血小板蛋白激酶C与脑梗塞的关系

为研究血小板（PLT）中蛋白激酶C（PKC）与脑梗塞发病的关系。以对倒脑梗塞患者及31例健康者为对象，检测其PLT及PLT中PKC活性，对检测结果进行统计学分析。结果脑梗塞组PLT数目，PLT膜PKC活性明显高于对照组。结果提了脑梗塞患者PKC活性增高，PKC可能是脑梗塞形成过程中的重要机制之一。     

高血压血小板中蛋白激酶C底物磷酸化程度的实验研究

目的　研究血小板蛋白激酶C(PKC)在高血压中的活性 ,以揭示PKC的致病作用。方法　利用32 P NaH2 PO4 标记血小板 ,以PKC底物 40kD蛋白磷酸化作为酶活性的标志 ,对高血压组及正常对照组PKC的基础活性及反应活性进行分析比较。结果　高血压组PKC的基础活性及经凝血酶刺激后的反应活性均较正常对照组显著增高 (P <0 .0 1)。结论　提示PKC活性增高为高血压病形成过程中的重要机制之一。     

蛋白激酶C亚型与胃癌关系的实验研究

目的研究蛋白激酶C(PKC)各亚型与胃癌的关系。方法选取60例胃癌组织标本和120例慢性胃炎标本,采用兔抗人多克隆抗体及SABC免疫组织化学染色法对PKC亚型进行比较。结果 PKCα在胃癌组织中的表达阳性率为76.7%,在慢性胃炎组织中的表达阳性率为47.5%(P<0.05)。PKCγ在胃癌组织中的表达阳性率为81.7%,在慢性胃炎组织中的表达阳性率为50.0%(P<0.05)。PKCβⅠPKCβⅡ在胃癌及慢性胃炎组织中均无表达。不同病理类型及不同临床分期的胃癌组织间的PKCα、PKCγ的表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。PKCα、PKCγ在各型慢性胃炎中的表达阳性率差异也无统计学意义(P>0.05)。结论 PKCα及PKCγ在胃癌组织中有较高表达,其阳性率明显高于慢性胃炎组织,但与胃癌病理类型及临床分期无关。PKC可能在胃癌的发生发展中起重要作用。     

瘦素对大鼠肝细胞蛋白激酶C蛋白表达的影响

目的观察瘦素对大鼠肝细胞蛋白激酶C(PKC)蛋白表达的影响.方法分离、培养新生Sprague-Dawley大鼠肝细胞,与瘦素(5 nmol/L)孵育12,24,36 h,提取蛋白后用Western印迹法检测各时间点蛋白激酶C的蛋白表达水平.结果大鼠肝细胞cPKCα的蛋白水平在瘦素孵育12 h及2 4 h后同对照组相比均未发生显著变化(P＞0.05);但在孵育36 h后同对照组相比显著升高(P＜0.05).经瘦素孵育24及36 h后,大鼠肝细胞cPKCα的蛋白水平同孵育12 h 时相比亦显著升高(P＜0.05).结论瘦素可上调大鼠肝细胞蛋白激酶C的蛋白表达,这种促进作用呈时间依赖性.     

蛋白激酶C受体与转录因子Twist在宫颈癌组织中表达及其临床意义

目的探讨蛋白激酶C受体(RACK-1)与转录因子Twist在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法收集潍坊市第二人民医院自2016年1月至2018年3月收治的85例首次行宫颈癌根治手术治疗的宫颈癌患者的癌组织及距离癌周5 cm以上正常组织的标本,采用免疫组化法检测宫颈癌组织和癌旁正常组织中RACK-1、Twist的表达情况,分析其与宫颈癌患者临床病理特征参数的相关性。结果宫颈癌组织中RACK-1阳性表达率为58.8%(50/85),高于正常组织的14.2%(12/85),差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组织中Twist阳性表达率为62.4%(53/85),高于正常组织的11.8%(10/85),差异有统计学意义(P<0.05)。RACK-1阳性表达与宫颈癌患者的淋巴结转移、分化程度、国际妇产科联盟分期、脉管瘤栓形成、深肌层浸润均有关(P<0.05)。Twist阳性表达与宫颈癌患者的淋巴结转移、脉管瘤栓形成相关(P<0.05)。在宫颈癌组织中,RACK-1与Twist蛋白的表达呈显著正相关(r=0.469,P<0.05)。结论 RACK-1、Twist高表达与宫颈癌的发生、发展及转移密切相关,RACK-1、Twist可能成为治疗宫颈癌的潜在靶点。     

蛋白激酶C在哺乳动物卵子受精过程中的作用

蛋白激酶C(PKC)被认为是在哺乳动物受精期间卵母细胞激活的主要调节者。在哺乳动物卵子的受精过程中,PKC可能作为卵子活化过程中Ca^2 的重要下游靶分子,启动皮质颗粒的排放,并使卵子突破MⅡ期阻滞,促使细胞周期恢复和原核形成。早期采用药物激活和抑制PKC获得了大量支持上述观点的证据,然而,有些研究结果与PKC调节卵子激活的作用相矛盾,故目前无法得到确切的结论。由于哺乳动物的卵子表达许多不同的。PKC亚型,并且它们的空间结构、辅助因子和作用底物存在区别。因此,需要更为全面地重新认识卵子中PKCS的作用。本文就PKC的生物化学特性、最近有关哺乳动物受精过程中PKC作用的实验证据以及某些PKC亚型在受精一诱导卵子激活中具有的特殊作用的研究近况作一综述。     

蛋白激酶C在肢体缺血预处置中的作用

目的：探讨缺血预处置（ＰＣ）减轻骨骼肌组织缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）损伤的作用机制．方法：采用大鼠后肢原位灌流方法观察ＰＣ和ＰＣ加用蛋白激酶Ｃ抑制剂ｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ或Ｈ７对Ｉ／Ｒ的影响．实验动物分为５组：Ｉ／Ｒ组，ＰＣ组，ＰＣ＋ＰＢ组，ＰＣ＋Ｈ７组，对照组．比较各组灌流液中和肌组织中的损伤性指标变化．结果：ＰＣ可以明显减轻肢体的Ｉ／Ｒ损伤，使用ｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ或Ｈ７则阻断ＰＣ对Ｉ／Ｒ骨骼肌细胞内酶漏出、丙二醛产生及钙超载等损伤性指标的改善作用．结论：ＰＣ对Ｉ／Ｒ肢体具有保护作用，其保护机制与蛋白激酶Ｃ的激活有关     

缺血性脑血管病血流变性及血小板改变的临床研究

目的 观察缺血性脑血管病患者血流变性及血小板的改变.方法 选择急性缺血性脑血管病103例,其中脑梗塞组75例,脑血栓形成组28例,另选健康成人50例作为对照组,检测其血液流变学及血小板指标并作统计学处理.结果 血液流变学4项指标,病人组三项指标均明显高于对照组;脑血栓和脑梗塞组之间三项指标无明显差异,脑血栓和脑梗塞组血小板指标均低于对照组.结论 急性缺血性脑血管病患者血流变学指标有明显改变,血液的流变性出现障碍.     

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

目的 探讨醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响。方法 采用腹腔内注射链脲菌素法制作糖尿病大鼠模型，将大鼠分为模型组、Sorbinil组、格列喹酮 苯那普利组和正常对照组。8周后处死大鼠，分离肾小球，分别测定各组肾小球细胞浆和细胞膜蛋白激酶C活性。结果 糠尿病模型组细胞浆蛋白激酶C活性显著降低，细胞膜蛋白激酶C活性显著升高。用两组西药治疗后，苯那普利 格列奎酮组无明显改善，而Sorbinil组可显著提高细胞浆蛋白激酶C活性、降低细胞膜蛋白激酶C活性。结论 Sorbinil可通过改善多元醇代谢而降低蛋白激酶C活性，同时，亦或存在其他途径如直接对蛋白激酶C的抑制作用等等。Sorbinil通过调节多元醇代谢等途径间接或直接降低蛋白激酶C活性，是其治疗糖尿病肾病的作用机理之一。     

低氧时蛋白激酶C对内皮细胞表达血管内皮生长因子的调节作用

目的探讨低氧培养大鼠肺动脉血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达变化与蛋白激酶C(PKC)活性的关系。方法培养大鼠肺动脉血管内皮细胞 ,观察低氧 ( 1 %O2 )培养 0、1、3、6、1 2h大鼠肺动脉血管内皮细胞PKC活性和VEGFmRNA水平变化 ;同时对培养液中VEGF蛋白水平进行测定。培养基中加入PKC抑制剂 (staurosporine)后 ,立即进行低氧培养 ,测定低氧培养不同时间点上述指标的变化。 结果低氧培养 1hPKC活性首先明显升高 (P >0 .0 5 ) ,至 3hVEGFmRNA表达明显升高 (P <0 .0 1 ) ,6h培养液中VEGF蛋白水平显著升高 (P <0 .0 1 )。而加入PKC抑制剂后 ,低氧培养的内皮细胞PKC活性与 0h比较明显下降 (P <0 .0 1 ) ,相应各时间点的VEGFmRNA及蛋白水平与 0h比较无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论低氧能够刺激大鼠肺动脉血管内皮细胞VEGF表达升高 ,低氧时PKC活性升高是调节VEGF表达升高的重要因素之一     

毛木耳多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶C活性的影响

目的　观察毛木耳多糖 (APSP)体外对小鼠腹腔巨噬细胞 (Mφ)蛋白激酶C(PKC)活性的影响。 方法　采用反相离子对高效液相色谱法测定PKC活力。结果　APSP (80mg·L-1)能引起小鼠腹腔Mφ中PKC活性明显升高 ,2 0min达峰值 ,1.5h恢复到基础水平 ,并可引起Mφ中PKC发生质膜转位。 结论　毛木耳多糖的免疫增强作用与其增强PKC活性有关     

蛋白激酶Cδ亚型cDNA的克隆及其序列分析

 目的 研究中国仓鼠卵巢上皮细胞是否表达蛋白激酶Cδ亚型.方法 参照GeneBank数据库PKC δ亚型的cDNA序列;通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW,选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKC δ亚型的特异引物;RT-PCR扩增CHO细胞PKC δ亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKC δ连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKC δ亚型.结果 运用RT-PCR和Western blotting技术证实CHO细胞表达PKC δ亚型,并经测序证实.结论 CHO细胞中发现PKC δ亚型的存在,为深入研究PKC δ亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础.     

蛋白激酶Cγ基因在脊髓背角跨器官敏化调控中的作用及其机制

目的 探索在内脏高敏感状态下,跨器官敏化模型鼠脊髓背角蛋白激酶(PKC)γ基因表达的改变并探索其与内脏痛敏程度之间的相关性,寻求调控跨器官敏化的新靶点.方法 采用鸡卵清蛋白(OVA)基础致敏联合结直肠芥子油(MO)灌注的方法建立跨器官敏化大鼠模型.30只SD大鼠随机分为:正常对照组(A组,n=7);跨器官敏化模型组(B组,n=8),给予OVA基础致敏联合MO结肠灌注;OVA+MO+生理盐水对照组(C组,n=7),给予OVA基础致敏联合MO结肠灌注,鞘内注射生理盐水10μl;OVA+MO+PKCγ特异性抑制剂(GF109203X)组(D组,n=8),OVA基础致敏联合MO结肠灌注,鞘内注射GF109203X 10μl.采用免疫荧光染色技术及Western blotting检测各组大鼠脊髓PKCγ的表达情况,并探讨PKCγ表达与内脏痛敏程度之间的关系.结果 免疫荧光染色结果显示,跨器官敏化模型组大鼠L4-6脊髓背角组织PKCγ蛋白表达量(98.99±7.73)明显多于正常对照组(56.14±6.22,P<0.05);而鞘内注射GF109203X的D组大鼠PKCγ表达量显著降低,明显低于鞘内注射生理盐水的C组(56.83±7.07 vs 89.59±9.90, P<0.05).Western blotting检测结果也显示,B组大鼠L4-6脊髓背角组织中PKCγ的表达量(1.538±0.228)与A组(1.065±0.064)相比显著增加(P<0.001);D组大鼠PKCγ表达量(1.124±0.169)与C组大鼠(1.605±0.224)比较则显著降低(P<0.001).结论 采用OVA基础致敏联合MO结肠灌注可成功建立跨器官敏化大鼠模型,脊髓背角组织中PKCγ参与了跨器官内脏痛敏信号的传递,在跨器官敏化的产生和维持中发挥了重要作用.     

蛋白激酶C对早期糖尿病大鼠肾小球高滤过的影响

探讨蛋白激酶C（Protein Kinase C,PKC)对早期糖尿病大鼠肾脏高滤过影响。选用雄性SD大鼠,随机分为正常对照组（C组）及糖尿病组（DM组）。DM组模型制备采用链脲佐菌素,饲养至2周时,断头处死。检测两组体重、肾重、24h尿白蛋白定量（放免法）、内生肌酐清除率（苦味酸法）、血浆、肾组织匀浆中一氧化氮合成酶（NOS)、一氧化氮（NO）、内皮素（ET）及肾小球PKC。糖尿病大鼠2周时,血糖、内生肌酐清除率、24h尿白蛋白量、肾重／体重均明显高于正常对照组（P＜0.01)。血浆及肾组织匀浆NO、NOS及肾小球细胞膜PKC均明显高于正常对照组（P＜0.01),而ET则低于正常对照组（P＜0.01)。两组肾小球细胞浆PKC相差不显著（P＞0.05)。两组大鼠肾小细胞膜PKC与内生肌酐清除率呈正直线相关（P＜0.01)。本研究表明肾脏组织PKC对早期糖尿病肾病高滤过起着重要作用,并同NOS及NO关系密切,由高血糖引起的PKC活性升高可能是引起早期糖尿病肾病肾脏肥大、高滤过的主要原因之一。     

蛋白激酶C对人胰腺癌细胞放射敏感性的影响及其机制

目的 研究蛋白激酶C对人胰腺癌细胞Panc-1体外放射敏感性的影响并探讨其机制。方法 应用蛋白激酶C激活剂PMA和抑制剂CH分别观察其对Panc-1细胞存活分数的影响。采用多靶单击数学模型拟合细胞剂量存活曲线,明确CH对人胰腺癌细胞Panc-1的放射增敏效应。采用Annexin Ⅴ/PI法流式细胞仪检测CH对细胞凋亡的影响。采用免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果 单纯照射组、PMA处理组和CH处理组细胞SF₂值分别为0.78±0.02、0.92±0.11和0.19±0.20。浓度为0.5、2和8μmol/L 的CH作用4h后,放射增敏比分别为1.05、1.24和1.77,呈药物浓度依赖性。流式细胞仪检测显示PMA可使照射后肿瘤细胞凋亡指数降低,而CH则使凋亡指数增加。CH作用后,肿瘤细胞Bax蛋白表达水平增加,Bcl-2蛋白表达水平无明显变化,但Bax/Bcl-2值增大。结论 蛋白激酶C通过改变肿瘤细胞的凋亡水平实现对人胰腺癌细胞Panc-1放射敏感性的调控。     

蛋白激酶C对大鼠逼尿肌肌条收缩活动影响的实验研究

 目的 探讨蛋白激酶C对大鼠离体逼尿肌肌条自发收缩活动的影响.方法 建立逼尿肌不稳定(detrusor instability ,DI)大鼠模型,制做大鼠逼尿肌肌条,观察不同浓度(3×10-7～3×10-4) mol/L的PMA和H-7对DI及逼尿肌稳定(detrusor stability,DS)大鼠逼尿肌肌条自发收缩活动的影响.结果 3×10-7～3×10-6 mol/L的PMA可明显增加DI、DS大鼠逼尿肌肌条自发收缩频率及收缩幅度,且DI组收缩频率高于DS组(P<0.05),但(3×10-5～3×10-4) mol/L的PMA对DI、DS大鼠逼尿肌肌条自发收缩频率和收缩幅度的促进作用无统计学差别(P>0.05).H-7能逆转PMA诱发的DS肌条的收缩作用,可明显抑制DI肌条自发收缩频率(P<0.05),但对其收缩幅度无影响(P>0.05).结论 蛋白激酶C信号通路可能介导了DI逼尿肌自发兴奋性增高的细胞内信号转导过程.     

内皮损伤及血小板在偏头痛与缺血性卒中关系间的作用

偏头痛是常见的头痛类型．属于原发性头痛．其表现为发作性头痛,有些在头痛前有眼前闪光或视野缺损、麻木等先兆症状,多数无先兆,常伴有恶心、呕吐、畏光、怕声等症状,严重干扰着患者的生活质量。目前偏头痛诊断和分类标准由2004年国际头痛学会头面痛分类委员会提出（ICHD-Ⅱ）,其根据临床症状主要有先兆性偏头痛（migrainewithaura,MA）和非先兆性偏头痛（migrainewithoutaura,MwoA）。     

CHO细胞中表达蛋白激酶C~ι亚型

目的研究中国仓鼠卵巢上皮细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO cell)是否表达蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)ι亚型。方法参照GeneBank数据库PKCι亚型的cDNA序列;通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW,选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKCι亚型的特异引物;RT-PCR扩增CHO细胞PKCι亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKCι连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKCι亚型。结果RT-PCR和Western blotting技术证实CHO细胞表达PKCι亚型,并经测序证实。结论CHO细胞中发现PKCι亚型的存在,为深入研究PKCι亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础。