RT-PCR多药耐药基因(mdr 1)检测方法及应用

检测白血病或肿瘤细胞我药耐药基因（ｍｄｒ１）有多种方法，其中以ＲＴ－ＰＣＲ法相对更灵敏、简单和特异。目前国内多用β２－微球蛋白为内参照，以ｍｄｒ１／βＭＧ幽会进行相对定量。现已Ψ２ＭＧ可受肿瘤影响，本文以细胞高表达的组织蛋白人参照，建立了ＲＴ－ＰＣＲｍｄｒ１基因表达方法，并对临床１０例标本进行检测。本文探讨了内参照应用的价值，存在的总理２以及临床的意义。     

多药抗药基因mdr1探针的基因克隆

多药抗药基因的表达水平与细胞的耐药性直接相关，检测ＭＤＲ１的表达水平可预测化疗的效果以及预后，用分子原位杂交的方法可检测单个细胞中ＭＤＲ１的表达水平。采用ＰＣＲ扩增方法获得了一段特异的ＤＮＡ片段，并将其克隆到ｐＵＣ１８载体中，经ＤＮＡ序列分析证明与文献一致。此探针可用于临床标本的分子杂交检测。     

人类多药耐药基因转录调控研究进展

多药耐药(MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一，而人类多药耐药基因(hmdrl)及其编码产物P—糖蛋白(P—gp)的超表达，是引起MDR表型的主要原因。研究表明P—gp的超表达主要在转录水平上进行调控。最近的研究主要集中在明显hmdrl启动子中新的未了解区域以及相应的信号传导通路。这些研究为了解MDR的机制提供了新思路。故就hmdrl的调控研究进展做一综述。     

三种结核分枝杆菌耐药基因检测的临床应用和评价

采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）检测结核分枝杆菌耐药基因（rPOB、katG和rPSL），评估它的临床应用价值。通过Bactec-960快速培养、PCR－SSCP和药物敏感试验了解123例肺结核病人结核分枝杆菌耐药情况，分析了临床治疗效果。近1／3的初治肺结核病人至少耐一种抗结核药物，RFP、INH和SM敏感株SM敏感株rPOB、katG和rPSL基因突变率分别为6．2％、10．8％和25．4％，耐药株基因突变率分别为60．2％、48．0％和61．5％，耐药基因突变率随着耐药浓度增高而增高。药敏试验联合耐药基因检测指导治疗效果满意。耐药基因检测指导治疗是一种新探索，与药敏试验联合应用可互相弥补，有可能成为临床指导用药的较好方法。     

中药逆转白血病多药耐药的研究

多药耐药是白血病化疗失败的主要原因,如何逆转是一重要课题,本文从多药耐药的机制出发,阐述了中药逆转白血病多药耐药的研究现状及进展.     

多药耐药基因的检测在急性白血病中的诊疗价值

白血药化疗失败的主要原因是肿瘤细胞对化疗物产生的多药耐药性，这种耐药性主要是由于多药耐药基因的过度表达所致。目前的研究结果表明，ＭＤＲ１基因的表达对临床白血病的治疗疗效有明显的相关性。本文通过对近年来国内外发表的ＭＤＲ１基因表达在临床方面有代表性的论文进行总结，以便进一步探讨ＭＤＲ１表达的检测对急性白血病患者疗效及预后判定的价值。另外，本文还对目前ＭＤＲ１逆围剂研究究及临床应用现代进行了综述，并提     

肿瘤多药耐药(MDR)的研究

２０世纪以来，人类疾病谱发生了重大变化，恶性肿瘤已成为威胁人类健康和生命的严重常见病。我国近２０年恶性肿瘤死亡率变化趋势和预测研究说明［１］，中国城乡恶性肿瘤死亡率均呈明显上升趋势，城市上升了２２．６３％，乡村上升了３２．１５％。因此，除积极预防肿瘤...     

多药抗药基因mdrl探针的基因克隆

多药抗药基因（ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｔｇｅｎｅ，ｍｄｒｌ）的表达水平与细胞的耐药性直接相关，检测ＭＤＲ１的表达水平可预测化疗的效果以及预后。用分子原位杂交的方法可检测单个细胞中ＭＤＲ１的表达水平。采用ＰＣＫ扩增方法获得了一段特异的ＤＮＡ片段，并将其克隆到ｐＵＣ１８载体中，经ＤＮＡ序列分析证明与文献一致。此探针可用于临床标本的分子杂交检测。     

急性白血病与肿瘤细胞多药耐药研究现状

急性白血病与肿瘤细胞多药耐药研究现状第四军医大学全军基因诊断技术研究所许昌泰综述许平①审校（西安７１００３２）关键词白血病急性多药耐药１前言急性白血病化疗失败之重要原因是细胞多药耐药（Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ）的产生。ＭＤＲ是指...     

肿瘤细胞MDR1基因多药耐药的研究进展

MDR1基因的过度表达是肿瘤细胞多药耐药的主要原因。作为肿瘤细胞多药耐药性基因重要的表达产物,MDR1与细胞内药物浓度及耐药程度密切相关。通过对多药耐药基因表达的检测及对耐药性逆转药物的研究,临床医师根据患者的基因型资料制定肿瘤化疗方案,选择合适的药物,达到减少耐药性,提高临床疗效的目的。     

聚合酶链反应(PCR)检测水中钩体DNA方法的建立和初步应用

目的:为了建立一个检测水中钩体DNA的技术方法。方法:本研究采用了根据1993年C.Gravekamp设计的引物G_1G_2序列自行合成的引物G_1G_2建立了检测致病钩体DNA的PCR方法。运用此方法并结合“优筛法”对采自云南河口、蒙自等地区108份水样进行检测,并与分离培养后经中国药品生物制品检定所鉴定结果进行了比较。结果:两组方法检测所有水样呈阴性,其精确度和一致性达100％,但分离培养方法漏检率为8.3％(9/108)。结论:建立了PCR检测水中钩体DNA方法。此方法简单、快速、准确,适用于一般实验室及大规模水样钩体DNA的检测,值得推广应用。     

PPMP调控KBv_(200)细胞株mdr1基因表达逆转其多药耐药

为研究糖脂合成酶抑制剂苯基棕榈酰胺吗啡丙醇 (DL threo 1 phenyl 2 palmitoylamino 3 morpholi no 1 propanol·HCl,PPMP)对人恶性肿瘤多药耐药细胞株KBv2 0 0 多药耐药mdr1基因的mRNA表达的调控 ,以及PPMP对细胞株KBv2 0 0 的多药耐药性的逆转作用 ,作者应用体外细胞培养技术对细胞株KBv2 0 0 进行PPMP处理 ,用RT PCR技术分析PPMP处理前后细胞mdr1的mRNA表达 ,以流式细胞仪检测PPMP处理前后KBv2 0 0 及其敏感株KB细胞内罗丹明 12 3的药物浓度变化。结果显示 5 μmol/L、15 μmol/LPPMP可部分抑制KBv2 0 0 细胞mdr1mRNA表达 ,2 5 μmol/LPPMP可完全抑制KBv2 0 0 细胞mdr1mRNA表达 ;PPMP可增加KBv2 0 0 细胞内罗丹明荧光强度 ,随着PPMP浓度的增加 ,耐药细胞内的罗丹明荧光强度逐渐增大。提示PPMP对细胞株KBv2 0 0 的多药耐药基因mdr1有抑制作用 ,并可以逆转KBv2 0 0 的多药耐药性 ,逆转作用与PPMP浓度呈正相关     

PPMP调控KBv200细胞株mdr1基因表达逆转其多药耐药

为研究糖脂合成酶抑制剂苯基棕榈酰胺吗啡丙醇（DL-threo-1-phenyl-2-palmitoylamino-3-morpholino-1-propanol     

99Tcm-MIBI显像对肿瘤多药耐药检测的应用

MDR(多药耐药)是目前肿瘤化疗失败的主要原因,对MDR的检测可以帮助化疗决策的制定,从而使肿瘤患者得到更有效的治疗。99Tcm-MIBI(99Tcm-甲氧基异丁基异腈)是mdr1基因编码的P-gp(P-糖蛋白)和MRP(多药耐药相关蛋白)的转运底物,肿瘤细胞内99Tcm-MIBI摄取减低表明其P-gp的高表达,并与MRP的表达相关。因此,99Tcm-MIBI显像可在治疗前预测对化疗的反应,并为选择更有效的化疗策略提供依据。99m     

辐射促进多药耐药反义寡核苷酸逆转耐药的实验研究

目的探讨辐射促转染的多药耐药基因（mdr1）反义寡核苷酸（ASON）逆转肿瘤细胞KBv200的耐药效果。方法应用MTT法比较脂质体介导的ASON直接转染与联合辐射转染的情况下KBv200细胞对长春新碱（VCR）的半数抑制量（IC50），再利用RT-PCR方法和流式细胞仪检测两种不同的转染方法对KBv200细胞的mdr1-mRNA及其表达产物P-糖蛋白（P-gp）的调控情况。采用耐药细胞株KBv200移植于裸鼠皮下，肿瘤局部2Gy^60Coγ射线照射后1h，瘤内注射脂质体介导的mdr1ASON，经VCR联合化疗。结果联合照射的ASON组明显优于未照射组（P〈0．05）。KBv200细胞的IC50、mdr1-mRNA的表达水平及P-gp的阳性率，均明显低于未照射组（P〈0．05）。联合照射组与未照射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有统计学意义（P〈0．01）。结论辐射促转染的mdr1 ASON对肿瘤细胞具有较强的耐药逆转作用。     

庚型肝炎病毒(HGV RNA)基因的定量检测

目的 :建立庚型肝炎病毒基因 (HGVRNA)的定量检测方法。方法 :采用荧光转换原理 ,应用特异荧光物质标记的引物进行逆转录PCR(RT_PCR) ,检测 4 1例临床血清标本的HGVRNA。结果 :与巢式定性PCR结果比较 ,两者具有相关显著性。以定量实验为标准定性实验的阳性漏检率为 3.33% ,阴性漏检率为 18.1% ,两者相对符合率为 92 .6 8%。结论 :定量检测HGVRNA在定性的基础上提供了量的结果 ,而且具有特异性强、结果稳定、操作简便等特点     

134例结核杆菌5种耐药基因的检测

应用聚合酶链反应－单链构象多态性（PCR－SSCP）方法分析134例临床分离株的5种结核杆菌（MT）耐药基因突变情况。结果表明，耐吡嗪酰胺（PZA）pncA基因，耐链霉素（SM）rpsL基因，耐利福平（REP）rpoB基因，耐异烟肼（INH）katG基因，耐乙胺丁醇（EMB）embB基因的突变率分别为42．7％，71．7％，78．9％，68．6％，43．9％。证实MT存在多种耐药基因突变的情况。但MT药敏实验与5种耐药基因突变率并不一致，说明MT的耐药除基因突变外，尚有其他影响因素存在。     

多药耐药相关基因在胃癌的表达

检测从未接受过化疗瓣胃癌病人胃癌组织及癌旁组织的酸性谷胱甘肽S－转移酶（GST－π）基因、多药耐药相关蛋白（MRP）基因、肺耐药蛋白（LRP）基因和多药耐药基因1（MDR1）。使用半定量逆转录聚合链酶反应（RT－PCR）方法。结果显示,在胃癌组织中,GST－π、MRP、LRP和MDR1表达阳性率分别为36.00%、12.00%、10.00%和10.00%,无显著高于癌旁组织中的表达,表达的总阳性率达46.00％。说明上述4种基因在未化疗过的胃癌组织中均有不同程度的高表达;但它们之间无共表达。近半数的胃癌病人可能存在固有性耐药。     

洛菲不动杆菌株多药耐药NDM-1基因的鉴定

目的检测并鉴定洛菲不动杆菌多药耐药菌株中新德里金属β内酰胺酶新德里金属β-内酰胺酶(new delhi metallo-β-lactamase,NDM)-1基因表达。方法抗菌药物最小抑菌浓度(minimal inhibitory,MIC)筛选多药耐药菌株,PCR方法鉴定候选菌株中金属β-内酰胺酶基因,经PCR测序、亚胺培南和亚胺培南+EDTA复合纸片的双纸片协同法鉴定金属β内酰胺酶表型,并采取接合实验和全基因组测序来确定NDM-1。结果自458株金属β-内酰胺酶阳性菌株中分离出一株洛菲不动杆菌,并检出NDM-1基因,此菌株并不合并存在VIM和IMP金属β-内酰胺酶基因阳性表达。该菌株对所有的β-内酰胺类抗生素均不敏感,而对阿米卡星、多粘菌素、替加环素敏感。全基因组测序确定其位于一个48.9 kb的质粒上,目标带纯化后克隆、扩增的目标序列与文献报道的NDM-1基因同源性为100%。结论 NDM-1是一种针对碳青霉烯类抗生素耐药的新机制,临床工作者应关注其对洛菲不动杆菌多药耐药的影响。     

^99Tc^m—MIBI显像对肿瘤多药耐药检测的应用

MDR（多药耐药）是目前肿瘤化疗失败的主要原因，对MDR的检测可以帮助化疗决策的制定，从而使肿瘤患得到更有效的治疗，^99Tc^m-MIBI^99Tc^m-甲氧基异丁基甲腈）是mdr1基因编码的P-gp(P-糖蛋白）和MRP（多药耐药相关蛋白）的转运底物，肿瘤细胞内^99Tc^m-MIBI摄取减低表明其P-gp的高表达，并与MRP的表达相关，因此，^99Tc^m-MIBI显像可在治疗前预测对化疗的反应，并为选择更有效的化疗策略提供依据。