血管内皮细胞的活化或损伤诱导平滑肌细胞的增生和凋亡

一、材料与方法1.细胞培养 :采用改进的Ｊａｆｆｅ氏培养法 ,培养人脐带静脉内皮细胞。采用贴块法培养人脐动脉平滑肌细胞并传代。培养液均为含 2 0 %胎牛血清的ＤＭＥＭ培养液。2 .内皮细胞的脂质过氧化引发实验 :将培养达融合状态的内皮细胞分组 ,分别加入含不同浓度氢过氧化枯烯的培养液孵育后 ,测定脂质过氧化物的代谢终产物丙二醛 (ＭＤＡ)的含量。3.培养液中乳酸脱氢酶 (ＬＤＨ)活性的测定 :ＬＤＨ是细胞内的可溶性酶 ,当细胞膜被破坏时可漏出细胞外 ,可作为细胞损伤的早期检测指标。采取内皮细胞培养液 ,以Ｓｉｇｍａ公司的ＬＤＨ测…     

亚太地区2型糖尿病政策组已将糖尿病控制标准作了修改(1999年)

2型糖尿病控制目标项目良好一般不良血糖葡萄糖ｍｍｏｌ/Ｌ空腹 4 4- 6 1≤ 7 0 >7.0非空腹 4.4- 8.0≤ 10 .0 >10 .0糖化血红蛋白 % <6 .2 6 .2 - 8.0 >8.0血压ｍｍＨｇ <130 / 80 >130 / 80 - <16 0 / 95≥ 16 0 / 95体重指数ｋｇ/ｍ3男 <2 5男 <2 7男≥ 2 7女 <2 4女 <2 6女≥ 2 5总胆固醇ｍｍｏｌ/Ｌ <4.5≥ 4.5≥ 6 0高密度脂蛋白胆固醇ｍｍｏｌ/Ｌ >1.11.1- 0 .9<0 .9 甘油三酯ｍｍｏｌ/Ｌ <1.5 <2 .2≥ 2 .2低密度脂蛋白胆固醇ｍｍｏｌ/Ｌ <2 .5 2 .5 - 4.4>4.4亚太地区2型糖尿病政策组已将糖尿病控制标准作了修改(1999年)…     

AngⅡ、mm-LDL和TNFα对ECV304细胞 PDGF-B链基因转录调控的影响

目的 :从基因转录水平探讨ＡｎｇⅡ、ｍｍ -ＬＤＬ及ＴＮＦα对ＥＣＶ30 4细胞ＰＤＧＦ -Ｂ链基因表达的影响。方法 :( 1 )以ＧＡＰＤＨ为内参照 ,用反转录 -多聚酶链反应 (ＲＴ -ＰＣＲ)方法检测 1 0 - 6 ｍｏｌ/ＬＡｎｇⅡ、1 0 0 μｇ/ｍＬｍｍ -ＬＤＬ及 2 0 0Ｕ/ｍＬＴＮＦα作用于ＥＣＶ30 4细胞 1 8ｈ后各实验组ＰＤＧＦ -Ｂ链基因ｍＲＮＡ水平 ,分别为对照组的 1 5倍、2 0倍和 1 3倍 ,提示ＡｎｇⅡ、ｍｍ -ＬＤＬ及ＴＮＦα在转录水平对ＥＣＶ30 4细胞ＰＤＧＦ -Ｂ链基因的表达有促进作用。 ( 2 )构建一系列含人ＰＤＧＦ -Ｂ链基…     

环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ_1基因表达的调控初探

目的 :探讨环核苷酸 (ｃＡＭＰ/ｃＧＭＰ)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与转化生长因子 β1基因表达调节中的作用 ,为心肌肥大的防治提供一定的理论依据。方法 :将Ｗｉｓｔａｒ乳鼠无血清培养 2 4ｈ的心肌细胞分为对照组、ｃＡＭＰ组 (8 ＢｒｏｍｏｃＡＭＰ 0 .1ｍｍｏｌ/Ｌ)、ｃＧＭＰ组 [加入一氧化氮 (ＮＯ)的供体硝普钠 1ｍｍｏｌ/Ｌ ,借此升高心肌细胞内ｃＧＭＰ浓度 ],并在 30ｍｉｎ、3ｈ、2 4ｈ、48ｈ、72ｈ等 5个时相点检测如下指标 :(1)细胞生长代谢活性 (ＭＴＴ法 ) ;(2 )ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ1的ｍＲＮＡ表达 (原位…     

环核苷酸对心肌细胞bFGF与TGFβ_1基因表达的调控初探

目的 :探讨环核苷酸 (ｃＡＭＰ/ｃＧＭＰ)对心肌细胞碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与转化生长因子 β1基因表达调节中的作用 ,为心肌肥大的防治提供一定的理论依据。方法 :将Ｗｉｓｔａｒ乳鼠无血清培养 2 4ｈ的细胞分为对照组、ｃＡＭＰ组 ( 8-Ｂｒｏｍｏ -ｃＡＭＰ 0 .1ｍｍｏｌ/Ｌ)、ｃＧＭＰ组 [加入一氧化氮 (ＮＯ)的供体 -硝普钠 1ｍｍｏｌ/Ｌ ,借此升高心肌细胞内ｃＧＭＰ浓度 ],并在 30ｍｉｎ、3ｈ、2 4ｈ、48ｈ、72ｈ等 5个时相点检测如下指标 :( 1 )细胞生长代谢活性 (ＭＴＴ法 ) ;( 2 )ｂＦＧＦ和ＴＧＦβ1 的ｍＲＮＡ表达 …     

血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究

目的 :血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣｓ)增殖与迁移在动脉粥样硬化 (ＡＳ)的早期、中期或ＡＳ进展期或血管事件的发病机制中起着关键性作用。方法 :采用改良的Ｂｏｙｄｅｎ小室法检测ＶＳＭＣｓ的迁移效应 ;以ＭＴＴ法、[3Ｈ]-Ｔｄｒ掺入法、[3Ｈ]-脯氨酸标记法和ＶＳＭＣｓ计数评价ＶＳＭＣｓ的增殖效应 ;将培养的ＶＳＭＣｓ分为 5组 ;2 %胎牛血清 ( 2 %ＦＣＳ)组、ＡｎｇⅡ组 (其浓度为 1 0 - 1 0 ～ 1 0 - 6ｍｏｌ/Ｌ)、Ｌｏｓａｒｔａｎ组 (其浓度为 1 0 - 7～ 1 0 - 5ｍｏｌ/Ｌ)、ＭＣＰ - 1ｍｃＡｂ组 (终浓度为 1 0 μｇ/ｍＬ)和阳性对照…     

NF-κB在过氧化氢所致心肌细胞凋亡的作用

目的和方法 :本文试图证明 :ＮＦ -ＫＢ信号通路的激活可能介导了过氧化氢 (Ｈ2 Ｏ2 )所致的心肌细胞凋亡 ,实验用体外培养的新生Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞 ,随机分为三组 :1 正常对照组 ( 37℃ ,3ｈ) ;2 Ｈ2 Ｏ2 ( 1ｍｍｏｌ/Ｌ)损伤组 ( 37℃ ,2 4ｈ) ;3 热休克预处理 ( 4 3℃ ,1ｈ ,37℃恢复 6ｈ) Ｈ2 Ｏ2 ( 1ｍｍｏｌ/Ｌ)损伤组 ( 37℃ ,3ｈ)。采用末端标记法及流式细胞仪检测凋亡发生 ,Ｗｅｓｔｅｒｎ -ｂｌｏｔ检测Ｈ2 Ｏ2 ( 1ｍｍｏｌ/Ｌ)损伤 5ｍｉｎ ,1 5ｍｉｎ ,30ｍｉｎ ,60ｍｉｎ后Ｉ-κΒα 量的变化及热休克预处理对这种变…     

脂质过氧化物与抗氧化剂对内皮细胞前列环素合成的影响

本研究以氢过氧化枯烯作用于培养的人血管内皮细胞,激发和促进细胞的脂质过氧化反应,并以各种抗氧化剂作用,观察脂质过氧化与抗氧化作用对内皮细胞前列环素(PGI_2)合成的影响。     

窒息新生儿早期血糖水平的临床观察

我科自 1998年 1月～② 2 0 0 1年 12月收治新生儿窒息4 2例 ,对其早期的血糖水平进行监测并分析 ,现报告如下。资料与方法1 一般资料　男 2 0例 ,女 2 2例。日龄 1ｈ～ 3ｄ ,出生体重 0 .95ｋｇ～ 4 .6ｋｇ ,早产儿 6例。 10例生后 1ｍｉｎＡｐｇａｒ评分0～ 3分的为重度窒息组 (简称重度组 ) ,32例生后 1ｍｉｎＡｐｇａｒ评分 4～ 7分的为轻度窒息组 (简称轻度组 )。2 诊断标准　足月新生儿全血血糖 <1.7ｍｍｏｌ/Ｌ ,早产儿或小于胎龄儿 <1.1ｍｍｏｌ/Ｌ诊断为新生儿低血糖 ,全血血糖 >7.0ｍｍｏｌ/Ｌ诊断为新生儿高血糖[1] 。3 方法　…     

冷冻切片诊断甲状旁腺双腺瘤一例

患者女 ,35岁。因周身乏力伴四肢肌肉疼痛及腰痛半年于 2 0 0 0年 5月 30日入院。半年来上述症状逐渐加重 ,目前行走困难 ,不能翻身 ,无发热和关节痛。入院前 1个月曾因外伤发生左锁骨骨折。实验室检查 :红细胞沉降率 7ｍｍ/1ｈ ;碱性磷酸酶 76 7.0Ｕ/Ｌ ;钙 3.2ｍｍｏｌ/Ｌ ;磷 0 .79ｍｍｏｌ/Ｌ ;甲状旁腺激素 10 19.81ｎｇ/Ｌ。发射型计算体层摄影 (ＥＣＴ)检查 :2 0 1Ｔｌ与99Ｔｃ的甲状旁腺双核素显像结果显示 ,在甲状腺右下叶区域出现一局灶性放射性分布浓集影 (图 1)。Ｘ光片检查显示肩关节、尺桡骨、双手、双股骨、胫腓骨呈普遍性骨…     

急性间日疟对HIV感染者T淋巴细胞亚群和表型的影响

近年来我们试用疟疾疗法治疗人免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)感染和获得性免疫缺陷综合征 (ＡＩＤＳ)患者并随访 2～ 3年 ,发现患者的免疫指标得到了部分的改善。本研究报告ＣＤ4细胞基线水平不同的ＨＩＶ感染者在急性疟疾期及其后 3个月内外周血Ｔ淋巴细胞亚群和表型的变化 ,以进一步阐明疟疾疗法治疗ＨＩＶ感染的适应证及该疗法的部分机理。12例ＨＩＶ 1感染者接受疟疾疗法 ,按美国疾病控制中心 (ＣＤＣ) 1993年修订的分类方法分组 :5例ＣＤ4≥ 5 0 0× 10 6 Ｌ为第 1组 (Ｇ1) ,5例ＣＤ4在 499～ 2 0 0×10 6 Ｌ为第 2组 (Ｇ2 ) ,2例ＣＤ4<2 0 …     

小儿恶性淋巴瘤与EB病毒的相关性

1　材料和方法2 3例标本均取自 1978～ 1998年间外检标本 ,全部标本均常规制成ＨＥ切片并行免疫组化标记分型。ＥＢＶ和 ｐ5 3检测为用超敏Ｓ Ｐ试剂盒、鼠抗ＥＢＶ(ＬＭＰ)和突变型 ｐ5 3蛋白单克隆抗体 ,同时取 15例 14岁及其以下病理诊断为良性淋巴组织增生的淋巴结行ＥＢＶ和 ｐ5 3蛋白检测作为对照 ,上述免疫组化试剂均购自福州迈新公司。2　结果2 .1　一般材料　淋巴瘤组 2 3例 ,男∶女 16∶7,年龄 3～ 13岁 ;ＥＢＶ阳性 15例 ,男∶女 11∶4,年龄 6 5± 2 6 (岁 ) ,ＥＢＶ阴性 8例 ,男∶女 5∶3,年龄 9 5± 3 31(岁 ) ,两组性别比无…     

过敏性皮炎患者糖皮质激素受体的临床研究

目的 :探讨外周血单个核白细胞糖皮质激素受体 (ＧＲ)改变及在过敏性皮炎治疗及预后的临床意义。方法 :过敏性皮炎患者 1 5例 ,男性 8例 ,女性 7例 ,年龄 1 3～ 51岁 ,平均年龄 31± 9岁 ,诊断标准医疗常规诊断标准。患者治疗均应用地塞米松 1 0ｍｇＶＤ。 7例ＧＲ异常者为Ａ组 ,8例ＧＲ正常者Ｂ组 ,随访 1年15名健康人作为对照组。外周血单个核细胞 (ＭＮＬ)用放射配体结合法。以 [3Ｈ]地塞米松 ( [3Ｈ]Ｄｅｘ 1 78ＴＢｑ/ｍｍｏｌ/Ｌ ,英国放化中心产品 )为配体 ,以饱和浓度 1 5ｎｍｏｌ/Ｌ[3Ｈ]Ｄｅｘ检测患者ＭＮＬ对 [3Ｈ]Ｄｅｘ的特…     

瑞氏综合征一例尸检

患儿女 ,2岁 4个月。因惊厥伴意识不清 1ｈ于 1998年6月 8日入院。患儿入院前 1ｈ无明显诱因突然抽搐 ,持续 5ｍｉｎ略缓解。发病前大便 2次 ,稍稀 ,病前 8ｈ食用火腿肠后呕吐一次。否认口服阿司匹林史 ,否认惊厥史。体检 :意识不清 ,双肺可闻及散在痰鸣音 ,肝脏 :肋下 3.0ｃｍ ,剑下 2 .5ｃｍ ,质稍硬 ,四肢肌张力低 ,膝腱、跟腱反射未引出 ,颈无抵抗。实验室检查 :白细胞 16 .7× 10 9/Ｌ ,中性粒细胞 0 .92 ,淋巴细胞 0 .0 8,血氨 6 4.5 70 μｍｏｌ/Ｌ(参考值 <44 .0 2 5 μｍｏｌ/Ｌ) ,血糖 0 .4ｍｍｏｌ/Ｌ。血谷 丙转氨酶 170Ｕ/Ｌ、…     

深圳地区小儿肠道病毒感染的核酸检测分析

为了解深圳地区肠道病毒 (ＥＶ)的感染流行情况和病毒分型特征 ,我们采用检测ＥＶ的套式逆转录聚合酶链反应(ＲＴ ｎＰＣＲ)方法进行ＥＶ感染检测 ,并对临床分离株 5′端非编码区 ( 5′ＵＴＲ)基因序列进行分子进化树分析。采用ＴＲＩＺＯＬ ＬＳＲｅａｇｅｎｔ试剂从疑诊ＥＶ感染儿童大便、咽拭子和脑脊液中提取ＥＶ ＲＮＡ ,根椐ＥＶ 5′ＵＴＲ保守的基因序列设计两对特异性引物 ,引物序列分别为ＥＶＰ1 60 :5′ＣＡＡＧＣＡＣＴ(ＴＡ)ＴＴ(ＣＡ)ＣＣＣＣＧＧ3′,ＥＶＰ2 50 :5′ＴＡＣＴＴＧＡ(ＧＡ)ＣＣ ＴＡＧＴＡ3′,ＥＶＰ50 0 :5′…     

胎儿窘迫时羊水中电解质浓度的实验研究

目的　探讨羊水中电解质浓度的变化对诊断胎儿窘迫及判断围产儿预后价值。方法　随机选择 5 0例正常产妇作正常组 ,5 0例胎儿窘迫者作为胎儿窘迫组 ,取各组羊水进行电解质浓度测定分析 ;每例新生儿出生时行Apgar 1min及5min评分。结果　胎儿窘迫组中 ,羊水中Na+ 浓度 (10 6 30± 11 4 0mmol/L)及Mg2 + 浓度 (0 36± 0 11mmol/L)较正常组Na+ 浓度 (12 8 4 1± 11 0mmol/L)及Mg2 + 浓度 (0 5 1± 0 14mmol/L)显著降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ;而K+ 浓度 (4 80±0 19mmol/L)及Ca2 + 浓度 (1 6 8± 0 13mmol/L)则较正常组羊水K+ 浓度 (4 14± 0 2 9mmol/L)及Ca2 + 浓度 (1 0 9±0 2 8mmol/L)显著升高 ,(P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。窘迫组的新生儿窒息率 (12 % )较正常组 (2 % )显著升高P <0 .0 2 5。结论　胎儿窘迫时 ,羊水中部分电解质浓度发生改变 ,监测该变化可作为诊断胎儿窘迫的依据及判断预后的指标。     

链球菌蛋白G在固相放射免疫分析中的应用

链球菌蛋白Ｇ(ＳＰＧ)分子中 ,含有多个ＩｇＧＦｃ段结合区 ,两者结合不影响ＩｇＧＦａｂ段对抗原的结合 ;据此 ,用ＳＰＧ制备固相抗体应用于放射免疫分析。基因重组ＳＰＧ ,用 5 0ｍｍｏｌ/Ｌ、ｐＨ9 6碳酸盐缓冲液溶解 ,浓度为 0 1μｇ/ｍｌ。包被聚苯乙烯试管 :1ｍｌ/管 ,室温 8ｈ ,弃液 ,加洗涤液ＰＢＳＴ (10ｍｍｏｌ/Ｌ、ｐＨ7.4ＰＢＳ ,含 0 0 5 %Ｔｗｅｅｎ2 0 ) 1ｍｌ,洗 3遍。作者单位 :2 710 0 0泰安 ,泰山医学院附属医院核医学科通信作者 :高云朝每管加稀释后甲状腺素抗体 1ｍｌ,含0 1%明胶 ,室温过夜 ,ＰＢＳＴ洗 3遍 ,固相…     

Aβ_((31-35))和ApoE_4对培养大鼠海马神经元的存活和生长的影响

为探讨β-淀粉样蛋白 ( Aβ)和载脂蛋白 E4( Apo E4)对培养大鼠海马神经元的作用 ,本文采用了神经细胞培养、MTT比色法、免疫组化及图象分析等技术进行了研究。结果显示 :( 1) MTT法测得 Aβ( 3 1 - 3 5) ( 10 μmol/ L) +Apo E4( 10 μg/ ml)和 Aβ( 3 1 - 3 5)( 2 0μmol/ L ) +Apo E4( 10μg/ ml)的 OD值 ,分别为 0 .197± 0 .0 2 1和 0 .191± 0 .0 2 4,明显低于对照组 ( 0 .2 2 9± 0 .0 3,P<0 .0 5 )。( 2 )这两组神经元胞体的最长径分别为 ( 10 .0 7± 1.98)μm和 ( 10 .0 1± 1.6 8)μm;最短径分别为 ( 6 .40± 0 .77)μm和 ( 6 .2 8± 0 .89) μm,明显低于对照组、Apo E4组、Aβ( 3 1 - 3 5) 组的最长径和最短径 ( P<0 .0 5 ) ;其突起平均长度分别为 ( 2 6 .36± 7.73) μm和 ( 2 3.86± 7.2 9)μm,明显低于对照组 ( 30 .88± 9.79)μm、Apo E4组 ( 30 .6 0± 7.30 )μm以及 Aβ( 3 1 - 3 5) ( 10μmol/ L )组 ( 2 8.34± 4.40 )μm( P<0 .0 5 )。 ( 3) Aβ( 3 1 - 3 5) ( 2 0 μmol/ L)组的突起平均长度为 ( 2 6 .81± 5 .42 ) μm,也明显低于对照组 ( 30 .88± 9.79) μm和Apo E4组 ( 30 .6 0± 7.30 )μm ( P<0 .0 5 )。本研究结果提示 ,Aβ( 3 1 - 3 5) +Apo E4对神经元的抑制作用较 Aβ(     

清开灵注射液对实验性发热的作用研究

目的 :复制家兔内毒素和内生致热原性发热模型 ,观察清开灵对实验性发热的作用。方法 :采用雄性日本大耳白家兔 ,体重 2 2～ 3 0ｋｇ。实验分两部分进行 ,第一部分观察清开灵对内毒素和内生致热原性发热的解热效应。 48只家兔随机分成 6组 :生理盐水对照组 (ｉｍ .1ｍＬ/ｋｇ) ;清开灵组 (ｉｍ .1ｍＬ/ｋｇ) ,内毒素组 (ｉｖ .5μｇ/ｋｇ) ;内毒素 清开灵组 (ｉｍ .清开灵 1ｍＬ/ｋｇ ,0 .5ｈ后ｉｖ ,内毒素 5μｇ/ｋｇ) ;内生致热原组(ｉｖ .1ｍＬ/ｋｇ) ;内生致热原 清开灵组 (ｉｍ .ＱＫＬ ,0 .5ｈ后ｉｖ,内生致热原 1ｍＬ/ｋｇ)。第…     

糖皮质激素受体的高效液相分离特征

目的 :探讨糖皮质激素低亲和力受体的理化特征。方法 :应用 6- 1 2周龄雄性ＳＤ大鼠肝胞液为标本 ,要求蛋白质浓度为 4～ 8ｍｇ/ｍＬ ,在 0～ 4℃ ,用 [1 ,2 ,4,6,73Ｈ]地塞米松 (英国放化中心产品 ,3 1 8ＴＢｑ ,31 8 2× 1 0 1 0 Ｂｑ/ｍｍｏｌ,放化纯度 >97% ) ,配制成 1 0ｎｍｏｌ/Ｌ ,1 0 0ｎｍｏｌ/Ｌ(冷标法 ) ,标记大鼠肝胞液中糖皮质激素受体 ,0～ 4℃放置 3～ 4ｈ ,用活性炭Ｄｃｃ法吸附 ,离心 ,取其上清液 ,测其ｃｏｕｎｔｓ·ｍｉｎ- 1 值。通过高压液相疏水作用 (层析柱Ｓｙｎｃｈｒｏｐａｋｐｒｏｐｙｌ 1 0 0× 4.6ｍｍＩＤ)…