热休克蛋白90抑制剂研究进展

热休克蛋白90(HSP90)抑制剂能够抑制HSP90,促使在肿瘤生长信号通路中起重要作用的HSP90效应蛋白通过泛素化降解,从而阻断肿瘤增殖生长信号通路的多个靶点,有效阻止肿瘤的生长.现综述近年来有关HSP90抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展.     

HSP90抑制剂在肿瘤临床中的研究进展

0 引言 分子靶向抗肿瘤治疗是目前肿瘤治疗研究领域的热点,并取得了令人瞩目的疗效.最著名的例子是BCR-ABL特异性抑制剂格列卫在慢性髓系白血病中的应用[1].作为靶点的分子通常是与致癌信号通路相关的蛋白激酶,但是研究发现单个蛋白激酶分子的靶向治疗通常只对少数肿瘤细胞有效,而且敏感的肿瘤细胞通常会发展为获得性抵抗.分子靶向治疗的最新进展提示有效的控制肿瘤需要同时抑制多个致癌信号通道[2].HSP90是一类普遍存在于各种细胞的分子伴侣蛋白,在肿瘤细胞中,HSP90通过调节多种癌蛋白的功能,从而参与调节肿瘤细胞的增殖、生存、侵袭、转移和血管生成等多种重要过程.由于HSP90对多种癌蛋白具有调控作用,通过对HSP90的抑制可以实现同时对多种肿瘤信号通路的调控,从而有效控制肿瘤.HSP90抑制剂的开发研究已经成为分子靶向抗肿瘤治疗的一个热点,近年来国外大量研究开发出了多种HSP90抑制剂,本文对HSP90抑制剂在多种肿瘤的临床研究进展讲行综述.     

HSP90生物学特征及其在泌尿系统肿瘤中作用机制的研究进展北大核心

HSP90作为热休克蛋白家族中最重要的成员,HSP90不仅可以作为癌基因的分子伴侣发挥其重要作用,而且在肿瘤的生长,进展阶段中扮演着重要角色,HSP90在多种癌蛋白的信号通路及信号转导中起着至关重要的作用。HSP90的高表达与泌尿系统肿瘤的发生,发展也密切相关。在肾癌、膀胱癌和前列腺癌中,HSP90均高表达,并且促进这三大肿瘤的发展。抑制HSP90的水平在泌尿系统肿瘤的治疗中也具有重要的研究意义。现对HSP90的生理学特征及其在泌尿系统肿瘤中的作用机制作一综述。     

热休克蛋白90在乳腺癌发生发展及治疗中的研究进展

乳腺癌已成为发病率最高的恶性肿瘤之一。热休克蛋白90(HSP90)被称为分子伴侣,其在合成多肽、控制蛋白数量、蛋白折叠、调控蛋白活性和蛋白降解过程中发挥重要作用。HSP90可调节细胞生长、粘附、侵袭、转移、血管生成和细胞凋亡等,在乳腺癌发展过程中起重要的作用。HSP90抑制剂在抵抗肿瘤生长和抑制侵袭方面发挥积极作用,成为一种新的治疗手段。本文就HSP90与乳腺癌的关系,以及HSP90抑制剂介导的乳腺癌治疗新模式进行阐述。     

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素研究进展

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）是一种热休克蛋白90（HSP90）抑制剂,能够靶向性抑制肿瘤源性的HSP90,使其效应蛋白即多条细胞信号转导通路的关键调节蛋白降解,从而使细胞生长、分化受抑制,引起细胞凋亡,抑制肿瘤生长。大量试验证明,17-AAG是一种独特的靶向性治疗肿瘤的药物,能有效抑制多条维持肿瘤增殖和生存的细胞信号转导途径。临床Ⅰ-Ⅱ期试验显示该药具有良好的药理作用特征。此外,它还能和放疗、传统化疗药物联合应用协同发挥抗肿瘤作用。     

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素研究进展

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)是一种热休克蛋白90(HSP90)抑制剂,能够靶向性抑制肿瘤源性的HSP90,使其效应蛋白即多条细胞信号转导通路的关键调节蛋白降解,从而使细胞生长、分化受抑制,引起细胞凋亡,抑制肿瘤生长。大量试验证明,17-AAG是一种独特的靶向性治疗肿瘤的药物,能有效抑制多条维持肿瘤增殖和生存的细胞信号转导途径。临床Ⅰ-Ⅱ期试验显示该药具有良好的药理作用特征。此外,它还能和放疗、传统化疗药物联合应用协同发挥抗肿瘤作用。     

热休克蛋白90α在肿瘤、食管癌中的研究

热休克蛋白90α（HSP90α）能够辅助蛋白折叠和维持细胞内多种信号传导蛋白的稳定,从而促进细胞存活和生长。在肿瘤细胞中,HSP90α能够使过度激活或突变的信号传导蛋白保持活性,加速肿瘤细胞的恶性转变。同时HSP90α还能被分泌到细胞外,可促进肿瘤的侵袭和转移。本文对HSP90α在肿瘤、食管癌中的表达、功能和分子作用机制作一综述。     

mTOR功能及其抑制剂研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin mTOR）是一种丝／苏氨酸蛋白激酶，mTOR在肿瘤细胞生长、增殖过程中起重要作用，mTOR信号通路活动异常与肿瘤的发生有密切关系，mTOR足肿瘤药物治疗作用的理想靶点，目前新的mTOR抑制剂不断出现。本文对mTOR蛋白的结构、功能和mTOR信号通路及其抑制剂进行了综述。     

HSP 90与survivin在人乳腺癌细胞中的作用及机制探讨

目的:研究热激蛋白90(heat shock protein 90,HSP 90)和survivin在人乳腺癌细胞中的相互作用以及对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法:以人乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,用HSP 90抑制剂格尔德霉素(geldanamycin,GA)处理后,Western印迹法检测细胞中P-STAT3、survivin蛋白表达的变化;RT-PCR检测survivin mRNA的变化;MTT法检测其对细胞的增殖活性影响;流式细胞术检测凋亡的变化。结果:HSP90抑制剂GA可使人乳腺癌细胞MDA-MB-231中P-STAT3减少、survivin的蛋白表达减少,细胞的增殖活性降低,凋亡增多。结论:在MDA-MB-231细胞中,HSP 90可能通过激活JAK-STAT3信号通路,影响survivin转录表达,共同促进该肿瘤细胞的高增殖、低凋亡的恶性行为。     

mTOR通路及其抑制剂抗肿瘤的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是PI3K/Akt通路的下游分子,可接受生长因子、营养、能量等多种信号,是细胞生长和增殖的关键调节分子.许多肿瘤中存在有编码mTOR信号通路相关蛋白的基因突变,这些蛋白的异常表达可引起mTOR通路的过度激活.目前,以mTOR为治疗靶点成为肿瘤治疗的研究新热点.本文就近年来有关mTOR通路及其抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展作一综述.     

PDK／Akt通路与肿瘤治疗

磷酸肌醇-3激酶／蛋白激酶B（phosphoinositide 3-kinase／protein kinaseB，P13K／Akt）信号通路参与很多重要生物学过程的调控，但其过度激活可导致肿瘤的发生。在正常组织中P13K／Akt信号转导途径处于活化状态，但是该通路如果被过度激活则可通过下调肿瘤抑制蛋白p53、刺激蛋白质合成、抑制细胞凋亡等导致肿瘤细胞的无限增殖，成为肿瘤预后不好的标志，因此抑制该通路的激活有利于肿瘤治疗。目前已发现肿瘤抑制基因PTEN、PHLPP和蛋白磷酸酶2A等均可通过不同的机制抑制该通路的激活。同时，针对该通路的抑制剂作为抗肿瘤药物得到了广泛研究并在临床上取得了预期的进展，如wtPTEN的转基因研究、P13K抑制剂LY294002和渥曼青霉素、PDK-1抑制剂星孢菌素和塞来昔布、Akt抑制剂哌立福新、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）抑制剂西罗莫司等，期望这些抑制剂能达到靶向治疗肿瘤的目的。     

NSCLC患者血清中HSP90α的表达及其临床意义

目的:探讨热休克蛋白90α（HSP90α）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中的表达水平及其临床意义。方法:选取2015年10月至2016年10月期间，在第四军医大学唐都医院胸外科确诊为NSCLC的患者100例为肺癌组。选取同期在我院进行体检的健康成年人40例为对照组。检测并比较两组血清HSP90α表达水平差异；比较不同肿瘤分期(TNM分期)患者的血清HSP90α水平差异；探讨不同TNM分期与血清HSP90α表达水平之间的关系。培养NSCLC A549细胞，检测其分泌至胞外的HSP90α蛋白；使用HSP90α抑制剂处理A549细胞，MTT法检测细胞增殖能力的变化。结果:肺癌组与对照组患者血清HSP90α表达水平比较，差异有统计学意义（P＜0.001）；不同TNM分期患者血清HSP90α表达水平比较，差异有统计学意义（P<0.001）；Spearman秩相关分析显示，TNM分期与血清HSP90α水平呈正相关(r=0.95，P＜0.05)。体外细胞实验证实A549细胞能分泌HSP90α至细胞外，使用HSP90α抑制剂处理后细胞增殖能力明显下降。结论:NSCLC患者血清中HSP90α表达水平较正常人升高，并且与TNM分期呈正相关。血清HSP90α由肺癌细胞分泌入血，检测其水平对肺癌的诊断与治疗有一定的临床参考价值。     

丁酸钠对前列腺癌LNCaP细胞HER-2信号通路的影响

 目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠对前列腺癌LNCaP细胞HER 2信号通路的影响，探讨其抗肿瘤作用的分子机制。方法 四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测药物对肿瘤细胞增殖的影响；hoechst 33342染色观察细胞凋亡的形态学变化，Western blot检测凋亡标志蛋白、HER2/ neu、Phos Akt、Phos Erk等信号蛋白的表达。结果 丁酸钠能够有效抑制LNCaP细胞的增殖并诱导细胞凋亡，半效杀伤剂量（EC50）为5.6mmol/L；药物能够抑制HER 2基因的转录和蛋白的表达，并抑制下游信号通路中MAPK和AKT的活化。结论 丁酸钠能够阻断对前列腺癌细胞生长具有重要作用的HER 2信号通路，从而对肿瘤细胞发挥抑制作用。     

小鼠多亚型热休克蛋白/肽疫苗联合PD-L1免疫检查点抑制剂的抗肿瘤实验研究

  目的  应用小鼠肉瘤组织制备混合多亚型热休克蛋白/肽疫苗（mHSP/P），联合程序性死亡配体（PD-L1）抑制剂治疗小鼠肉瘤。  方法  免疫组织化学染色和Elisa蛋白定量鉴定肉瘤细胞MCA207中的热休克蛋白（HSP70、HSP90、Grp94）的表达。制备蛋白悬液，通过蛋白层析技术获取mHSP/P和Grp94/肽肉瘤疫苗（Grp94/P），以Western blot（WB）鉴定。流式细胞术测定细胞毒性作用。Elisa实验测定mHSP/P和Grp94/P刺激产生的干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）。小鼠实验探究肉瘤疫苗对肉瘤生长以及小鼠生存状况的影响。免疫荧光染色MCA207肉瘤细胞表面PD-L1的表达，WB测定IFN-γ对PD-L1表达的影响。动物实验探究PD-L1抑制剂联合mHSP/P对肿瘤的影响。  结果  肿瘤组织携带多种亚型的HSP（HSP70、HSP90、Grp94）；成功制备肉瘤组织来源的mHSP/P和Grp94/P，Western blot对肿瘤疫苗鉴定并且流式细胞学测定未发现细胞毒性；制备的mHSP/P较Grp94/P刺激产生更多的IFN-γ和TNF-α细胞因子（P < 0.05）。肉瘤细胞表面PD-L1的表达随着IFN-γ的介入而增高；动物实验显示PD-L1抑制剂联合mHSP/P提高了免疫反应的抗肿瘤作用（P < 0.05）。  结论  肿瘤来源的mHSP/P和Grp94/P可以作为肿瘤疫苗在动物实验中使用。mHSP/P比Grp94/P能诱发更强的抗肿瘤免疫反应。IFN-γ刺激肉瘤细胞PD-L1的表达而导致免疫逃逸。PD-L1抑制剂联合mHSP/P提高了抗肿瘤作用。      

PI3K/AKT/mTOR信号通路在Burkitt淋巴瘤中的研究进展

 Burkitt淋巴瘤是一种高度侵袭性的非霍奇金淋巴瘤，是人类生长最快的肿瘤。根据流行病学及miRNA不同，分为地方型、散发型与免疫缺陷相关型。该病主要发生在儿童及青少年，少数发生于成年人。经短期、强效化疗后疗效显著，但成年、晚期、耐药的患者预后较差。PI3K/AKT/mTOR信号通路在细胞的生长、分化、代谢、生存以及增殖等方面发挥重要作用，研究发现，该信号通路在Burkitt淋巴瘤中呈激活状态，且针对该通路的抑制剂对Burkitt淋巴瘤细胞有抑制作用。通过对该信号通路与PTEN、c-Myc、自噬在Burkitt淋巴瘤中作用及相互关系的研究，了解其发病机制，设计该通路抑制剂与其他相关通路抑制剂或与单克隆抗体的联合用药，为晚期、耐药的患者寻找精准、高效、低毒的靶向治疗方案。     

热休克蛋白90通过抑制Bid裂解抑制NIH3T3成纤维细胞凋亡

目的探讨热休克蛋白90(heatshockproteins90,HSP90)抑制肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNFα)和放线菌酮(cycloheximide,CHX)诱导的细胞凋亡作用机制。方法采用电穿孔技术建立稳定过表达HSP90的细胞克隆;应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪,观察TNFα/CHX诱导的细胞凋亡及HSP90对细胞凋亡的拮抗作用;应用Westernblotting及免疫沉淀方法,检测HSP90是否直接作用于Bid(BH3interactingdeathag-onist)及HSP90抑制剂格尔德霉素的功能。结果在稳定过表达HSP90的NIH3T3细胞中,HSP90能够抑制TNF-α/CHX诱导的细胞凋亡;HSP90通过直接与Bid结合阻止Bid的裂解来抑制TNF-α/CHX诱导的细胞凋亡;HSP90的特异性抑制剂格尔德霉素可以拮抗HSP90,阻止Bid裂解。结论HSP90的大量存在(即使在生理条件下)不仅通过促进蛋白质的折叠,而且通过阻止Bid的裂解而保持前凋亡因子的惰性状态,使细胞免于凋亡,对细胞稳态的维持发挥重要作用;HSP90抑制剂作为抗肿瘤药物的一个作用机制,可能通过促进Bid从HSP90复合物中释放,进而促进肿瘤细胞凋亡。     

转移性肾细胞癌的靶向治疗

抗血管生成治疗是转移性肾细胞癌的标准治疗。近年来,肿瘤新生血管通路的众多抑制剂纷纷进入临床研究,部分靶向药物取得良好的临床疗效。其他信号通路阻断剂如哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与成纤维生长因子受体通路抑制剂也取得一定的成果。     

ILK与HSP90相互作用对乳腺癌细胞迁移影响及其机制的探讨

目的:研究ILK与HSP90的相关性及其在肿瘤侵袭转移中的作用.方法:免疫共沉淀方法检测ILK与HSP90的相互作用;用反义ILK质粒转染乳腺癌细胞,建立稳定表达反义ILK的细胞系;蛋白质印迹法检测细胞内源性ILK的表达;细胞增殖实验和划痕实验观察细胞增殖和迁移情况;蛋白质印迹法检测E-cadherin、MMP-9以及β-catenin的表达.结果:在IEC18和MA891细胞中均检测到ILK与HSP90α和HSP90β的相互作用;反义ILK在抑制细胞内源性ILK表达的同时促进HSP90β的表达;与对照组细胞相比,反义ILK使MA891细胞生长速度减慢、运动迁移能力下降;其在增加E-cadherin表达的同时抑制MMP-9以及细胞核β-catenin的表达.结论:乳腺癌细胞中存在ILK与HSP90的相互作用,反义ILK通过抑制Wnt/β-catenin信号通路关键分子β-catenin的核积累而抑制乳腺癌细胞迁移.     

miR-214通过PTEN调控AKT信号通路抑制鼻咽癌细胞凋亡CSCD

目的探讨miR-214通过PTEN调控下游AKT信号通路激活对鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法miR-214抑制剂转染鼻咽癌5-8F和6-10B细胞。MTT法评估细胞增殖情况。Annexin-V/PI染色法检测两种鼻咽癌细胞凋亡情况。Western blot和real-time PCR检测miR-214抑制剂对PTEN基因转录和蛋白表达以及对AKT信号通路和凋亡相关蛋白表达水平的影响。检测shRNA沉默PTEN基因转录和蛋白表达后,miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞凋亡影响。结果miR-214抑制剂可抑制鼻咽癌细胞生长,诱导5-8F和6-10B细胞凋亡。miR-214通过靶向3'-UTR区域调控PTEN基因转录和蛋白表达。抑制miR-214可促进PTEN的表达,抑制AKT信号通路激活,进而调控下游细胞周期和凋亡相关蛋白表达。沉默PTEN基因转录和蛋白表达可逆转miR-214抑制剂对鼻咽癌细胞AKT信号通路活性和凋亡的影响。结论miR-214可通过直接靶向PTEN基因转录促进AKT信号通路激活抑制鼻咽癌细胞凋亡。     

PI3K-Akt信号通路阻断在乳腺癌治疗中的作用

分子靶向药物为肿瘤的治疗提供了新的方向。抑制信号通路中一些小分子的活性,从而阻断某些信号的转导,成为肿瘤治疗中的新的策略。在肿瘤的发生、发展过程中,经常伴有P13K信号通路的异常改变。过度激活P13K-Akt信号通路之后,可以引起一系列的反应,包括细胞的生长、增殖和转移,上皮细胞向间叶细胞的转变以及血管的生成。因此,这条信号通路成为人们比较感兴趣的分子治疗的靶标。另外,在一些实验中,过度表达P13K或者Akt,特别是当它们持续活化时,就足以引起细胞的恶性转变,并且能够使细胞产生耐药。当P13K-Akt信号通路被阻断之后,具有高水平Akt的细胞生长就会受到抑制,并且开始凋亡。由于某些肿瘤细胞的存活和生长对P13K-Akt信号通路的依赖,使分子靶向药物能够比较特异的杀死肿瘤细胞。在过去的几年中,人们已经找到了一些此信号通路的抑制剂。我们介绍了P13K-Akt信号通路以及阻断此信号通路在乳腺癌治疗中的应用,重点介绍pAkt和mTOR的分子抑制剂。