半夏与其伪品掌叶半夏的鉴别

目的建立半夏与其伪品掌叶半夏的鉴别方法。方法利用该二药的药材性状、显微特征和薄层色谱加以对照区分。结果发现二者在叶片与块茎形态、淀粉粒形状与复粒中分粒的个数以及薄层色谱的斑点数目和位置均存在较大差异。结论方法简便可行,对此二味药材或粉末等不同类型的样品均可选择本方法鉴别定性。     

掌叶半夏碱甲及其衍生物的合成

腺嘌呤(1a)与6-氯甲基吡啶衍生物(7a～c)在NaH/DMF中反应生成相应的6-氨基-9-(3-取代-6-吡啶)甲基-9H-嘌呤(3b～3d)。3c在酸性甲醇溶液中以Pd/c催化氢解得3a。3a～d的化学结构经光谱分析确证;其中3a为掌叶半夏碱甲。     

掌叶半夏总蛋白诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的实验研究

目的研究掌叶半夏蛋白对人卵巢癌细胞SKOV3体外增殖凋亡活性的影响,以确定掌叶半夏蛋白能否抑制卵巢癌的生长及其可能的作用机制。方法应用CCK-8法检测掌叶半夏蛋白对SKOV3细胞体外生长的影响;利用流式细胞仪,采用Anexinn-V法检测掌叶半夏蛋白诱导SKOV3细胞凋亡的作用。结果SKOV3细胞经掌叶半夏蛋白作用后,细胞生长受到明显的抑制,Anexinn-V法检测到细胞凋亡,凋亡率随着作用浓度的增加及作用时间的延长而升高。结论掌叶半夏蛋白对卵巢癌细胞SKOV3有抑制增殖和促凋亡作用,其诱导凋亡机制有待进一步研究。     

HPLC法测定宫颈癌栓中掌叶半夏碱乙的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定宫颈癌栓中掌叶半夏碱乙含量的方法。方法:色谱柱为Thermo柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(3:97),流速为1.0mL.min-1,检测波长为254nm。结果:掌叶半夏碱乙的检测浓度在0.725～8.700μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999);平均回收率为97.17%,RSD=2.48%(n=6)。结论:本法简便、准确,可用于宫颈癌栓的质量控制。     

半夏类药材不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402的诱导凋亡作用

目的:观察并比较半夏类药材不同提取物诱导体外培养的人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用。方法:应用流式细胞术,检测半夏类药材不同提取物促进人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用,并观察了2种掌叶半夏醋酸乙酯提取物对细胞凋亡的量效关系。结果:3种药材都有诱导Bel-7402肿瘤细胞凋亡的活性,其诱导肿瘤细胞凋亡的有效成分主要集中在总有机酸或醋酸乙酯提取部分。结论:掌叶半夏和半夏诱导肿瘤细胞凋亡的作用较强,水半夏较弱,并且2种掌叶半夏样品的醋酸乙酯部分对促进Bel-7402细胞凋亡呈现一定的剂量依赖性。     

掌叶半夏有效提取物单独对体外培养肝癌HepG2细胞的作用

目的观察中药掌叶半夏有效提取物半夏蛋白对体外培养肝癌HepG2细胞的作用。期待在临床上找到有效抑制肝癌的药物。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,分别用半夏蛋白及DDP（顺铂）处理细胞;用倒置相差显微镜观察细胞生长及摄影,并应用MTT法检测细胞活性。结果半夏蛋白及DDP对肝癌HepG2细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量半夏蛋白可表现出对两种肿瘤细胞的抑制作用,同时,HepG2更加敏感。结论半夏蛋白对肝癌HepG2细胞有明显的抑制生长作用,同时,对各种肝癌细胞作用的程度有一定差别。     

龙胆超临界CO_2萃取物的GC-MS分析

目的分析龙胆的超临界CO2流体萃取成分。方法用超临界CO2流体(SFE)萃取的方法对龙胆进行提取。用GC-MS技术分析超临界CO2萃取物的化学成分。结果从龙胆中确定了28个峰的成分,含量最高的为香樟醇,占总成分的40%以上。结论本方法稳定可行,是分析龙胆中低极性组分的有效手段。     

黄荆子超临界CO_2萃取物化学成分的研究

目的分析黄荆子超临界CO2萃取物的挥发性成分。方法采用超临界CO2萃取法对黄荆子药材进行提取,运用毛细管气相色谱-质谱法对萃取物的挥发性成分进行分析,用气相色谱面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果经毛细管色谱分离出91个峰,并鉴定出了其中的60个化合物,所鉴定的化学成分约占色谱峰总面积的96%。其主要化学成分为正癸醇(71.22%)、2,5,5,8a—四甲基—八氢—2H—苯并吡喃(4.96%)、β—石竹烯(2.29%)、环己烯(1.86%)、蛇床子素(1.77%)、4—羟基—4—甲基—2—戊酮(1.61%)、9—(3—丁烯基)蒽(1.11%)等。结论本研究可为进一步开发利用黄荆子提供科学依据。     

超临界CO2萃取盾叶薯蓣醇提物中薯蓣皂素

目的：优选盾叶薯蓣醇提物中薯蓣皂素的提取工艺。方法：采用超临界CO2萃取技术和正交实验设计研究盾叶著蓣提取物中薯蓣皂素的最佳提取条件,以薯蓣皂苷元作为对照品,采用比色法测定含量。结果：优选提取工艺为：用3倍量无水乙醇作夹带剂、萃取压力30MPa、萃取温度50℃、萃取时间2h;结论：该法可综合利用资源,大幅减少废水的生成,减少环境污染,生产周期也明显缩短。     

细叶桉叶超临界CO_2萃取挥发油的GC-MS分析

目的:分析经超临界CO(2SFE-CO2)萃取的细叶桉叶挥发油的化学成分。方法:采用SFE-CO2法从细叶桉叶中提取挥发油,用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析,并用归一化法确定各化学成分的相对百分含量。结果:细叶桉叶挥发油中共提取、鉴定出28种化合物,占色谱峰总面积的88.13%。其挥发性组分主要是桉油精(33.99%)、冰片(8.88%)、α-蒎烯(5.39%)、石竹烯(4.51%)、(+)-4-蒈烯(4.19%)等。结论:本研究可为细叶桉叶的进一步开发利用提供科学依据。     

二至丸水提物对体外肝细胞损伤的保护作用

目的研究二至丸水提物（aqueous extract of Erzhi Pill,AEEP）对体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法培养L-O2型肝细胞,采用H2O2和CCl4体外分别诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶（AST）和丙氨酸氨基转换酶（ALT）水平,测定上清液中丙二醛（MDA）的含量和过氧化物岐化酶（SOD）活力,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果①AEEP（0.32~40μg/ml）剂量组可明显降低由H2O2升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量,还可提高H2O2降低的肝细胞存活率和SOD活力;②AEEP（0.32~40μg/ml）剂量组可使CCl4升高的肝细胞培养上清液中ALT和ALT水平及MDA含量明显降低或恢复,还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和SOD活力。结论提示AEEP对体外肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

超临界CO2萃取优化肺痿颗粒中黄芪甲苷提取工艺的研究

目的 优化肺痿颗粒中黄芪甲苷的超临界CO₂萃取最佳工艺。方法 以黄芪甲苷的含量为指标,选取粉碎粒度、萃取时间、夹带剂浓度和夹带剂流速为影响因素,采用L₉（3⁴）正交试验法,优化提取工艺。结果 处方最佳提取工艺为粉碎粒度40目、提取时间1.5 h、夹带剂浓度95%乙醇和夹带剂流速10 mL?min^-1进行超临界萃取。结论 该优选工艺有效成分提取率高,条件可行,为肺痿颗粒工艺的优化提供科学依据。     

半夏水提取液逆转多药耐药细胞系K562/A02耐药性的研究

目的观察非细胞毒性浓度半夏水提取液对耐阿霉素的人白血病细胞系K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制.方法采用MTT法测定半夏水提取液的细胞毒性及其对K562/A02细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测非细胞毒性浓度的半夏水提取液处理后K562/A02细胞膜表面糖蛋白P170表达的变化.结果半夏水提取液对K562/A02细胞有一定的细胞毒作用,非细胞毒性浓度半夏水提取液可显著降低阿霉素对K562/A02细胞的IC50,显著降低细胞膜糖蛋白P170的表达.结论半夏水提取液可部分逆转多药耐药细胞系K562/A02细胞对阿霉素的耐药性.     

白刺抗氧化活性提取物的闪提-大孔树脂纯化工艺

目的 建立白刺干果抗氧化提取物的提取和纯化工艺.方法 以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法测定的半抑制浓度(IC 50)值为指标,评价不同醇浓度、不同提取方法所得浸膏及大孔树脂柱不同洗脱流分的抗氧化活性.结果 以70%乙醇为溶剂,采用闪式提取所得浸膏抗氧化活性强、得率高,经AB-8型大孔树脂纯化,西伯利亚白刺(Nitraria sibirica Pall.)以40%乙醇洗脱流分活性最强(半抑制浓度:0.05 mg·mL-1),唐古特白刺(Ni-traria tangutorum Bobr.)以20%乙醇洗脱流分活性最强(半抑制浓度:0.10 mg·mL-1).结论 通过该工艺制备的白刺抗氧化提取物水溶性好,清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼的能力与维生素C相近,是一种很有开发前景的天然抗氧化剂.     

正交设计法优化鼻渊净胶囊超临界CO2萃取工艺条件研究

目的:优选鼻渊净胶囊的SFE-CO₂萃取工艺条件。方法:用正交设计法,以萃取温度、萃取压力、萃取时间为考察因素,以木兰脂素含量、欧前胡素和异欧前胡素含量之和、总萃取得率为评价指标,用L₉(3⁴)正交设计表优选鼻渊净胶囊超临界CO₂最佳工艺条件。结果:萃取温度对综合评价值有显著性影响(P<0.05);萃取压力和萃取时间对综合评价值无显著性影响(P>0.05);优选的萃取条件为:萃取温度50 ℃,萃取压力20 MPa,提取时间2 h。结论:本文优选的SFE-CO₂萃取工艺条件可行、稳定、萃取率高。     

高效液相色谱-蒸发光散射法测定红药片中三七皂苷R_1及人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1的含量

目的用高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)法测定红药片中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量。方法色谱柱填料为氨基键合硅胶(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(体积比为80∶20),漂移管温度为90℃,载气流速为2.1 L.min-1。结果三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Re、Rb1质量分别在0.214~2.14μg、0.808~8.08μg、0.308 4~3.04μg及0.996~9.96μg内的对数值与相应峰面积的对数值呈良好线性关系;制剂中4种成分的平均回收率(n=6)分别为96.7%(RSD=2.1%)、96.0%(RSD=1.2%)、96.8%(RSD=2.4%)和96.6%(RSD=2.5%)。结论该方法准确、分离效果好、无干扰,可用于红药片的质量控制。     

原花青素对H2O2致PC12细胞氧化损伤作用的保护研究

目的：探讨原花青素对H2O2致PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法：使用H2O2造成PC12细胞损伤,MTT法测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化法检测细胞中Bax与Bcl-2的蛋白表达。结果：原花青素能提高H2O2损伤后细胞的活性;能减少细胞凋亡;能够增加Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达。结论：原花青素对H2O2致细胞损伤具有保护作用,能够减少细胞凋亡,其机制可能与其增加Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达有关。     

眼镜王蛇毒中酸性磷脂酶A_2对三氯化铁诱导的大鼠动脉血栓形成的抑制作用

目的　研究眼镜王蛇毒中酸性磷脂酶A2 组分Ⅰ (命名为APLA2 Ⅰ)抑制动脉血栓形成的能力 ,观察将其开发成抗血栓药物的可能性。方法　模型组大鼠舌下ivPBS,3组APLA2 Ⅰ预治疗组大鼠分别舌下ivAPLA2 Ⅰ 1 .0 ,0 .5和 0 .1mg·kg-1 。各组给药 30min后 ,用 40 %FeCl3 诱导大鼠腹主动脉血栓形成 ,监测远端腹主动脉压 ,记录最低腹主动脉压和血栓形成时间 ,测量血栓面积及血栓重量。采用大鼠体外血浆凝块回缩实验观察APLA2 Ⅰ对血浆凝块回缩的影响。用小鼠尾动脉出血实验观察APLA2 Ⅰ对出血时间的影响。结果　预ivAPLA2 Ⅰ 1 .0 ,0 .5及 0 .1mg·kg-1 可抑制FeCl3 诱导的大鼠血栓形成后的腹主动脉压下降 ,使最低腹主动脉压从(4.0± 0 .5)kPa(模型组 )分别增高至 (7.7± 1 .0 ) ,(6 .8±0 .8)和 (5 .4± 0 .7)kPa ;使血栓形成时间从(31±4)min(模型组 )分别延长至 (60± 7) ,(53± 5)和(49± 6)min;使血栓面积从 (1 0 62± 1 39) μm2 (模型组 )分别减少至 (72 4± 74) ,(785± 96)和 (91 0±1 2 6) μm2 ;使 0 .5cm长血管内血栓重量从 (5 .2±0 .6)mg(模型组 )分别减少至 (3 .5± 0 .5) ,(3 .8±0 .5)和 (4.6± 0 .6)mg(P <0 .0 5 ,n =1 0 )。体外实验显示APLA2 Ⅰ能剂量依赖性地抑制大鼠血浆凝块回缩?     

川芎嗪对大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤L4/L5段背根神经节P2X3受体表达的影响

目的 探讨川芎嗪抑制P2X₃受体介导慢性神经病理痛的作用途径。方法 制备大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)神经病理痛模型，于d 2起ip川芎嗪100 mg·kg^-1，每天1次，共14 d。免疫组织化学法观察CCI大鼠L₄/L₅段背根神经节P2X₃受体的表达，全细胞膜片钳技术测定新鲜分离的L₄/L₅段背根神经节三磷酸腺苷（ATP）和α,β-亚甲基三磷酸腺苷（α,β-meATP）激活的电流。结果 与正常对照组比较，正常大鼠ip川芎嗪14 d，L₄/L₅段背根神经节P2X₃受体表达、ATP激活电流和α,β-meATP激活电流无明显变化，假手术组亦无明显变化。与假手术组比较，CCI模型组大鼠L₄/L₅段背根神经节P2X₃受体的表达、ATP和α,β-meATP激活电流明显增强。CCI大鼠ip川芎嗪14 d，L₄/L₅段背根神经节P2X₃受体表达、ATP和α,β-meATP激活电流较CCI模型组明显降低。结论 川芎嗪可抑制CCI大鼠L₄/L₅段背根神经节P2X₃受体的表达，从而对P2X₃受体介导的神经病理痛产生抑制作用。