两性霉素B分离纯化工艺研究

本文开发了一种高纯度两性霉素B的分离纯化工艺,通过工艺参数精细化控制,探索了两性霉素B的溶出率和乙醇加入量、溶液pH的关系,将陶瓷膜超滤技术应用于浸泡液处理,以及表面活性剂甘油应用于结晶体系,并确定了结晶的最佳pH值,本方法制备的两性霉素B结晶粉的生物效价检测含量大于970u/mg,面积归一百分含量大于95%,杂质含量低,产品质量优于同行业产品。     

pH响应性两性霉素B衍生物的合成及体外评价

摘要：目的 合成一种具有pH响应性可降解的两性霉素B衍生物,以减轻两性霉素B溶血性的同时保持其抗菌活性。方 法 采用马来酸酐和柠康酸酐为酰化剂,分别与两性霉素B反应生成具有β-羧酸酰胺键的衍生物,建立HPLC检测方法,表征 衍生物的结构,验证其pH响应降解性能,考察其体外溶血性和抗菌活性。结果 基于柠康酸酐合成的两性霉素B衍生物AMB CIT,在pH7.4条件下24h后降解30.6%,在pH6.5和pH5.5条件下分别降解46.1%和73.2%,具有明显的酸响应降解性能,并且生成 两性霉素B产物。AMB-CIT能在一定程度上降低两性霉素B的溶血毒性,在微酸环境下具有良好的抗菌活性。结论 本研究为 环境响应性可降解的两性霉素B衍生物的合成及应用提供了一种参考。     

头孢他啶五水化合物结晶工艺的改进

本论文的实验目的是提高头孢他啶的含量，改善粉体的流动性，有利于工业生产。通过改变结晶浓度、pH值、加晶种，改进了反应结晶的方法。经过大批量实验得到满意的结果，含量达97％以上，收率提高1．6％，由此得出结论，此工艺可行。     

高效液相色谱法测定两性霉素B含量和相关物质

目的建立HPLC法测定两性霉素B含量及相关物质。方法色谱柱:C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:5.0mmol/LEDTA∶乙腈∶甲醇(30∶25∶60);流速:1.0ml/min;检测波长:405nm;柱温:30℃。结果两性霉素B含量在12～28μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0.9998,平均回收率为99.9%。两性霉素B相关物质在浓度为0.08～0.49μg/ml范围内线性关系良好,相关系数为0.9995;平均回收率为100.4%;最低检测浓度为4.10ng/ml,最低定量浓度为14.32ng/ml。结论本方法简单、准确,重现性、分离效果好,能较好两性霉素B含量和相关物质的测定。     

两性霉素B脂质体-微球的制备及工艺优化

目的 应用Box-Behnken响应面分析法优化两性霉素B脂质体-微球的制备条件。方法 采用乳化-相分离法制备包载两性霉素B脂质体的海藻酸钠微球,通过单因素实验确定显著影响微球成球性的因素,利用Box-Behnken响应面分析法考察氯化钙浓度、司盘80用量及搅拌速度对微球粒径、跨距、包封率、1h释放量及72h释放量的影响,筛选最佳制备工艺,并进行体外抑菌试验。结果 最佳制备工艺条件为氯化钙浓度41%,司盘80用量4.3%,搅拌速度678r/min。此优化条件下,制得的两性霉素B脂质体-微球平均粒径为8.0μm,药物包封率大于80%,体外抑菌试验结果显示载药微球具有较好的抑菌能力。结论 Box-Behnken响应面分析法可有效平衡各因素之间的相互影响,适用于两性霉素B脂质体-微球的制备工艺筛选。     

不同提取条件对丹酚酸B和E相对含量的影响

通过HPLC、LC-MS等手段确定了丹参提取物中的小组分丹酚酸E,并考察了加水量、提取温度、时间和pH对丹酚酸B、E相对含量及丹酚酸B提取率的影响。结果显示:不同提取条件下,丹酚酸B、E相对含量变化显著,推测两者存在一定转化机制。丹酚酸B的最佳提取工艺为:丹参药材中加入8倍体积水,用1 mol/L盐酸调至pH 4 0,70℃提取60min,丹酚酸B的收率大于90%。     

两性霉素B含量的HPLC测定

建立了两性霉素B与注射用两性霉素B含量的HPLC测定法方法：采用ODS柱,以0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈（66:34）为流动相,检测波长为410nm,流速为1.0ml/min,柱温为室温,进样量为10ul。结果,线性范围1.25～3.75ug,日内RSD为0.3%,日间百分偏差为0.3%,提示本法快速简便,适用于两性霉素B与注射用两性霉素B的含量测定。     

抗真菌剂两性霉素B的结构修饰

自两性霉素B作为抗真菌剂应用于临床以来,便受到了人们的广泛关注,目前仍为治疗全身或深部真菌病的首选药物.但其毒副作用,水溶件差等缺点存在,使得该抗生素的临床应用受到了一定的限制,因此开发新犁两性霉素B衍生物具有重要的研究和应用价值,近年人们对两性霉素B进行了大量的结构修饰研究,并从中获得了一系列有价值的衍生物.本文对两性霉素B结构修饰的最新研究进展作了一个简要的综述,并重点对几个毒副作用明显降低的两性霉素B衍生物作了较为详细的介绍.     

美法仑与98种药物配伍稳定性

目的 综述国内外有关美法仑与98种药物配伍稳定性。方法 检索文献资料，观察外观，pH值变化。结果 美法仑与卡铂等96种药物配伍外观澄明，无颜色变化，pH值变化不大，两药含量均在初始浓度的90%以上，与氯丙嚷或两性霉素B溶于0.9％NS中不稳定。结论 美法仑与96种药物分别配伍是可行的，与氯丙或嗪两性霉素B不宜配伍给药，应单独分别给药。     

混合醇萃取用以降低林可霉素产品中B组分含量的工艺研究

本文以提高林可霉素产品纯度为目的 ,研究了以混合高碳醇为萃取剂从发酵液中提取林可霉素的工艺过程 ;以混合高碳醇 (80 %辛醇∶2 0 %癸醇 )为萃取剂从发酵液 (pH10 )中提取林可霉素 ,常温下 12级连续逆流操作时 ,萃取率可达 92 .8%;萃取相经过洗涤后 ,以等当量的盐酸反萃 ,反萃液经浓缩、脱色和结晶 ,所得产品中林可霉素B含量 (1.3 %)远低于传统丁醇提取工艺产品 (4 .2 %)。在此基础上 ,还探讨了混合高碳醇萃取和丁醇萃取工艺相结合的可行性 ,以丁醇提取工艺的林可霉素一次结晶为原料 ,通过两级萃取和单级洗涤操作 ,再以盐酸溶液反萃 ,结晶后产品中林可霉素B含量小于 1.8%,提升了产品质量等级     

In line final filters for removing particles from amphotericin B infusions.

The feasibility of using membrane filters to remove particles from intravenous infusions of amphotericin B in dextrose 5% (a colloidal solution) was studied. Six types of commercial membrane filters, ranging in pore size from 0.45-1.0 mum, were used. Because of the effect of pH on the particle size of colloidal solutions, each filter was tested at solution pH 4.7, 5.6 and 6.5. Samples of filtrate were analyzed spectrophotometrically for amphotericin content. All filters of pore size 0.22 mum removed amphotericin B from solution and were inappropriate for use with this product. Solutions at pH 4.7 were turbid, filtered slowly and were generally unacceptable for clinical use. At pH 5.6, only filters with pore sizes of 1.0 mum or greater showed acceptable results. At pH 6.5, filters with pore sizes of 0.45 mum or greater gave acceptable results; the use of a filter with a pore size of not less than 1.0 mum would provide a margin for error to compensate for variations in the colloidal particle size of amphotericin B.     

在线成像结合红外光谱技术对头孢克肟反应结晶过程的工艺优化

头孢克肟的粒度分布、结晶度及杂质含量是影响其加工性能、颜色 ( 白度 )、贮存时间和生物毒性的关键质量指标, 在实际生产过程中发现这些关键指标较难控制。本研究应用了先进在线过程分析技术对头孢克肟的反应结晶过程进行了测量和 分析,包括：傅里叶变换衰减全反射红外光谱仪 (ATR-FTIR) 准确测量结晶过程浓度,并辅助解释反应结晶过程转晶机理,在 线成像系统测量结晶过程颗粒的形貌和粒形变化,在线浊度仪测量成核时刻。实验考察了反应结晶过程的反应温度、养晶时刻、 养晶时间、加料速率、搅拌速率等工艺条件对头孢克肟粒度分布、白度、结晶度和杂质含量的影响,探寻反应结晶过程晶型转 变的规律。结果表明,头孢克肟结晶为聚结生长方式,养晶时刻是影响其聚集体粒度分布及白度的关键因素,养晶时间与滴酸 速率是影响结晶度的关键因素。实验优化得到了头孢克肟反应结晶的最佳操作工艺并可为其工业化提供重要参考,利用该工艺 得到了粒度分布均匀、结晶度高、杂质含量低和白度好的产品。     

Stability studies with amphotericin B and amphotericin B methyl ester.

In solid form, amphotericin B and amphotericin B methyl ester free base exhibit similar stability. Acid salts of the methyl ester derivative stored under identical conditions are less stable. In solution, amphotericin B is generally more stable than its methy ester salts. However, when pH is adjusted to 6.0 and storage temperature held at 5 degrees C the methyl ester salts reflect the stability exhibited by the parent compound, amphotericin B.     

硫酸头孢匹罗结晶工艺的优化研究#br#

目的 优化硫酸头孢匹罗结晶工艺,降低产品色级、提高含量。方法 采用单因素试验考察脱色pH值、活性炭用量、硫酸头孢匹罗粗品流加速率、晶种用量对产品色级、含量的影响。通过正交试验优选最佳硫酸头孢匹罗结晶工艺条件,并进行3批试验验证,优化工艺。结果 硫酸头孢匹罗结晶工艺的最佳条件为脱色pH4.0、活性炭用量为4%、硫酸头孢匹罗粗品流加速率1.5mL/min、晶种用量2%。3批验证试验与正交试验结果一致,产品质量均符合企业内控质量标准。结论 优化后的工艺稳定可行,可以有效降低产品色级,提高含量,产生可观的经济效益。     

硫酸头孢匹罗结晶工艺的优化研究#br#

目的 优化硫酸头孢匹罗结晶工艺,降低产品色级、提高含量。方法 采用单因素试验考察脱色pH值、活性炭用量、硫酸头孢匹罗粗品流加速率、晶种用量对产品色级、含量的影响。通过正交试验优选最佳硫酸头孢匹罗结晶工艺条件,并进行3批试验验证,优化工艺。结果 硫酸头孢匹罗结晶工艺的最佳条件为脱色pH4.0、活性炭用量为4%、硫酸头孢匹罗粗品流加速率1.5mL/min、晶种用量2%。3批验证试验与正交试验结果一致,产品质量均符合企业内控质量标准。结论 优化后的工艺稳定可行,可以有效降低产品色级,提高含量,产生可观的经济效益。     

注射用两性霉素B脂质体效价测定法的改进

目的 建立准确测定注射用两性霉素B脂质体效价含量的生物测定方法,解决现有质控标准中培养体系下无法形成抑菌圈的难点问题。方法 效价测定方法：管碟法,沙氏培养基(含1%氯化钠)pH6.0~6.2,磷酸盐缓冲液(pH7.0,含1%聚山梨醇),检定菌为啤酒酵母(ATCC9763)。桥接液相方法：色谱柱：CAPCELLPAK MG ⅡC18(250mm×4.6mm, 5μm);流动相：乙腈：磷酸溶液(pH1.00±0.05)(370:630, V/V);流速：0.8mL/min;柱温：25℃;检测波长：383nm;进样量：10μL。结果 改进后的方法：抑菌圈边缘清晰,且其抑菌圈直径大小符合生物测定法的方法学要求;在1.0~11.9u/mL浓度范围内线性良好(r=0.9995);可信限率符合中国药典要求(不大于5%);通过HPLC间接桥接方式验证,效价含量测定结果准确,可满足预期用途。结论 改进后的效价测定方法通过了方法学验证,可作为注射用两性霉素B脂质体的日常质控方法。     

注射用两性霉素B脂质体效价测定法的改进

目的 建立准确测定注射用两性霉素B脂质体效价含量的生物测定方法,解决现有质控标准中培养体系下无法形成抑菌圈的难点问题。方法 效价测定方法：管碟法,沙氏培养基(含1%氯化钠)pH6.0~6.2,磷酸盐缓冲液(pH7.0,含1%聚山梨醇),检定菌为啤酒酵母(ATCC9763)。桥接液相方法：色谱柱：CAPCELLPAK MG ⅡC18(250mm×4.6mm, 5μm);流动相：乙腈：磷酸溶液(pH1.00±0.05)(370:630, V/V);流速：0.8mL/min;柱温：25℃;检测波长：383nm;进样量：10μL。结果 改进后的方法：抑菌圈边缘清晰,且其抑菌圈直径大小符合生物测定法的方法学要求;在1.0~11.9u/mL浓度范围内线性良好(r=0.9995);可信限率符合中国药典要求(不大于5%);通过HPLC间接桥接方式验证,效价含量测定结果准确,可满足预期用途。结论     

磺基水杨酸处理对高效液相色谱法检测人纤维蛋白原中蔗糖含量的影响

目的:研究磺基水杨酸处理样品对高效液相色谱法检测人纤维蛋白原中蔗糖含量的影响。方法:通过比较未经或经磺基水杨酸处理的蔗糖对照品溶液色谱图,确认磺基水杨酸处理对蔗糖水解的影响。蔗糖对照品溶液和人纤维蛋白原样品分别经磺基水杨酸处理2、3、4、5 h,研究处理时间对蔗糖水解的影响。用未经和经磺基水杨酸处理的蔗糖对照品溶液分别...     

重组四价人乳头瘤病毒16/18/52/58型病毒样颗粒疫苗制剂工艺的优化

目的 考察不同制剂工艺流程下制备的重组四价人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）16/18/52/58型病毒样颗粒疫苗的抗原吸附效果、稳定性及免疫原性,根据实验结果筛选出最合适的制剂配方及工艺。方法  通过改变重组四价HPV疫苗的缓冲体系,以及氢氧化铝佐剂的含量、混合工艺、吸附方式与吸附条件,配制不同的实验疫苗,观察其外观,并分别进行蛋白质稳定性、抗原吸附率和小鼠体内半数有效剂量的检测。 结果 重组四价HPV疫苗原液与450 μg/ml氢氧化铝佐剂在pH6.5的组氨酸缓冲体系下混合后的实验疫苗,外观均一性良好,抗原蛋白稳定性最高,Tm=87.4 ℃,小鼠体内免疫原性较好;搅动吸附条件下的4型别HPV抗原吸附率明显高于静止吸附;铝佐剂和抗原蛋白的吸附与混合先后顺序,不同吸附比例、温度和时间对疫苗外观无显著影响,抗原吸附率均大于99.00%。结论 确定了重组四价HPV16/18/52/58型病毒样颗粒疫苗合适的制剂工艺条件。