玉竹提取物A对小鼠脾淋巴细胞转化和IL-2产生的影响

目的探讨玉竹提取物A(EA-PAOA)对免疫功能的影响及其作用机制。方法以体外观察小鼠脾淋巴细胞转化和IL-2产生为指标。结果玉竹提取物A对Con-A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化的IP(inhibitory percentage)以1μg/mL计量的抑制作用相对为高,达66.1%(P<0.01),对非Con-A诱导的小鼠脾淋巴细胞自然转化,小剂量没有抑制作用,但二者均呈量效关系;对小鼠脾淋巴细胞经Con-A诱导和去除Con-A及玉竹提取物A两种IL-2产生的抑制作用都以10μg/mL的计量为最高,IP分别达41.5%和26.9%,P均<0.01。结论玉竹提取物A对免疫功能起抑制作用,抑制IL-2的产生是其机制之一。     

姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制与凋亡诱导的影响

目的研究姜黄素对人原髓细胞白血病HL-60细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,探讨其诱导细胞凋亡的机理。方法应用MTT比色法、细胞荧光染色法和Western blotting检测姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制、凋亡诱导以及对HL-60细胞表达Bcl-2、Caspase9和c-myc的影响。结果姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制与剂量相关(P<0.05);经姜黄素作用后HL-60细胞的形态差异明显,表现凋亡的特征性变化,而且姜黄素作用后HL-60细胞的Bcl-2和原癌基因c-myc的表达量低于对照组(P<0.05),而Caspase9的表达量则明显高于对照组(P<0.05)。结论姜黄素可有效抑制体外培养的HL-60细胞增殖,其诱导HL-60细胞凋亡的途径可能通过线粒体介导。     

阿魏酸抑制p38 MAPK保护棕榈酸诱导的肝细胞脂毒性

目的:研究阿魏酸对棕榈酸诱导的HepG2肝细胞脂毒性的保护作用并初步探究其分子机制。方法:采用棕榈酸诱导HepG2肝细胞建立脂毒性模型并给予阿魏酸进行干预,采用LDH法检测细胞损伤,采用MTT法检测细胞存活率。采用Western Blotting技术对阿魏酸保护作用的分子机制进行研究。结果:不同浓度(25、50、100、200μmol/L)阿魏酸暴露对肝细胞无毒性作用(P>0.05)。阿魏酸干预显著抑制棕榈酸诱导的肝细胞损伤并改善棕榈酸诱导的细胞线粒体膜电位降低(P<0.05)。激活p38可显著增强棕榈酸诱导的肝细胞脂毒性(P<0.05),而抑制p38显著改善棕榈酸诱导的细胞损伤(P<0.05)。此外,阿魏酸显著抑制棕榈酸上调的p38磷酸化(P<0.05),采用p38激活剂处理细胞可阻断阿魏酸对脂毒性的保护作用(P<0.05)。结论:阿魏酸可有效改善脂毒性诱导的肝细胞损伤,该保护作用可能与其抑制p38信号通路有关。阿魏酸可能成为防治以脂毒性为主要病理特征性肝病的功效因子。     

20(S)-原人参二醇对SMMC-7721细胞体内外作用的研究

目的观察不同剂量的20(S)-原人参二醇(Protopanaxadiol,PPD)在体内外对人肝癌细胞株SMMC-7721抗肿瘤作用。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察20(S)-原人参二醇的肿瘤抑制作用。MTT比色法检测20(S)-原人参二醇对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,Ho-echst33342核染色观察细胞凋亡形态学改变,采用FITC-An-nexinⅤ/PI双染流式细胞术分析凋亡情况,同时检测Caspase-3活性。结果在体内,PPD可抑制SMMC-7721细胞裸鼠异种移植瘤生长;在体外,PPD对SMMC-7721细胞的增殖具有明显的抑制及诱导其凋亡作用,呈时间和剂量依赖性,Hoechst33342核染色可见凋亡小体,同时伴有Caspase-3活性的增加。结论20(S)-原人参二醇在体内外均可抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能通过活化Caspase-3诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

环孢菌素抑制钙离子介导的HL-60细胞凋亡(英文)

目的:研究环孢菌素(Cyc)在HL-60细胞凋亡中的作用.方法:通过DNA凝胶电泳、细胞形态观察及流式细胞术等方法确定药物三尖杉酯碱(Har), 喜树碱(Cam)或卡西霉素(Cal),thapsigargin(Tha)诱导的细胞凋亡.流式细胞术测定细胞凋亡中胞内相对自由钙浓度的变化.结果:Cal或Tha均能诱导HL-60细胞凋亡,其效应可被Cyc抑制;但Cyc不抑制Hat或Cam诱导的HL-60细胞凋亡.Cal或Tha均能诱导细胞内Ca~(2 )浓度升高,而Hat或Cam并不诱导胞内Ca~(2 )浓度升高.结论:Cyc只抑制由Ca~(2 )升高介导的细胞凋亡.Cal或Tha诱导的细胞凋亡机制不同于由Hat或Cam所诱导的细胞凋亡机制.     

吗啡对淋巴细胞反应性的影响

本文探讨小鼠或大鼠一次性sc吗啡对分裂原诱导的淋巴细胞增殖反应的影响。结果,吗啡抑制Con A诱导的小鼠或大鼠全血淋巴细胞增殖反应,作用呈浓度依赖关系;但脾淋巴细胞反应性并未明显受损,即使吗啡给药浓度增至50 mg·kg~(-1)。如分离大鼠全血单个核细胞,再观察其对Con A的反应性,则吗啡的抑制活性依然存在,提示全血中的血浆成分不是全血和脾淋巴细胞对吗啡作用敏感性不同的原因。进一步实验发现,纳洛酮10 mg·kg~(-1)预处理可完全拮抗吗啡25 mg·kg~(-1)所致小鼠和大鼠全血淋巴细胞反应性下降,使其恢复至正常水平;而单独给予纳洛酮,对脾和全血淋巴细胞增殖皆无影响。结果表明,吗啡整体给药的免疫调节作用与药物剂量及淋巴细胞的组织来源有关,且其效应通过阿片受体介导。     

9-顺式-维甲酸联合8-cl-cAMP诱导人肺癌细胞株凋亡的研究

目的:探讨9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)联合8-cl-cAMP对人肺癌细胞株H460和H292的生长抑制和凋亡诱导作用。方法:应用MTT法分别检测单用9-cis-RA和8-cl-cAMP以及两药联合使用对H460和H292细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术(FCM)分析9-cis-RA和8-cl-cAMP对H460和H292细胞的凋亡诱导作用。结果:单药9-cis-RA明显抑制H460细胞的生长,具有时间和浓度依赖性,并诱导其凋亡,9-cis-RA(5×10-6moL/L )诱导的凋亡率最高;同样条件下,H292细胞对9-cis-RA不敏感;9-cis-RA联合8-cl-cAMP对H460细胞的生长抑制作用较单药组提早24h出现,同时,9-cis RA联合8-cl-cAMP明显抑制H292细胞生长,且诱导其凋亡。结论: 人肺癌细胞株H460和H292对9-cis-RA的敏感性不同,9-cis-RA联合8-cl-cAMP对H460和H292细胞的生长抑制和凋亡诱导具有协同作用。     

葛根素对血管平滑肌细胞增殖及对c-fos蛋白和凝血酶受体mRNA表达的影响

目的:通过建立凝血酶(T)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对T诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对c- fos蛋白以及凝血酶受体(TR)mRNA表达的作用,旨在认识葛根素作用的分子机制。方法:以细胞计数法和流式细胞仪测定DNA含量,细胞周期分析观察T及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。T及葛根素等各处理因素作用2 4h后,免疫印迹法(Westernblot)检测c -fos蛋白表达,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT- PCR)检测TRmRNA的表达。结果:T对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在2 4h末达到峰值,且T浓度在0 .1～1.0U·L- 1有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制T诱导的细胞增殖、DNA合成以及VSMCc fos蛋白的表达;高浓度(1.5×10 - 3mol·L- 1)的葛根素可显著抑制T诱导的TRmRNA上调。结论:葛根素能抑制T诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c- fos蛋白有关,并部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

苦参碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的实验研究

目的研究不同浓度的苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞诱导凋亡的作用。方法将不同浓度的苦参碱作用于培养的SMMC-7721肝癌细胞,通过四氮噻唑蓝(MTT)比色法检测各浓度的药物对细胞的抑制增殖作用;光学显微镜、荧光显微镜下形态学观察;DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪(FCM)研究分析其对肝癌细胞的诱导凋亡作用。结果浓度为2.01,4.02,6.04和8.05mmol·L-1苦参碱对SMMC-7721肝癌细胞都有不同程度的抑制增殖作用,抑制增殖作用随药物浓度的增加及作用时间的延长而加强(P<0.001)。光学显微镜、荧光显微镜下观察,发现细胞凋亡现象;DNA琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯形条带;流式细胞仪(FCM)检测分析出现凋亡亚二倍体峰。结论苦参碱对肝癌细胞具有诱导凋亡作用,诱导作用具有明显的量效和时效关系。     

五味子乙素对UVB辐射诱导HaCat细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的研究五味子乙素(SchB)对中波紫外线(ultraviolet radiation b,UVB)辐射诱导人表皮角质永生化细胞(HaCat)凋亡的抑制及其作用。方法 MTT法检测五味子乙素(SchB)对UVB辐射诱导HaCat细胞凋亡的抑制作用;Hoechst染色检测细胞凋亡;RT-PCR检测SchB对HaCaT基因表达的影响。结果 SchB对HaCaT细胞生长未显示出抑制作用,且可以抑制由UVB辐射引起的细胞凋亡,并降低了UVB诱导的p53、p21、Caspase-3等与凋亡有关基因的表达。结论 SchB可通过降低紫外线辐射后细胞的凋亡基因的表达从而抑制UVB对皮肤细胞的损伤,发挥其抗光老化作用。     

原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1表达的影响

目的 探讨原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)表达的影响.方法 酶免疫测定法(EIA)检测原花青素对PGE2生成的影响,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mPGES-1mRNA的表达,Western blotting检测mPGES-1蛋白的表达.结果 脂多糖(LPS)可以促进RAW264.7细胞PGE2的生成同时上调mPGES-1mRNA和蛋白的表达,而原花青素(4、20mg·L-1)下调LPS诱导的RAW264.7细胞mPGE-1mRNA和蛋白的表达,从而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2的生成.结论 原花青素在mRNA和蛋白水平抑制LPS诱导的RAW264.7细胞mPGES-1表达从而减少PGE2的合成,这可能是原花青素抗炎的机制之一.     

雌激素对培养大鼠皮质神经元细胞β淀粉样蛋白(25-35)损伤的保护作用

目的:研究雌激素对β淀粉样蛋白(βamyloidprotein,Aβ)诱导的大鼠神经细胞损伤的影响。方法:通过相差倒置显微镜、Giemsa染色及乳酸脱氢酶(lactatedehydrohenase,LDH)释放率的测定。观察17β雌二醇(17βestradiol,17βE2)对Aβ(2535)诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤的影响。结果:Aβ(2535)可以诱导大鼠皮质神经元细胞损伤,17βE2预处理48h显著抑制Aβ(2535)诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤。结论:Aβ对大鼠皮质神经元细胞有毒性作用,雌激素可以抑制Aβ诱导的大鼠皮质神经元细胞损伤,雌激素具有神经保护作用。     

美洛昔康对人肝癌HepG_2细胞增殖的抑制作用

目的:研究环氧合酶(COX)-2抑制剂美洛昔康对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用及其作用机制。方法:MTT法观察美洛昔康在不同浓度和作用时间下对细胞增殖的抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;DNA原位末端标记(TUNEL)法和流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果:美洛昔康可抑制人肝癌细胞HepG2增殖;TUNEL及FCM检测结果均显示美洛昔康可诱导HepG2细胞凋亡。结论:美洛昔康可通过抑制细胞增殖和诱导凋亡2种途径抑制人肝癌细胞HepG2的生长。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖及凝血酶受体mRNA表达的影响

目的通过建立凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对凝血酶诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对凝血酶受体(TR)mRNA的表达有何作用,旨在认识葛根素的作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。凝血酶及葛根素等各处理因素作用24h后,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TRmRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24h末达峰,且凝血酶浓度在0.1U/L~1.0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成;高浓度(1.5×10-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TRmRNA上调。结论葛根素抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

双氢青蒿素诱导人肿瘤细胞凋亡及其分子机制的研究

目的:研究双氢青蒿素诱导人白血病细胞凋亡作用及其机制。方法:用双氢青蒿素处理K562细胞,通过MTT比色法检测细胞增殖抑制的效果;荧光显微镜观察细胞的凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测半胱氨酰-天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的表达,蛋白印迹技术(Western blot)检测线粒体、胞浆细胞色素C的表达。结果:双氢青蒿素处理K562细胞48h后MTT检测,570nm波长处测定半数细胞抑制浓度为8×10-5mol.L-1;Hoechst33342/PI双荧光染色可观察到明显核固缩、凝集等细胞增殖抑制表现;RT-PCR检测到caspase-3的表达,Western-blot检测线粒体细胞色素C表达下调,胞浆中细胞色素C表达阳性。结论:双氢青蒿素能够在体外抑制人白血病细胞增殖并诱导其凋亡,而促进细胞色素C的释放,激活caspase-3可能是其作用机制之一。     

原花青素对白介素-1β诱导的A549细胞环氧合酶-2 mRNA转录的抑制作用

目的研究原花青素对白介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞A549中环氧合酶-2(COX-2)mRNA转录的抑制机制。方法采用RT-PCR法测定原花青素对IL-1β诱导的A549细胞中COX-2 mRNA转录的影响,采用Western blot和免疫组化法考察原花青素对IL-1β诱导的A549细胞核转录因子κB(NF-κB)亚基p65(NF-κB/p65)及NF-κB抑制性蛋白(I-κB)表达的抑制作用。结果原花青素对A549细胞中COX-2 mRNA的转录有较强抑制作用,抑制NF-κB/p65的表达及I-κB的降解。结论原花青素可能是通过抑制NF-κB/p65的表达及I-κB的降解而抑制COX-2mRNA的转录。     

金龙胆草总皂苷诱导Hela细胞和SPC-A1细胞凋亡的研究

目的:研究金龙胆草总皂苷对宫颈癌(Hela)细胞和肺癌(SPC-A1)细胞增殖的影响。方法:采用MTT法检测金龙胆草总皂苷对Hela细胞和SPC-A1细胞生长的影响;琼脂糖凝胶电泳法检测药物作用后细胞DNA变化;Western blot法检测药物对半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)含量的影响。结果:10-3～10-7mol·L-1金龙胆草总皂苷对Hela细胞和SPC-A1细胞的生长抑制有明显的剂量和时间依赖性,并诱导细胞发生凋亡;DNA凝胶电泳呈凋亡特有的梯状带;Caspase-3含量在药物作用前后有变化。结论:金龙胆草总皂苷是通过诱导Hela细胞和SPC-A1细胞凋亡而抑制其生长的。     

阿维A酸联合干扰素诱导皮肤鳞癌细胞凋亡作用的实验研究

目的:探讨阿维A酸联合干扰素对人皮肤鳞癌细胞的生长抑制及凋亡的诱导作用。方法:应用阿维A酸联合干扰素α-2a(IFNα-2a)作用于体外培养的人皮肤鳞癌细胞株SCL-1细胞,采用MTT比色法筛选联合应用的最佳时间和剂量;酶联免疫分析法(ELISA)及AnnxinV/PI法检测凋亡的诱导情况。结果:阿维A酸联合干扰素能显著抑制SCL-1细胞的生长,诱导SCL-1细胞凋亡,与溶媒对照组、阿维A酸或IFN单独应用组比较,差异显著(P<0.05)。结论:阿维A酸与IFNα-2a具有协同抑制人皮肤鳞癌细胞生长及诱导凋亡作用。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖及凝血酶受体mRNA表达的影响

目的通过建立凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖模型,观察葛根素对凝血酶诱导的VSMC增殖的影响,并进一步观察其对凝血酶受体(TR)mRNA的表达有何作用,旨在认识葛根素的作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪DNA含量测定法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。凝血酶及葛根素等各处理因素作用24h后,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TRmRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24h末达峰,且凝血酶浓度在0.1U/L～1.0U/L之间有剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成;高浓度(1.5×10^-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TRmRNA上调。结论葛根素抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能部分与其抑制TRmRNA表达有关。     

盐酸埃克替尼对人非小细胞肺癌HCC827细胞凋亡及EGFR下游信号通路蛋白表达的影响

目的 探讨盐酸埃克替尼(Icotinib)对人非小细胞肺癌(NSCLC)HCC827细胞凋亡及EGFR下游信号通路蛋白表达的影响.方法 通过噻唑蓝比色(MTT)法检测Icotinib对HCC827细胞增殖的影响,流式细胞仪观察Icotinib对HCC827细胞凋亡的诱导作用,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测表皮生长因子受体(EGFR)、蛋白激酶B(AKT)、胞外信号调节激酶(ERK)、p-EGFR、p-AKT、p-ERK和Survivin等EGFR下游信号通路蛋白的表达水平.结果 Icotinib抑制HCC827细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用具有浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05);随着Icotinib对HCC827细胞作用的药物浓度升高,p-EGFR、p-AKT、p-ERK和survivin等EGFR下游信号通路蛋白的表达水平均明显下调(P<0.05).结论 Icotinib可能通过抑制EGFR下游信号通路蛋白的表达,进而有效抑制HCC827细胞的增殖和诱导HCC827细胞的凋亡.