泛耐药鲍曼不动杆菌质粒介导碳青霉烯酶的研究

目的 了解泛耐药鲍曼不动杆菌(pan-drug resistant A.baumannii,PDR-AB)的耐药性和产耐药酶的情况及其耐药机制.方法收集泛耐药鲍曼不动杆菌3株,用纸片扩散法进行药敏测定;通过质粒接合试验、质粒提取实验、琼脂糖凝胶电泳、质粒消除试验等方法,研究细菌对碳青霉烯类耐药的分子机制.结果 3株泛耐药鲍曼不动杆菌对包括亚胺培南(IMP)在内的常用抗菌药物均高度耐药.所有菌株接合试验均成功,接合子质粒条带相同.且经SDS质粒消除试验发现其对碳青霉烯类的耐药性随质粒的消除而丢失.结论 碳青霉烯酶的产生是泛耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药的机制之一;其携带的耐药基因能通过质粒在细菌间传递.     

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的研究

近年来不动杆菌对碳青霉烯酶的耐药性不断增强，并且呈现多药耐药趋势。研究表明，不动杆菌对碳青霉烯的主要耐药机制是产生了质粒或染色体编码的碳青霉烯酶。为了解本地区鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的类型，进行了研究。     

3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶抑制增强试验检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的研究

目的 了解3-氨基苯硼酸(PBA)联合乙二胺四乙酸(EDTA)碳青霉烯酶抑制剂增强试验(PBA-EDTA法)用于检测肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶的检测结果.方法 使用PBA-EDTA法测定275株经金标准PCR及DNA测序已明确为产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌产碳青霉烯酶结果的符合率,并与CLSI推荐的mCIM联合eCIM改良碳...     

肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶研究进展

摘要:肺炎克雷伯茵碳青霉烯酶( Kebsella pneumoniae carbapenemases, KPC)能 水解几乎所有的β-内酰胺类抗生素,是临床上最重要的碳青霉烯酶,常见于以肺炎克雷伯菌为代表的肠杆菌科细菌。自首次分离以来,KPC酶已产生多种亚型,其编码基因位于质粒和转座子等可移动元件上,并迅速传播至世界各地。产KPC酶的细菌所引起的感染非常棘手，给患者带来巨大危害。该文就KPC酶的结构和流行特点、耐药特征、传播机制、感染人群分布及检测技术等方面进行综述,以期为临床合理用药及阻止产KPC酶细菌的传播提供依据。     

KPC型碳青霉烯酶研究进展

碳青霉烯类抗生素包括亚胺培南、美罗培南和厄他培南等是治疗肠杆菌科细菌尤其是产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)及AmpC酶等多重耐药菌株引起感染的最有效的抗菌药物[1].然而,随着碳青霉烯类抗生素耐药肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的出现及不断增多,该类药物的临床应用受到严峻的挑战.     

质粒介导的Amp C酶研究进展

AmpC酶又称头孢菌素酶 ,按Bush分类属于Group 1,而按Amber分类属ClassC。以往认为只有染色体介导的AmpC酶 ,且可被 β内酰胺抗生素诱导 ,属诱导酶。自 1988年美国发现第一个质粒介导的AmpC酶 (pAmpC酶 ) ,pAmpC酶引起越来越多的关注 ,每年发现 1～ 3个pAmpC酶。与染色体介导的AmpC酶不同 ,pAmpC酶高水平持续表达 ,且可通过转化、接合等方式转移给其他菌种 ,造成耐药性的广泛传播。在肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌、肠炎沙门菌中都已发现pAmpC酶。以下就pAmpC酶的命名原则、流行背景及特征、pAmpC酶基因的同源性等进行…     

KPC型碳青霉烯酶研究概况及进展

摘要： 多重耐药(MDR)菌株广泛播散,在抗菌药物的选择性压力下,随着bla_KPC耐药基因在不同菌种和菌株间播散,进一步加剧了抗感染治疗的风险和成本。本文通过对KPC型碳青霉烯酶研究的新进展作一简要综述,旨在为产KPC酶耐药细菌感染的预防、治疗及感染控制提供依据。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行病学及碳青霉烯酶类型的研究

目的 了解碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶类型。方法 收集本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌45株，浓度梯度法(Etest)测定最低抑菌浓度(MIC)；采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性；通过等电点聚焦电泳(IEF)、三维试验、2-巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)、克隆测序等方法分析碳青霉烯酶类型。结果 45株细菌均为多重耐药株，仅对头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦耐药率较低分别为2．2％和6．5％，敏感率分别为63．0％和43．5％。45株菌株PFGE图谱分为A、B两型，A型是主要流行株(44株)，主要集中在重症监护病房(ICU)。B型1株来自血液科病房。45株菌中有43株产碳青霉烯酶，其中16号株(PFGE为B型)等电点有6．6、7．2两个条带，pI6．6为OXA-23，其余42株(A1～A4亚型)pIs均有6．4、7．0两个条带，均不被克拉维酸、氯唑西林及2-巯基丙酸抑制，PCR方法也未能检出OXA-23、OXA-24系列的基因。结论 本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行主要为医院感染所致，该流行株呈多重耐药，未发现金属酶，仅1株产OXA型碳青霉烯酶，为OXA-23。     

碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型研究

目的了解临床分离的耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌的耐药情况以及碳青霉烯酶的基因型。方法收集21株耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌,采用纸片扩散法（K—B法）进行药敏试验,PCR方法检测碳青霉烯酶基因型。结果21株碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌对阿米卡星、左氧氟沙星和氨曲南的耐药率分别为35．7％、42．9％和78．6％,对其余抗菌药物耐药率均高达92．9％～100％。21株中检出OXA-23基因阳性17株（80．9％）,OXA-51基因阳性15株（71．4N）,OXA-58基因阳性2株（9．5％）。12株（57．1％）含OXA-23＋OXA-51基因,1株（4．8％）含OXA-23＋0XA-51＋OXA～58基因。上述菌株中均未检出OXA-24、IMP和VIM耐药基因。结论碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌多重耐药情况严重,碳青霉烯酶基因型OXA-23和OXA-51携带率高,且以OXA-23＋OXA-512种基因型同时存在为主。     

抑制剂增强碳青霉烯类灭活法对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶初步分类的评价

目的评价抑制剂增强碳青霉烯类灭活法(ieCIM)对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶检测及初步分类的可靠性。方法分别以他唑巴坦和乙二胺四乙酸作为碳青霉烯酶抑制剂,对CIM进行改良。选取临床分离的198株肠杆菌科细菌和35株非发酵菌,采用ieCIM检测碳青霉烯酶并进行初步分类,以PCR方法检测碳青霉烯酶基因作对比。结果 198株肠杆菌科细菌中碳青霉烯酶基因阳性101株,CIM检测阳性99株;碳青霉烯酶基因阴性97株,CIM检测均阴性。35株非发酵菌中碳青霉烯酶基因阳性25株,CIM检测阳性24株;碳青霉烯酶基因阴性10株,CIM检测均阴性。使用ieCIM初步分类碳青霉烯酶,87株产A类酶菌株中检出85株(97.7%),25株产B类酶菌株中检出22株(88.0%),12株产D类酶菌株和2株同时产A、B类酶菌株全部检出,ieCIM检测敏感性为96%,特异性100%。结论 ieCIM与基因检测结果一致性高,适合临床微生物常规工作中对碳青霉烯酶的检测及初步分类。     

质粒介导的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐喹诺酮类药物的研究

目的研究质粒介导的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的流行情况及其对喹诺酮类药物耐药的作用。方法采用聚合酶链反应(PCR)对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的qnr基因进行筛选,用实验证明qnr基因可以通过质粒介导并在细菌之间传递。结果在145株大肠埃希菌和125株肺炎克雷伯菌中共检出16株细菌携带qnr基因,其中12株为大肠埃希菌,4株肺炎克雷伯菌。16株qnr基因阳性菌株均为产超广谱内酰胺酶(ESBLs)菌株且呈多重耐药性。结论共检出16株细菌携带qnr基因,其阳性率为5.9%,大肠埃希菌阳性率高于肺炎克雷伯菌。qnr基因可以通过质粒介导,从供体菌接合转移至受体菌,且qnr在接合子中较稳定。     

血必净对急性肺损伤治疗机制的研究现状

急性肺损伤(ALI)是临床常见的危重病,主要南创伤、感染及手术等过程继发的瀑布性炎症反应所致,其发病机制错综复杂,目前尚无切实有效的治疗方法,成人呼吸窘迫综合征(ARDS)是其严重阶段.目前,血必净注射液作为中医药辅助治疗ALI逐渐被临床所关注,很多学者对其治疗的机制进行了深入的临床研究,研究结果提示,血必净所含的中药成分可能通过以下机制发挥治疗作用:①对中性粒细胞的抑制作用;②减少炎症因子的释放;③抗氧自由基的作用;④对凝血和抗凝功能的调节;⑤对肝细胞生长因子(HGF)和角细胞生长因子(KGF)的调节.血必净是多种活血化瘀中药的复方制剂,对ALI的治疗机制不能以拈抗单一致病因素的理论来解释,而应该是整体的调节,这需要更多的临床研究来证实.     

耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌膜蛋白机制研究

目的研究耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌膜蛋白机制并了解其流行型别。方法收集仁济医院、瑞金医院和上海市第六人民医院鲍曼不动杆菌共85株,其中亚胺培南和美罗培南耐药菌49株,敏感菌36株。用细菌基因组回文结构重复序列-聚合酶链反应(REP-PCR)分析其流行型别,PCR扩增检测碳青霉烯类水解酶及金属酶,对阳性扩增菌株进行DNA测序分析,同时用超声波和超速离心法提取细菌的膜孔蛋白并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行分析。结果49株耐亚胺培南和美罗培南鲍曼不动杆菌中,REP-PCR分析结果以A型为主,与敏感菌株存在很大差异;耐药菌株中oxa-51均为阳性,45株为oxa-23阳性;36株敏感菌株中检测到1株oxa-58阳性,29株为oxa-51阳性;金属酶(VIM和IMP-1/4型)均阴性;膜蛋白分析显示,在36株耐药株中38 000附近条带缺失,而在30株敏感株中有17株在相应位置处表达该条带。结论耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要以A型流行,产oxa-23水解酶和38 000附近膜孔蛋白条带缺失可能是其主要耐药机制。     

耐碳青霉烯类抗菌药物鲍曼不动杆菌膜蛋白机制研究

目的研究耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌膜蛋白机制并了解其流行型别。方法收集仁济医院、瑞金医院和上海市第六人民医院鲍曼不动杆菌共85株,其中亚胺培南和美罗培南耐药菌49株,敏感菌36株。用细菌基因组回文结构重复序列-聚合酶链反应（REP-PCR）分析其流行型别,PCR扩增检测碳青霉烯类水解酶及金属酶,对阳性扩增菌株进行DNA测序分析,同时用超声波和超速离心法提取细菌的膜孔蛋白并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行分析。结果49株耐亚胺培南和美罗培南鲍曼不动杆菌中,REP-PCR分析结果以A型为主,与敏感菌株存在很大差异;耐药菌株中oxa-51均为阳性,45株为oxa-23阳性;36株敏感菌株中检测到1株oxa-58阳性,29株为oxa-51阳性;金属酶（VIM和IMP-1/4型）均阴性;膜蛋白分析显示,在36株耐药株中38 000附近条带缺失,而在30株敏感株中有17株在相应位置处表达该条带。结论耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌主要以A型流行,产oxa-23水解酶和38 000附近膜孔蛋白条带缺失可能是其主要耐药机制。     

First detection of the plasmid-mediated class A carbapenemase KPC-2 in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae from South America

The plasmid-mediated class A carbapenemase KPC-2 was isolated from unrelated Klebsiella pneumoniae isolates in Medellin, Colombia. These KPC enzymes are the first from South America and the second isolation outside of the United States. The expanding geographic spread of KPC carbapenemases underscores the importance of clinical recognition of these enzymes.     

质粒Ⅰ型β-内酰胺酶检测方法的研究

目的探讨质粒介导的Ⅰ型β-内酰胺酶(AmpCs)的检测方法。方法用直接法、间接Ⅰ法和间接Ⅱ法对1053株细菌进行了质粒AmpCs检测,并对结果进行了比较。结果共检出阳性菌156株,可疑菌13株,直接法检出率最低,间接Ⅰ法和间接Ⅱ法的检出率相近,在部分可疑结果的判断上,间接Ⅰ法不如间接Ⅱ法。结论间接Ⅱ法操作方便,可避免一些不良因素的影响,准确性和特异性高,可在临床上推广应用。     

母源性免疫传递在增强乙肝疫苗免疫应答水平中的作用

目的通过定量检测婴幼儿和母亲血清HBsAb水平,观察母亲HBsAb水平对婴幼儿儿主动免疫效果的影响,探讨母源性免疫传递在增强乙肝疫苗免疫应答水平中的作用。方法①选择185例母亲和其生产的191例婴幼儿,按标准剂量和程序分别给予新生儿注射乙肝疫苗;②在新生儿8～48个月时,分别检测母亲和婴幼儿血清HBsAb水平③分析婴幼儿HBsAb水平与母亲体内HBsAb水平相关性。结果婴幼儿HBsAb水平与母亲体内HBsAb水平有显著相关性(P<0.05)。结论可以通过母源性免疫传递,提高乙肝疫苗注射后HBsAb阳转率,提高婴幼儿乙肝疫苗注射后免疫效果。     

苦参碱的抗肿瘤机制及其研究进展

苦参碱是苦参(sophora flavescens ait.)的主要成分,在抗炎、抗病毒、抗肝纤维化、抗心律失常及免疫抑制方面具有重要作用.近年研究表明,苦参碱可通过抑制肿瘤细胞增殖及诱导分化、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导肿瘤细胞发生自噬相关性死亡、抑制肿瘤细胞黏附、侵袭与转移,以及逆转肿瘤耐药性、联合用药降低化疗毒副作用等途径,发挥抗肿瘤作用.笔者拟就苦参碱抗肿瘤机制及其最新研究进展进行综述如下,旨在为肿瘤治疗提供更广阔的思路.     

1株泛耐药肺炎克雷伯菌质粒介导耐药的机制研究

摘要:目的：观察质粒与1株泛耐药肺炎克雷伯菌（PRKP）耐药机制间的关系。 方法：用纸片扩散法和微量肉汤稀释法对1株临床分离的PRKP进行药敏试验。用PCR检测PRKP携带的碳青霉烯酶基因GES-1～9、GES-11、OXA-48-like、IMP、VIM、KPC-1～5和NDM,以及广宿主质粒IncN家族的复制酶基因repA。提取该菌株质粒并行琼脂糖凝胶电泳,进行质粒接合、转化试验,PCR检测转化接合子碳青霉烯酶基因和repA。 结果：从PRKP菌株分离到pIncN-XM和pKPC-XM质粒,前者可经接合转移到E.coli J53,PCR检测显示其为一种具广宿主质粒IncN特征的质粒,并携带喹诺酮类抗性基因;后者接合试验阴性,但可经转化导入感受态细菌E.coli DH5α,携带bla_KPC-2型基因。 结论: 该PRKP菌株泛耐药的机制与其含携带bla_KPC-2型基因的质粒和携带喹诺酮类抗性基因并具有广宿主质粒IncN特征的质粒密切相关。