高糖对大鼠离体胰岛胰岛素分泌的影响

经胶原酶分离、培养的大鼠胰岛,其形态、结构完整。长时间(24h)暴露于高浓度葡萄糖(简称高糖,下同)环境中(26.4mmol/L)的胰岛,与新分离的胰岛相比,温育时胰岛素的基础分泌(2.8mmol/L葡萄糖)增加(P<0.01);而对高糖(16.7mmol/L)刺激的分泌则降低(P<0.05),且此作用具有时间依赖性。长时间高糖培养后的胰岛灌流时亦可见基础分泌显著增加,高糖刺激的胰岛素分泌第一时相消失,第二时相幅度明显降低。高糖培养后的胰岛对精氨酸的敏感性增加,高糖培养对精氨酸刺激的胰岛素分泌有显著的加强作用。人参总皂甙能显著提高胰岛对葡萄糖刺激的反应性。     

替米沙坦对体外胰岛的第一相胰岛素分泌功能的影响

目的 一些大规模流行病学研究显示血管紧张素(angiotension, Ang)Ⅱ受体拮抗剂能减少2型糖尿病的发生,但其机制尚未阐明.文中旨在探讨替米沙坦(Telmisartan)体外干预对小鼠体外胰岛的第一相胰岛素分泌功能的影响.方法 18只8周龄db/m非糖尿病小鼠,随机分为3组,每组6只,编为A、B、C组.另12只db/db糖尿病小鼠随机分为2组,每组6只,编为D、E组.分离胰岛后,A～E组分别给予含有空白、100nmol/LAngⅡ、10μmol/L替米沙坦+100nmol/LAngⅡ、空白、10μmol/L替米沙坦的培养液孵育及灌流.收集高糖灌流后0～30min各时间点的灌出液,测定胰岛素水平.结果 AngⅡ孵育灌流的db/m小鼠胰岛的胰岛素第一相分泌显著下降,仅达到基础水平的4倍,而预先给予替米沙坦后,AngⅡ孵育灌流的db/m小鼠胰岛的胰岛素第一相分泌明显改善,达到基础水平的7倍左右.db/db小鼠体外胰岛的胰岛素分泌在高糖刺激后胰岛素第一相分泌明显受损,小于基础值的2倍,仅为3μg/L.而替米沙坦孵育灌流的db/db小鼠胰岛的胰岛素分泌在给予16.7mmol/L葡萄糖后1min即达到最高值6μg/L,显示胰岛素第一相分泌明显改善.结论 替米沙坦体外干预阻断局部肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)活性,显著改善了胰岛β细胞第一时相分泌,保护胰岛功能,这可能是阻断RAS降低糖尿病发病率的保护机制之一.     

国产格列美脲对2型糖尿病胰岛分泌功能及胰岛素敏感性的影响

目的 :探讨国产格列美脲对 2型糖尿病 (DM)病人的胰岛素分泌功能和胰岛素敏感性的影响。方法 :对按 1 998年 WHO诊断标准判定的 2型 DM病人 2 9例 ,给予国产格列美脲片 2～ 6 m g/ d,疗程 8周 ,治疗前后测定空腹血糖 (FBS) ,餐后 2 h血糖 (PBS) ,空腹胰岛素 (FINS)、餐后胰岛素 (PINS)、糖化血红蛋白 (Hb A1 c)、按胰岛素抵抗稳态模型公式 :FINS× FBS/ 2 2 .5计算出胰岛素抵抗指数 (IRI)。结果 :经治疗 8周 ,FBS降低 (1 .4 2± 1 .6 0 ) mm ol/ L (P <0 .0 0 1 ) ,PBS降低 (3.2 5± 2 .97) mmol/ L(P <0 .0 0 1 ) ,FINS无明显改变 (P >0 .0 0 5 ) ,PINS增加 (33.96± 1 9.4 6 ) m IU / L (P <0 .0 0 1 ) ;IRI为 1 .5 2± 0 .4 7,较治疗前明显降低 (P <0 .0 0 1 )。结论 :国产格列美脲可以在刺激 PINS分泌的同时明显改善周围组织对胰岛素的敏感性     

三种阿片肽对体外培养大鼠胰岛胰岛素释放的影响

目的：观察不同浓度的３种阿片肽对体外孵育胰岛分泌胰岛素的影响。方法：大鼠胰岛培养中分别加入１０＾－１５，１０＾－１２，１０＾－９，１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ４种浓度的β内啡肽（β－ＥＰ）、亮啡肽（Ｌ－ＥＫ）和强啡肽Ａ１－１３（ＤｙｎＡ１－１３）。结果：３种阿片肽都能刺激胰岛素分泌。高浓度（１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）β－ＥＰ和ＤｙｎＡ１－１３相对于低浓度（１０＾－１５ｍｏｌ／Ｌ）胰岛素分泌反而减少，但仍高于正     

瘦素对大鼠体外胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的抑制作用

目的了解不同浓度瘦素对体外培养大鼠胰岛β细胞胰岛素合成与分泌的影响。方法用含11.1 mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养液体外培养大鼠胰岛β细胞系胰岛素-1(insulin-1,INS-1)细胞,实验分为5组,培养液瘦素浓度分别为0、5、10、20μg/L和50μg/L。培养24 h后分别以荧光定量PCR和ELISA方法检测胰岛β细胞前胰岛素原mRNA的表达及上清液胰岛素浓度。结果在葡萄糖浓度11.1 mmol/L、瘦素作用24 h情况下,胰岛β细胞前胰岛素原mRNA表达随培养液瘦素浓度的升高而逐渐下降,上清液胰岛素浓度随培养液瘦素浓度的升高而逐渐下降,瘦素可抑制胰岛β细胞胰岛素的合成与分泌。结论重组瘦素对体外培养大鼠胰岛β细胞(葡萄糖浓度11.1 mmol/L,瘦素作用24 h)胰岛素的合成与分泌具有抑制作用,随瘦素浓度的增加,抑制作用越明显。     

高浓度芬太尼抑制体外培养大鼠胰岛葡萄糖刺激胰岛素分泌

目的研究高浓度芬太尼对大鼠胰岛的损伤作用。方法通过用胶原酶V液灌注分离成年SD大鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛。然后将胰岛分为空白对照组和处理组,处理组与20ng／ml的芬太尼在静态条件下共同培养24h和后,检测低高浓度葡萄糖（2．8和16．7mmol／L）刺激胰岛素释放试验,细胞内cAMP及蛋白含量,电子显微镜检测胰岛细胞。结果高浓度的芬太尼明显抑制大鼠胰岛的葡萄糖刺激胰岛素释放量,及细胞内cAMP的含量,电子显微镜检测显示高浓度芬太尼对大鼠胰岛具有损伤作用。结论高浓度芬太尼抑制体外培养大鼠胰岛素的分泌,并且对鼠胰岛细胞具有一定的损伤作用。     

微量水溶性维生素对胰岛素分泌的影响

目的研究各种微量水溶性维生素对胰岛素分泌的影响。方法每种水溶性维生素和混合的B族维生素配制成浓度为0、0、05、0．25、0．5和1μmol／L的不同维生素溶液,将维生素溶液添加于含葡萄糖0、8．3和16．7mmol／L的大鼠胰岛培养液中,孵化90min后测定胰岛素分泌量。结果维生素B1和维生素B6在0．25～1μmol／L浓度范嘲内埘秧岛索分泌没有影响;生物素和泛酸在16．7mmol／L的葡萄糖浓度条件下能刺激胰岛素的分泌;炯酸在16．7mmlol／L葡萄糖浓度条件下对胰岛素分泌有刺激作用,在8．3mmol／L葡萄糖浓度条件下则抑制胰岛素的分泌;叶酸、维生素C、维生素B2以及混合B族维生素在16．7mmol／L葡萄糖浓度条件下抑制胰岛素的分泌。结论水溶性维生素对胰岛素分泌的作用各不相同,胰岛素分泌量依赖于葡萄糖和维牛素的浓度。糖尿病患者应该注意食物中水溶性维生素的摄入。     

铁超负荷对胰岛β细胞分泌胰岛素功能的影响

目的 建立胰岛细胞表面灌注系统,并检测次氮基三醋酸铁（FeNTA）溶液对正常大鼠离体胰岛细胞一相分泌的影响。方法 分离正常大鼠的胰岛细胞,将其分为3组：A组、B组和C组,每组合50个胰岛,分别用不同的刺激液进行灌注,检测40min内胰岛素的分泌量。其中,A组为对照组,灌注液为16．7mmol／L葡萄糖液;B组为舍铁的高糖液灌注,包括B1组（高糖液舍有0．05mmol／LFeNTA）和B2组（高糖液舍有O．1mmol／LFeNTA）;C组为经过FeNTA孵育5h后用高糖液灌注,包括C1组（孵育液中含FeNTA0．05mmol／L）和C2组（孵育液中舍FeNTA0．1mmol／L）;实验过程重复3次。结果 ①正常大鼠的胰岛细胞在16．7mmol／L葡萄糖刺激下胰岛素分泌具有典型的早相分泌;②无论是在含一定浓度的（0．05mmol／L或0．1mmol／L）FeNTA的葡萄糖的刺激液灌注,还是经过合FeNTA（0．05mmol／L或0．1mmol／L）孵育液孵育5h后再用高糖刺激液灌注,大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌均完全缺乏一相分泌,仅有不断出现的微小波动,分泌峰值仅仅较基础状态略有增加。结论 铁含量增加会损害胰岛细胞分泌胰岛素,这对阐明铁与糖尿病的关系具有一定的意义。     

茶多酚对胰岛素分泌和胰岛内钙离子浓度的影响

目的研究茶多酚对胰岛素分泌和胰岛内Ca~（2＋）浓度的影响。方法在显微镜下挑选单个胰岛,收集5个胰岛为1组,放置在含有不同浓度（0～150μg/mL）茶多酚的葡萄糖溶液中孵化,检测上清液中胰岛素的含量;收集100个胰岛个体,用Fluo-3/AM染色,放置于含不同浓度茶多酚的葡萄糖溶液中孵化,用激光扫描共聚焦显微镜检测胰岛个体内Ca~（2＋）荧光信号强度。结果与对照组（不含茶多酚的葡萄糖孵化溶液）相比,不同茶多酚浓度孵化液中胰岛素的浓度提高2～11倍（P〈0.01）;胰岛内Ca~（2＋）荧光信号强度提高3～30倍（P〈0.01）。结论茶多酚能够提高胰岛内Ca~（2＋）浓度,并在胰岛水平上促进胰岛素分泌。     

川芎嗪对新生大鼠离体胰岛分泌胰岛素的影响

目的 :了解川芎嗪对胰岛分泌功能的影响。方法 :取出生 3～ 5d的SD大鼠 ,无菌摘出胰腺 ,用V型胶原酶消化、分离纯化胰岛并用 1 6 4 0完全培养液稀释 ,按每孔 2 0± 3个胰岛分组接种于 96孔细胞培养板 ,观察不同剂量及不同作用时间下对胰岛素基础分泌及高糖刺激分泌的影响。结果 :在体外培养情况下 ,川芎嗪对新生大鼠离体胰岛B细胞胰岛素的基础分泌有明显促进作用 ,但对葡萄糖刺激的胰岛素分泌无显著影响。结论 :激胰岛素分泌并且不改变胰岛细胞的正常分泌功能     

川芎嗪对新生大鼠离体胰岛分泌胰岛素的影响

目的观察川芎嗪对新生大鼠离体胰岛胰岛素分泌的影响并探讨其作用途径.方法利用放射免疫技术,分别测定不同浓度川芎嗪处理组,川芎嗪处理不同时间组及不同浓度维拉帕米与川芎嗪共同处理组培养的大鼠离体胰岛的基础胰岛素分泌量和高糖刺激的胰岛素分泌量.结果①川芎嗪1.0 mmol/L、2.0 mmol/L、4.0mmol/L作用于胰岛24 h,其基础胰岛素分泌量明显高于对照组(P＜0.05),作用呈剂量依赖性,而高糖刺激的胰岛素分泌量无明显改变(P＞0.05);②川芎嗪1.0 mmoL/L分别作用于胰岛12 h、24 h、36 h后,基础胰岛素分泌量高于对照组(P＜0.05),呈一定的时间依赖性;③维拉帕米25μg/L、50μg/L、100 μg/L与2.0 mmol/L川芎嗪联合作用后基础胰岛素分泌量低于对照组(P＜0.05),且呈剂量依赖性.结论川芎嗪能促进离体培养大鼠胰岛基础胰岛素分泌,其作用可能与激活钙通道有关.     

2型糖尿病患者胰岛分泌功能和胰岛素抵抗的临床研究

目的 探索胰岛素分泌功能和胰岛素抵抗在正常人(NGT)、糖耐量减退(IGT)和2型糖尿病(DM)不同阶段的变化情况。方法 用稳态模型(Homa model)的胰岛素分泌指数(Homa Is)和胰岛素抵抗指数(Homa IR)对335例正常人、IGT和2型糖尿病患进行分析。结果 从IGT到2型糖尿病各个阶段，胰岛素分泌曲线下面积、Homa IS逐渐下降，而Homa IR逐渐增高。结论 从IGT到2型糖尿病的各个阶段存在胰岛素分泌不足和胰岛素抵抗。     

糖耐量不同的代谢综合征患者胰岛素抵抗和胰岛β细胞1相胰岛素分泌功能的研究

目的　研究正常人、糖耐量正常肥胖 (肥胖 )、肥胖伴糖耐量减退 (IGT)和肥胖伴 2型糖尿病 (T2DM)患者的胰岛素抵抗和胰岛 β细胞 1相胰岛素分泌功能。 方法　 15 1位受试者接受了口服 75 g葡萄糖耐量试验 (OGTT)和胰岛素改良的减少样本数 (n =12 )的Bergman微小模型技术 ,结合多样本静脉葡萄糖耐量试验 (FSIGTT) ,前者用以诊断糖耐量有无异常 ,后者用以测定机体的胰岛素敏感性指数 (SI)、葡萄糖自身代谢效能 (SG)和机体对FSIGTT中葡萄糖负荷后的胰岛素分泌反应(AIRg) ,应用处理指数 (DI =AIRg×SI)评价AIRg是否足以代偿机体的胰岛素抵抗。 结果　正常组的SI 显著高于肥胖、IGT和T2DM组 (P <0 0 1) ,后 3组间差异无显著意义。正常组与肥胖组的SG无明显差异 ,但显著大于IGT和T2DM组 (P <0 0 1) ,后 2组间差异无显著意义 ;正常组与IGT组的AIRg(2 6 1mU·L-1·min-1± 0 13mU·L-1·min-1vs 2 5 6mU·L-1·min-1± 0 2 5mU·L-1·min-1)差异无显著意义 ,但小于肥胖组 (3 0 2mU·L-1·min-1± 0 2 7mU·L-1·min-1,P <0 0 1)而大于T2DM组 (1 5 4mU·L-1·min-1± 0 5 5mU·L-1·min-1,P <0 0 1) ;DI值则由正常组 (3 4 4± 0 17)向肥胖组、IGT和T2DM组依次降低 (3 16± 0 31、2 6 5± 0 5 0、1     

同型半胱氨酸对胰岛β细胞胰岛素分泌及凋亡的影响

目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对克隆的胰岛β细胞NIT-1细胞株胰岛素分泌、细胞生存率及细胞凋亡的影响.方法 将Hcy作用于NIT-1细胞后,用放射免疫分析法检测不同浓度Hcy作用不同时间后对细胞胰岛素分泌的影响;用溴化(4,5二甲基2噻唑基)2,5二苯基四氮唑分析法检测细胞生存率;流式细胞仪磷脂结合蛋白V/PI双染色法和琼脂糖凝胶电泳检测不同浓度的Hcy作用不同时间对NIT-1细胞凋亡的影响.结果 50 μmol/L的Hcy作用24 h以及100 μmol/L的Hcy作用12 h后,细胞胰岛素的分泌量较正常对照组分别下降了17.1%和10.8%,差异有统计学意义(均P＜0.01).100 μmol/L的Hcy作用12、24 h后细胞存活率分别降至95%、88%,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);50 μmol/L的Hcy作用48、72 h后,细胞存活率分别降至91%、87%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).当100 μmol/L Hcy作用24 h,NIT-1细胞凋亡率为7.2%(P＜0.01);250 μmol/L的Hcy作用12 h,NIT-1细胞凋亡率为12.9%(P＜0.05).琼脂糖凝胶电泳显示随着Hcy浓度增加,凋亡NIT-1细胞的DNA电泳条带呈现为明显的梯形条带.结论 Hcy对胰岛β细胞胰岛素分泌的抑制作用呈时间、剂量依赖性.Hcy对细胞的生存率具有抑制作用,且以时间和浓度依赖性的方式诱导胰岛β细胞凋亡.     

白细胞介素-1对大鼠离体胰岛B细胞分泌功能的影响

目的 :观察白细胞介素 1(IL 1)对大鼠胰岛B细胞分泌功能的影响并探讨其机制。方法 :采用胰岛细胞培养的方法 ,观察IL 1对胰岛素分泌和MTT还原的影响 ;通过分子杂交检测c fosmRNA并分析蛋白质合成的变化。结果 :IL 1作用后胰岛素分泌和MTT还原量明显减少 ,且有时间依赖性 ;IL 1诱导c fosmRNA ,从而使细胞蛋白质表达发生变化。结论 :IL 1可能通过改变胰岛细胞内基因表达 ,抑制细胞代谢 ,从而使胰岛素分泌减少     

短期胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响研究

目的：探讨短期胰岛素强化治疗时初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能的影响。方法：时空腹血糖（FPG）≥11．1mmol／L和／或餐后2小时血糖（2hPG）≥14mmol／L的60例初诊2型糖尿病患者进行了2周严格血糖控制．对比治疗前后FPG，静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）时胰岛素及C肽曲线下面积和第一时相胰岛素分泌（AIR）。结果：经短期胰岛素强化治疗后，血糖可得到良好控制，IVGTT时出现明显胰岛素及C肽分泌相，部分患者恢复了AIR。结论：短期胰岛素强化治疗可改善B细胞功能，有利于血糖控制。     

肾上腺髓质素对自发性高血压大鼠胰岛分泌功能影响的体外实验

目的　探讨肾上腺髓质素 (AM)对自发性高血压大鼠 (SHR)和 Wistar- Kyoto(WKY)鼠胰岛分泌功能的影响。方法　分别在含 2 .8mm ol/ L 及 11.1mm ol/ L 葡萄糖的 RPMI16 4 0培养基中加不同浓度 AM(0、10 - 8、10 - 7和 10 - 6 m ol/ L )培养 SHR和 WKY大鼠胰岛 ,用放射免疫分析 (RIA )法测定两次培养液的胰岛素及胰升糖素含量。结果　加入不同浓度 AM培养 WKY鼠胰岛 2 4 h后 ,培养液中胰岛素含量呈剂量依赖性降低 ;高浓度 AM(10 - 6 mol/ L )使 SHR和胰岛培养液中胰岛素含量明显降低 (P<0 .0 5 )。SHR、WKY鼠的各组培养液中胰升糖素含量无明显差异 ,SHR与 WKY鼠相比亦无差异。结论　 AM对 WKY鼠的胰岛β细胞的分泌功能具有剂量依赖性抑制作用 ,高浓度 AM对 SHR胰岛β细胞的分泌功能具有抑制作用。 AM对胰岛α细胞分泌功能无影响     

胰敏颗粒对体外培养大鼠脂毒性胰岛细胞分泌胰岛素的影响

目的观察胰敏颗粒对体外培养的棕榈酸导致的脂毒性的大鼠胰岛细胞分泌胰岛素的影响。方法分离正常大鼠胰岛细胞,置于RPMI 1640培养液中,加入20 mmol/L棕榈酸盐,培养24 h后,更换培养液,将胰岛细胞分为棕榈酸组(A组)、胰敏颗粒含药血清组(B组)、罗格列酮含药血清组(C组)3组;另设空白对照组(D组),未经棕榈酸盐处理,作为空白对照。各组分别加入含3.3或16.7 mmol/L葡萄糖的孵化液+非含药血清或含胰敏颗粒血清或含罗格列酮血清100μL/mL,进行葡萄糖刺激胰岛素释放试验,放射免疫法检测培养液中胰岛素的浓度。结果在低糖和高糖刺激条件下,A组胰岛素分泌水平均显著低于D组,2组比较,差异具有高度统计意义(P0.01);在低糖和高糖刺激下,B组胰岛素分泌水平显著高于A组,2组比较,差异具有统计意义(P0.05或P0.01);C组仅在高糖刺激下,胰岛素分泌水平显著高于A组,2组比较,差异具有高度统计意义(P0.01);B组与C组在低糖和高糖刺激下胰岛素分泌水平差异均无统计意义。结论胰敏颗粒能够保护棕榈酸对胰岛β细胞分泌功能的损害。     

游离脂肪酸对大鼠胰岛分泌功能和胰岛细胞凋亡的影响研究

目的：研究游离脂肪酸对体外培养SD大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响并探讨可能机制。方法：取健康雄性SD大鼠胰岛原代分离培养,分为6组,培养1d：NC1组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA1组（0．25mmol／L）、FFA2组（0．5mmol／L）;培养3d：NC2组（5．6mmol／L葡萄糖）、FFA3组（0．25mmol／L）、FFA4组（0．5mmol／L）;每组6个样本,每个样本20个胰岛。采用RT—PCR扩增胰岛素、PDX-1、Bax、Caspase-3基因mRNA表达,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡率,放射免疫法检测胰岛素水平。结果：①FFA1、FFA2组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC1组明显下降,FFA1、FFA2组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC1组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）;②FFA3、FFA4组Insulin、PDX-1基因表达量、胰岛素分泌较NC2组明显下降,FFA3、FFA4组凋亡基因Bax、Caspase-3表达量及胰岛细胞凋亡率较NC2组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：游离脂肪酸抑制体外培养SD大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌功能,其可能机制是FFA抑制胰岛素基因、PDX-1基因的合成,刺激胰岛细胞凋亡基因Bax、Caspase-3表达,并导致胰岛细胞凋亡,最终导致胰岛细胞分泌功能下降。