抗菌不锈钢材料的细胞毒性评价研究

目的 评价一种新型抗菌不锈钢材料的细胞毒性,并与商品化的两种正畸材料纯钛和普通不锈钢的细胞毒性进行比较。方法 用倒置相差显微镜观察L-929细胞在普通不锈钢、抗菌不锈钢和纯钛浸提液中的生长情况,用CCK-8试剂盒检测L-929细胞在不同材料浸提液中培养1、2、3d的吸光度,判断细胞毒性的级别。结果 细胞在3种材料的浸提液中均生长旺盛,形态正常。抗菌不锈钢组与普通不锈钢组的吸光度值均低于纯钛组,但2种不锈钢的吸光度值没有统计学差异。细胞毒性分级为1级或0级。结论 抗菌不锈钢材料无明显细胞毒性,符合口腔正畸材料的临床应用标准。     

3种应用于正畸支抗的金属材料的细胞毒性和遗传毒性检测

目的:初步评价应用于口腔正畸支抗种植体的金属材料:商业纯钛(cpTi),钛合金(Ti6Al4V),医用316L不锈钢的生物安全性.方法:参考国标GB/T16886.5-2003以及医疗行业标准YY/T0127.2-2009所规定的方法,采用体外细胞毒性实验,体外遗传毒性实验及急性全身毒性实验对3种材料进行测试.结果:cpTi、Ti6Al4V和平316L不锈钢100％浸提液的细胞毒性分别为0级、1级、2级;DNA OTM分别为2.16 ±0.09,9.84±1.78和10.79±0.39;细胞尾部DNA分别为(0.43±0.01)％、(0.92±0.43)％和(1.22±0.06)％.小鼠体内急性毒实验3种材料显示毒性体征,未引起小鼠体重变化.结论:cpTi生物安全性优于Ti6 Al4V和316L.     

自制GG纯钛瓷粉生物安全性的评价

目的：评估自制GG纯钛烤瓷材料的生物安全性。方法：依据ISO标准，制作GG纯钛瓷粉材料试件，选用细胞毒性试验、急性毒性试验、口腔黏膜刺激试验，对该纯钛体瓷材料的毒性、黏膜刺激性进行生物安全性评估。结果：该体瓷材料细胞毒性评分为0级；急性毒性实验评价为无毒性；口腔黏膜刺激实验肉眼观察无红斑，显微镜评分≤4。结论：该自制纯钛体瓷材料具有良好的生物安全性。     

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目的评价2种自制含钛镍铬烤瓷合金的细胞毒性。方法本研究于2009年5—12月在中国医科大学中心实验室完成。分别将2种自制含钛镍铬烤瓷合金（2、3号合金）、纯钛、普通镍铬合金及铅的浸提液与体外培养的细胞接触后,进行MTT实验来评定材料的细胞毒性。结果2、3号合金毒性为1级,钛的毒性为0级,镍铬毒性为1级,铅在细胞培养72h后毒性级由1级增至2级。结论自制的含钛镍铬烤瓷合金符合临床应用要求,生物相容性好于目前,I盏床常用的普通镍铬合金。     

钴铬钼合金对L929细胞生物学行为的影响

目的：研究牙科用钴铬钼合金对L929细胞生物学行为的影响。方法：制备医用纯钛、钴铬钼合金、钴铬合金、镍铬合金的浸提液,在浸提液与L929细胞作用24 、48 、72 h后,用倒置相差显微镜观察细胞的生长情况,并通过CCK-8实验评定4种材料的细胞毒性;采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI 双染法评价材料对细胞凋亡的影响;应用吖啶橙染色法检测L929细胞在材料表面的黏附情况;采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果：倒置相差显微镜下观察,各时间点除镍铬合金组可见少量细胞核固缩,呈现轻微中毒状态外,其余3组细胞生长情况良好;钴铬钼合金组在各时间点的OD值、细胞凋亡率、细胞黏附数量均显著低于医用纯钛组(P<0.05),而高于钴铬合金组 (P<0.05)和镍铬合金组(P<0.05);观察期内,医用纯钛组、钴铬钼合金组、钴铬合金组细胞毒性均为1级,镍铬合金组为2级,表现为轻微毒性。结论：钴铬钼合金对L929细胞的生物学行为无明显不良影响,符合口腔生物材料的临床应用要求,具有良好的生物相容性。     

石墨和磷酸盐包埋料对纯钛铸件生物学性能的影响

目的：了解石墨及磷酸盐包埋料所致纯钛铸件表面结构的改变对纯钛铸件生物学性能的影响。方法：用石墨和磷酸盐包埋料铸造加工圆片状铸件若干，以相同规格的牙胶为对照，分打磨抛光前后共4组进行细胞毒性试验。粘膜刺激试验。结果：根据国际标准化组织ISO文件和我国医用生物材料性能测试标准，4组试件的细胞毒性试验均为I级，病理反应分级均为0级，结论：两种包埋料所致纯钛铸件表面结构的变化未导致其生物学性能方面的明显改变。     

CCK-8法和MTT法评价医用抗菌不锈钢细胞毒性的比较研究

[摘要] 目的 通过MTT法和CCK-8法对医用抗菌不锈钢的细胞毒性进行比较研究,为其临床应用提供生物学证据。方法 将各组材料制备成15 mm×10 mm×3 mm的长方体试件,按样品表面积:溶液体积3 cm~2/ml的比例制备浸提液,通过倒置相差显微镜观察共培养24、48、72 h的细胞形态,并通过MTT比色法和CCK-8法得出细胞在培养24、48、72 h的吸光度(A)值,进而计算其RGR评价抗菌不锈钢的细胞毒性。结果 ①培养48 h后,随着作用时间的延长,阳性对照组细胞表现出明显的中毒形态,其余各组细胞生长旺盛,医用不锈钢及抗菌不锈钢组开始出现少量细胞核固缩。②MTT实验中,阴性对照组、不锈钢试件组及阳性对照组的A值呈递减趋势,但抗菌不锈钢和普通医用不锈钢的A值无显著差异。③CCK-8实验结果显示,各组A值按阴性对照组、抗菌不锈钢试件组、普通医用不锈钢对照组、阳性对照组的顺序呈递减趋势,差异有显著性。④实验中各组试件的细胞毒性均为0级。结论 ①抗菌不锈钢毒性等级与医用不锈钢相同,符合口腔正畸材料的临床应用要求。②CCK-8法较MTT法具有更高的灵敏度和可重复性,值得推广应用。     

钛铸件复合氮化处理的生物安全性研究

目的:评价纯钛铸件表面等离子渗氮、脉冲电弧离子镀膜复合处理后的生物安全性。方法:按照国际ISO 10993标准,选择细胞毒性试验、溶血试验、急性全身毒性试验及口腔黏膜刺激试验,记录实验结果并作统计学分析。结果:钛铸件经渗氮、镀膜复合处理后细胞毒性测试为0级或I级;溶血率为0.45%,有良好的血液相容性;无急性全身毒性反应;口腔黏膜刺激试验阴性,各项指标均符合ISO 10993标准。结论:钛铸件复合氮化处理后无潜在生物学毒性。     

γ射线照射对钛板周围组织影响的实验研究

我们利用动物实验,对比观察钛及不锈钢下颌骨修复板周围组织在60钴γ射线照射后的组织学改变,探讨钛板修复后放射治疗的可行性。1材料与方法:①材料:医用纯钛下颌骨接骨板及医用不锈钢下颌骨接骨板。②方法:将15只狗共30例下颌骨分成3组,对照组5例,钛板组15例,不锈钢板组...     

义齿磁性固位体中两种不锈钢的细胞毒性研究

目的 对将使用于义齿磁性固位体的两种特殊不锈钢（S1与S2）的生物安全性进行初步检测,评价其临床应用的生物相容性。方法 用纯钛及钴铬合金作比较,通过将材料浸提液与体外培养的L-929细胞接触培养,进行细胞的形态学观察及二甲基噻唑二苯基四唑嗅盐（MTT）比色,评价材料对细胞造成的毒性损害程度。结果 细胞的形态学观察显示,随着培养天数的增加,阳性对照组中的脱落细胞、死亡细胞逐渐增多。其余各组细胞大部分继续贴壁生长。细胞密度增加。MTT比色法结果显示,非磁性不锈钢（S1）和磁性不锈钢（S2）浸提液对细胞有轻微的毒性,细胞相对增殖率（RGR）降低3％,钴铬合金对细胞表现出1级细胞毒性,RGR降低11％,但4种金属材料组与阴性对照组的吸光度值之间的差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 S1、S2两种不锈钢仅具有极微弱的细胞毒性,符合临床应用的要求。     

医用高分子材料的体外细胞毒性研究

目的 研究１１种医用高分子材料的细胞毒性。方法 应用体外细胞培养琼脂覆盖法对９种医用硅橡胶材料和２种聚氨酯材料的细胞毒性进行评价。结果 １１种实验材料的材料周围和材料下脱色区范围及脱色区内细胞溶解评价（Ｚ／Ｌ值）除Ｄ．Ｃ硅橡胶材料为０／０、复旦聚氨酯材料为２／２外、其余９种材料均为１／１。结论 琼脂覆盖法快速,简便,是评价生物医用材料细胞毒性的一种有效方法。     

牙科用锆基非晶合金的细胞毒性及血液相容性研究

目的:测定高强度、高弹性模量的新型口腔种植用锆基非晶合金的细胞毒性及血液相容性。方法:通过锆基非晶合金与新鲜人血接触进行血液相容性实验并采用MTT法研究锆基非晶合金的细胞毒性。结果:细胞毒性试验显示本研究制备的锆基非晶合金的细胞毒性反应分级为0级,无细胞毒性;血液相容性试验结果锆基非晶合金溶血率低,动态凝血时间较纯钛及Ti₆Al₄V延长,以PT、APTT为指标的抗凝血性能与纯钛、Ti₆Al₄V相当,血小板粘附试验中Zr-Cu-Al-Ag较少出现血小板黏附,团聚及伪足伸出现象。结论:Zr-Cu-Al-Ag拥有良好的细胞相容性、血液相容性,可以初步满足其作为口腔种植材料的基本应用要求。     

金刚石涂膜种植材料骨界面区骨钙素mRNA表达

目的：探讨骨组织形成过程中骨钙素表达规律,评价金刚石-钛涂膜,纯钛和羟基磷灰石三种材料植入界面骨细胞功能情况,以利筛选出新的种植材料。方法：本实验将金刚石-钛涂膜、纯钛和羟基磷灰石三种种植材料,植入鼠下颌骨内,进行骨界面骨钙素mRNA检测及骨钙素免疫组织化学染色。结果：金刚石-钛涂膜材料新骨生成启动早,能明显加快组织的骨性愈合;金刚石和羟基磷灰石种植材料骨钙素mRNA表达量明显大于纯钛（P〈0．01）。结论：骨钙素mRNA表达与界面区细胞增殖、新骨形成有关;骨钙素mRNA的检测有助于界面区细胞功能状态的判断。     

新型钛合金Ti—75的体外细胞相容性试验

通过对Ｔｉ－７５、纯钛和Ｔｉ－６Ａ１－４Ｖ三种钛材，采用体外培养细胞的四唑盐比色试验（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）和材料表面生长细胞的形态学观察法，对Ｔｉ－７５的生物相容性进行了初步评价。结果显示：３种钛材在ＭＴＴ试验中的光吸收值无显著性差异（Ｐ〉０．０５），毒性均为０级，细胞增殖曲线基本重合；ＳＥＭ观察细胞形态，未发现异常。结论：新型Ｔｉ－７５合金有良好的细胞相容性，是一种有应用前景的口腔修复材料。     

新型钛合金Ti－75的体外细胞相容性试验

通过对Ｔｉ－７５、纯钛和Ｔｉ－６Ａ１－４Ｖ三种钛材，采用体外培养细胞的四唑盐比色试验（ＭＴＴａｓｓａｙ）和材料表面生长细胞的形态学观察法，对Ｔｉ－７５的生物相容性进行了初步评价。结果显示：３种钛材在ＭＴＴ试验中的光吸收值无显著性差异（Ｐ＞０．０５），毒性均为０级，细胞增殖曲线基本重合；ＳＥＭ观察细胞形态，未发现异常。结论：新型Ｔｉ－７５合金有良好的细胞相容性，是一种有应用前景的口腔修复材料。     

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目的评价自制含钛镍铬烤瓷合金的细胞毒性。方法于2006年5月至2007年1月,在中国医科大学基础部第五实验室将自制含钛镍铬烤瓷合金材料的浸提液与体外培养的细胞接触后,进行MTT实验来评定材料的细胞毒性,并与临床常用的镍铬合金、纯钛的生物学性能相比较。结果自制含钛镍铬烤瓷合金组对细胞增殖的抑制作用大于纯钛组而小于镍铬合金组,但统计学分析结果显示:5种金属材料与阴性对照组的吸光度值之间的差异均无统计学意义(P>0.05),与阳性对照组之间的吸光度值之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论自制含钛镍铬烤瓷合金仅具有极微弱的细胞毒性,符合口腔科材料临床应用的要求,为其在临床烤瓷合金中的应用提供了生物学依据。     

MTT法评价牙科激光立体成形钛锆合金的细胞毒性

目的：评测口腔修复体用激光立体成形钛锆合金的细胞毒性。方法：采用激光立体成形的方法制备出钛锆合金的试件,根据国家标准制备试件的浸提液;通过体外细胞培养,四唑盐（MTT）比色方法评价材料的细胞毒性。结果：激光立体成形钛锆合金的细胞毒性为0～1级,阴性对照组、浸提液各浓度组细胞增殖曲线几乎重叠,并呈线性增加趋势。结论：激光立体成形的牙科钛锆合金材料具有较好的生物相容性。     

新型口腔修复用钛锆铌锡合金的生物安全性评价

目的:评价高强度、高弹性模量的新型口腔修复用钛锆铌锡合金的生物安全性。方法:参照国标GB/T16886.5-2003,GB/T16886.10-2005,YY-T0279-1995,YY-T0127.2-1993所规定的方法,分别进行细胞毒性试验、豚鼠最大剂量迟发型致敏试验、口腔黏膜刺激试验以及急性全身毒性试验。结果:细胞毒性试验显示本研究制备的钛锆铌锡合金细胞相对增殖度为124%,细胞毒性反应分级为0级,无细胞毒性;致敏试验表明移去斑贴物24、48h后,试验动物贴敷部位均无红斑和水肿出现,反应积分为0。根据皮肤致敏实验分级标准,Ti-Zr-Nb-Sn合金对豚鼠无明显的潜在致敏性;口腔黏膜刺激试验未见异常组织学反应;短期全身毒性试验显示无明显短期全身毒性。结论:可以初步认为Ti-Zr-Nb-Sn合金是一种合金具有良好生物安全性口腔修复用金属材料。     

纯钛微弧氧化-壳聚糖-海藻酸钠涂层的细胞相容性研究

目的:通过对不同涂层表面进行成骨细胞生物相容性检测,评价其生物相容性。方法:纯钛微弧氧化组为对照A组、纯钛微弧氧化-碱处理-壳聚糖复合处理为实验B组、纯钛微弧氧化-碱处理-壳聚糖-海藻酸钠复合处理为C组。通过CCK-8实验检测不同时间细胞黏附情况以及增殖情况,激光共聚焦检测早期细胞骨架形态,扫描电镜观察试件表面形貌,ALP检测其不同时间碱性磷酸酶活性。结果:激光共聚焦显示B组和C组表面细胞的生长和黏附均优于A组,C组优于B组。CCK-8和ALP的检测结果显示3组材料表面细胞的增殖、活性的顺序为C组>B组>A组,3组的比较差异均具有统计学意义。结论:3组材料均具有良好的生物相容性,纯钛微弧氧化--碱处理-壳聚糖-海藻酸钠复合处理涂层细胞相容性最佳。[关键词]纯钛成骨细胞壳聚糖海藻酸钠生物相容性     

新型高氮无镍不锈钢骨植入材料的体内外生物相容性研究

目的 探讨新型高氮无镍不锈钢(-HNS)骨植入材料的体内外生物相容性,为其临床应用提供安全性方面的科学依据.方法 对HNS开展了细胞毒性、溶血性、遗传毒性(Ames和MLA试验)和致癌性方面的体外实验研究;进一步选择不同的动物评价了其皮内反应、致敏性和急性/亚慢性全身毒性;并以316L医用不锈钢材料为对照,研究兔胫骨内植入4w、12w和26w后HNS材料与骨组织之间的生物相容性.结果 HNS无明显的细胞毒性:无溶血;未诱发鼠伤寒沙门氏菌的体外基因回复突变;未引起体外哺乳动物细胞L5178Y/TK+/-的TK基因突变和染色体诱变;体外细胞转化试验结果为阴性;未引起动物皮肤过敏和皮内反应、不引起小鼠的急性全身毒性反应;亚慢性全身毒性试验中SD大鼠均未见临床全身毒性症状、试验组和对照组之间的体重及主要脏器体重比的差异均无统计学意义(P＞0.05)、血液学和临床生化主要检测指标与对照组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05),动物的心、肺、肝、脾、肾、脑等主要脏器均未见异常改变.HNS植入后各期的组织学分析表明:相比316L医用不锈钢,HNS能更明显促进骨种植体周围的新骨形成.结论 新型HNS骨植入材料对生物体全身组织器官无潜在的危害性,生物相容性好,具有临床应用前景.