中药复方对免疫介导小鼠再生障碍性贫血红系造血祖细胞的影响

目的研究中药复方地甘口服液、红霖四物口服液对免疫介导再障小鼠模型骨髓红系造血祖细胞体外增殖影响。方法选用Ｂａｌｂ／ｃ小鼠为实验对象,在注射ＤＢＡ／２小鼠胸腺、淋巴结混合细胞后,立即接受亚致死剂量射线照射,形成免疫介导再障小鼠模型,然后分组处理。结果地甘口服液、红霖四物口服液在有ＥＰＯ存在的条件下,能促进小鼠骨髓细胞体外培养ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成,其中１００％浓度的地甘口服液效果明显优于２００％地甘口服液及红霖四物口服液。结论中药复方地甘口服液、红霖四物口服液能促进免疫介导再障小鼠模型骨髓红系祖细胞的体外细胞培殖。     

地甘口服液对免疫介导再生障碍性贫血小鼠胸腺细胞增殖 …

目的：研究中药复方地甘口服液对免疫介导再生生贫血小鼠模型胸腺淋巴细胞增殖周期的影响。方法：选用Ｂａｌｂ／ｃ小鼠为实验对象,在接受亚致死剂量射线照射后,立即注射ＤＢＡ／２小鼠胸腺、淋巴结混合细胞,形成免疫介导再障小鼠模型,分组处理后,摘取胸腺制成单细胞悬液,然后采用流氏细胞仪（ＦＡＣＳ）进行分析。结果：免疫介导再障小鼠胸腺细胞绝大部分停留在Ｇ０／Ｇ１期,Ｓ期和Ｇ２＋Ｍ期细胞显著减少,与正常对照组比较     

补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附分子的影响

目的:观察补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附能力及黏附分子CD106/CD49d的影响。方法:用免疫介导法复制小鼠再障模型,并给予补肾活血方药(参芪益肾饮),体外培养再障小鼠骨髓基质细胞,碘化丙啶染色检测其细胞周期,用流式细胞仪测定骨髓基质黏附分子表达水平。结果:再障小鼠骨髓基质细胞绝大部分处于G0/G1期,处于S期及G2+M期的细胞比例明显降低,中药组小鼠骨髓基质细胞处于S期及G2+M期的比例较模型组小鼠明显增加;模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,中药组基质细胞黏附能力回升,与正常组无区别;模型组骨髓基质细胞CD106、CD49d表达均降低,中药组CD106、CD49d水平有所升高。结论:补肾活血法提高再障小鼠骨髓基质黏附分子表达水平,可能是其治疗再障的机制之一。     

山茱萸水煎液对老年小鼠免疫器官保护作用的研究

目的 研究山茱萸水煎液对老年小鼠免疫器官的保护作用.方法 运用流式细胞术测定小鼠骨髓、胸腺、脾脏细胞的细胞周期、凋亡率等.结果 衰老组小鼠与青年组小鼠相比,骨髓、胸腺、脾脏细胞Go-G1期明显增多,S期明显减少,细胞增殖明显减缓;胸腺细胞、脾细胞凋亡率明显增多.山茱萸水煎液能明显抑制老年小鼠胸腺细胞的凋亡(P＜0.05),并且明显改善老年小鼠骨髓细胞、脾细胞的增殖抑制,表现为脾细胞G0-G1期明显减少(P＜0.05),S期明显增高(P＜0.05),骨髓细胞G0-G1期明显减少(P＜0.05).结论 山茱萸水煎液具有一定的抑制老年小鼠免疫衰退的作用.     

生血丸1号对免疫介导的再生障碍性贫血小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白D_3表达的影响

目的:探讨生血丸1号(简称生血丸)对免疫介导的再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓增殖及细胞周期蛋白 D_3(Cyclin D_3)表达的影响。方法:建立免疫介导的再障模型,胃饲生血丸1号水提液,每次0.1ml/10g 体重,每天2次,连续9天,并以康力隆为对照。第10天处死动物,采用流式细胞仪检测小鼠骨髓有核细胞(BMNC)G_0/G_1期百分率,免疫组织化学超敏 S-AP 法检测股骨中段骨髓 Cyclin D_3表达水平。结果:生血丸组 G_0/G_1期细胞百分率较再障模型组显著降低(P<0.05),而 Cyclin D_3表达水平明显高于再障模型组(P<0.01),两项指标之间呈显著负相关(r=-0.8219,P<0.05)。结论:生血丸1号能提高免疫介导的再障小鼠骨髓 Cyclin D_3的表达水平,从而促进造血细胞由 G_0/G_1期进入增殖期。     

补肾活血法对免疫介导型再障小鼠的影响

建立免疫介导型再障小鼠模型 ,胃饲补肾活血中药 ,观察红系和粒系造血祖细胞的变化。结果 :再障模型组小鼠红系造血祖细胞CFU E、BFU E和粒 单系祖细胞CFU GM集落数均较正常对照组显著减少 (P <0 0 1) ,补肾活血中药组CFU E、BFU E和CFU GM集落数均较再障模型组显著升高 (P <0 0 1)。说明补肾活血中药能使再障小鼠受损的骨髓红系和粒单系造血干细胞继续增殖与分化 ,促进造血功能的恢复。     

清毒饮、养正片影响白血病K562细胞增殖周期、细胞凋亡的实验研究

目的:观察清毒饮、养正片诱导人白血病细胞株K562细胞凋亡及对细胞增殖周期的作用;探索其时效关系,为临床提供选择最佳用药时机的实验基础.方法:制备含清毒饮、养正片药物血清,建立相应的培养体系,加入含药小鼠血清,培养K562细胞株;分别于培养12、24、36、48、72h收集细胞,固定、染色、上流式细胞仪进行细胞周期、细胞凋亡的检测.结果:人白血病K562细胞株存在有自然凋亡,正常小鼠血清无诱导该细胞凋亡的作用;清毒饮、阿糖胞苷具有诱导细胞凋亡的作用,且随着培养时间的延长凋亡率愈加明显.清毒饮对K562细胞周期的影响,还表现出明显的时间依赖性;随着培养时间的延长,当细胞出现明显凋亡时,细胞株S期显著下降,G0/G1期升高,提示清毒饮和清毒加养正合剂都可引起K562细胞株的G0/G1期阻滞,对凋亡的敏感性增强.结论:清毒饮能抑制K562细胞增殖、促进细胞分化、诱导细胞凋亡,提示该中药复方具有从分子水平抗肿瘤细胞增殖的效应,这也是中药复方协同化疗药物治疗白血病在增效减毒方面的关键机制;清毒饮对K562细胞发生细胞毒作用,是通过抑制其细胞周期S期、将其阻滞于G1期,并通过促进K562细胞凋亡实现的,其作用强度与时间呈密切正相关.     

护肾固精方对大鼠系膜细胞增殖周期的影响

目的探讨中药复方护肾固精方对大鼠系膜细胞(MC)生物学行为的影响。方法采用体外培养大鼠MC和血清药理学方法,分为护肾固精方血清组、脂多糖(LPS)病理组及正常对照组,将不同浓度的作用物加入MC共同培养,培养后的MC制成单细胞悬液,经流式细胞仪检测后,计算出细胞周期中的G0/G1期、S期、G2/M期各时期的百分比及S期抑制百分比、细胞PI。结果不同浓度的作用物对MC增殖周期有不同影响。LPS血清能明显刺激MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比减以及S期细胞增加;细胞的S期抑制百分比明显下降,而细胞的PI则显著增高;中、高浓度的中药血清明显抑制MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比增加及S期细胞减以,细胞的S期抑制百分比明显增加,而细胞的PI则显著降低。并且使大量MC阻滞在G0/G1期,能诱导MC发生凋亡。结论护肾固精方治疗系膜增殖性肾炎等肾小球疾病的作用机理之一,可能与抑制MC增殖和促其细胞凋亡有关。     

红芪替换玉屏风口服液中的黄芪后对免疫抑制小鼠细胞免疫作用的比较研究

目的:比较研究红芪替换玉屏风口服液中的黄芪后对免疫抑制小鼠细胞免疫调节作用。方法:通过给小鼠腹腔注射免疫抑制剂环磷酰胺致成免疫功能低下模型,以相同剂量的红芪替代玉屏风口服液中的黄芪灌胃进行体内拮抗实验,测定胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞的增殖能力、杀伤活性、T细胞亚群、血清IL-1β的含量。结果:玉屏风口服液和红芪替换黄芪的玉屏风水提物均可显著提高被环磷酰胺抑制的小鼠胸腺指数和脾脏指数;使巨噬细胞吞噬功能明显增加;并能拮抗环磷酰胺对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖、杀伤活性、T细胞亚群数量和IL-1β产生的免疫抑制作用。且红芪替换黄芪的玉屏风水提物提高被环磷酰胺抑制的小鼠脾脏指数和T淋巴细胞增殖能力优于玉屏风口服液。结论:红芪与防风、白术配伍后与玉屏风口服液相比在细胞免疫调节方面具有相似的作用,且在恢复脾脏质量和T淋巴细胞增殖方面优于玉屏风口服液。     

补肾阳中药对小鼠胚胎干细胞活动及相关基因表达的影响

目的:观察补肾阳中药复方对小鼠胚胎干细胞活动的影响.方法:选用小鼠胚胎干细胞模型CRL-1825细胞株,加入补肾阳中药复方大鼠含药血清,观察补肾阳中药对干细胞增殖、分化、凋亡以及相关基因表达的影响.结果:补肾阳中药可以抑制CRL-1825细胞凋亡,但对CRL-1825细胞增殖、分化无明显影响;补肾阳中药同时可促进CRL-1825细胞Notch1基因表达,相对表强度由46.33升高至102.81;补肾阳中药还可以抑制P16INK4a基因表达,相对表强度由202.11降至93.11.结论:补肾阳中药复方可以抑制CRL-1825细胞凋亡,并可能与调控Notch1、P16INK4a表达相关.     

地甘口服液对环磷酰胺所致小鼠脾组织凋亡及相关基因mRNA表达的影响

目的探讨地甘口服液对环磷酰胺损伤所致小鼠脾组织凋亡及凋亡相关基因 bc1-2 和 bax mRNA 表达的作用.方法建立环磷酰胺损伤的小鼠模型(小鼠用环磷酰胺 100mg/kg,腹腔注射 1 次/d,连续3d,造成模型),喂饲1 00%地甘口服液每次0.2mL/10g 小鼠,每日2次.第10天用原位末端标记的 TUNEL 技术检测脾组织细胞凋亡和原位杂交法检测凋亡相关基因bc1-2 和bax mRNA 的表达.结果地甘口服液组与对照组比较,脾脏的细胞凋亡率和bax mRNA 表达显著减少(P＜0.01),bc1-2 mRBA 的表达显著增强(P＜0.01).结论地甘口服液可能通过促进bc1-2 和降低bax mRNA 的表达,促进造血细胞的增生和提高机体免疫力.     

四物汤对环磷酰胺致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响

目的：研究四物汤对环磷酰胺（CTX）损伤致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响,旨在分子水平上探讨四物汤促进骨髓造血的作用机制。方法：采用CTX 250 mg·kg^-1腹腔注射制成化学损伤型血虚证小鼠模型,利用蛋白质组学技术研究四物汤治疗后的差异蛋白质组。结果：研究发现CTX使小鼠骨髓中12个蛋白表达上调、3个蛋白表达下调,四物汤可使CTX造模后这些表达改变的蛋白有不同程度恢复。结论：四物汤可能通过影响与细胞凋亡、造血干祖细胞增殖分化有关的蛋白质而促进骨髓造血。     

生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓细胞周期和细胞凋亡的影响

目的探讨生血增白汤对骨髓移植后小鼠骨髓中细胞周期和细胞凋亡的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法将实验动物随机分为5组:正常组、模型组、粒细胞-集落刺激因子组(G-CSF组)、生血组、生血+G-CSF组(联合组);建立小鼠骨髓移植模型,生血组及联合组胃饲生血增白汤浓缩煎剂。骨髓移植后第9、14、24天,采用流式细胞仪检测骨髓单核细胞凋亡率(APO)并分析细胞周期变化,进行外周血细胞和骨髓单核细胞计数,并做骨髓组织学观察。结果骨髓移植后第14天,生血组外周血细胞中血红蛋白高于模型组及G-CSF组(P<0.05),联合组高于模型组(P<0.05);骨髓移植后第24天,生血组外周血细胞中白细胞高于模型组(P<0.05)。骨髓移植后第24天时,G-CSF组、生血组和联合组骨髓单核细胞计数均高于模型组(P<0.01)。骨髓移植后第24天,生血组第24天APO明显低于同期模型组及G-CSF组(P<0.01)。结论生血增白汤能促进骨髓造血细胞的增殖分化,抑制骨髓细胞凋亡,可能是生血增白汤重建造血的机制之一。     

基于GPER/PI3K/AKT 通路探究四物汤对成骨细胞的雌激素样效应及其分子机制

目的：利用SD大鼠颅骨原代培养成骨细胞研究四物汤的雌激素样效应及其分子机理。方法：40只未性成熟SD大鼠,体重50 g,按照随机分组原则分为5组：正常对照组、雌激素组和四物汤高、中、低剂量组。四物汤灌胃给药,持续4天后腹主动脉取血,制备含药血清。利用出生72 h内的乳鼠提取并培养原代成骨细胞（rats osteoblast,ROBs）,并选取第2或3代的细胞进行实验研究。用四物汤含药血清作用ROBs细胞,并分别加入G蛋白偶联雌激素受体（GPER）的特异性激动剂G1和特异性拮抗剂G15作为工具药,通过MTT法检测各组含药血清对ROBs细胞增殖的影响;通过细胞免疫荧光法检测含药血清对ROBs PI3K、AKT、p-Akt表达的影响。结果：显微镜下形态学观察和ALP结果表明,原代ROBs提取和培养成功;四物汤含药血清可促进ROBs增殖（P<0.05或P<0.01）,该促增殖作用在加入拮抗剂G15后明显减弱（P<0.01）,加入激动剂G1后明显增强（P<0.05或P<0.01）;利用细胞免疫荧光技术检测发现四物汤含药血清可提高PI3K、p-Akt在ROBs细胞的荧光表达强度,且该效应在加入G1后增强（P<0.05或P<0.01）,加入G15后减弱（P<0.05）。结论：四物汤可通过GPER通路发挥雌激素样效应,促进成骨细胞增殖,提高GPER介导下游信号分子PI3K、p-Akt的表达水平。     

红芪口服液增强免疫力的药理作用研究

[目的]考察红芪口服液对环磷酰胺诱导的免疫低下小鼠免疫功能的影响,为其临床用药提供一定实验依据.[方法]实验选用雄性昆明小鼠,采用腹腔注射环磷酰胺(35 mg/kg)方法复制免疫低下动物模型,设置正常组、模型组、红芪口服液低(5.2 mL/kg)、中(20.8 mL/kg)、高(41.6 mL/kg)剂量组,连续灌胃给...     

孕康口服液保胎作用的实验研究

孕康口服液对针刺和缩宫素所致的大鼠和小鼠实验性流产模型有明显的保胎作用，其疗效与黄体酮无差异；对大鼠，小鼠的离体子宫和家兔在体子宫平滑肌均有明显的松驰作用，并能损坏抗缩宫素和乙酰胆碱收缩动物离体和在体子宫平滑肌的作用，毒性试验结果：小鼠和大鼠灌胃的最大耐受量分别大于２４０ｇ／ｋｇ和９６ｇ／ｋｇ，小鼠腹腔注射的ＬＤ５０＝６１．５６±５．２９ｇ／ｋｇ（Ｐ＝０．９５）；大鼠长期毒性试验未见明显毒性；致突     

甘草蜜炙前后对小鼠免疫调节的影响

目的 研究甘草炮制前后对免疫低下小鼠免疫调节作用的影响。方法 小鼠腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下模型,给予生甘草、清炒甘草、蜜炙甘草的提取液,检测免疫功能学评价指标,包括免疫器官指数、半数溶血值、溶血空斑数、脾淋巴细胞增值率、自然杀伤（NK）细胞杀伤率、耳肿胀度、碳廓清指数、腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数。结果 与对照组小鼠比较,模型组小鼠各检测指标明显降低（P<0.05,P<0.01）;与模型组小鼠比较,各给药组（生甘草组、清炒甘草组、蜜炙甘草组）小鼠各检测指标均能增强。其中,仅蜜炙甘草组能明显增强各检测指标（P<0.05,P<0.01）;与生甘草组小鼠相比,清炒甘草组能明显增强血清溶血素和抗体生成细胞、脾淋巴细胞增殖率和NK细胞活性（P<0.05,P<0.01）,但对胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、DTH、碳廓清功能无明显影响,蜜炙甘草组能明显增强除胸腺指数的各项评价指标（P<0.05,P<0.01）,但对胸腺指数无明显影响。结论 甘草蜜炙前后对小鼠非特异性免疫、体液免疫及细胞免疫功能均有促进作用,且蜜炙后作用更强,为蜜炙甘草机制研究提供参考。     

复方活血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达作用

目的：探讨复方活血汤（简称中药）对免疫诱导的再生障碍性贫血（再障）小鼠骨髓造血细胞粘附分子及细胞周期蛋白表达的作用。方法：建立免疫诱导的再障小鼠模型，喂饲１００％复方活血汤每次０２ｍｌ，每日２次，第１３日用流式细胞仪检测小鼠骨髓单个核细胞β１整合素家族（ＣＤ４９ｄ／ＣＤ２９，α４β１；又称ＶｅｒｙＬａｔｅＡｎｔｉｇｅｎｓ，ＶＬＡ家族）及细胞周期蛋白Ｄ２的表达水平。结果：中药组ＣＤ４９ｄ表达明显高于再障组（Ｐ＜００５），且与正常组无明显差异；中药组细胞周期蛋白Ｄ２表达明显高于再障组（Ｐ＜００１）；而其Ｇ０＋Ｇ１期细胞数显著低于再障组（Ｐ＜００１）。结论：复方活血汤能增强免疫再障小鼠骨髓造血细胞粘附分子ＣＤ４９ｄ和细胞周期蛋白Ｄ２的表达，促进造血细胞的增生。