转导人TIMP—2基因抑制癌浸润转移的实验研究

目的 外源性人ＴＩＭＰ－２基因在人ＬＡＫ细胞中的表达及其对胃癌浸润转移的抑制作用。方法 通过磷酸钙－ＤＮＡ共沉淀的方法将ＴＩＭＰ－２重组真核表达质粒ｐＬ（ＴＩＭＰ－２）ＳＮ转染兼性包装细胞ＰＡ３１７包装形成病毒颗粒。用病毒液感染人ＬＡＫ细胞,再以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及反向酶谱试验进行表达及活性分析。用转基因ＬＡＫ细胞（ＬＡＫ／ＬＴ）２×１０＾６给胃癌转移模型腹腔内注射。结果 ＴＩ     

白细胞介素-2基因转导人胃癌细胞的实验研究

为研究白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因转导人胃癌细胞的可行性和有效性，用真核表达载体，将人ＩＬ－２ｃＤＮＡ转导入人胃癌细胞株ＳＧＣ－７９０１细胞表达，并观察了基因转导和表达对胃癌细胞体外生长特性和ＬＡＫ细胞的肿瘤杀伤作用的影响，以及基因转导细胞的体内致瘤性。结果表明，人ＩＬ－２ｃＤＮＡ可以转导入人胃癌细胞，并表达有活性的ＩＬ－２，基因转导不改变胃癌细胞的体外生长特性，并能增强ＬＡＫ细胞的肿瘤杀伤作用，降低或消除胃癌细胞的体内致瘤性。本研究结果提示：ＩＬ－２基因转导胃癌细胞可能是防治胃癌的有效方法。     

Linomide抑制胃癌生长和转移的实验研究

探讨Linomide对胃癌生长和转移的作用。方法：将人胃细胞株SGC7901原位种植于裸鼠,制成胃癌模型。在荷瘤鼠饮用水中加入不同剂量的Linomide,于第10周处死动物,测定肿瘤体积并检查胃周淋巴结转移情况。结果：Linomide抑制胃癌生长的作用程度与其剂量有关,160mg/kg的Linomide对胃癌生长抑制作用明显（P＜0．05）;对胃周淋巴结转移的抑制率与对照组比无显著差异（P＞0．05）,但抑制率达到405。结论：Linomide是胃癌生长和转移的一种有效抑制剂,其抗肿瘤作用及机制值进一步研究。     

胃康宁冲剂抑制胃癌生长与转移的实验研究

[目的]研究胃康宁含药血清在体内对胃癌细胞生长和转移的影响。[方法]将人胃癌MGC-803细胞注入祼小鼠腋前皮下,待生长成瘤后取出,将瘤块植入裸鼠胃壁内,建立胃癌原位移植瘤模型。设对照组、胃康宁高剂量组、胃康宁低剂量组,灌胃4周。检测各组原位肿瘤抑瘤率、肝及淋巴结转移情况。[结果]胃康宁高剂量组可明显抑制原位肿瘤的生长,对胃周淋巴结转移有明显抑制作用,对肝脏转移无明显抑制作用。[结论]胃康宁冲剂对胃癌的生长和转移有一定的抑制作用。     

瘤浸润淋巴细胞抑制小鼠肺腺癌转移的研究

采用Ｔ＿（７３９）近交系小鼠进行实验，发现小鼠ＬＡ＿（７９５）肺腺癌实体瘤中的瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）体外经白细胞介素２（ＩＬ＿２）激活，具有明显的抗肿瘤作用。体外杀瘤活性用氚－胸腺嘧啶核苷（￣３Ｈ－ＴｄＲ）释放法测定表明：ＴＩＬ的杀瘤活性明显高于自然杀伤细胞（ＬＡＫ）。体内的抗肿瘤作用主要观察ＴＩＬ抑制自发性肺转移作用。实验１静脉注射或瘤周注射ＴＩＬ的自发性肺转移抑制率分别为７３．５％，７９．９％；实验２的结果与实验１相似，且ＴＩＬ治疗组的自发性肺转移抑制作用强于ＬＡＫ细胞治疗组３倍。     

早期胃癌分型与浸润深度及淋巴转移的关系探讨

本文总结我院１０年来内镜诊断并经手术后病理证实的早期胃癌５３例的内镜及手术病理资料，旨在探讨早期胃癌内镜下分型与浸润深度及淋巴转移的关系，提高内镜对早期胃癌的诊断和癌浸润深度的判断。一、资料和方法：５３例早期胃癌均为我院内镜诊断并经手术病理证实的病例...     

血管生成抑制素抑制胃癌浸润转移的实验研究

实验研究血管生成抑制素抑制胃癌程润转移的作用。方法：以Sepharose亲和层析柱从血浆成分中分离出纤溶酶原，再用弹性蛋白酶酶切，经Sepharose4B．Lysine亲和层析拄分离出血管生成抑制素。以完整组织块裸鼠胃壁内原位种植建立胃癌转移模型．于肿瘤种植当天，结实验动物24μg(t2mg／kg)血管生成抑制素作腹腔内注射．以后每天给以12μg(0．6mg／kg)；以相同剂量的纤溶酶原行腹腔内注射作为对照，相同体积的生理盐水腹腔内注射作为空白对照，治疗共进行3周，肿瘤种植后10周处死动物．测量肿瘤体积，观察转移情况，并用免疫组化法检测肿瘤微血管密度。结果：从血浆成分中分离出的纤溶酶原分子量为94kD．经弹性蛋白酶酶切后分离所得血管生成抑制素有41～43kD和51～53kD两种片段。动物实验表明，血管生成抑制素对胃癌生长及转移有一定的抑制作用，具体为：肿瘤生长抑制了540％．腹膜转移抑制了55．6％，肝转移抑制了61．9％：纤溶酶原对胃癌生长及浸润转移均无作用，结论：血管生成抑制素可从血浆成分中分离出。血管生成抑制素对胃癌生长及转移具有一定的抑制作用。     

TIMP-1和TIMP-2在原发性肝癌生长、浸润及转移中的作用

目的：了解基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitou of metalloproteinase-1，TIMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)mRNA及相关抗原在肝癌组织中的定位和表达状态，探讨TIMP-1和TIMP-2在肝癌组织生长、浸润及转移中所起的作用。方法：以TIMP-1和TIMP-2探针及单克隆抗体（McAb）为试剂，采用原位杂交技术及免疫组织化学法检测原发性肝癌、肝高分化腺癌的肝组织中TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原的表达，并与10例正常肝组织做对照。结果：20例原发性肝癌患者的肝组织中TIMP-1和TIMP-1mRNA及相关抗原表达的阳性率为90%;9例肝高分化腺癌的腺癌组织中无TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原的表达；10例正常肝组织中TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原表达均为阴性；TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原阳性信号呈现为棕黄色颗粒状，分布在肝细胞浆内，未见细胞核着色；无论是原发性肝癌癌组织还是癌周组织中,TIMP-1的表达强于TIMP-2的表达，癌周组织中TIMP-1和TIMP-2mRNA和相关抗原的表达与肝组织病理改变相关，即肝硬化者表达强，慢性肝炎者表达弱，正常肝组织无表达。结论：原发性肝癌的癌组织中存在TIMP-1和TIMP-2mRNA及相关抗原的表达，其表达强度可能与原发性肝癌的分型有关，它可能通过抑制MMP的活性使ECM降解减少从而阻止癌细胞通过基底膜移出而抑制肝癌细胞向周围浸润及转移。     

早期胃癌浸润转移的研究进展

早期胃癌指癌细胞侵犯深度不超过粘膜下层，而不论其有无淋巴或远处转移。早期胃癌的预后主要和癌细胞浸润深度及有无淋巴转移密切相关。资料统计表明，手术后胃癌患者5年生存率粘膜层癌为100％、粘膜下层癌为90％、固有肌层癌为70％、浆膜层癌为7％～40％，随着现代医学科技的发展和提高患者生存质量的要求，无创或微创治疗渐成     

小干扰RNA沉默bcl-2基因抑制胃癌细胞生长的研究

目的利用RNA干扰技术,研究靶向bcl-2的小干扰RNA(siRNA)在体内外对胃癌细胞生长的影响,探讨其对胃癌治疗的可行性。方法化学合成bcl-2基因的siRNA,脂质体法将bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞,采用实时定量PCR和Western印迹观察bcl-2 siRNA转染前后胃癌细胞bcl-2基因的表达变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、流式细胞检测技术和端粒重复序列扩增法(TRAP)分别检测胃癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性变化。并将转染bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种于裸鼠皮下,观察其在裸鼠体内成瘤及生长情况。结果数据经方差分析,bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,明显抑制bcl-2基因表达,并与其浓度和作用时间相关,以100 nmol/L bcl-2 siRNA对bcl-2基因表达抑制效果最佳。以该浓度的bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,bcl-2 mRNA和蛋白表达抑制分别为79．9%和85．3%；经bcl-2 siRNA作用的SGC 7901细胞生长明显缓于对照组(P＜0．05),细胞凋亡率高于对照组(P＜0．05),端粒酶活性明显低于对照组(P＜0．05)。转染100 nmol/L bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种裸鼠皮下后,肿瘤出现时间晚,体积小．生长受到明显抑制(P＜0．05)。结论靶向bcl-2的siRNA可明显下调靶基因bcl-2的表达,在体内外抑制胃癌SGC 7901细胞的生长,为探索胃癌基因治疗提供新的策略。     

基质金属蛋白酶2表达与胃癌侵袭及转移的关系

基质金属蛋白酶2（MMP-2）在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用。其过度表达与人类多种恶性肿瘤侵袭转移潜能及预后密切相关。MMP-2高度表达的胃癌,其侵袭性和转移性较强,恶性程度较高,患者的预后较差。本文就MMP-2和胃癌侵袭转移的相关性及其作用机制和影响因素作一综述。     

神经导向分子Semaphorin5A在人胃癌侵袭和转移过程中作用的研究

目的 探讨神经轴突导向分子Semaphorin 5A表达与胃癌患者临床病理特征的关系及其在胃癌侵袭和转移过程中的作用.方法 使用免疫组织化学方法检测Semaphorin 5A在171例不同性别、年龄、组织学类型和TNM分期胃癌患者组织中的表达.使用Western印迹方法检测Semaphorin 5A在具转移能力的胃癌细胞株(SGC7901和MKN-45)和无转移能力的胃癌细胞株(SNU-1和AGS)中的表达情况.运用RNA干扰技术构建Semaphorin 5A-siRNA表达载体并转染胃癌细胞株SGC7901,建立Semaphorin 5A稳定低表达的胃癌细胞株,经细胞粘附实验、划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测Semaphorin 5A基因沉默后对胃癌细胞粘附、运动和侵袭的影响.结果 Semaphorin 5A表达水平与胃癌分化程度(x2=6.32,P=0.01)、胃癌淋巴结转移(x2=7.68,P=0.01)和远处转移(x2=13.6,P=0.00)有关,与患者年龄(x2=0.21,P=0.79)、性别(x2=1.79,P=0.15)和胃癌浸润深度无关(x2=1.34,P=0.55).SGC7901和MKN-45细胞株中Semaphorin 5A的表达水平明显高于SNU-1和AGS细胞株(P＜0.01).Semaphorin 5A基因表达沉默可抑制胃癌细胞的粘附、运动和侵袭能力.结论 Semaphorin 5A可能通过提高胃癌细胞粘附、运动和侵袭能力,在胃癌侵袭和转移过程中发挥促进作用.     

血管生成抑制剂抗胃癌微淋巴管生成的实验研究

Objective To evaluate the inhibitory effect of 2-(8-hydroxy-6-methoxy-1-oxo-1-H-2-benzopyran-3-Y1) propionic acid (NM-3) on lymphangiogenesis in gastric cancer using orthotopic implantated tumor models of BALB/C nude mice. Methods A BALB/C nude mouse model of transplanted in situ human gastric cancer was established. Twenty-eight nude mice were divided into four groups with 7 each: control group, NM-3 treated group, carboplatin (10 mg/kg) treated group,and NM-3 combiantion group injected with normal saline, 5 mg/kg of NM-3, 10 mg/kg of carboplatin or 5 mg/kg of NM-3, + 10 mg/kg carboplatin, respectively, twice a week for 8 weeks. At the end of the 8th week, all mice were sacrificed for detection of lymphatic microvessel density (LMVD),lymphatic vessel endothelial hyaluranic acid receptor 1 (LYVE-1), podoplanin and Prox-1 byimmunohistochemistry with staining. Results In comparison with control group, the LYVE-1 level in other three groups was decreased with no significant difference (P＞ 0.05). The concentrations of podoplanin and Prox-1 in NM-3 group and combination group decreased significantly than those in control group and carboplatin group (P ＜ 0.05). The number of LMVD in NM-3 group and combination group was 4.72±0.50 and 4.78± 0.38, respectively, which was significantly lower than that in control group (7.35±0.55)and carboplatin group (6.98i0.35, P＜0.05). Conclusion The NM-3 can inhibit the growth of gastric cancer by interfering lymphangiogenesis of gastric cancer.     

血管生成抑制剂抗胃癌微淋巴管生成的实验研究

Objective To evaluate the inhibitory effect of 2-(8-hydroxy-6-methoxy-1-oxo-1-H-2-benzopyran-3-Y1) propionic acid (NM-3) on lymphangiogenesis in gastric cancer using orthotopic implantated tumor models of BALB/C nude mice. Methods A BALB/C nude mouse model of transplanted in situ human gastric cancer was established. Twenty-eight nude mice were divided into four groups with 7 each: control group, NM-3 treated group, carboplatin (10 mg/kg) treated group,and NM-3 combiantion group injected with normal saline, 5 mg/kg of NM-3, 10 mg/kg of carboplatin or 5 mg/kg of NM-3, + 10 mg/kg carboplatin, respectively, twice a week for 8 weeks. At the end of the 8th week, all mice were sacrificed for detection of lymphatic microvessel density (LMVD),lymphatic vessel endothelial hyaluranic acid receptor 1 (LYVE-1), podoplanin and Prox-1 byimmunohistochemistry with staining. Results In comparison with control group, the LYVE-1 level in other three groups was decreased with no significant difference (P＞ 0.05). The concentrations of podoplanin and Prox-1 in NM-3 group and combination group decreased significantly than those in control group and carboplatin group (P ＜ 0.05). The number of LMVD in NM-3 group and combination group was 4.72±0.50 and 4.78± 0.38, respectively, which was significantly lower than that in control group (7.35±0.55)and carboplatin group (6.98i0.35, P＜0.05). Conclusion The NM-3 can inhibit the growth of gastric cancer by interfering lymphangiogenesis of gastric cancer.