马利兰治疗重型β地中海贫血(简报)

我们发现马利兰能增加贫血恒河猴γ珠蛋白基因的表达,因而能使胎儿血红蛋白(HbF)的含量升高。将该药试用于两例重型β地中海贫血患儿(患儿2介于重型与中间型之间)。患儿1治疗前血红蛋白(Hb)2.5g％左右,输血一次Hb达4.2g%,HbF42.1％。用药一个疗程HbF逐渐升高达79.6%;Hb在第50天开始上升,于第68天(以第一疗程首次给药为第一天)达6.5g%;以后渐降,到第209天为4.7g%;Hb高于输血后水平约5个月。患儿2治疗前Hb7.4g%,HbF73.1%,用药一个疗程HbF升至     

珠蛋白肽链的分析:β~+和β°地中海贫血的鉴别及新生儿HbF的Gγ/Aγ比率的测定

血红蛋白的珠蛋白的肽链常用分析法有:(1)羧甲基纤维素柱层析法;(2)巯基乙醇—尿素解离后的电泳分析法;(3)对氯汞苯甲酸解离后的电泳分析法。但有的操作繁琐、费时;有的分辨力差,不能同时分析各种肽链,而且均不能分离HbF的γ链的两种变异体:G_γ和A_γ。Rovera等结合巯     

北京地区1763例健康人HbA_2HbF正常值探讨

血红蛋白属色蛋白,由血红素与珠蛋白组成。珠蛋白含四条肽链。成人血中,珠蛋白肽链主要有四种即α、β、γ和δ,构成三种血红蛋白。其中主要是HbA(α_2β_2),占总量的95％以上,其它为HbA_2(α_2δ_2)占2～3％,HbF(α_2γ_2)占<2％。 血红蛋白分析对某些血液病特别是贫血的诊断和鉴别诊断有重要参考价值。为此各实验室均需有自己的有关正常值。我们于1981年4     

BCL11A对胎儿血红蛋白的调控

β-地中海贫血(β-thalassemia,β-地贫)和镰状细胞贫血(sickle cell anemia,SCA)均属于β-珠蛋白异常导致的血红蛋白病,不同程度地流行于东南亚、南亚、北非及地中海区域.胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)水平升高可明显改善两者的临床症状.B细胞淋巴瘤因子11A(B cell lymphoma/leukemia 11A,BCL11A)是一种锌指结构转录因子,在胎儿到成人血红蛋白转换过程中发挥重要的负向调节作用.BCL11A下调会激活γ-珠蛋白提高HbF表达,使β-地贫和SCA临床症状得到缓解.本文主要论述BCL11A对γ-珠蛋白的调控机制、BCL11A与β-地贫和SCA的治疗,从而为β-珠蛋白病的研究提供理论依据.     

贵阳地区正常人血红蛋白A_2定量测定

人类红细胞血红蛋白(Hb、是具有带氧功能的色素结合蛋白质。色素部分为亚铁血红素,蛋蛋白部分为珠蛋白。后者由四种肽链(即α,β,γ和δ)所组成。由于肽链的不同组合,构成了不同的血红蛋白。人出生以后的正常血红蛋白有三种,即HbA(α_2β_2),HbA_2(α_2δ_2)和HbF(α_2 γ_2)。初生时Hb A占15～40％,HbA,<0.3％,HbF占50～85％。3岁以后HbA占95～98％,HbA_2占1～3％,HbF占0～2％。某些Hb病患者HbA_2量可以增高或减低,故HbA_2的测定可为Hb病的诊断提供一个客观     

东南亚型遗传性胎儿血红蛋白持续增多症或东南亚型β°-地中海贫血

目的:弄清过去所发现遗传性胎儿血红蛋白持续增多症(HPFH)的类型和分子机制.方法:用血红蛋白淀粉-琼脂混合凝胶电泳检出胎儿血红蛋白(HbF)增多、醋酸纤维膜电泳洗脱定量、酸洗脱法观察HbF在红细胞中分布、β珠蛋白基因族中基因缺失情况的分析、Southern Blot、Gγ启动子-158附近情况的分析(酶切,测序)、单体型分析、α珠蛋白基因数目的研究等.结果:与一般HPFH不同,此例是β珠蛋白基因缺失、δ珠蛋白基因存在.缺失的全长约为27kb,包括整个β珠蛋白基因和它的3'HS1区.先证者的α珠蛋白基因型为:ααα/αα、其父亲为αα/αα.结论:此例HPFH为东南亚型,属于β.地中海贫血范畴.特殊之处是多出一个α珠蛋白基因,患者HbF显著增高的原因可能与此有关.     

试用马利兰治疗β—地中海贫血

对3例重型β-地中海贫血(β-地贫)患儿试用马利兰治疗。患儿每日口服马利兰(0.2mg/kg),20d后,Hb,HbF,RBC等主要血液学指数均有所改善。临床症状缓解,肝脾肿大减轻。2例患儿姐妹染色体互换(SCE)有轻度增加,停药后即可恢复,1例基本无变化,提示所用剂量的马利兰对患者染色体DNA无明显损伤。用多聚酶链反应(PCR)和寡聚核苷酸探针杂交测定13例经马利兰治疗的重型β-地贫患儿的DNA,在22条β-地贫染色体中发现有7种β-珠蛋白基因突变类型,提示马利兰对不同突变类型β-地贫均有疗效。     

丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达的诱导作用及机制

目的:研究丁酸钠对K562细胞系γ珠蛋白基因表达和胎儿血红蛋白合成的诱导作用及机制.方法:以丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72 h的K562细胞为实验组,设K562亲本细胞和SB203580(10 μmol/L)处理1 h后用丁酸钠(0.5 mmoL/L)诱导72 h 的K562细胞为阴性对照组,设羟基脲(100 μmol/L)诱导72 h的K562细胞为阳性对照.分别提取细胞总RNA 和总蛋白.采用RT-PCR、Western blotting和联苯胺染色方法检测γ珠蛋白基因、胎儿血红蛋白和p38表达及p38磷酸化水平.结果:与K562亲本细胞和SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞相比,丁酸钠诱导的K562细胞中G-γ珠蛋白、A-γ珠蛋白和胎儿血红蛋白的表达均明显上调(P<0.05),p38 mRNA和蛋白水平表达均无明显变化(P>0.05),但p38蛋白磷酸化水平显著增加(P<0.05).K562亲本细胞、SB203580处理后丁酸钠诱导的K562细胞和丁酸钠诱导的K562细胞中联苯胺阳性细胞百分率分别为(3.2±0.4)%、(12.7±0.2)%和(36.3±0.8)%(P<0.05).结论:丁酸钠可以诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因、合成胎儿血红蛋白,p38MAPKs的激活在丁酸钠诱导K562细胞高表达γ珠蛋白基因中发挥重要作用.     

地中海贫血患者珠蛋白基因mRNA和肽链水平的检测及其相关性分析

目的 研究β地中海贫血（简称地贫）患者外周血中α,β,γ珠蛋白基因ｍＲＮＡ和肽链的相对含量,为进一步研究珠蛋白基因表达的调控提供基础。方法 应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ和血红蛋白电泳,以α珠蛋白基因ｍＲＮＡ和α珠蛋白连为内对照,检测了正常人和β地贫患者外周血中β和γ珠蛋白基因和肽链的相对含量。结果 β地贫患者外周血中β珠蛋白基因ｍＲＮＡ和β珠蛋白肽链都有不同程度的减少和γ珠蛋白基因产物代偿性增高,同时两     

盐酸山莨菪碱对贫血小鼠珠蛋白肽链合成的影响

用盐酸山莨菪碱治疗贫血小鼠，经ＰＡＧＥ电泳及珠蛋白肽链合成速率的检测发现，小鼠的α－及β－珠蛋白肽链合成明显增加，并能维持１０ｄ左右。结果显示无小鼠胚胎型血红蛋白产生，该药作用途径可能是增加了成年型α及β肽链的合成。     

T细胞性NHL抗原受体基因重排分析

应用Southern blot和PCR技术对13例T细胞免疫表型的NHL进行基因重排分析。结果显示,11例(86％)肿瘤出现TCRβ基因克隆性重排,其中10例(91％)伴有TCRγ基因重排。提示基因重排分析是确立NHL克隆性和细胞源性的敏感而特异的标记。     

依达拉奉对高氧损伤小鼠肺组织中白介素-4、干扰素-γ、转化生长因子-β1的影响

目的  探讨依达拉奉对新生小鼠高氧肺损伤的治疗作用,为临床防治新生儿高氧肺损伤提供理论依据。方法  将新生小鼠随机分为空气+生理盐水组、空气＋依达拉奉组、高氧+生理盐水组、高氧+依达拉奉组,于实验第3、7、10、14和21天取材,测定肺组织中白介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）、肺组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的变化。结果  随着吸氧时间的延长,高氧组IL-4、IFN-γ含量均高于空气组且比例失衡,TGF-β1表达越多并肺组织结构紊乱;依达拉奉治疗组IFN-γ含量显著增高,IL-4含量明显降低,IFN-γ/IL-4比值更接近正常组,TGF-β1表达降低,肺组织结构较高氧组好转。结论  高氧可导致新生小鼠急性肺损伤;依达拉奉可调节IFN-γ、IL-4的含量及比例,降低TGF-β1的表达,发挥对高氧肺损伤的防治作用。

     

苦参碱诱导K562细胞合成γ珠蛋白

目的 体外研究苦参碱对K562细胞γ珠蛋白合成的影响.方法 以K562细胞为体外模型,采用联苯胺染色方法确定苦参碱诱导K562细胞血红蛋白表达增加的剂量效应和时间效应,进一步应用Western blotting技术检测血红蛋白F(αγ2)水平.结果 0.1mg/ml苦参碱作用于K562细胞,在96h联苯胺染色阳性细胞率达到15.67%;Western blotting检测到血红蛋白F表达增加.结论 苦参碱在体外可诱导K562细胞γ珠蛋白合成增加,从而使血红蛋白F增加.苦参碱具有与阳性对照丁酸钠相似的诱导γ珠蛋白合成增加的作用.     

α:Non–α and Gγ:Aγ globin chain ratios in thalassemia intermedia patients treated with hydroxyurea

ObjectiveTo elucidate the possible ways by which hydroxyurea molecules affect globin chain (α or β-like) synthesis.MethodsA total of 23 thalassemia intermedia patients (13 male and 10 female) aged between 5 and 26 years were treated for five months with 15 mg/(kg·day) of hydroxyurea. Hemoglobins electrophoresis and globin chain electrophoresis was performed on each sample at different time points before and during the treatment.ResultsFetal hemoglobin increased significantly in most patients and average episodes of transfusion decreased. Both Gγ and Aγ-globin chains increased significantly and α-globin:Nonα-globin chain as well as Gγ-globin:Aγ globin chains ratios decreased.ConclusionsImprovement in α:non-α ratio and consequent decrease of free α-globin chain might be the cause of beneficial effects of hydroxyurea therapy. Two patients who felt better didn't show significant increase in their fetal hemoglobin level, and this is in contradiction with the hypothesis claiming that the HbF level increase is the cause of such therapeutic effect. In spite of the unclear mechanism of action of this drug, hydroxyurea therapy had noticeable impacts on thalassemia intermedia and also sickle cell disease and even patients suffering from thalassemia major.     

反应停对HL-60细胞马利兰耐药的逆转作用

目的:研究反应停对HL -60细胞马利兰耐药的逆转作用。方法:低剂量马利兰反复刺激HL- 60细胞造成 HL -60马利兰耐药细胞株,联合应用反应停加马利兰观察反应停对马利兰耐药HL- 60细胞的逆转作用,并检测细胞谷 胱甘肽(GSH)、血管内皮生长因子(VEGF)和细胞色素C水平。结果:马利兰对HL 60细胞的IC50为5.44mmol/L,对 马利兰耐药HL 60细胞的IC50>100mmol/L;反应停单独应用对马利兰耐药HL 60细胞生长无影响,但能使马利兰对 马利兰耐药HL -60细胞的IC50降至14.34mmol/L,同时降低细胞GSH、VEGF和升高细胞色素C水平。结论:反应停 对HL- 60细胞马利兰耐药有逆转作用,其机制可能与降低细胞GSH、VEGF和升高细胞色素C水平有关。     

GTPγS及GDPβS对SHRSP内脏阻力血管平滑肌钙通道的影响

目的 研究Ｇ蛋白激动剂ＧＴＰγＳ和抑制剂ＧＤＰβＳ对卒中易感型自发性高血压大鼠（ＳＨＲＳＰ）及常压大鼠肠系膜动脉Ａ４－Ａ５分支阻力血管平滑肌钙通道的影响。方法 应用膜片箝全细胞钡电流方式。结果 （１）ＧＴＰγＳ使ＳＨＲＳＰ和Ｗｉｓｔａｒ两种大鼠阻力血和平滑肌全细胞峰值钡电流明显增加,且ＳＨＲＳＰ大鼠显著大于Ｗｉｓｔａｒ大鼠。ＧＤＰβＳ则可报制两种大鼠的全细胞峰值钡电流,对于ＳＨＲＳＰ大鼠的帽程度显     

影响慢性粒细胞白血病生存期因素的临床分析

将存活5年以上的23例慢性粒细胞白血病(慢粒)患者与同期生存时间少于5年的40例慢粒患者的临床特点进行了对照分析,慢粒患者初诊时的年龄、性别、血红蛋白、血小板、外周血嗜碱细胞、骨髓巨核细胞以及外周血和骨髓原粒细胞+早幼粒细胞与生存期关系不大(p>0.05),而脾肿大与生存期有明显关系(p<0.05)。白细胞较高者预后并不一定恶劣。接受马利兰治疗累积剂量及达到缓解所需时间与慢粒生存期的关系也不大(p>0.05),而马利兰所致骨髓抑制对延长生存期似有一定影响,首次缓解持续时间与生存期有明显关系(p<0.01)。马利兰与靛玉红交替使用可能是一种对延长生存期有益的治疗方案。     

一种定量评估化学物质致癌性的新方法：比值评估法

Based upon the results of battery of mutagenesis tests, a new approach, ratio estimate method (REM), for predicting carcinogenicity of chemicals quantitatively is described. If the tests are composed of n mutually independent experiments, a result's set is constituted:M = [M1,M2,..., Mn]. According to the formulas of probability, we have: P (C+/M)/P(C-/M) = [P(C+)/P(C-)]. (formula; see text) where P(C+/M)/P(C-/M) is the ratio of the probability of a carcinogen to a non-carcinogen with the result's set of M. P(C+) and P(C-) signify the probability of a carcinogen and a non-carcinogen. P(Mi/C+) and P(Mi/C-) represent the probability with which the result Mi can be obtained to a carcinogen or a non-carcinogen. Let (formula; see text) then beta = gamma/alpha. The value gamma can be derived from the sensitivity and specificity of mutagenesis tests. It is difficult to get the exact value of alpha but one can give its suitable range. For example, let a less than or equal to alpha less than or equal to b, then gamma/gamma + b less than or equal to P(C+/M less than or equal to gamma/gamma + a. Thus, the mean value P(C+/M) = gamma/2 (1/gamma + b + 1/gamma + a) could be taken as an estimated probability to predict the carcinogenicity. The application of REM to predict the carcinogenicity of a carcinogenic and a non-carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbon was illustrated. The error range of the value estimated by REM was also discussed in detail. The major advantage of REM is that it only demands to give an experiential range of P(C-)/P(C+) without pre-determining its exact value and the calculating process is simple and feasible to the toxicologists.