间接血球凝集反应的原理示意图

<正> 间接血球凝集反应(间接血凝)试验,在医学及生物学领域的应用已有30余年的历史。因它具有抗原抗体的特异性;用已知抗原(或抗体),就可检测出未知的微量抗体(或抗原)。它又具有灵敏、快速、简便及易于结果判定等优点,故已成为基础理论研究和临床血清学诊断的有力工具之一。 间接血凝反应的原理,从理论上早有详细论述,即将多糖或蛋白质抗原(或抗体)吸附(或结合)在载体——红血球的表面上,这种血球——致敏血球,就具备了血清学性质。致敏血球与患者血清     

丙酮醛制备血凝红细胞诊断血吸虫病初步报告

间接血凝试验,具有快速,敏感,操作简便等优点,目前在免疫血清中已广泛应用于各个领域。这种试验,是将某种抗原物质吸附到红细胞表面,已吸附抗原的红细胞称为致敏红细胞,致敏过的红细胞与血清中相应的抗体结合后,红细胞即发生凝集,形成     

间凝技术在诊断血吸虫病中的应用

间接红细胞凝集试验(Indirect hs-emagglutination test,IHA)是以红血球为载体.将预制的特异性抗原或抗体吸附其表面作为试剂,用于检测标本中的相应抗体或抗原的一种血清学方法.其特点是:微量的抗原与其相应抗体之间的特异性反应,可借红血球凝集现象表现出来,因此.显著地提高了反应的敏感性。 1.致敏血球和问凝技术已广泛应用于血吸虫病的诊断和流行病学调查它有高度的敏感性和特异性,其阳性检出率为92.80％～100％,平均为95.31％,非血     

IHA法间接检测囊虫病患者血清特异抗原的探讨

目的 探讨适用于基层医院检测囊虫抗原的方法。方法 囊液抗原致敏血球间接血凝（IHA）法，检测待检血清与含1：8＋囊虫抗体兔血清的混合液的抗体，低于1：2#为阳性。结果 检测未经治疗的囊虫患52例和用吡喹酮治疗后的患41例，阳性率分别为82.69%和85.37%。结论 囊液抗原致敏血球IHA法间接检测囊虫患血清特异抗原结果稳定，方法简便，临床符合率较高。     

不完全抗体筛查在输血安全中的意义

目的：笔者于2010年1月~2011年3月对2 176例有过输血史和妊娠史的需要输血或择期手术的住院患者进行不完全抗体的筛查和抗体鉴定。方法：利用盐水联合凝聚胺对患者血清进行检测,如检出阳性,再用间接抗人球蛋白实验对患者血清进行鉴定。结果：在2 176例检测患者血清中,不完全抗体即IgG抗体检出10例;冷抗体即IgM抗体检出2例。结论：不完全抗体是在输血和妊娠过程中由于血型抗原不相容,而被致敏所产生的相应抗体,当再次接受该血型抗原,会发生迟发性溶血性输血反应,因此,在输血及备血前对有输血史、妊娠史的患者血清进行不完全抗体筛查,对输血安全有着重要意义。     

抗精子抗体的间接血凝测定

本文报告了用间接血凝技术测定抗精子抗体的方法。为了检测输精管结扎后兔的抗精子抗体,实验中用兔附睾精子免疫兔和豚鼠获标准血清。致敏韖酸化的红细胞的抗原液是兔附睾精子提取液,其蛋白质浓度为0.6mg/ml。稀释致敏红细胞的稳定剂以及稀释待试血清的稀释液以2％兔血清盐水效果稳定。实验中经与间接免疫荧光法比较,以及用间接血凝抑制试验验证,结果表明该方法的敏感性和特异性均较高。     

免疫学知识介绍(十)

自身免疫性疾病什么是自身免疫性疾病自身免疫反应和自身免疫性疾病有所不同。自身免疫反应是指机体对自身抗原能形成自身抗体或致敏淋巴细胞。正常人血清中可以有多种对抗自身抗原的抗体(如抗核抗体、平滑肌抗体、微粒体抗体、线粒体抗体等),但它们一般不引起自身组织损伤。自身免疫反应不一定引起自身免疫性疾病。自身免疫反应如果达到一定强度以致能破坏自身正常组织结构,并引起临床症状时,称为     

固相致敏血球凝聚试验检测肉毒毒素的改进

为了克服ELISA和固相放射免疫(SPRIA)试验中存在的某些问题,Braolburne等1979年利用抗体致敏红血球作为显示剂,设计了固相血球凝聚(SPACE)系统,即先用抗体包被聚苯乙烯血凝滴定板,洗板后加检材(抗原)结合,然后加抗体致敏红血球作用,根据血球凝聚(固相吸附)     

应用聚乙二醇改进的间接血凝试验检测单克隆抗体

本文采用硷化乙醇法制备细菌O抗原,用以致敏醛化红细胞。临用前加入3%聚乙二醇(PEG)、灭活的正常兔血清及绵羊红细胞膜配成间接血凝应用液,以检测杂交瘤产生的抗霍乱弧菌菌体抗原的单克隆抗体。在细胞培养上清和小鼠腹水抗体的检测中,其灵敏度比经典的醛化致敏血球提高4～8倍。     

乙型肝炎间接血凝法的探讨

<正> 为研究乙型肝炎的需要,我们以全国统一检测法,对关中地区健康人群和肝炎住院患者共6774例进行了HBgAg的调查测定。在测定过程中,为了提高其敏感性,增强特异性和节约试剂等,故又采用对流电泳等法同时进行了实验比较和探讨。现报告如下: 原理:间接血凝试验是以红血球为载体,根据抗原和抗体反应的特异性,用已知抗原(或抗体)检测未知抗体(或抗原)的一种简易血清学方法。由于多种不同的抗原——抗体     

免疫学知识介绍(三)

抗原抗原是一类物质,它能刺激机体发生免疫应答,产生抗体或致敏淋巴细胞等;并能与所产生的相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合。也可以说抗原具有两种性能:刺激机体发生免疫应答的免疫原性,和与相应免疫应答的产物发生特异结合的免疫反应性。免疫原性和免疫反应性二者皆具备者称之完全抗原,如细菌、病毒、细菌外毒素等;仅有免疫反应性者称为半抗原(或称不完全抗原),如细菌的多糖、类脂等。半抗原虽没有免疫原性,但与一蛋     

基于IgY的间接凝集试验检测日本血吸虫感染小鼠血清中循环抗原

【目的】 间接凝集实验(IHA)是将抗原或抗体吸附于致敏红细胞表面作为检测试剂来检测标本中的相应抗体或抗原的血清学方法,是血吸虫病疫区应用最广泛的免疫学诊断方法。但由于其较低的敏感性和特异性、红细胞的批间差异以及较高的假阳性率等缺点,现场诊断价值大打折扣。IgY(Immunoglobulin of egg yolk)是鸡卵黄中的免疫球蛋白,相比哺乳动物的IgG,IgY可与抗原上的更多表位反应,放大信号,提高诊断敏感性。且其不与补体、抗体及人或细菌Fc受体等结合,减少了样本中无关因子的干扰从而避免假阳性或假阴性结果。本实验结合IgY的优点,引用IHA的原理,以工业化的纳米磁珠代替致敏红细胞避免批间差异,建立基于IgY的免疫磁珠间接凝集试验,用于检测血吸虫感染小鼠血清中的循环抗原,为检测血吸虫循环抗原提供一种新的技术。 【方法】 从血吸虫感染的兔肝脏中收集虫卵,制备可溶性虫卵抗原(SEA)。用SEA皮下免疫莱杭鸡,制备纯化抗SEA的IgY抗体,将抗SEA的IgY抗体与纳米磁珠偶联制成免疫磁珠。建立血吸虫感染小鼠模型,收集感染前后不同时间(2、4、6、8、10和12周)小鼠血清标本。按IHA的操作进行试验,检测感染小鼠血清中循环抗原。 【结果】 本实验成功制备了分子量为130 kDa的anti-SEA IgY多克隆抗体,该抗体可特异性地识别血吸虫SEA中140 kDa、100 kDa和69 kDa三种抗原成分。免疫磁珠间接凝集试验可检测出重度感染组感染后6周以及轻、中度感染组感染后8周血清中的循环抗原,并且血清反应的强度与小鼠感染度、感染时间呈正相关。 【结论】 本课题组成功建立了基于IgY的免疫磁珠间接凝集试验,此法可有效地检测出不同感染度小鼠血清中循环抗原。为血吸虫循环抗原的检测提供了一种高敏感性和特异性,操作简便快捷的诊断方法,可提高免疫诊断试验在血吸虫病防治活动中的实用价值。     

应用氯化铬作结合剂快速诊断流行性脑脊髓膜炎的反向血凝试验方法

近年来,由于蛋白质间接血球凝集技术的广泛应用和不断发展,已有多种方法能使蛋白类抗原或抗体吸附在红血球上。Jandi等首先用三氯化铬(CrCl_3)将人血清蛋白结合在红血球上,认为此种方法敏感、特异和简便。去年,山东省济阳县防疫站、北京市儿童医院及中国医学科学院流行病防治研究所流脑组共同协作,用铬作结合剂,在红血球的表面上挂流脑群特异抗体,对流脑快速诊断的反向血凝试验作了一些探索研究,发现具有可喜的苗头。但尚存在许多问题,还不够成熟,现将此法介绍如下。     

角膜穿孔伤患者血清中四种眼组织抗体的测定

目的通过测定眼角膜穿孔伤和外眼病患者血清抗葡萄膜抗体(AUAb)、抗晶状体抗体(ALAb)、抗视网膜抗体(ARAb)和抗角膜抗体(AKAb),了解角膜穿孔伤后患者血清中眼组织的自身免疫状况。方法取新鲜的牛眼组织制备相应组织抗原和抗体,用其抗原致敏羊血球后,改良的间接血凝法检测患者血清中的相应眼组织抗体。结果角膜穿孔伤患者血清中AUAb、ALAb和AKAb阳性率显著高于正常人(P<0.05或P<0.01),而外眼病组却无差异(P>0.05)。结论通过对角膜穿孔伤患者血清中眼组织自身抗体的检测,可及时了解机体的免疫反应情况,对临床的诊断和防治有一定指导意义。     

麻疹间接血凝试验与血凝抑制试验的应用比较

被动血球凝集试验(PHA)是一种快速、敏感的血清学方法,已广泛应用于微生物学及免疫学领域,1988年中国预防医学科学脘流行病学微生物学研究所与四川省卫生防疫站采用超声波处理未浓缩抗原致敏醛化绵羊红血球,建立麻疹被动血球凝集试验,并将其引入麻疹抗体的检测中。我们应用此试剂和微量血凝抑制试验(HI)同时检测305份健康儿童血清中的麻疹抗体,结果报道如下:     

第二讲 抗原

抗原是一类能刺激机体的免疫系统,产生抗体试致敏淋巴细胞,并能与相应抗体或致敏淋巴细胞在体内、体外发生特异性结合的物质。抗原具有两种性能:①免疫原性,也称抗原性,即刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞的性能;②反应原性,也称免疫反应性,即与相应的抗体或致敏淋巴细胞特异性结合的性能。同时具备上述两种性能的抗原称完全抗原,如细菌、病毒、动物免疫血清等。只具有免疫反应性而无免疫原性的物质称不完全抗原,也叫半抗原,如大多数多糖和某些药物等。半抗原与体内蛋白质结合,可获得免疫原性,成为完全抗原。     

干滴血间接血凝试验诊断钩虫病在普查中的试用

间接血凝试验(IHA试验),正在广泛应用于各个领城,在某些寄生虫病的诊断方面报导较多,如血吸虫病、猪囊虫症、阿米巴病、旋毛虫病等。此试验是将寄生虫抗原吸附在红细胞上,此种致敏的红细胞与血清中相应的特异性抗体相遇,在适宜条件下,抗原、抗体发生反应,红细胞便被动凝集起来而显示阳性结果。本试验具有快速简便,敏感性高等优点。特別是采用沪纸干滴血做为待检血清,给本试验创造了更方便的条件。关于钩虫病血清学的研究,很少有人报导。于Ball等1969年曾做过IH     

菌痢间接血凝抗体测定方法的研究

用间接血凝法(以下简称间凝法)测定人群的菌痢抗体,国外曾有若干报告。1948年澳大利亚Keogh等提出细菌抗原可被红细胞吸附,而后与抗体凝集旺[1]。以后有人陆续报道间接血凝法用于肠道菌的抗体测定[2-4],包括大肠杆菌、沙门氏菌以及痢疾杆菌等。1959年J.Havlik等用多价弗氏、宋内氏痢疾菌致敏人红细胞测定病人血清抗体,发现甚至轻型病人及无症状带菌者多数也具有阳性水平的抗体。他认为此法对于已用抗菌素治疗的病例诊断很有意义,因为这些病人大便培养细菌常常是阴性的[5]。1960年Young等用多糖抗原致敏人红细胞测定弗氏菌病人血清,发现间凝法比直接凝集反应敏感[6]。国内尚未见菌痢间凝法的研究报告。我们为了给流行病学调查、临床诊断提供良好诊断工具,对血凝法的特异性、敏感性以及感染菌痢后间接血凝抗体的消长规律进行研究。     

SPA痢疾杆菌分型试剂在实际应用上的价值

金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。     

关于影响间接血凝试验诊断血吸虫病效果的若干问题的探讨(一)

近年来应用间接血凝试验诊断寄生虫病日益增多.实验证明该试验诊断血吸虫病具有高度的敏感性和特异性,并有简易快速的优点,可作为临床辅助诊断和流行病学调查研究的有效工具.虽然间接血凝试验有高度的敏感性,可测出微量的抗体或抗原,但整个技术过程比较复杂,除特别注意抗原或抗体系统的纯度和致敏量外,影响的因素较多,故有时可出现复制性不够稳定.如条