组织工程血管种子细胞研究进展

心血管外科常常需要各种直径不同的血管移植物来作为修补材料，目前所应用的多种血管替代物存在易栓塞、钙化、缺乏生长性等缺点，不能满足临床的需求。组织工程血管为解决这一问题提出了新的思路。     

血管组织工程种子细胞研究现状

组织工程化血管构建过程中种子细胞的选取是关键步骤之一.成熟的血管壁细胞及可分化为该类细胞或改善其性能的前体细胞、成体干细胞、胚胎干细胞和基因修饰细胞等,都已作为种子细胞得到研究应用.目前广为采用的还是成熟血管壁细胞,对其分离方法、培养环境等进行改进已使之相对较为适用于组织工程化血管的构建;在体外实验及临床应用中均已证实骨髓基质细胞可分化形成血管壁细胞,但其具体机制仍待阐明;基因转染技术及干细胞的诱导分化也在探索之中.该文对这些种子细胞的研究及应用情况作了综述.     

组织工程血管种子细胞培养的实验研究

目的：为血管组织工程的实验研究提供细胞来源，方法：分别采用消化法和和组织块法培养血管内皮细胞和血管平滑肌细胞，并进行两种细胞的传代、纯化、鉴定以及形态学观察，结果：培养的两种细胞均符合血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的形态特征，结论：所培养的细胞可提供作进一步深入的血管组织工程的研究。     

组织工程化血管

随着多种血管移植手术在外科中的应用 ,血管移植材料的研究成为人们关注的重要课题。自体血管 ,如乳内动脉、大隐静脉虽是较为理想的材料 ,但来源有限。利用人体自身材料如心包〔1〕,构建代用血管也有相应的限制。而目前广泛使用的两种合成材料血管ｅＰＴＦＥ(ｅｘｐａｎｄｅｄｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｏｅｔｈｙ ｌｅｎｅ)与Ｄａｃｒｏｎ ,则由于易发生吻合口处内膜增生及血栓形成〔2〕,作为血管替代物 ,尚不能让人满意。进入 80年代以后 ,细胞工程技术 (ｃｅｌｌｕｌａｒｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ)的成熟使大规模细胞培养成为可能 ,而…     

血管组织工程的研究进展

血管组织工程是在体外构建有生理活性的血管移植物,为心血管外科临床提供新的血管替代物来源。介绍近年来血管组织工程所涉及的主要环节,包括支架材料、种子细胞及构建环境的新进展,显示该领域今后的发展方向。     

组织工程化血管构建中胚胎干细胞诱导分化为血管内皮细胞的研究进展

血管组织工程学是将体外培养扩增的血管壁细胞(包括内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细饱),种植于天然或人工合成的细胞外基质上,经体外培养后,再移植到体内,以替代病损     

血管组织工程的进展

血管组织工程就是在体外构建理想的血管移植物。在过去20余年中涌现出了许多制备血管替代物的方法，包括胶原胶、脱细胞、细胞接种可降解材料等技术，这些成果显示了组织工程血管在临床应用方面的巨大潜力。目前，血管组织工程面临的挑战在于机械性能和抗血栓性，该领域今后的发展方向为细胞来源、体外培养环境、细胞增殖、黏附性和支架材料等。     

组织工程的研究现状

组织工程的研究现状张晨＊张东＊高景恒＊十九世纪和二十世纪中叶，生物学的两大发现是细胞和ＤＮＡ的双螺旋结构，标志着细胞生物学和分子生物学的形成，它们是现代医学发展的两个重要里程碑。近二十年来，在国际上兴起了一门由生物医学和工程学技术相结合的边缘学科，即...     

血管组织工程的进展

血管病变尤其是冠状动脉的闭塞性病变为人类的主要病死原因之一。其主要的治疗方法是血管搭桥手术,需要各种直径的血管移植物作为修补材料。临床已经应用的血管移植物包括自体血管、异体血管和合成材料管道。然而目前无论那种血管移植物都无法满足临床需要,临床需要一种新的血管替代物,这种管道应具有高度的组织相容性、可生     

组织工程骨血管生成的研究进展

目的对组织工程骨血管生成过程中种子细胞及相关细胞因子研究作一综述。方法广泛查阅近年来组织工程骨血管生成相关文献,对常见种子细胞来源、生物学特性、转变机制、相关细胞因子及信号通路等进行综述。结果随着显微外科技术、基因工程技术的发展,组织工程骨血管化细胞共培养体系的研究已有长足进展,无论是诱导性多能干细胞的引入,还是VEGF和血管生成素1双转染MSCs-内皮祖细胞共培养体系,均在骨生成和血管生成中显示出明显优势,但距临床应用仍有距离。结论采用基因修饰构建的种子细胞-细胞因子-支架材料复合物具有血管生成速度快、效率高、稳定性好的优势,在组织工程骨血管化中具有良好应用前景。     

组织工程学方法体外构建血管的研究

目的 探讨用组织工程学方法构建血管的可行性。方法 实验组：将体外培养、扩增的人脐带动脉平滑肌细胞与用可降解的生物材料聚乙醇酸(PGA)制成的管状结构结合，体外培养1周后植入裸鼠背部皮下。分别于2、4、5、6、11周取材进行大体及组织学检测；对照组：将没有细胞的单纯管状PGA植入裸鼠背部皮下，于相同时间点进行检测。结果 实验组在观测点均形成一内壁光滑的管状结构，组织学检测表明，该结构随观测时间的延长组织学成分也有明显的变化，从开始以PGA为主向平滑肌细胞及其分泌的胶原为主要成分过渡。而对照组则随着PGA的降解管状结构逐渐丧失。结论 组织工程学方法可形成具有一定张力及组织成分的管状结构。该方法用于构建血管是可行的。     

组织工程皮肤修复皮肤缺损的初步实验研究

目的:探讨组织工程皮肤移植的手术方法、注意事项及临床效果。方法:2.5～3月龄约克猪6只,制备全厚皮肤缺损创面48个,随机分为三组,每组16例。A组:组织工程全层皮肤移植组;B组:组织工程真皮和自体表皮复合移植组;C组(对照组):自体全厚皮片移植组。观察实验组与对照组间的治愈率。结果:A组治愈率75.00%,B组治愈率87.50%,C组治愈率93.75%,三组比较无显著性差异(χ2=2.34,P>0.05)。结论:组织工程皮肤修复皮肤缺损是可行的。     

Functional tissue engineering of autologous tunica albuginea: a possible graft for Peyronie's disease surgery

OBJECTIVES: The aim of the present study was to generate a tissue engineered type of mechanically stable graft suitable for surgical replacement of the tunica albuginea penis. METHODS: Porcine fibroblasts isolated from open fascia biopsies were seeded on decellularized collagen matrices and then cultivated in a bioreactor under continuous multiaxial stress for up to 21 days (n=12). Static cultures without mechanical stress served as controls. Cell proliferation, cell alignment, and de novo synthesis of extracellular matrix proteins (proteoglycans, procollagen I, elastin) in these grafts was evaluated by hematoxylin-eosin, pentachrome, and immuno-staining. Additionally, the enzymatic isolation of porcine fibroblasts from X4mm skin punch biopsies (n=8) was evaluated. RESULTS: Mechanically strained cultures of fibroblasts showed a homogeneous multilayer matrix infiltration and a regular cell alignment in the direction of strain axis after 7 days, as well as a de novo production of extracellular matrix proteins compared to the static control. A large amount of viable fibroblasts was easily obtained from small skin punch biopsies. CONCLUSION: This study shows that continuous multiaxial stimuli improve proliferation and extracellular matrix synthesis of mature fibroblasts reseeded on a biological matrix making this a feasible autologous tissue engineered graft for penile surgery. For the clinical setting fibroblasts harvested from small skin biopsies can be a comfortable cell source.     

组织工程人工血管的临床应用研究进展

为了寻找理想的血管替代物,涌现很多组织工程血管构建方法 ,如动物蛋白凝胶支架细胞种植,可降解支架细胞种植,组织片层组装,胸、腹腔生物反应器管芯诱导等.有的已部分或完全满足临床应用条件或已应用于临床,本文对大动物试验和临床应用中表现性能较好的构建模型加以综述,并探讨目前研究中的问题及对未来的展望.     

全生物化组织工程血管的体外构建

目的 探讨组织工程血管的体外构建:脱细胞血管基质的制备.血管平滑肌细胞和血管内皮祖细胞的体外诱导培养和种植方法.方法 处理猪胸主动脉来获得脱细胞血管基质,采用二步种植法先后种植体外培养的平滑肌细胞和内皮细胞.结果 动脉管壁细胞全部脱除,脱细胞基质胶原蛋白含量与新鲜动脉相似,胶原纤维、弹性纤维呈网状排列,无断裂,基质保持完好.脱细胞血管基质的极限应力比新鲜动脉绀织减小20%[新鲜动脉:(1.1510±1.2870)×10-2,脱细胞血管基质:(0.9215±1.7000)×10-2,t=34.137,P<0.01].种植的平滑肌细胞和内皮细胞生长良好.结论 平滑肌细胞和内皮细胞种植于脱细胞血管基质后生长良好,可体外构建组织工程血管.     

Bladder wall replacement by tissue engineering and autologous keratinocytes in minipigs

OBJECTIVE: To develop a tissue-engineered bladder wall replacement with autologous cells and a biodegradable scaffold, as whenever there is a lack of native urological tissue the bladder is reconstructed with different bowel segments, which has inevitable complications. MATERIAL AND METHODS: Skin biopsies were taken from six minipigs, and primary fibroblast and keratinocyte cell cultures established. A partial resection of the urinary bladder was reconstructed by a cell-seeded scaffold covered with completely differentiated epithelium and supported by a mucosa-free pedicled ileum graft. Each pig was assessed urodynamically and by cystography before operation and every month until explantation; the pigs were killed at 1, 2 and 3 months after augmentation. Control groups (of six pigs each) with bladder augmentation with complete or denuded ileum were used. The bladders were assessed histologically and by distensibility measurements RESULTS: The differentiated keratinocyte epithelium was still present on the reconstructed bladder wall after 3 months. The overall shrinkage rate was 6.5%. The engineered bladder wall had lower distensibility than the native one. The inflammatory reaction present initially had disappeared after 3 months. CONCLUSIONS: The implanted, tissue-engineered substitution of the bladder wall is not only a bridging graft, but also a complete reconstruction. With this model, extended bladder wall substitution seems feasible and should be investigated in further studies.     

组织工程技术尿道重建的实验研究

目的 利用组织工程技术进行人工管状皮肤的培养，探讨其用于尿道重建的可行性。方法 用Wistar大鼠乳鼠皮肤为细胞来源，结合管状壳多糖基质网架，在体外共同培养成复层皮肤结构，移植到裸鼠皮下。分别于移植的5、7、14、28、35d收取标本，光镜下观察移植物生长情况。以没有种植细胞的壳多糖基质网架作为对照组，进行对比分析。结果 移植物在裸鼠皮下生长良好，未发生收缩。移植初期细胞数量少，排列不规律；随着时间的延长，细胞数量逐渐增多，排列趋于规律。所有移植物均见成纤维细胞生长，约57层，细胞呈长梭形，成纤维细胞向表皮细胞层游走，并规律的生长在表皮细胞层下，细胞大致按层生长，只有少量细胞相互长人对方。在移植后的5d，可见有毛细血管长入。之后，毛细血管的数目日渐增多。移植物的表皮层生长良好，呈4-6层，但分化较差。对照组可见有大量炎性细胞。结论 移植物的成纤维细胞生长、分化较好，表皮细胞增殖较好，但分化差。以壳多糖为支架的人工皮肤进行尿道修复具有可行性。     

组织工程技术在阴道重建中的应用

目的对当前应用组织工程学技术进行阴道重建的研究进展作一综述。方法查阅近年国内外相关文献,总结应用组织工程技术进行阴道重建的研究进展。结果组织工程学为阴道成形术提供了理想的组织衬里,重建的阴道具有与正常阴道相似的形态结构与功能。临床应用组织工程阴道作为阴道成形术衬里对机体无损伤,术后新阴道具有足够的长度与深度,但尚缺乏大量病例观察与长期随访结果。结论应用组织工程学技术进行阴道重建可能具有良好的应用前景,但需要更深入的研究。     

Biliary tract reconstruction using an autologous vein graft in rats

Numerous biologic and synthetic materials have been used with limited success as an interposed graft to repair segmental common bile duct (CBD) defects. The authors report here that an autologous vein graft can be successfully used to correct a CBD deficit contingent on accurate microsurgical technique immediate stenting and rapid graft vascularization. Thirty Sprague-Dawley rats underwent laparotomy and the experimental group (n=25) had a 3-mm segment of the CBD excised. The CBD defect was repaired using an interposed femoral vein graft aided by a plastic stent. The control group (n=5) had the CBD cut and repaired by means of primary anastomosis. The experimental group was subdivided into three sub-groups each examined at three different postoperative intervals: 1, 4 and 12 weeks. The results showed that inflammation was apparent in the venous wall following the first postoperative week. A progressive loss of the vascular endothelium and replacement with the columnar epithelium typical of the CBD was seen in the vein graft. Nineteen of the 25 experimental rats (76 percent) of the animals survived without complication from the surgery and there were no abnormalities in the liver biochemical tests of these animals. Any biliary tract obstruction that developed was attributed to dislocation of the stent leading to collapse of the vein graft (experimental group), or constriction of the anastomosis (control group). This study demonstrates that biliary tract reconstruction using an autologous vein graft can be successfully performed in a rat model of CBD repair. The application of this method to the clinical setting is also discussed.     

应用生物反应器体外构建组织工程化血管平滑肌层

目的探讨生物反应器内构建具有一定强度的组织工程化血管的可行性。方法将体外培养扩增的猪血管平滑肌细胞接种于聚羟基乙酸(PGA)上,形成细胞材料复合物,将其置于生物反应器内培养。实验组(n=5)为动态力学刺激培养(搏动频率:75次/分;扩张量:<5%);对照组(n=5)为静态培养。3周后行大体观察及组织学检测。结果血管样组织直径5mm,长10mm,厚1mm。实验组具有良好的弹性,管腔圆;平滑肌纤维与弹力纤维较多,排列有层次。对照组弹性欠佳,管腔塌陷;平滑肌纤维与弹力纤维较少且排列紊乱。结论应用生物反应器可构建具有良好弹性的血管平滑肌层组织。