输尿管支架材料己内酯/丙交脂共聚物的体外实验研究

目的 评价输尿管支架生物降解材料己内酯/丙交酯共聚物(PCL/PLA)(PCLA)(30∶70)在体外的降解及临床应用.方法 PCLA试样24个,随机分成3组,每组8个,分别浸于pH值为4、6、8的浸泡液中,将所有试管置于37℃恒温水浴箱中,浸泡液每日更换1次,分别于2、4、6、8 w时各取出3种浸泡液中的各2个试样.对试件进行质量、分子量的测量及扫描电镜观察.结果 在pH值为8时其降解率最高,重量损失最为明显,pH值为6时居中,pH值为4时降解率最小,重量损失相对于前两者少.结论 此种共聚物的降解为无规本体水解过程.可适度调节共聚物的比例和降低共聚物的分子量,以达到临床工作需要.     

输尿管支架降解材料的筛选

目的 评价可生物降解输尿管支架材料己内酯/环氧乙烷(PCL-EO)共聚物在体外环境中的降解、临床应用和材料的毒性.方法 PCL-EO试样24个,随机分成3组,每组8个,分别浸于pH值为4,6,8的浸泡液中,将所有试管置于37℃恒温水浴箱中,浸泡液每日更换1次,分别于2,4,6和8 w时各取出3种浸泡液中的各2个试样,对试件进行质量、分子量的测量及扫描电镜观察,进行细胞生长抑制试验.结果 (1)PCI-EO降解初期,前6 w分子量下降迅速,随后趋缓,重量的损失滞后于分子量的损失,此种共聚物的降解为无规则本体水解过程.(2)PCL-EO降解吸收时间延长,可用做长期植入材料使用.通过共聚的方法,可调控试样的生物降解规律及周期.(3)材料的细胞毒性为2级.结论 PCL-EO是临床中有希望的输尿管替代材料.     

可生物降解输尿管支架材料体内降解行为的研究

目的 评价可生物降解输尿管支架材料己内酯/丙内酯共聚物1：2（FClA）的降解性能.方法 共20个试件分5组随机植入健康成年SD大鼠脊柱两侧肌肉中,手术后2、4、6、8、12 w取出.结果 对试件进行质量、分子量的测量及扫描电镜观察.结论 PClA降解吸收时间延长,不适宜做为输尿管支架材料使用,可适度调节共聚物的比例和降低共聚物的分子量,以期达到临床工作需要.     

担载丝裂霉素C纳米纤维体内降解机制

目的探讨担载丝裂霉素C纳米纤维-丙交酯己内酯共聚物PLCL(LA/CL 80:20)的体内降解机制。方法 96枚PLCL试样随机分成5个时间组,分别植入大鼠脊柱肌肉中,在2、4、6、8、12 w取出材料及外周组织。测量试件电镜下微观形态、质量及生物降解率变化。结果 (1)载药剂型电镜下微观形态表现为材料孔隙增多,结构疏松化,出现断层,已完全失去材料连续性。(2)载药剂型分子量随聚合物酯键断裂,数值迅速下降,表现为生物降解率增高,随后趋缓。(3)载药剂型经过12 w的降解,有失重情况,明显失重发生在6～12 w之间。结论通过共聚的方法,可调控新药物剂型的降解周期及生物降解规律,载药剂型经过12 w的降解,电镜下微观形态降解破坏明显。     

己内酯/环氧乙烷共聚物降解行为及生物相容性

目的 研究己内酯/环氧乙烷共聚物(PCL-EO)在体内的降解规律和组织相容性,并对降解性输尿管支架材料的用途进行探讨.方法 20枚PCL-EO试样及20只大鼠分别随机分成5个时间组.实验动物麻醉后,于无菌条件下将消毒后的PCL-EO植入大鼠脊柱肌肉中.分别在2、4、6、8、12 w取出材料及周围组织.测量试件质量、分子量观察大体和微观形态变化.大鼠16只,分成4个时间组,PCL-EO植入大鼠脊柱肌肉中,于2、4、8、12 w,取出植入材料及周围的组织块,用组织学方法分析生物相容性.结果 ①PCL-EO在降解初期分子量下降迅速,随后趋缓,重量的损失滞后于分子量的损失,此种共聚物的降解为无规本体水解过程.②植入2 w时可见局部组织水肿,炎细胞浸润;4 w后,炎细胞数量减少,新生毛细血管形成.结论 PCL-EO 降解缓慢,吸收时间较长,埋植初期组织有炎性反应,此后,炎性反应减轻.PCL-EO适宜用作长期植入输尿管支架材料.     

丝裂霉素纳米纤维对膀胱移形细胞癌T24细胞凋亡的影响

目的探讨以生物降解高分子材料为载体制备的新剂型———担载丝裂霉素纳米纤维-丙交酯己内酯共聚物PLCL(LA/CL 80∶20)对膀胱移形细胞癌T24细胞凋亡的影响。方法采用荧光显微镜观察不同质量的载药纤维对T24细胞产生凋亡的细胞形态学变化;采用流式细胞仪(PI和Annexin V双染法)检测载药纤维对T24细胞凋亡的影响。结果 (1)经不同质量担载丝裂霉素纳米纤维处理48 h后,细胞变圆变小,细胞膜模糊,染色质浓缩并分裂成块状,并出现多个凋亡小体。(2)AnnexinⅤ/PI双染法结果显示,随着剂量的递增,早期凋亡和晚期凋亡的细胞比例逐渐增加,显示出剂量依赖性。结论载药纤维作用于T24细胞后以剂量依赖的方式显著地诱导细胞凋亡。     

担载丝裂霉素纳米纤维的药物释放

目的探讨以高分子材料丙交酯己内酯共聚物PLCL(LA/CL 80∶20)为载体制备的担载丝裂霉素C纳米纤维的药物释放规律。方法光学显微镜和电子显微镜下进行载药纳米纤维的理化性质评价;利用PBS为稀释液,制备不同浓度丝裂霉素溶液,酶标仪于363 nm处读取OD值,根据所得OD值与其对应的浓度制作丝裂霉素标准品的标准曲线,以此曲线测量不同质量载药纳米纤维在PBS中的药物释放率。结果 (1)微观表现为纤维呈连续直线状,无卷曲,粗细较均匀,表面光滑,无药物积聚,成均一网格状。(2)载药纳米纤维在PBS中可缓慢释放,于第5天达到最大释放浓度,其后维持不变,不同质量的纳米纤维释载药率约为10%左右。结论担载丝裂霉素C纳米纤维PLCL(LA/CL 80∶20)理化性质稳定,载药均匀。担载丝裂霉素纳米纤维可实现低浓度释放且维持时间延长,符合化疗药物抑制肿瘤的试验要求。     

生物降解乙交酯与丙交酯共聚物缓释中药大黄蛰虫栓的生物相容性研究

目的探讨生物可降解乙交酯与丙交酯共聚物（PLGA）与中药混合栓剂的生物相溶性。方法通过大鼠腿部肌肉埋植实验,观察高分子缓释中药栓植入剂在局部肌肉组织的变化,初步评价高分子生物可降解缓释中药栓的生物相容性。结果药栓植入肌肉组织内可引起局部肌肉组织轻微的无菌性炎症,栓剂周围有纤维组织包裹厚度（〈30μm）,药栓植入24w后完全降解。结论PLGA聚合物作为药物缓释载体,控制药物释放速度,待药物在机体内释放后,载体可被生物降解成水和二氧化碳,具有良好的生物相溶性。     

鼠骨髓间充质干细胞诱导的成骨细胞与3-羟基丁酸/3-羟基己酸共聚物的体外相容性

目的探讨SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导的成骨细胞与3-羟基丁酸/3-羟基己酸共聚物(PHBHHx)支架材料的体外相容性,进一步验证PHBHHx材料作为骨组织工程支架材料的可行性。方法将SD大鼠BMSCs诱导的成骨细胞与PHBHHx支架材料体外复合培养,通过扫描电镜观察细胞与材料的复合情况,用MTT法检测材料对细胞增殖的影响。结果成骨细胞在PHBHHx支架材料表面及孔隙中能较好地黏附和增殖。结论 PHBHHx与成骨细胞有良好的体外相容性,是一种性能优良的骨组织工程支架材料。     

几丁聚糖在外周神经功能重建中的作用

神经损伤是老年患者常见疾病,往往导致患者感觉功能障碍和活动受限,甚至丧失劳动能力.因此,提高神经修复重建速度、加速组织再生、促进功能恢复,是老年医学研究的重要课题[1,2].本研究应用抗炎、促进生长的天然高分子几丁聚糖与可吸收的己内酯/丙交酯(PLCL)复合薄膜为引导神经再生的中空管道,桥接神经两断端,神经元即可通过管腔再生,达到受损组织修复的目的.     

局部释放肝素的生物降解性支架的初步实验研究

目的探讨携带肝素的生物降解性支架预防再狭窄的作用。方法应用已内酯和混旋丙交酯共聚物制成支架，并携带肝素，植入７只小型猪的颈动脉，观察不同时间的造影及病理改变。结果６只植入成功。植入成功者，１只因颈动脉破裂、支架内血栓形成死亡。３只动物分别于１个月（ｎ＝２）和２个月（ｎ＝１）处死，造影均未发现狭窄，光镜下仅见轻度内膜增生，扫描电镜观察支架表面已完全内皮化。２个月处死的另外２只动物造影显示狭窄，光镜下可见明显的平滑肌细胞增生。所有动物未见明显的异物反应。结论这种生物降解性支架，同时作为局部释放肝素的装置，可成功地植入颈动脉，对于其预防再狭窄的价值有待于进一步研究     

内皮祖细胞CD34抗体包被冠脉支架对猪冠状动脉再狭窄影响的研究

目的 探讨生物可降解高分子载内皮祖细胞CD34抗体支架是否可降低猪冠状动脉支架置入术后再狭窄.方法 以生物可降解高分子聚乙二醇-聚乳酸-聚谷氨酸共聚物为载体,应用N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫)-丙酸酯(SPDP)方法制成内皮祖细胞CD34抗体洗脱支架.18只猪随机分为三组,即紫杉醇支架组、CD34抗体支架组、裸支架组,每组6只,将紫杉醇支架、CD34抗体支架、裸支架分别植入到各组猪的冠状动脉损伤段,4 w后处死,取出支架段血管行病理学观察及计算机图像分析血管管腔面积、内膜增生面积以及面积狭窄百分比.结果 CD34抗体支架组内膜增生面积较裸支架组减低(P＜0.05),紫杉醇支架组内膜增生面积较裸支架组也减低(P＜0.05),但较CD34抗体支架组无明显差别(P＞0.05).结论 生物可降解高分子载内皮祖细胞CD34抗体支架可明显加速支架置入术后血管内皮修复,降低再狭窄的发生.     

小白菊内酯对膝骨性关节炎兔模型血清及关节液肿瘤坏死因子-α和白介素-1β水平的影响

目的 通过观察小白菊内酯对兔膝骨性关节炎(OA)模型血清及关节液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β水平的影响,探讨其治疗OA的作用机制.方法 健康纯种新西兰兔32只,随机8只为正常组,其余的24只采用右后肢伸直位管型石膏固定法,建立OA模型.造模后随机分为3组:模型组、小白菊内酯组、盐酸氨基葡萄糖组,每组8只.小白菊内酯组兔予小白菊内酯灌胃,盐酸氨基葡萄糖组予盐酸氨基葡萄糖灌胃,其余两组予生理盐水灌胃,连续治疗6w后,测定各组兔治疗前后血清、膝关节液TNF-α、IL-1β表达水平.结果 小白菊内酯组、盐酸氨基葡萄糖组关节液及血清中的TNF-α、IL-1β浓度均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),且小白菊内酯组降低幅度明显大于盐酸氨基葡萄糖组(P＜0.05).结论 小白菊内酯可能通过抑制TNF-α、IL-1β的分泌而产生免疫调节作用,其抗炎疗效优于盐酸氨基葡萄糖.     

一种新型可降解聚合物涂层-雷帕霉素洗脱支架对猪冠状动脉新生内膜增生的影响

目的:评价可降解高分子材料聚丙交酯-乙交酯(PLGA)作为支架药物载体的可行性及携带雷帕霉素的PLGA涂层支架的抗内膜增生作用。方法:在14头微型猪的3支冠状动脉分别植入钴铬合金裸支架(CoCr-BMS)、不载药的PLGA涂层支架(PCOS)和PLGA涂层雷帕霉素洗脱支架(PLGA-SES)。分别在支架植入后1个月和3个月时,复查冠状动脉造影,然后分离支架段血管行组织病理学分析。结果:共有12头动物存活,其余2头动物可能因麻醉剂相关的呼吸抑制而死亡。支架植入后1个月和3个月,不载药的PLGA涂层支架新生内膜面积和晚期管腔丢失与CoCr-BMS组相近,而PLGA-SES组则明显低于CoCr-BMS组。组织形态学示3组支架段血管损伤积分、炎症积分及再内皮化积分差异无统计学意义。结论:在猪冠状动脉支架模型中,PLGA涂层的支架设计具有良好的生物相容性和安全性;携带雷帕霉素的这种支架可抑制新生内膜形成,预防支架再狭窄的发生。     

控释双生长因子海藻酸钠水凝胶载体的制备及检测

目的 制备控释双生长因子海藻酸钠水凝胶载体,并检测其理化性能.方法 采用氧化及钴60辐照对海藻酸钠进行修饰,制备控释双生长因子海藻酸钠水凝胶载体.将无针注射器中海藻酸钠水凝胶打入24孔培养板中,通过测定水凝胶的干重损失检测控释双生长因子海藻酸钠水凝胶的体外降解.用无针注射器于18只兔心肌组织喷射100 μl双生长因子海藻酸钠水凝胶,分别于各时间点取心肌组织,进行HE染色,观察海藻酸钠水凝胶的体内降解情况.采用MTT法进行控释双生长因子海藻酸钠水凝胶的细胞毒性分析.结果 体外降解实验中,控释双生长因子海藻酸钠水凝胶显示了相对较快地降解,第1周大约降解50%,3 w后几乎降解完全.体内降解实验显示,心肌组织中控释双生长因子海藻酸钠水凝胶逐渐减少,5 w后,在心肌组织中几乎没有观察到水凝胶的片段.控释双生长因子海藻酸钠水凝胶对细胞活性无明显影响.结论 成功制备了控释双生长因子海藻酸钠水凝胶载体,具有较好的降解性能及安全性,它可以作为具有控制释放生长因子能力的生物载体材料,为后续实验提供基础.     

贵州苗药刺梨调控SIRT1-TGFβ/Smads信号途径延缓肾纤维化的机制

目的 探讨苗药刺梨延缓单侧输尿管、结扎术(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的作用机制.方法 将50只SPF级雄性SD大鼠,适应性喂养1 w后,随机分为假手术组和手术组;手术组行UUO,假手术组只行输尿管分离,但不结扎.术后第2天,手术组随机分为模型组、SIRT1激动剂组、刺梨中剂量组、氯沙坦钾组,每组10只.各组于分组当天参照马氏定理设定干预剂量.氯沙坦组给予氯沙坦10 mg/(kg·d),浓度为20%;刺梨中剂量给予刺梨冻干粉3 g/(kg·d),浓度为3%;SIRT1激动剂组给予白藜芦醇25 mg/d.模型组和假手术组均同时给予同等容积无菌生理盐水灌胃.实验大鼠均每天干预1次,连续干预14 d后处死大鼠.取大鼠肾组织做苏木素-伊红(HE)、Masson染色以观察其病理变化;免疫组织化学法测定Western印迹检测肾组织转化生长因子(TGF)-β1、TGF-βⅠ型受体(TGF-βRⅠ)、Smad2、Smad3、Smad7的表达;用RT-PCR技术检测TGF-β1 mRNA、TGF-βRⅠmRNA、Smads2、Smad3、Smad7 mRNA的表达.结果 与假手术组比较,模型组病理损伤程度显著增加,丙二醛(MDA)含量增加、超氧化物歧化酶(SOD)含量降低(P<0.01),TGF-β1、TGF-βRⅠ的表达水平明显增加(P<0.05).与模型组比较各治疗组病理损伤减轻,TGF-β1、TGF-βRⅠ表达减少,Smda2、Smad3的表达降低,Smda7表达增加(均P<0.05).刺梨中剂量组与SIRT1激动剂组比较差异无显著性(P>0.05).结论 刺梨冻干粉与SIRT1激动剂(白藜芦醇)均可减轻单侧输尿管结扎肾间质纤维化大鼠的肾组织脂质过氧化物的产生,同时能增加抗氧化酶的含量,保护受损肾小管上皮细胞,有效改善肾脏纤维化病变.其机制可能与其富含维生素C、SOD、刺梨黄酮等多种抗氧化成分,激活体内SIRT1,从而活化Smda7以下调TGF-β1、TGF-βRⅠ及Smda2、Smad3的表达有关.