冷浸泡法保存心脏的实验研究（保存心脏2—6小时）

冷浸泡法保存成年猪心２．５０～６．０８ｈ，利用体外循环装置使１１个心脏离体复苏并测试心功能。在心脏复苏前用温血心停搏液灌注以减轻再灌注损伤。结果表明在灌注温血心停搏液时，心脏无电机械活动，ＭＶＯ２为１．５０±０．９３％。１１个离体心脏经灌注氧合血后７个自动复跳，４个需电击除颤。测试心输出量为１５００～４２５０ｍｌ／ｍｉｎ，平均２７２５±８７５ｍｌ／ｍｉｎ；其中１个心脏保存６．０８ｈ，心输出量为４２００ｍｌ／ｍｉｎ。２个保存心脏的组织学表明除心肌纤维及其间隙轻度水肿外，无不可逆病损。单纯冷浸泡法保存心脏其安全时限一般为４ｈ。本实验采用温血心停搏液灌注法，延长保存期至６ｈ，心肌组织学损害轻。复苏后心功能满意。     

原位心脏移植20例动物实验研究

本文报告１９９２年４月至１９９３年１２月对２０只犬进行原位心脏移植的实验研究。２０只实验犬均手术成功，获得满意的结果。文中就供体的准备，供心的荨取，供心的保存，爱体的准备，受体心的切除，供心移植的技术进行了描要这和讨论 。     

二氮嗪改善供心超时冷保存效果的实验研究

目的　研究二氮嗪在离体大鼠心脏冷保存中的作用,探讨线粒体ATP敏感性钾通道(Mito chondrialATP sensitivepotassiumchannel,MitoKATPC)开放剂在改善供心功能中的可能机制,及超时(超过公认5h)冷保存供心的有效性。方法　SD大鼠随机分7组。对照组、二氮嗪(DE)组,以上两组又各分为冷保存3、5、10h组和DE +5 羟基葵酸盐(5 HD)组。采用Langendorff离体鼠心灌注法,复灌6 0min ,观察心脏血流动力学、冠脉流出液心肌酶漏出量及心肌水含量变化,并做心肌超微结构检查。结果　(1)冷保存3、5、10h后,DE组LVDP、±dp/dtmax、CF恢复率在多个复灌时间点上均优于对照组,且心肌酶漏出量明显减少。(2 )5、10h保存组中,DE处理后LVEDP的变化明显小于对照组。(3)与对照组相比,保存10h后DE组的心肌水含量明显降低,且心肌超微结构优于对照组。(4)与保存5h对照组相比,保存10h后DE组在复灌期可显著抑制LVEDP的增高;仅LVDP和-dp/dtmax恢复率较保存5h对照组低。(5 )DE的上述作用可被Mi-toKATPC的特异性阻断剂5 HD抵消。结论　Celsior保存液中加入DE能明显改善离体大鼠心脏冷保存效果,且供心的冷缺血安全时间可安全延长至10h,其保护机制涉及MitoKATPC的开放     

自制SDMC—1液对热缺血冷保存狗心保护的实验研究

为提高心脏离体保存效果，作者研制了ＳＤＭＣ１号（山东医科大学心脏１号）心脏保存液。实验采用狗心异体异位移植。供心先经６分钟常温缺血后，实验组（ｎ＝６）用ＳＤＭＣ１液，对照组（ｎ＝６）用Ｃｏｌｉｎｓ液分别进行心脏灌洗并离体低温保存（４℃）６小时。观察指标：（１）供心再供血至恢复稳定节律时间；（２）电除颤次数；（３）血清肌酸激酶同功酶（ＣＫＭＢ）和丙二醛（ＭＤＡ）；（４）供心左心室功能和心肌超微结构。结果显示：ＳＤＭＣ１液灌洗并单纯低温离体保存的狗心移植后，心电活动和左心室功能恢复快，较Ｃｏｌｉｎｓ液有更好的心肌保护效果。     

延长大鼠异种心脏移植后存活时间的实验研究

目的　研究如何延长大鼠异种心脏移植后的存活时间。方法　实验分为A、B、C、D四组。A组 :移植术前 12、8、4、0d及 10、6、2、0d分别将脾细胞 1× 10 8个 ,抗血清 0 .2ml静脉注入受体大鼠 ;B组 :在A组的基础上 ,加用中华眼镜蛇毒 (CCV) 0 .2mg·kg-1·d-1,术前 3d至术日腹腔注射。C组 :在B组的基础上 ,加用环孢素A(CsA) 10mg·kg-1·d-1、环磷酰胺 (Cy) 2 0mg·kg-1·d-1,术前 12d开始至术日腹腔注射。D组 :在C组的基础上 ,加用抗巨噬细胞和抗自然杀伤细胞单克隆抗体 2 5 0 μg·kg-1·d-1,术前 12d开始至术日腹腔注射。结果　A、B、C、D四组移植心脏分别存活 (0 .32± 0 .12 )h ,(2 5 .6± 9.6 )h、(48.6± 10 .4)h和 (72 .4± 2 1.7)h ;术日各组IgG均下降 ,尤以C、D组下降明显 ,与A、B组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　术前静脉注射供体脾细胞及抗血清 ,尤其与CCV、CsA、Cy合用 ,能显著抑制IgG的产生 ,延长移植心脏的存活时间。     

经二氮嗪强化的Celsior液延长大鼠供心冷保存时间的研究

目的 研究经二氮嗪强化的Celsior液对延长大鼠供心冷保存时间的作用及机制.方法 选取近交系雄性SD大鼠作为心脏移植的供、受者.根据供心保存液的不同分为对照组和实验组,每组24只.再根据供心保存时间的不同,将对照组和实验组各随机平均分为3组:对照5、8和10 h组,分别将供心置于低温单纯Celsior液中保存5、8和10 h;实验5、8和10 h组,分别将供心置于含30/μmol/L二氮嗪的低温Celsior液中保存5、8和10 h.各组供心在保存相应时间后进行大鼠颈部异位心脏移植.术后观察和比较各组供心移植后的复跳率、心肌丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、ATP酶活性、Caspase-3蛋白的表达水平、心肌细胞凋亡以及心肌超微结构的变化.结果 供心血流开放30 s内,实验8和10 h组心脏复跳率较相应对照组显著提高;在相同保存时间下,实验组较对照组心肌MDA含量明显降低、SOD活性和心肌ATP酶活性明显增强以及Caspase-3蛋白表达和心肌细胞凋亡减少;各实验组和对照5 h组心肌超微结构清晰、完整;对照8和10 h组心肌超微结构受到不同程度的损伤.结论 经二氮嗪强化的Celsior液能够有效延长大鼠供心的冷保存时间,其作用机制可能与二氮嗪减轻供心的缺血再灌注损伤有关.     

22例原位心脏移植术中长时间心肌缺血的心肌保护和术后近期效果

心脏移植手术是治疗各种终末期心脏病合理而又必要的治疗手段，但主要制约因素是供体的来源不足。对于供心耐受缺血的上限，目前，国外均认为4h内为安全期限。     

供肝灌洗液中透明质酸含量与肝脏冷保存损伤及术后成活率的关系

目的 :观察冷保存后供肝灌洗液中透明质酸 (Hyaluronic Acid,HA)水平与肝功能及成活率的关系。方法 :行 2 3例猪原位肝移植术 ,供肝植入前 ,用 4℃乳酸林格氏液经门静脉内灌洗肝脏 ,测量灌洗液中的HA含量。同时 ,分别于术后 2小时、2 4小时及 72小时取血测肝功能 (AL T及 L DH ) ,取其中最高值 (即峰值 )。结果 :以 HA值为 40 0μg/ L作为界限 ,把实验猪分为两组 ,结果发现血清 AL T及 L DH峰值在两组间无显著差异 ,而 2 4小时及 2成活率也没有显著差异。结论 :供肝灌液洗中 HA含量与术后早期肝功能和成活率无关。即测量灌洗液中的 HA含量不能预测供肝功能和术后成活情况     

自制多器官保存液对草犬肾脏低温保存的实验研究

目的 研究自制上海多器官(SMO)液对草犬肾脏低温保存的效果。方法 采用草犬肾脏非循环离体灌注模型，比较SMO液、Uw液和高渗枸椽酸盐嘌呤溶液(HC-A)对草犬肾脏保存后，其形态学及生物化学的改变，并进行肾脏移植，观察移植后肾功能恢复情况。结果 SMO液保存72h之内，肾脏的形态学无明显改变，其各项生化功能SMO组明显优于HC-A组(P＜0．05)；与Uw液组比较，肾脏线粒体呼吸控制率(RCR)、皮质ATP含量两组间差异有显著性(P＜0．05)；保存48、72h后保存液PH值，SMO组明显高于Uw组(P＜0.05)。结论 SMO液保存犬肾72h效果明显优于HC-A液，与UW液相当。     

自制SDMC-2液对离体大鼠心脏低温保存的实验研究

目的：开发一种应用简便、保存效果好的新心脏保存液。方法：实验动物采用SD雄性大鼠。分为对照组（A组），Stanford液保存组（B组），SDMC－1液保存组（C组），SDMC－2液保存组（D组）。实验组中，每组心脏均经某一种液体停搏、灌洗并保存8h，然后通过Langendorff灌流装置再灌注，分别测定保存未及再灌注后心肌的ATP、肌酸激酶（CK）、含水量及组织学检查，以及左心室功能的恢复、冠脉流量（CF）。结果：B、C、D三组各项检测指标与A组比较均有不同和程度降低（P＜0．05或0．01）。左心室功能指标；D组优于B、C组；CF：D组高于B、C组；ATP、CK含量：保存末及再灌注后D组优于B、C组，再灌注前后比较，B、C组降低；B组水含量高且再灌注后加重；电镜：D组细胞结构损伤轻，B组损伤最重。结论：SDMC－2液配方更为合理，长时间低温保存离体心脏，效果优良。可直接用于心脏停搏、原位灌洗、保存及移植过程中的灌注，简化了心脏保存过程。     

Orthotopic transplantation of the canine heart after prolonged preservation by simple immersion

The viability of the heart was assessed following orthotopic transplantation. Following coronary vascular washout with cold potassium-verapamil cardioplegia, the heart was removed, immersed in the same solution, and stored at 4°C for 24 hours in Group I (6 animals), 36 hours in Group II (5 animals), and 48 hours in Group III (3 animals). All six animals in Group I and four of five animals in Group II maintained a stable recipient circulation for the acute phase of 2 hours after transplantation, without cardiopulmonary bypass. For the dogs in Group III, cardiopulmonary bypass was vital. Contraction band injury after transplantation was more frequently observed in the Group II grafts than those of Group I. We conclude that the combination of coronary vascular washout with cold potassium-verapamil cardioplegia and storage at 4°C in the same solution may preserve the canine heart for up to 24 to 36 hours, as demonstrated by post-orthotopic transplantation function. Presented at the Thirty-sixth Annual Meeting of the Japanese Association for Thoracic Surgery, Kyoto, Japan, November 11–13, 1983     

HOE-642联合改良K/Mg冷血心麻液对犬供心的保护作用

目的探讨HOE-642联合改良K／Mg冷血心麻液提高犬供心的保存效果的作用。方法雄性成年杂种家犬32只，随机分为整合组和常规组（每组16只，供、受者各8只）。（1）整合组：供心保护采用HOE-642联合改良K／Mg冷血心麻液的“整合策略”；（2）常规组：供心保护采用临床上常规方法。所有动物的供心均冷浸浴保存4h，心脏移植用原位标准法。记录不同时段的心功能指标；实验结束后观察心肌超微结构并测定心肌含水量。结果每组各1例主动脉开放后因主动脉吻合口漏血，失血陛休克死亡，剔除出实验；其余动物均成功脱离体外循环。整合组的移植心脏左心室收缩功能和舒张功能恢复指标显著优于常规组（P〈0．05）；整合组心肌组织含水量显著小于常规组（P〈0．05）；整合组心肌细胞亚细胞结构的保存亦优于常规组。结论临床常规方法和HOE-642联合改良K／Mg冷血心麻液的“整合策略”，均可安全冷保存供心4h，但后者能进一步减轻心肌水肿、维持心肌细胞结构完整、促进缺血／再灌注损伤后心功能的恢复，具有更佳的心肌保护效果。     

SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用

目 的研究SMO保存液对犬肾低温保存期间线粒体功能的保护作用。方法 建立犬离体肾脏单纯低温保存模型，分别采用0～4℃的SMO保存液、HTK保存液和UW保存液对犬肾进行灌注和保存，并根据所用保存液的不同分为SMO组、HTK组和UW组。分别于低温保存2、24、48和72h后取各组的肾组织皮质标本，进行病理学观察并应用氧电极（Clark）法测定肾组织细胞线粒体的呼吸控制率（RCR）和磷／氧比（P／O）。结果 犬肾在保存48h和72h后，SMO组肾组织病理学改变较HTK组轻；保存24h内肾组织RCR与HTK组无明显差异，但其余时间点均高于HTK组（P〈0．05），保存72h时差异最为明显（P〈0．01）。SMO组犬肾保存2h后，肾组织的P／O比值与HTK组无明显差异（P〉0．05），但在保存24h后则明显高于HTK组（P〈0．05）。SMO组与UW组各项观察指标比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 SMO保存液在减轻细胞形态学改变和保持线粒体整体功能方面显著优于HTK保存液，与UW保存液效果相当。     

总结69例心脏移植中供心的心肌保护技术

目的总结心脏移植中供心的心肌保护技术，分析供心的灌注、保存以及缺血时间对心脏移植效果的影响。方法回顾性分析2004年6月至2006年9月间的69例晚期心脏病患者行心脏移植术的临床资料。供心的心肌保护采用低温St．Thomas液和HTK液顺序灌注方法，术中供心保持持续低温状态。根据供心缺血时间长短将受者分为两组，A组36例，供心缺血时间小于240min；B组33例，供心缺血时间大于240min。术后对受者进行定期随访。结果在心脏移植术中，B组受者较A组的体外循环时间延长。术后两组受者的死亡率、移植心功能、排斥反应以及并发症等资料的比较，差异无统计学意义（P〈0．05）。所有受者在心脏移植后，无近期死亡，但随访期间死亡6例。结论采用St．Thomas液和HTK液顺序冷灌注的改良方法，能够有效的保护供心心肌组织；供心缺血时间的缩短会使心肌泵血功能恢复较快。这些对移植心功能的恢复和受者的预后具有良好的近期和中期效果。     

尼可地尔超极化心脏保存液保存兔心的效果

目的 研究钾通道开放剂尼可地尔（nicorandil）在心脏保存中的作用。方法 40个兔心随机分成4组，分别用含尼可地尔的KH液（超级化心脏保存液）、UW液、STH液和KH液保存。采用Langendorff灌注模型和工作心模型，保存前、后测左室发展压、心室内压上升最大速率、心室内压下降最大速率、冠状动脉流量、肌酸激酶及乳酸脱氢酶，记录各组心跳停止和心电活动停止所需时间、心肌含水量、保存后心肌ATP含量。结果 尼可地尔组的各项指标（除心肌含水量外）均优于STH组和KH组，达到了UW液的效果，结论 尼可地尔超级化心脏保存液保存兔心效果较好。     

Fas/FasL和Caspase-3在二氮嗪强化Celsior液超时冷保存鼠心移植中的表达及其意义

研究心肌线粒体三磷腺苷敏感性钾离子通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel,MitoKATPC)开放剂二氮嗪(diazoxide,DE)添加入Celsior液中对大鼠供心超时冷保存的效果,并探讨其抗心肌凋亡作用的可能机制.方法 SD大鼠112 只,随机分成7组,每组16只(供者、受者各8只).(1)Celsior组:保存液为单纯Celsior液;(2)DE组:保存液为30 μmol/L DE+Celsior 液;上述两组又以保存时间不同分为5 h、8 h、10 h组.(3)5-HD组:保存液为Celsior液+DE (30 μmol/L)+5-HD(100 μmol/L),保存时间为5 h.利用改良Heron法建立大鼠颈部异位心脏移植模型,观察移植术后5 min内心脏恢复跳动、心率表现;采用原位末端标记染色法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学方法检测心肌Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达情况;以及用电镜观察心肌超微结构等.结果 (1)除5 h保存时间的心脏外,DE各组心脏移植术后30 s复跳率较相应Celsior液组显著提高;DE组心率明显较Celsior液组快(P<0.05),DE 10 h组与Celsior 5 h组无明显区别(P>0.05);(2)与Celsior液组相比,DE处理明显降低各组心肌细胞凋亡指数(P<0.05),减少Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达(均为P<0.05);DE 10 h组与Celsior 5 h组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)5-HD可取消上述DE的作用;(4)DE各组和Celsior 5 h组心肌超微结构保护相对较佳:肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显,嵴结构较为清楚;Celsior 10 h组心肌结构尚清楚,但肌纤维疏松,个别区域肌丝肌节溶解,线粒体肿胀较明显,嵴模糊.结论 DE强化Celsior液冷保存的鼠供心,可能通过激活MitoKATPC,明显抑制Fas/FasL和Caspase-3蛋白的表达,保护线粒体功能和结构的完整,从而使心肌细胞凋亡减少,减轻缺血再灌注损伤,使得DE强化Celsior液超时(10 h)冷保存的鼠供心移植安全有效.     

温度对犬肺灌注保存效果的影响

评价不同温度灌注和保存犬肺对肺保存效果的影响.方法 将24只犬随机分为实验组和对照组两组,每组供、受体各6只.实验组以23℃低钾右旋糖酐(LPD)液灌注后切取右肺保存于10℃LPD液,对照组以4℃LPD液灌注后切取右肺保存于4℃LPD液,其后两组均行左肺移植术.比较两组供体肺组织不同时间段的髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量及湿/干重量比(W/D),比较两组受体犬移植前后不同时间肺血流动力学参数以及血气分析指标,并比较病理结果.结果与对照组相比,实验组肺组织灌注后各时间段的MPO活性、丙二醛含量及W/D较低(P<0.05).实验组受体犬移植后的肺毛细血管楔压(PCWP)、平均肺动脉压(MPAP)较低,动脉血氧分压(PaO2)较高,差异均有统计学意义(均为P﹤0.05).病理学结果显示,实验组肺组织中性粒细胞浸润、肺泡水肿及损伤等病理变化较对照组减轻.结论 在本实验条件下,与4℃灌注+4℃保存相比,23℃灌注+10℃保存的温度对犬肺具有较好的保存效果,更适用于实验肺移植.