FSHR和SCF在梗阻性和非梗阻性无精症患者睾丸组织中表达的初步研究

目的研究FSHR和SCF在梗阻性和非梗阻性无精症患者睾丸组织中表达是否存在差异,初步探讨精子产生是否与FSHR和SCF表达量有关.方法收集2007年11月至2009年9月无精症患者的睾丸活检标本的石蜡块36例,2008年8月至2010年4月无精症患者的睾丸活检组织标本19例,依病理结果分梗阻性和非梗阻性两组,36例标本用免疫组化MaxVision快速法、19例标本用real time PCR荧光定量法检测两组睾丸组织FSHR、SCF的表达情况,分别用积分光密度（IOD）值和2-△CT值比较FSHR、SCF的表达差异.结果 （1）免疫组化部分：两组FSHR和SCF表达量分别比较,梗阻性无精症组表达都明显高于非梗阻性无精症组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;（2）real time PCR部分：与梗阻性无精症组比较,非梗阻性无精症组患者FSHR mRNA和SCFmRNA的表达量均减少,差异具有统计学意义（P〈0.05）.结论非梗阻性无精症睾丸组织FSHR及SCF mRNA表达下调可能是非梗阻性无精症患者睾丸精子分化成熟障碍的原因之一.     

EGFR和中期因子在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其与预后的关系

目的：研究EGFR和中期因子在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其与预后的关系。方法：应用免疫组化的方法检测卵巢上皮性肿瘤组织中的表达的情况并分析卵巢上皮性肿瘤组织中EGFR和中期因子阳性的表达率与预后的关系。结果：EGFR和中期因子在卵巢癌组织中的阳性表达水平明显高于卵巢的良性肿瘤和正常的卵巢组织，低分化、有淋巴结转移伴腹水和临床分期为晚期的EGFR和中期因子阳性的表达率显著升高。结论：EGFR和中期因子在卵巢上皮性肿瘤的进展中起到至关重要的作用，能够作为判断卵巢上皮性肿瘤组织的恶性程度和预后的重要指标。     

基于MSR1 mRNA和蛋白在泛癌组织中表达的生物信息学分析及其意义

目的：通过生物信息学分析探讨巨噬细胞清道夫受体1 (MSR1)在泛癌组织中的表达水平、患者生存情况和免疫特性,阐明MSR1作为新的生物标志物对肿瘤的诊断、预后和免疫治疗的价值。方法：采用临床生信之家数据库和Sangerbox数据库分析正常组织和肿瘤组织中MSR1 mRNA表达水平,采用人类蛋白质图谱（HPA）数据库分析MSR1蛋白表达情况,采用单因素生存分析和Kaplan-Meier分析评估MSR1对预后的价值,采用肿瘤免疫单细胞中心（TISCH）数据库的单细胞测序结果分析MSR1在各种细胞类型中的表达情况,采用肿瘤免疫估计资源（TIMER2.0）、肿瘤免疫共基因小鼠（TISMO）、肿瘤免疫功能障碍与排斥（TIDE）和基因集癌症分析（GSCA）数据库分析泛癌组织中MSR1表达水平与免疫细胞浸润、免疫检查点基因表达和免疫治疗反应之间的相关性。结果：与正常组织比较,在17种肿瘤组织中MSR1 mRNA表达水平上调,包括乳腺浸润性癌（BRCA）、结肠腺癌（COAD）、食道癌（ESCA）、多形性胶质母细胞瘤（GBM）、头颈部鳞状细胞癌（HNSC）、肾透明细胞癌（KIRC）、肾性肾乳头状细胞癌（...     

Plasma SCF/c-kit Levels in Patients with Dipper and Non-Dipper Hypertension

Objective The aim of this study was to investigate the relationship between peripheral plasma stem cell factor (SCF)/c-kit levels and the types of dipper and non-dipper hypertension in hypertensive patients. Methods This cross-sectional study included newly diagnosed hypertensive patients who underwent 24-hour ambulatory blood pressure monitor (ABPM) between January 2009 and 2012 in Jiangning city. Patients were divided into the dipper group and the non-dipper group according to ABPM measurements. The levels of SCF and its receptor c-kit, tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin 6 (IL-6) in peripheral blood were measuredvia enzyme-linked immunosorbent assays. The serum levels of glucose and lipid were examined as well. The levels of SCF/c-kit were compared between the dippers and the non-dippers; and their correlation with 24-hour mean systolic blood pressure (MSBP), 24-hour mean diastolic blood pressure (MDBP), TNF-α and IL-6 were investigated using linear regression analyses statistically. Results A total of 247 patients with newly diagnosed hypertension were recruited into the study, including 116 non-dippers and 131 dippers. The levels of peripheral plasma SCF were higher in non-dipper group (907.1±52.7ng/L vs. 778.7±44.6 ng/L;t=2.837,P<0.01), and the levels of c-kit were higher in non-dipper group too (13.2±1.7μg/Lvs 9.57±1.4μg/L; t=2.831,P<0.01). Linear regression analysis revealed that SCF/c-kit levels were significantly positively correlated with MSBP, MDBP, plasma TNF-α, and IL-6 levels (allP<0.01). Conclusions Peripheral plasma SCF/c-kit levels are higher in patients with non-dipper hypertension than those with dipper one, and significantly correlate with 24-hour MSBP, 24-hour MDBP, serum TNF-α and IL-6 levels.     

精液中SCF/c-kit值在肾虚男性不育辨证中的价值

目的：评价精液中干细胞因子（stem cell factor, SCF）及其受体（c-kit）在男性不育肾虚证中的临床诊断价值,为肾藏精主生殖的基本理论提供实验依据。方法选取45例肾虚不育型患者与30例正常生育者进行对照研究,用酶联免疫吸附试验（ELISA法）测定两组精浆中SCF含量,用实时荧光定量 PCR方法对精液离心沉淀物检测c-kit的ct值,并计算其相对表达量。结果两组患者SCF浓度比较无差异（P>0.05）,与正常生育组比较,肾虚不育患者前向运动精子数明显降低（P<0.01）、精液离心沉淀物c-kit相对表达量升高（P<0.05）。结论男性不育肾虚证与精子活动和精液中c-kit表达量密切相关,两者可以作为男性不育肾虚证辨证时重要的客观指标,同时为中医肾藏精主生殖理论提供科学依据。     

SCF/c-Kit反应轴调控ADSCs在糖尿病创面修复中的作用研究

探讨干细胞因子（SCF）/ 干细胞因子受体（c-Kit）信号调节脂肪间充质干细胞（ADSCs）增殖、迁移的作用机制,及其在糖尿病创面愈合中的作用。方法分离培养ADSCs。将其分为ADSCs 组、ADSCs+SCF（4 ng/ml,24 h）组和ADSCs+SCF+c-Kit siRNA（4 ng/ml,24 h）组;利用Western blot检测c-Kit、p-AKT、AKT蛋白的表达;采用CCK-8、细胞克隆形成检测增殖情况;采用Transwell法检测迁移情况。采用链脲佐菌素腹腔注射复制糖尿病小鼠模型,并复制背部直径为2cm 的全层皮肤缺损模型。将6 只糖尿病裸鼠随机分为实验组和对照组,对照组小鼠于创面周围以皮内注射方式注射1×106个未处理的ADSCs,实验组小鼠注射等量的经SCF（4 ng/ml）预处理24 h后的ADSCs。10 d后处死各组裸鼠,计算创面愈合率,苏木精- 伊红染色法检测真皮层与表皮层间的厚度,比较两组的差异。结果SCF 诱导c-Kit的表达呈时间、浓度依赖性（p <0.05）。SCF促进ADSCs的增殖、迁移,c-Kit siRNA抑制ADSCs的增殖、迁移（p <0.05）。SCF促进p-AKT的表达,c-Kit siRNA抑制c-Kit、p-AKT 的表达。实验组糖尿病裸鼠创面愈合率更高,真皮层与表皮层厚度大（p <0.05）。结论SCF/c-Kit 反应轴激活PI3K/AKT 信号通路,促进ADSCs 增殖、迁移。SCF 预处理能够促进糖尿病裸鼠创面愈合。     

莪术-三棱药对配伍挥发油成分GC-MS分析

目的：考察莪术、三棱药对配伍对挥发油化学成分的影响。方法：采用气-质联用系统对莪术、三棱药材以及药对配伍中的挥发油进行分析,评价配伍对挥发油成分及含量的影响。结果：采用GC-MS对莪术、三棱药材和药对挥发油的成分进行分析比较,发现莪术挥发油中检出的（1S-内）-1,7,7-三甲基-双环[2.2.1]庚烷-2-乙酸酯,1R,3Z,9S-2,6,10,10-四甲基双环[7.2.0]十一-2,6-二烯,（1α,4aα,8aα）-1,2,4a,5,6,8a-六氢化-4,7-二甲基-1-（1-甲基乙基）-萘,（E,E）-3,7-二甲基-10-（1-甲基亚乙基）-3,7-癸二烯-1-酮等成分和三棱挥发油中检出的（3α,3aβ,7β,8aα）-八氢化-3,8,8-三甲基-6-亚甲基-1H-3a,7-亚甲基薁、2,6-双（1,1-二甲基乙基）-苯酚等成分在药对挥发油中未检出,而相对于单煎所得的挥发油,药对挥发油中新增成分有莰烯,乙酸龙脑酯,[s-（E,E）]-1-甲基-5-亚甲基-8-（1-甲基乙基）-1,6-环癸二烯,反-6-乙烯基-4,5,6,7-四氢-3,6-二甲基-5-异丙烯基-苯并呋喃等。结论：莪术、三棱药对配伍对所提挥发油的成分和含量都有较大的影响。     

不同产地苍术挥发油特征性成分分析

目的 对不同产地苍术中苍术素、苍术酮和β-桉叶醇进行含量测定,为茅苍术道地性及品质评价提供依据.方法 气相色谱法,选用HP-5毛细管柱,氢火焰离子化检测器(FID),检测器温度为300℃,氢气流量为40 mL/Min,空气流量为450 mL/min,尾吹N2 45 mL/min;进样量为1 μL.结果 句容茅山苍术中苍术素和苍术酮的含量明显高于其他产地,挥发油中苍术酮、β-按叶醇及苍术素符合一种特定配比关系(0.70～2.00):(0.09～0.40):1.结论 句容茅山产苍术在主成分含量及配比关系上具有明显道地性特征.     

肝细胞生长因子对c-kit+Lin-细胞的增殖作用

目的 探讨在无血清无基质的条件下,肝细胞生长因子(HGF)和因子组合对扩增c-kit Lin-细胞的影响.方法 采用免疫磁珠法分离小鼠骨髓c-kit Lin-细胞,研究在干细胞因子(SCF),FLt-3配基(FL),促血小板生成素(TPO)和白血病抑制因子(LIF)组合中添加不同浓度的HGF培养7 d,检测细胞总数,c-kit Lin-细胞扩增倍数及细胞凋亡率.结果 各因子组均可显著扩增c-kit Lin-细胞,扩增倍数2～8倍不等.其中,10ng/ml HGF组扩增c-kit Lin-细胞效果最为显著.为8.00倍,细胞总数扩增45.43倍,细胞凋亡率为17.42%.但随剂量加大,虽然细胞总数上升,c-kit Lin-细胞扩增反而下降.40 ng/ml组细胞总数扩增80.50倍,c-kit Lin-细胞扩增效果不明显,仅为2.87倍,细胞凋亡率最低.为5.91%.结论 10 ng/ml的HGF能协同SCF FL TPO LIF扩增c-kit Lin-细胞,使细胞凋亡率降低,其表型并不受影响,但过高剂量会诱导其分化.     

纳洛酮对离体人脑神经元缺氧损伤干细胞因子和受体表达的影响

目的 通过检测神经元细胞内干细胞因子(SCF)及其受体c-kit(c-kitR)mRNA表达量的变化探讨纳洛酮对人胚胎大脑神经元缺氧损伤的影响.方法 应用无血清方法原代培养人胚胎大脑神经元,于第10天对神经元进行缺氧结合无糖处理.将24孔培养板细胞随机分为4组:对照组(按照正常培养条件同期培养)、单纯缺氧组(缺氧无糖处理0.5h)、纳洛酮0.5组(纳洛酮0.5μg/ml+缺氧无糖处理0.5 h)、纳洛酮10组(纳洛酮10μg/ml+缺氧无糖处理0.5 h).分别于复氧24 h后测定细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)浓度,并应用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞存活情况.将25 ml培养瓶按上述方法分组,分别于缺氧前、缺氧后即刻、复氧3、6、12和24 h提取细胞内总RNA,应用逆转录聚合酶链反应扩增后,检测SCF和c-kitR mRNA表达量的变化.结果 单纯缺氧组细胞MTT值显著低于对照组(P<0.01),纳洛酮0.5组MTT值显著低于对照组,与单纯缺氧组比较差异无显著性,络洛酮10组MTT升高至对照组水平(P>0.05);单纯缺氧组细胞外液LDH浓度显著高于对照组(P<0.05),纳洛酮0.5组与对照组和单纯缺氧组比较差异均无显著性(P>0.05),络洛酮10组细胞外液LDH浓度降至对照组水平(P>0.05);缺氧后即刻,可见SCF/c-kitR mRNA表达量显著升高(P<0.01),其中SCF表达量在24 h内呈双峰分布;给予不同浓度纳洛酮后,随药物浓度的增加,各组表达量峰值降低,并且延迟出现,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01).结论 SCF/c-kitR mRNA 在神经元缺氧后早期即表达增高.纳洛酮可以减轻细胞损伤,并可调节SCF/c-kitR的表达.纳洛酮对细胞损伤的保护作用可能涉及对某些细胞因子表达的调控.     

川芎天麻伍用镇痛、镇静作用的实验研究

[目的]探索川芎天麻镇痛、镇静作用的最佳配伍比例。[方法]按析因设计的方法设置16个不同的配伍比例。采用热板法与醋酸扭体法来观察各配伍比例对小鼠的镇痛作用;采用旷场实验与悬尾实验来观察各配伍比例对大鼠的镇静作用。[结果]川芎∶天麻为1∶3(3 g/kg)可以显著提高小鼠在热板实验中的痛阈值(P0.01);川芎∶天麻为1∶4(3 g/kg)可以显著减少小鼠腹腔注射醋酸溶液后的扭体次数(P0.01);川芎∶天麻为1∶4(2 g/kg)可以显著降低大鼠在旷场实验仪中的自主运动活性(P0.01);川芎∶天麻为0∶4(2 g/kg)可以显著缩短大鼠在悬尾实验中的不动时间(P0.01)。[结论]川芎、天麻配伍可以对小鼠和大鼠产生镇痛、镇静作用,其中川芎、天麻最佳配伍比例为1∶4。     

莪术、哈蟆油对去势后大鼠雌激素水平及受体表达的影响

目的 检测莪术、哈蟆油对去势后大鼠血清雌激素水平、脾脏雌激素受体表达,探讨其对生殖内分泌-免疫网络的影响及作用机制.方法 将成年SD雌性大鼠去势后制成更年期综合征模型,给药12周后,采用放射免疫法测定大鼠血清性激素(E2、FSH、LH、T、P)和白介素-2含量.取脾脏用免疫荧光法检测雌激素受体表达.结果 与模型对照组比较大剂量莪术、哈蟆油能升高去势大鼠血清E2、T、P水平(P<0.01),明显提高IL-2含量(P<0.01),有降低FSH、LH含量趋势(P0.05),并能显著升高脾脏ER表达水平(P<0.01).结论 莪术、哈蟆油可提高去势大鼠血清性激素水平,增强脾脏ER表达.为临床治疗更年期综合征提供实验依据.     

山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌生长和细胞周期的影响

目的探讨山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制作用。方法建立裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞模型。105只裸鼠随机分为山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组,乳剂溶媒对照组,生理盐水组,环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组和空白对照组,每组15只。各组裸鼠予以相应药物实施干预。观察各组荷瘤裸鼠一般情况、肿瘤生长情况及抑瘤率。流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况。电镜下观察肿瘤细胞超微结构的变化。结果山柰挥发油乳剂高、中、低剂量组的抑瘤率分别为57.2%、28.0%和5.0%,肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期,与空白对照组比较差异有统计学意义,且呈剂量依赖效应。电镜下观察山柰挥发油乳剂高剂量组和CTX组可见较多凋亡细胞,而山柰挥发油乳剂中、低剂量组凋亡细胞较少。结论山柰挥发油对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制增殖作用,且呈剂量依赖效应,其机制可能与调节胃癌细胞周期、促进G1期阻滞及诱导细胞凋亡相关。