中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞吞噬体成熟及其功能研究进展

吞噬体经过早期内体、晚期内体和溶酶体融合的变化,最终生成能降解抗原或杀死病原微生物的过程称为吞噬体成熟。吞噬体在不同免疫细胞中成熟后的功能差异,导致其对抗原摄取后的加工呈现不同的特征。通过比较中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞3种免疫细胞摄取抗原后的吞噬体功能差异,发现免疫细胞抗原降解能力与抗原提呈能力相反,三者中树突状...     

幽门螺杆菌球形休眠体形成的比较蛋白质组学研究

目的　研究幽门螺杆菌由螺杆状转变成球形休眠体的相关蛋白。方法　运用双向电泳技术比较螺杆状幽门螺杆菌及其球形休眠体全菌蛋白表达谱 ,差异蛋白进行胶内酶切 ,肽混合物使用基质辅助激光解吸 电离飞行时间质谱仪 (MALDI TOF MS)进行质谱分析 ,将肽质量指纹谱数据输入互联网上的蛋白质数据库进行检索。结果　获得 9个与幽门螺杆菌球形休眠体形成相关蛋白 ,即相对分子质量 (Mr)为 2 6× 10 3的过氧化物酶、硫氧还蛋白、烯醇酶、黄素氧化还原蛋白、单链DNA结合蛋白、翻译起始因子 1、延长因子P、中性粒细胞激活蛋白和Mr 为 10× 10 3的热休克蛋白。结论　上述蛋白的鉴定为深入研究幽门螺杆菌球形休眠体形成机制 ,筛选具有潜在价值的抗幽门螺杆菌药物靶位和疫苗候选靶位具有参考价值。     

脑性瘫痪儿童脑脊液内外泌体的蛋白质组学分析北大核心

背景:脑性瘫痪(简称脑瘫)是一种广泛的神经损伤性疾病,其病因在很大程度上仍不明确,用于该病分类或监测的分子指标也尚未见报道。目的:分离培养儿童脑瘫患者脑脊液来源的外泌体,使用无标记定量质谱蛋白质组学方法分析其外泌体的蛋白质组表达谱特征,为儿童脑瘫群体的分型、诊断和预后评估等提供分子生物学依据。方法:选择在北京中医药大学东直门医院进行选择性脊神经后根切断术的脑瘫患者,其中痉挛型脑瘫患者4例,混合型脑瘫患者3例,每位患者抽取3 mL脑脊液,通过超速离心法分离儿童脑瘫患者脑脊液中的外泌体,并使用纳米颗粒跟踪分析、透射电镜和蛋白质质谱分析对外泌体进行表征。结果与结论:①透射电镜观察显示,儿童脑瘫患者脑脊液内存在外泌体形态的囊泡。Western blot检测到外泌体标志蛋白Syntenin-1和Flotillin-1的表达;②纳米颗粒跟踪分析显示囊泡的大小和浓度符合外泌体的异质性特征。对痉挛性脑瘫、混合性脑瘫的脑脊液外泌体进行蛋白质谱分析,共鉴定出551个蛋白;③生物信息学分析显示,鉴定出的脑脊液外泌体蛋白与负责外泌体功能和神经发育过程的分子信号机制相关,这些蛋白主要富集于额叶皮质、运动皮质等脑部区域,与脑瘫病理密切相关。研究结果提示儿童脑瘫患者脑脊液内存在外泌体,外泌体蛋白可能与脑瘫分子病理机制相关。     

吞噬凋亡细胞研究新进展

从线虫到哺乳动物 ,吞噬细胞对凋亡细胞的识别与吞噬具有进化保守性 ,目前发现 ,有 7种吞噬基因编码吞噬蛋白参与这一过程的主动调控。吞噬基因的突变可以改变细胞凋亡的进程 ,甚至可以逃避吞噬而存活 ,这具有潜在的临床应用前景     

比较蛋白质组学研究与应用进展

蛋白质组学研究细胞内蛋白质组成及其活动规律是对不同时间和空间发挥功能的特定蛋白质群体的研究。通过比较分析不同条件蛋白质组的差异表达,着眼发现和鉴定出有差异的蛋白质或蛋白质群,即比较蛋白质组学。介绍比较蛋白质组学研究内容适用于比较蛋白质组学研究的相关技术及其在疾病研究中的应用进展。     

邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响研究

目的:近期台湾地区食品及饮料中添加邻苯二甲酸酯类(塑化剂)的安全问题受到广泛关注,已有研究证实邻苯二甲酸酯类物质能影响人类生殖系统发育,但其对人体免疫系统影响尚不清楚。本文研究邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力的影响,以期揭示其对人类健康的危害。方法:使用不同浓度邻苯二甲酸二丁酯体外处理小鼠腹腔巨噬细胞24小时,然后进行巨噬细胞对细菌E.coli以及诱导凋亡的小鼠胸腺细胞的吞噬实验,并检测其吞噬率和吞噬指数,从而评价其对巨噬细胞吞噬能力的影响。用流式细胞仪检测邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞表面吞噬相关分子CD11b、CD54、CD36、TLR4和CD64的影响;利用siRNA技术对吞噬相关受体CD36进行表达干扰,验证其在邻苯二甲酸二丁酯抑制巨噬细胞吞噬能力中的作用。结果:经过24小时体外处理,不同浓度邻苯二甲酸二丁酯对巨噬细胞吞噬能力均有抑制作用,并且具有剂量依赖性。此外,邻苯二甲酸二丁酯能显著降低巨噬细胞清道夫受体CD36的表达。结论:研究结果证实邻苯二甲酸二丁酯通过降低细胞膜表面CD36表达从而抑制巨噬细胞吞噬能力。     

蛋白质组学研究技术进展

本文综述了蛋白质组学研究技术的进展,包括样品制备、蛋白质分离技术、染色技术、蛋白质鉴定技术及蛋白质生物信息学.     

蛋白质组学在肿瘤研究中的应用

肿瘤是机体正常细胞在多因素、多基因作用下,经过多个步骤发生转化,失去原有的生长分化调节而异常增生的结果。因此,肿瘤细胞与其起源的正常细胞相比,蛋白质既有相同也有不同点。应用蛋白质组学研究技术可以比较患有同一肿瘤的不同个体的肿瘤组织(或细胞)之间,或者同一个体肿瘤细胞与正常起源细胞之间蛋白质在表达数量、表达位置和修饰状态上的差异,可以发现肿瘤发生过程中蛋白质变化的规律,筛选和确定肿瘤特异性标记物,对肿瘤发病机制的探讨以及在其诊断和有效治疗均具有重要的意义。     

蛋白质组学在免疫学研究中的应用

蛋白质组学即应用一系列的技术手段,在基因组规模分析蛋白质表达情况,包括蛋白质表达丰度及其翻译后修饰等.正是因为蛋白质组学关注的对象是蛋白质(本质上催化和控制所有生物学过程的分子),蛋白质组学在众多组学分支中显得尤其引人注目.而对于高等动物的免疫系统而言,蛋白质除了发挥执行者的作用外,还具有调节免疫系统,清除病毒或微生物病原体感染,恶性肿瘤细胞的转化等重要功能.因此,蛋白质组学的方法是适于在分子水平进行免疫学研究的理想工具.本综述旨在介绍蛋白质组学在免疫学相关研究中的应用以及对免疫学领域热点问题的推动作用.     

蛋白质组学在药学研究中的应用

在后基因组时代 ,蛋白质组学逐渐成为科学家研究的热点学科。它从整体水平对蛋白质进行分析 ,并逐渐被应用于医学研究的不同领域。在药学范畴内 ,它针对药物作用靶点的识别与验证 ,药物耐药机制的探索 ,药物毒理学研究 ,分子药理模型的构建等进行研究 ,在药物研究方面已显示出巨大的潜力。     

心血管疾病的蛋白质组学研究现状

心血管疾病严重威胁人类健康,深入研究其发病与防治机制具有重要意义.器官、亚细胞和分子水平的研究表明,心血管疾病的发生和发展涉及动态、复杂、精细的细胞内过程.     

信号转导的功能蛋白质组学研究

随着人类基因组图谱的完成、蛋白质组学技术的飞速发展以及用于蛋白质鉴定的生物信息学的不断完善,蛋白质组学研究已经成为鉴定疾病相关标记和治疗靶点的有效工具。根据研究目的和研究手段的不同,蛋白质组学又分为表达蛋白质、结构蛋白质和功能蛋白质组学。表达蛋白质组学研究细胞内表达的蛋白质种类,双向凝胶电泳是主要的研究方法。     

体神经-内脏神经吻合后异类神经再生过程的蛋白质组学分析

目的 使用蛋白质组研究技术研究大鼠体神经-内脏神经吻合术后异类神经再生过程中不同时段蛋白质表达的变化.方法 建立大鼠体神经-内脏神经吻合动物模型,分别于术后7d、14d、28d取出再生的异类神经与对侧正常的体神经,应用双向电泳技术对提取物进行分析,经图像分析系统识别差异蛋白质,用MALDI-TOF-MS对差异表达的蛋白质进行鉴定分析,获得的肽质指纹图谱进入数据库中检索.结果质谱分析识别了25种具不同功能的蛋白质,其中包括神经髓鞘中的成分、急性期炎性因子、神经细胞骨架蛋白和脂类代谢蛋白等.这些蛋白可能在Wallerian变性、轴突再生和再髓鞘化中起作用.结论获得了再生异类神经时序性双向电泳凝胶图谱,成功鉴定25个与异类神经再生相关的蛋白质,揭示了施万细胞和巨噬细胞在异类神经再生过程中所起的重要作用.     

食管癌患者血浆外泌体蛋白标志物TMT定量蛋白质组学筛选及分析

目的 探讨食管癌患者血浆外泌体蛋白的表达变化,筛选并分析食管癌诊断的生物标志物.方法 采用定量蛋白质组学串联质量标签(TMT)标记技术对3例食管鳞状细胞癌患者及3例健康体检者的血浆外泌体蛋白进行检测及定量分析,筛选食管癌患者血清外泌体中发生显著性变化的差异蛋白.采用Proteome Discoverer、STRING等...     

精子蛋白质组学研究进展

迄今蛋白质组学技术已被广泛应用于生理与病理状态下差异蛋白表达的研究,在人类精子蛋白质组学研究方面,许多研究应用该技术对生理与病理状态下精子差异蛋白表达进行了探索,从蛋白质组水平揭示了精子不同生理与病理条件下的蛋白质表达谱的变化规律,为全面理解精子生理与病理的分子机制提供了可靠的理论依据.     

蛋白质组学与心血管疾病

心血管疾病是目前威胁人类健康和生命的主要病因,其中许多心脏疾病的细胞和分子机制的研究手段相对比较匮乏,而随着人类基因组图谱的绘制完成和蛋白质组学的不断完善,因此,蛋白质组作为基因表达的最终产物,将为揭示疾病发生、发展的转化规律提供有益的思路。本文综述了近年来蛋白质组学应用于心血管疾病的研究进展。     

蛋白质组学在肝癌研究中的应用进展

随着人类基因组计划的完成,蛋白质组学作为一种新的高通量、高灵敏性蛋白质层面的检测研究技术,在探讨肝癌发生发展及转移复发机制、筛选药物治疗靶点和预测转移生物标记中发挥了重要作用,对肝癌的药物研发、早期诊断及靶向治疗等方面具有重要意义.     

孔雀绿比色法测定巨噬细胞吞噬功能的研究

测定巨噬细胞(Mφ)吞噬功能是了解机体免疫功能的试验。本文利用无色孔雀绿测定血浆中微量的血红蛋白含量,对用孔雀绿比色法测定小鼠Mφ的吞噬功能进行了研究。实验结果表明小鼠腹腔细胞贴壁2小时,效靶细胞比例1∶100、吞噬时间1小时为该方法的最佳条件。同时,还用本法进行了胸腺素和氢化可的松对体外Mφ吞噬功能影响的测定,结果胸腺素组OD值明显高于对照组,而氢化可的松组OD值明显低于对照组,该方法操作简单,孔雀绿呈色稳定,是定量测定Mφ吞噬功能较满意的试验方法。     

巨噬细胞中Toll样受体的信号转导链接自体吞噬通路与吞噬作用

众所周知，细胞的吞噬作用和自体吞噬是2个古老的、高度保守的过程，它们分别参与细胞外和细胞液中生物体的清除。不管是对代谢的调节，还是对自身的防御，细胞的自体吞噬都会形成1个双层膜结构，此膜结构称为自噬体，自噬体与溶酶体融合，细胞内容物被降解，这个过程类似于吞噬小体的成熟过程。     

戈谢病细胞免疫表型及吞噬功能研究

戈谢病 (Ｇａｕｃｈｅｒ’ｓｄｉｓｅａｓｅ)是一种罕见的脂类代谢异常性疾病 ,临床资料报道较多 ,实验室研究资料尚少。我们通过对 3例戈谢病骨髓中戈谢细胞的免疫表型及吞噬功能研究 ,发现戈谢细胞主要表达淋巴细胞抗原 ,高度表达Ｂ淋巴细胞抗原 ,同时证实戈谢细胞具有吞噬功