态变化研究

目的探讨应用G-CSF动员外周血干细胞时,异体/自体造血干细胞移植供/受者的骨髓及外周血CD34 细胞和T细胞亚群的动态变化特点及最佳外周血干细胞采集时间.方法对12例健康供者和16例化疗7 d后的恶性血液病患者,以G-CSF 150 μg/12 h,皮下注射,连用5 d.应用流式细胞仪测定骨髓及外周血CD34 细胞和T细胞亚群.结果①应用G-CSF前,两者骨髓CD34 细胞有显著差异(P<0.01).应用48 h后,两者的骨髓CD34 细胞均较前有明显增加(P<0.01),两者之间仍存在明显差异(P<0.01).两者的骨髓CD34 细胞高峰值出现在96 h后,较应用前差异显著(P<0.01),两者之间无差异(P>0.05).②应用G-CSF前,两者的外周血CD34 细胞无明显差异(P>0.05).应用72 h后,两者外周血中CD34 细胞均较前有明显增加(P<0.01),两者之间无明显差异(P>0.05).96 h后,两者的CD34 细胞达高峰,较应用前差异显著(P<0.01).两者之间无明显差异(P>0.05).③应用G-CSF对两者的T淋巴细胞亚群无明显影响.结论应用G-CSF动员外周血干细胞96 h后,异体/自体造血干细胞移植供/受者的骨髓及外周血CD34 细胞均达到高峰,可适时采集外周血干细胞.     

rhG-CSF动员对外周血淋巴细胞亚群和CD34+细胞的影响

目的:动态观察自体外周血造血干细胞移植患者经rhG-CSF动员过程中外周血及外周血造血干细胞(PBPC)中淋巴细胞亚群和CD34 细胞的变化,指导临床选择最佳采集时机。方法:对大剂量化疗(HDC)联合重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的38例白血病和淋巴瘤患者,采用流式细胞术(FACS)测定其动员前后外周血及PBPC中的淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8、NK、CD19和造血干细胞CD34细胞含量的变化,同时用甲基纤维素半固体培养基进行CFU-GM培养来评价干细胞克隆生成能力。结果:动员后外周血淋巴细胞亚群CD3、CD4细胞含量均低于动员前(P<0.01),而动员后外周血中的CD34细胞含量明显高于动员前(P(0.05)。动员后第5天CD34含量达到最高峰。PBPC中CD4、CD4/CD8明显低于外周血(P<0.005),其他淋巴细胞亚群含量与外周血比较无明显变化。动员后外周血中CD34 细胞明显高于动员后,动员后PBPC中CFU-GM生成明显高于外周血(P<0.05),CD4/CD8比值严重倒置,B细胞恢复较快。结论:大剂量化疗联合rhG-CSF动员会使外周血淋巴细胞亚群发生不同程度的变化并明显增加外周血造血干细胞含量。     

培哚普利对急性心肌梗死伴2型糖尿病患者内皮祖细胞动员及预后的影响

目的观察应用培哚普利治疗急性心肌梗死(AMI)伴2型糖尿病(T2DM)患者的预后,血浆血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1α)水平,骨髓内皮祖细胞(EPC)动员情况。方法将20例AMI伴T2DM患者随机分为培哚普利组(10例,予口服培哚普利4mg/d)及对照组(10例,未予培哚普利)。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,应用流式细胞仪检测AMI不同时间点[急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)前,PCI后1、3、5、7、14和28d]外周静脉血中CD45-/low+/CD34+/CD133+/KDR+早期EPC数量。采用酶联免疫吸附法检测血浆中VEGF、SDF-1α及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果培哚普利组在PCI后7d的外周静脉血中EPC数量为(211±78)个/1×106,显著高于对照组的(147±57)个/1×106(P<0.05),且在PCI后5d较PCI前显著升高(P<0.05)。培哚普利组在PCI后5、7d的血浆中VEGF水平[(172±72)、(183±63)ng/L]均显著高于同时间点的对照组[分别为(105±63)、(77±37)ng/L,P值均<0.05]。培哚普利组在PCI后7d(高峰点)的SDF-1α水平为(3296±680)ng/L,显著高于同时间点的对照组[(2115±570)ng/L,P<0.05]。培哚普利组在PCI后3d(高峰点)的hs-CRP水平为(26.2±6.5)mg/L,显著低于同时间点的对照组[(33.8±10.6)mg/L,P<0.05]。随访6个月时培哚普利组的左心室射血分数(LVEF)为0.491±0.059,显著高于入院时的0.469±0.051(P<0.05);对照组LVEF分别为0.482±0.054、0.479±0.052,差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用培哚普利治疗AMI伴T2DM患者,可改善其组织缺血后SDF-1α、VEGF-EPC动员通路障碍,并改善其预后。     

体外扩增对脐血CD34+细胞粘附特性和趋化功能的影响

目的 探讨在体外扩增过程中,脐血(UCB)干／祖细胞(HSPC)的粘附特性和趋化功能的变化。方法 从新鲜UCB标本中纯化的CD34^ 细胞接种于无血清无基质悬浮扩增体系,分别于培养7、10和14d从扩增细胞中再次纯化CD34^ 细胞,比较扩增前后CD34^ 细胞的几种与归巢密切相关的功能特性,包括归巢相关粘附分子(CAM)的表达,粘附功能和趋化功能。结果 (1)表达各种粘附分子的CD34^ 细胞亚群的数量在扩增过程中明显增加(15～72倍),而且扩增后CD34^ 细胞表面粘附分子CD44、CDlla、CD49e和CD49d的表达与原代CD34^ 细胞持平或升高,CD62L、CD54和CD31的表达则有不同程度的下调;(2)在前10d的扩增中,CD34^ 细胞与FN间的自发粘附率和SDF-1诱导粘附率均呈上升趋势,0、7和10d分别为28％和63％、60%,和70％、63％,和90%,;(3)扩增1周后,CD34^ 细胞的体外迁移能力无明显变化。结论 所建立的短期培养体系可以支持扩增1周的UCB HSPC保持原有粘附和趋化功能,而继续扩增则可能在某种程度上不利于细胞这些能力的保持。     

慢性粒细胞白血病患者PBMCs中CD4+CD25+细胞体外增殖及对CD4+CD25-细胞增殖的影响

目的 探讨慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血单个核细胞(PBMCs)来源的CD4 CD25 细胞体外增殖及对CD4 CD25-细胞增殖的影响.方法 以免疫磁性分离方法(MACS)分选出CML患者外周单个核细胞中的CD4 CD25 及CD4 CD25-细胞后,用流式细胞仪分析细胞的纯度及活力;再以小鼠抗人CD3单抗、小鼠抗人CD28单抗及rh IL-2作为刺激因子,CD4 CD25 细胞与CD4 CD25-细胞共培养,观察CD4 CD25 细胞对CD4 D25-细胞增殖的抑制效应.结果 (1)分选后健康对照组及CML患者PBMC中CD4 CD25 细胞纯度分别为(84.93±2.55)%、(86.32±2.40)%,两者相比,无显著差异(P＞0.05);(2)经MACS分选后正常对照组与CML患者CD4 CD25 细胞活力分别为(98.12±0.68)%、(97.33±0.78)%,两者相比,无显著差异(P＞0.05);(3)无论是健康对照还是CML患者的CD4 CD25 细胞均具有明显抑制效应性细胞如CD4 CD25-细胞的增殖,随着CD4 CD25 细胞数的增加,这种抑制增殖的能力也相应增加,当CD4 CD25 T:CD4 CD25-T为1:1时,抑制率最大.结论 MACS分选法能够分选出高纯度及高活力的CD4 CD25 细胞,分选后CD4 CD25 细胞在体外均能抑制CD4 CD25-细胞增殖,且这种抑制效应呈一定效靶比关系.     

骨髓基质细胞衍生因子1及其受体在骨髓增生异常综合征患者中的表达

目的 探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)与其受体趋化因子受体CXCR4在骨髓增生异常综合征(MDS)发病中的可能作用,为MDS的治疗寻找有意义的靶点.方法 收集2006年10月至2010年6月59例MDS病例,根据国际预后积分系统(IPSS)分为低危和高危两组,分别为33例和26例,以10份正常的骨髓标本作为对照.采集骨髓标本,检测骨髓血浆中SDF-1的含量、CD34+细胞CXCR4的表达率、CD34+细胞的凋亡率及血管内皮生长因子(VEGF)在骨髓血浆中的表达.结果 SDF-1在低危组和高危组患者骨髓血浆中的含量[(2301±413)、(1173 ±501)ng/L]显著高于对照组[(689±190)ng/L,P＜0.05],低危组显著高于高危组(P＜0.05).CD34+细胞CXCR4的表达在高危组(68.1％±18.8％)显著高于低危组(21.0％±9.7％)和对照组(19.4％±5.3％)(P＜0.05),在后两组的表达率差异无统计学意义(P＞0.05).CD34+细胞的凋亡率在低危组、高危组和对照组分别为54.8％±10.2％,24.3％±7.9％,l8.5％±8.7％,前组显著高于后两组(P＜0.05).骨髓血浆中VEGF的含量在低危组、高危组、对照组分别为(286±97)、(407±168)、(157±46)ng/L,差异有统计学意义(P＜0.05).相关分析显示:低危组CD34+细胞的凋亡率与骨髓血浆SDF-1的含量呈正相关(r =0.805,P＜0.05);高危组血浆VEGF的含量与CD34+细胞CXCR4的表达呈正相关(r=0.683,P＜0.05).结论 SDF-1/CXCR4在MDS中存在异常表达,且与骨髓细胞的凋亡和血管新成具有相关性,针对该生物轴的干预可为该病的治疗提供新的靶点.     

Enhanced external counterpulsation promotes growth cytokines-mediated myocardial angiogenesis in a porcine model of hypercholesterolemia

Background Enhanced external counterpulsation （EECP） improves ischemia in patients with refractory angina pectoris but the mechanism remains unclear. To explore the mechanisms of EECP action, we detected progenitor cells presenting any of the following markers CD34^＋, CD29^＋, and CD106^＋.
Methods Growth cytokines-mediated progenitor cell mobilization and associated angiogenesis potential were assessed in a porcine model of hypercholesterolemia. Twenty-four male domestic swines were randomly assigned to 4 groups： normal diet （control, n=6）, hypercholesterolemic diet （CHOL, n=-6）, hypercholesterolemic diet with administration of recombinant human granulocyte colony-stimulating factor （rhG-CSF） （rhG-CSF, n=6）, and hypercholesterolemic diet with EECP treatment （EECP, n=6）. EECP was applied 2 hours every other day for a total of 36 hours. Serum levels of vascular endothelial growth factor （VEGF） and granulocyte colony-stimulating factor （G-CSF）, peripheral blood progenitor cell counts, level of regional angiogenesis, and expression of VEGF and stromal cell derived factor l a （SDF-1α） in porcine myocardium were assessed, respectively.
Results A porcine model of hypercholesterolemia-induced arteriosclerosis was successfully established. There was no significant difference in serum levels of VEGF among the four groups. The serum levels of G-CSF in the EECP group increased significantly at week 15 and week 18 （（38.3±5.6） pg/ml at week 15 vs （26.2±3.7） pg/ml at week 12, P 〈0.05, and （46.9±6.1） pg/ml at week 18 vs （26.2±3.7） pg/ml at week 12, P 〈0.01）. The serum levels of G-CSF in group 3 increased also significantly after receiving rhG-CSF injection for five days （（150±13.9） pg/ml at week 18 vs （24.8±5.4） pg/ml at week 12, P 〈0.01）. Compared to other groups and other time points, progenitor celt counts increased significantly after 2-hour EECP treatment （108±13 vs 26±6 per 10^5 leukocytes, P 〈0.01）, but not at week 18. The progenitor cell counts also increased significantly after subcutaneous injection of rhG-CSF for five days compared to the week 12 （baseline） （180±21 vs 25±7 per 10s leukocytes, P 〈0.01）. There was no significant difference among the four groups at other time points. Moreover, the expression of VEGF and SDF-1α and the level of regional angiogenesis in myocardium increased significantly in both EECP and rhG-CSF groups.
Conclusions The results demonstrated that EECP could facilitate angiogenesis in the myocardium of atherosclerotic swines by increasing endogenous G-CSF, inducing an enhanced mobilization of progenitor cells and augmenting myocardial expression of VEGF and SDF-1α.     

急性脑梗死患者外周血造血干细胞测定的临床意义

目的:探讨急性脑梗死患者自体外周血造血干细胞水平的变化及其临床意义.方法:采用流式细胞术方法分别检测40例急性脑梗死患者3,7,10和14dCD34+CD38-细胞百分率.结果:脑梗死急性期外周血CD34+CD38-细胞水平明显高于对照组(P<0.05),梗死后3dCD34+CD38-细胞水平上升,10d达高峰,然后开始下降(P<0.01).脑梗死早期CD34+CD38-细胞水平与Fugl-Meyer量表评分负相关(r=-0.281,P<0.05).神经功能恢复越好,CD34+CD38-细胞水平越高(P<0.05).结论:外周血造血干细胞在参与脑梗死急性期神经的修复过程中起重要作用.     

冠心病患者外周血CD4+CD28-T细胞和CD4+CD25+T细胞亚群变化

目的 探讨冠心病患者外周血CD4 CD28-T细胞和CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)亚组的变化及意义.方法 入选病例为我院从2005年6月到2005年12月共28例行冠状动脉支架术治疗的冠心病患者(不稳定性心绞痛16例、稳定性心绞痛12例),以同时冠脉造影正常11例胸痛综合症患者为对照.借助三色荧光标记技术对外周血CD4 CD28-T细胞和CD4 CD25 Treg占CD4 T细胞比例进行流式细胞术测定.结果 不稳定性心绞痛患者外周血Treg/CD4 T细胞比例[(6.55±2.45)%]显著低于稳定性心绞痛组[(14.01±4.92)%]和胸痛综合征组[(13.55±3.87)%](P＜0.05),而CD4 CD28-/CD4 T细胞比例[(10.55±4.76)%]则明显高于稳定性心绞痛组[(2.64±1.33)%]和胸痛综合征组[(2.75±1.55)%](P＜0.05).结论 不稳定性心绞痛患者外周血Treg比例减少而CD4 CD28-T细胞比例升高,Treg比例降低可能使外周免疫耐受失去平衡,参与了动脉粥样硬化的发生发展.     

基质金属蛋白酶9在粒细胞集落刺激因子诱导的造血干/祖细胞动员中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)在粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的造血干/祖细胞(HSPC)动员中的作用。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法测定了健康供者稳态及G-CSF动员第5天骨髓、外周血MMP-9蛋白及mRNA水平的变化,比较富含MMP-9的细胞系HT1080无血清培养上清孵育前后CD34+细胞表面CXCR4表达及对基质细胞衍生因子1(SDF-1)的迁移能力的变化,将rhMMP-9与rhSDF-1孵育后应用Western印迹检测MMP-9对SDF-1的降解作用,观察注射MMP-9化学抑制剂(MPI)ο-邻二氮杂菲对G-CSF动员BALB/c小鼠外周血成熟白细胞计数(WBC)和干/祖细胞的数量的影响。结果G-CSF动员第5天,骨髓上清MMP-9浓度增加了6.6倍(P<0.01),骨髓组织表达MMP-9的中性粒细胞明显增多。动员后骨髓单个核细胞MMP-9mRNA表达水平上调(P<0.05)。rhSDF-1与rhMMP-9短期孵育后可被后者降解。HT1080无血清培养上清液能够上调脐血和动员外周血富集的CD34+细胞的CXCR4表达水平(均P<0.05)及增强CD34+细胞向SDF-1浓度梯度迁移能力(均P<0.05),该效应可被MPI阻断(P<0.05)。与G-CSF共注射MPI后BALB/c小鼠外周血成熟WBC(12.3×106/L±1.2×106/L)和造血祖细胞集落形成单位(69U/2×105MNC±3U/2×105MNC)数量显著低于对照组(P<0.05)。结论MMP-9可能通过裂解SDF-1、上调CD34+细胞表面SDF-1特异性受体CXCR4的表达及增强CD34+细胞迁移能力在G-CSF介导的HSPC动员中发挥重要作用。