自噬相关基因在Janus蛋白酪氨酸激酶抑制剂治疗类风湿关节炎前后患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义

目的:探讨自噬相关基因(ATGs)是否参与类风湿关节炎(RA)的发生发展及Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK)抑制剂治疗前后的自噬表达变化。方法:收集30例经JAK抑制剂治疗24周的RA患者(RA组)的临床、实验室资料及外周血标本；同时收集30名健康者(HC组)外周血标本作为对照。实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞中自噬相关基因的表达水平。结果:RA组ATG5、Beclin-1、LC-3的mRNA表达水平均高于HC组；ATG16的mRNA表达水平低于HC组(P<0.05)。RA组ATG5表达水平与ESR、hsCRP、SJC、PtGA、DAS-28(ESR)、CCP正相关(P<0.05);ATG12表达水平与hsCRP、CCP正相关(P<0.05);ATG16表达水平与hsCRP、SJC正相关(P<0.05);Beclin-1表达水平与ESR、hsCRP、PtGA、DAS-28(ESR)正相关(P<0.05),与RF-IgG负相关(P<0.05);LC-3表达水平与ESR、hsCRP正相关(P<0.05)。治疗24周后，ATG5、LC-3、Be...     

犀角地黄汤对脑缺血大鼠的自噬相关蛋白Atg-5、Be-clin-1表达的研究

目的探讨犀角地黄汤对内毒素诱导下持续性大脑中动脉栓塞模型(pMCAO)大鼠脑组织的自噬相关Atg-5、Beclin-1蛋白的mRNA表达,以及透射电镜下观察染色的LC-3抗体表达。方法造模后进行分组,并采用不同剂量犀角地黄汤进行干预,分别提取RNA、PCR检测Rat-atg-5、Beclin-1基因表达,透射电镜下观察染色的LC-3抗体表达。结果 "瘀热"证pMCAO模型大鼠中Atg-5、Beclin-1mRNA、模型组Atg-5和Beclin-1mRNA明显上升,犀角地黄汤中剂量治疗组和阳性药组与模型组比较均显著降低其表达。LC-3抗体染色颗粒提示,空白组表达不明显,模型组造模成功,尤其在第6天,模型组明显增多;阳性药组明显抑制LC-3的表达,第3和第6天到达最佳;低剂量组抑制效果不明显;中剂量组抑制效果好于高剂量组,第6天抑制效果最佳。结论犀角地黄汤通过显著的降低Atg-5、Beclin-1mRNA的表达,以及明显抑制LC-3的表达,能够起到脑保护的作用。     

SLE患儿外周血自噬基因的表达与疾病发生及活动水平的关系

目的:探讨系统系性红斑狼疮(SLE)患儿外周血自噬基因的表达与疾病发生及活动水平的关系.方法:选取50例SLE患儿为研究对象,根据SLE疾病活动度评分(SLEDAI)分为SLE-1组(初诊、未经治疗且SLEDAI≥10分)和SLE-2组(经治疗且SLEDAI<10分),每组各25例;另选15名健康儿童为正常对照组(NC组).比较三组儿童血清补体C3及C4、免疫球蛋白IgG、IgA及IgM、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、肌酐(Scr)、血沉(ESR)水平,分别采用RT-PCR及Western blotting检测3组儿童外周血单核细胞(PBMC)中自噬基因Beclin-1、ATG-5、ATG-7、p62 mRNA表达水平及蛋白表达量.结果:SLE-1及SLE-2组患儿C3、C4、PLT、Hb水平低于NC组(P<0.05),且SLE-1组低于SLE-2组(P<0.05);IgG、IgM、IgA、Scr、TG、ESR高于NC组(P<0.05),且SLE-1组高于SLE-2组(P<0.05);抗ANA抗体、抗ds-DNA抗体阳性率高于NC组(P<0.05),且SLE-1组高于SLE-2组(P<0.05);PBMC中Beclin-1、ATG-7及p62 mRNA表达水平高于NC组(P<0.05),且SLE-1组高于SLE-2组(P<0.05);Beclin-1、ATG-7及p62蛋白表达量高于NC组(P<0.05),且SLE-1组高于SLE-2组(P<0.05).结论:SLE自噬水平增强,Beclin-1、ATG-7、P62水平及蛋白量在治疗后降低,自噬可能参与了SLE的发生与发展,可能是治疗的新靶点.     

饥饿诱导胶质瘤细胞自噬发生及Beclin-1表达的变化

目的 探讨饥饿诱导大鼠胶质瘤细胞C6自噬的发生及自噬相关蛋白Beclin-1的变化。方法 在培养大鼠胶质瘤细胞C6至对数生长期后,以无氨基酸培养液EBSS(Earle’s balanced salt)代替DMEM培养液培养细胞,培养1、3、6、12、18 h后收集细胞,采用蛋白质印迹分析和免疫荧光检测特异性标记自噬的微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC-3)以及自噬相关蛋白Beclin-1,采用透射电镜观察自噬体。结果 饥饿处理1 h后胶质瘤细胞C6中LC-3表达开始增加,并随着饥饿时间延长而逐渐增加,12 h达到高峰后开始下降;免疫荧光下可见点状自噬体;透射电镜下观察到自噬体的形成。饥饿处理1 h后胶质瘤细胞C6中Beclin-1表达开始升高,3 h达到高峰后逐渐下降;免疫荧光下观察到Beclin-1表达增高。结论 饥饿可以诱导胶质瘤细胞C6发生自噬,Beclin-1与饥饿诱导的胶质瘤细胞C6的自噬相关,为进一步研究Beclin-1在胶质瘤细胞自噬中的作用机制打下基础。     

自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3表达与口腔癌生物学特征的关系

目的:研究自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3表达与口腔癌生物学特征的关系。方法:取口腔癌组织和癌旁组织,检测Beclin-1和MAP1LC3的mRNA表达量;培养舌癌细胞株CTST-2和正常颊粘膜的原代上皮细胞,检测自噬标志分子(Beclin-1、MAP1LC3)以及促凋亡基因(P53、Caspase-3)、抗凋亡基因(生存素、Bcl-2、Bmi-1)的mRNA表达量。结果:舌癌、颊粘膜癌、牙龈癌、口底癌组织中Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量显著低于相应的癌旁组织;舌癌细胞CTST-2中Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量均低于正常粘膜细胞;舌癌细胞CTST-2中P53、Caspase-3的mRNA含量均低于正常粘膜细胞,与Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量呈正相关;CTST-2中生存素、Bcl-2、Bmi-1的mRNA含量均高于正常粘膜细胞,与Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量呈负相关。结论:口腔癌中自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3的表达量异常降低且与癌细胞的促凋亡基因、抗凋亡基因的表达具有显著相关性。     

基于JNK信号通路探讨自噬、胰岛素抵抗在非酒精性脂肪性肝病中的发病机制

目的:探讨基于JNK信号通路自噬、胰岛素抵抗在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的发病机制。方法:采用高脂饮食喂养SD大鼠建立NAFLD模型，分为正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)、JNK抑制剂SP600125治疗组(SP600125组)、磷酸盐缓冲盐水PBS对照组(Control组)。ND组喂食正常饲料，HFD组、SP600125组和Control组喂食高脂饲料20周，SP600125组大鼠腹腔注射SP600125、Control组大鼠注射磷酸盐缓冲盐水PBS,每天1次，再延长8周。检测大鼠的胰岛素抵抗、C-Jun N末端激酶(JNK)信号通路及自噬相关蛋白的表达。结果:与ND组大鼠对比HFD组血糖、游离脂肪酸及胰岛素水平升高(均P<0.05),HFD组磷酸化JNK1(p-JNK1)蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。自噬相关蛋白Beclin-1(Beclin-1)、自噬相关蛋白LC-3Ⅱ(LC-3Ⅱ)、自噬相关基因3(Atg 3)和自噬相关基因5(Atg 5)表达水平升高(均P<0.05)。HFD组的胰岛素受体(IR)β亚基、IR底物-1和蛋白激酶B的...     

依达拉奉对急性缺血性卒中患者外周血自噬及氧化应激水平的影响

目的 观察依达拉奉对急性缺血性卒中(AIS)患者外周血自噬及氧化应激水平的影响.方法 选取2017年1月至2020年12月该院收治的AIS患者150例作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组75例.对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用依达拉奉,连续治疗2周.采用实时荧光定量-聚合酶链反应检测两组患者外周血单个核细胞(PBMC)中自噬相关基因(Beclin-1、LC3-Ⅱ)mRNA水平,酶联免疫吸附试验检测相关炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和日常生活活动能力(ADL)量表评估神经功能,经颅超声多普勒测定大脑动脉血流情况,记录不良反应发生情况.结果 观察组患者治疗后PBMC中Beclin-1、LC3-ⅡmRNA水平均较对照组降低,MDA、IL-1β、TNF-α水平均低于对照组,SOD水平高于对照组,NIHSS评分低于对照组,ADL评分高于对照组,基底动脉、左右侧大脑中动脉血流均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 依达拉奉可明显降低AIS患者过度激活的细胞自噬及下游氧化应激和炎性通路,从而减轻脑组织缺血再灌注损伤,促进神经功能的恢复.     

依达拉奉对急性缺血性卒中患者外周血自噬及氧化应激水平的影响

目的 观察依达拉奉对急性缺血性卒中(AIS)患者外周血自噬及氧化应激水平的影响.方法 选取2017年1月至2020年12月该院收治的AIS患者150例作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组75例.对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上加用依达拉奉,连续治疗2周.采用实时荧光定量-聚合酶链反应检测两组患者外周血单个核细胞(PBMC)中自噬相关基因(Beclin-1、LC3-Ⅱ)mRNA水平,酶联免疫吸附试验检测相关炎性细胞因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平,采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和日常生活活动能力(ADL)量表评估神经功能,经颅超声多普勒测定大脑动脉血流情况,记录不良反应发生情况.结果 观察组患者治疗后PBMC中Beclin-1、LC3-ⅡmRNA水平均较对照组降低,MDA、IL-1β、TNF-α水平均低于对照组,SOD水平高于对照组,NIHSS评分低于对照组,ADL评分高于对照组,基底动脉、左右侧大脑中动脉血流均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 依达拉奉可明显降低AIS患者过度激活的细胞自噬及下游氧化应激和炎性通路,从而减轻脑组织缺血再灌注损伤,促进神经功能的恢复.     

阿伐他汀通过PI3K/Akt/mTOR途径调节白血病细胞自噬的作用及机制

目的:研究阿伐他汀对白血病细胞K562自噬的影响及相关信号机制。方法:取对数生长期的K562细胞,分为阴性对照组、阿伐他汀组、阿伐他汀+PI3K抑制剂(LY294002)组、阿伐他汀+mTOR抑制剂(雷帕霉素)组。共培养24h后,采用吖啶橙染色观察细胞自噬体的变化,Western Blot检测Ⅱ型自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)和自噬血管基因Beclin-1的表达,RT-PCR和Western Blot检测磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)的表达。结果:与阴性对照组相比,阿伐他汀抑制白血病细胞K562自噬体的形成(P<0.05),下调LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达(P<0.05)。与阿伐他汀组相比,阿伐他汀+PI3K抑制剂(LY294002)组LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达增加(P<0.05);阿伐他汀+mTOR抑制剂(雷帕霉素)组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达增加(P<0.05)。与阿伐他汀组相比,阿伐他汀+PI3K抑制剂(LY294002)组p-Akt和p-mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05);阿伐他汀+mTOR抑制剂(雷帕霉素)组p-Akt和p-mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05)。结论:阿伐他汀可以抑制白血病细胞K562自噬,推测其机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

鲍曼不动杆菌OmpA经ROS/NLRP3信号通路调控THP 1细胞自噬和凋亡

目的: 探讨鲍曼不动杆菌外膜蛋白A(outer membrance protein A, OmpA)对人单核巨噬THP-1细胞自噬和凋亡的影响及其可能机制。方法: 构建OmpA/pET-28a载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达纯化重组OmpA蛋白,并免疫家兔制备多克隆抗体;采用蛋白质印迹法检测呼吸机相关性肺炎患者发病前后血清中OmpA抗体水平变化。以不同浓度(1、10 μg/mL)重组OmpA蛋白分别刺激THP-1细胞1、3、6 h,采用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白LC-3和Beclin-1表达,流式细胞术检测细胞凋亡率及活性氧产生,荧光实时定量PCR检测细胞含NLR家族Pyrin域NOD样受体家族3(NLRP3)、Caspase-1和IL-1β等mRNA表达。结果： 自制多抗可以识别临床菌株OmpA蛋白。呼吸机相关性肺炎患者发病前后,血清中均可检出OmpA抗体(IgG型),且发病后OmpA抗体水平显著高于气管插管前(P<0.05)。重组OmpA蛋白刺激THP-1细胞后,细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1表达显著上升,细胞凋亡率显著升高,呈一定的时间和浓度依赖性(P<0.05)。与对照组比,在重组OmpA蛋白作用1 h时,细胞IL-1β mRNA表达和活性氧含量显著增加(P<0.05);3 h和6 h时,3种mRNA表达量和活性氧含量显著降低(P<0.05)。结论： OmpA通过激活THP-1细胞NLRP3炎症小体,释放活性氧和IL-1β等炎症介质,诱导THP-1细胞自噬和凋亡发生。     

系统性硬化症合并肺间质病变患者外周血中IL-8、CXCR1、CXCR2的表达及意义

目的分析系统性硬化症(SSc)合并肺间质病变(ILD)患者外周血中白介素8 (IL-8)、趋化因子受体1(CXCR1)、CXCR2表达的临床意义。方法选取2018年1月-2019年5月武汉市第五医院风湿免疫科治疗的系统性硬化症患者42例作为研究对象,其中合并ILD患者25例为SSc-ILD组,非ILD患者17例为SSc-非ILD组。另选取同期来院体检的健康者30例为健康对照组。检测3组受试者肺功能,外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR1、CXCR2mRNA,血清IL-8、ESR、CRP、IgA、IgG、IgM、补体C3水平。采用Spearman进行检测指标的相关性分析。结果 SScILD组FEV1%、FEV1/FVC显著低于SSc-非ILD组和健康对照组(F/P=76.626/0.000,29.097/0.000),且SSc-非ILD组显著低于健康对照组(P<0.05);SSc-ILD组CXCR1、CXCR2 mRNA表达水平及血清IL-8、ESR、CRP、IgA、IgG、IgM水平显著高于SSc-非ILD组和健康对照组(F/P=581.600/0.000、401.103/0.000、149.551/0.000、34.990/0.000、37.207/0.000、189.508/0.000、117.657/0.000、12.708/0.000),且SSc-非ILD组各指标显著高于健康对照组(P<0.05);SSc患者外周血中CXCR1、CXCR2及血清IL-8水平与FEV1%呈显著负相关(r/P=-0.608/0.005、-0.538/0.048、-0.613/0.003),CXCR1、IL-8与FEV1/FVC呈显著负相关(r/P=-0.616/0.002、-0.581/0.0.15),CXCR2与FEV1/FVC无显著相关性(P>0.05);SSc合并ILD患者CXCR1、CXCR2、IL-8与CRP、ESR、IgA、IgG、IgM均呈正相关(P<0.05),与C3无显著相关性(P>0.05)。结论 IL-8与其受体CXCR1、CXCR2在系统性硬化症合并肺间质病变患者血清中均高表达,IL-8可能在SSc-ILD的发病机制中具有重要作用。     

体外探究脱落酸对肺腺癌细胞系Spc-A1自噬的影响

目的观察脱落酸(ABA)作用于肺腺癌细胞株Spc-A1引起自噬方面的变化,研究ABA对Spc-A1细胞自噬的影响。方法以人肺腺癌细胞系Spc-A1为研究对象,ABA给药浓度分别为0.8、20、100μmol/L,采用MTT法检测ABA作用后Spc-A1细胞的活力;激光共聚焦显微镜观察ABA作用于Spc-A1细胞后自噬现象;提取培养细胞mRNA及蛋白质,分别采用荧光实时定量PCR、蛋白印迹法检测自噬相关基因Beclin-1及LC3-Ⅱ的表达。结果 ABA作用后,肺腺癌细胞Spc-A1活力随着ABA浓度的增高而下降,各处理组之间差异具有统计学意义(P<0.001);ABA可诱导Spc-A1细胞自噬,自噬现象随药物浓度增高而增加;ABA处理后Bec-lin-1及LC3-Ⅱ的mRNA表达量随着ABA浓度的增加而增高,各处理组表达量差异具有统计学意义(P<0.05);蛋白表达结果显示ABA 100μmol/L处理组与对照组Beclin-1表达量差异具有显著性(P=0.04);ABA 100μmol/L处理组与对照组LC3-Ⅱ表达量差异具有显著性(P=0.005),ABA 0.8μmol/L组与ABA 100μmol/L组之间LC3-Ⅱ表达量差异具有显著性(P=0.039),余处理组表达量两两之间未见显著性差异。结论 ABA可通过调节自噬信号转导通路中相关基因的表达诱导肺腺癌细胞Spc-A1自噬,随着自噬的增加,可能抑制肿瘤的生长。     

糖皮质激素受体α、β mRNA在婴幼儿喘息患儿中的表达及临床意义

目的 研究婴幼儿喘息患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)αmRNA和GRβmRNA表达水平的变化,为选择性应用糖皮质激素(glucocorticoid,GC)和早期干预提供实验依据。 方法 选取2015年9月—2018年1月绍兴市人民医院儿内科住院的50例婴幼儿喘息(重症19例)和25例对照组进行研究。研究对象入院后次日晨空腹抽取静脉血2 mL,采用Ficoll密度梯度离心法分离PBMC,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PBMC中GRαmRNA和GRβmRNA表达量。 结果 婴幼儿喘息重度组GRαmRNA表达量显著高于对照组(中位数2.870×10-2 vs.0.266×10-2,U=2.204,P=0.028),与轻度组(中位数0.865×10-2)比较差异无统计学意义(U=0.650,P=0.516);重度组GRβmRNA表达量(中位数0.057×10-2)显著高于轻度组和对照组(中位数0.003×10-2、0.001×10-2),差异有统计学意义(U=3.388,P<0.001;U=3.969,P<0.001);重度组GRα/β比值(中位数25.900×10-2)显著低于轻度组和对照组(中位数780.800×10-2,U=2.708,P=0.007;98.000×10-2,U=2.192,P=0.028),恢复期GRα/β比值(中位数253.500×10-2)较急性期(中位数51.100×10-2)显著升高(U=2.084,P=0.037)。临床症状严重度评分与GRβmRNA之间存在显著正相关(r=0.762,P=0.029),与GRα/β比值之间存在显著负相关(r=-0.760,P=0.037)。 结论 重度婴幼儿喘息主要表现为GRβmRNA表达量增加,GRα/β比值降低。随着临床症状评分的升高,GRβmRNA表达量增加,GRα/β比值下降。      

Th17细胞及相关细胞因子在系统性硬化病小鼠模型中的表达及意义

目的:研究T辅助细胞17(Th17)及相关细胞因子在系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)小鼠模型外周血、皮肤、肺部的表达及意义。方法:20只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组和博莱霉素注射4周组(SSc组),观察小鼠皮肤/肺部炎症和纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的病理切片,流式细胞计数检测外周血、皮肤/肺组织CD4+IL-17+Th17细胞,荧光定量PCR检测小鼠皮肤/肺部维甲酸相关孤独受体(RORγt)、IL-17A和IL-6 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验检测血清IL-17、IL-6水平,并分析这些指标的相关性。结果:SSc组比对照组皮肤炎症和肺纤维化评分(Ashcroft评分)明显增加(2.6±0.84 vs.0.4±0.52,2.80±1.81 vs.0.60±0.70),皮肤/肺羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)的含量明显增多[(3.17±1.74)mg/g vs.(1.45±0.40)mg/g,(0.53±0.14)mg/g vs.(0.38±0.16)mg/g],均P<0.05。SSc组外周血、皮肤和肺组织Th17细胞比例较对照组明显增加[(2.07±0.89)%vs.(1.02±0.32)%,(5.80±2.02)%vs.(1.64±0.58)%,(5.24±2.43)%vs.(1.92±0.98)%,P<0.01];与对照组相比,SSc组皮肤/肺组织IL-17A、IL-6 mRNA的表达量,皮肤RORγt mRNA的表达量增高,均P<0.05。SSc组外周血IL-17、IL-6含量明显增高(P<0.01)。外周血Th17细胞、IL-17和IL-6的含量与皮肤/肺部炎症、PF评分、皮肤HYP含量呈密切正相关,皮肤/肺组织Th17细胞分别与皮肤/肺部炎症、皮肤/肺HYP含量密切正相关。结论:Th17细胞在SSc小鼠模型外周血、皮肤及肺组织表达增高,与皮肤/肺部炎症、纤维化病变密切正相关,并通过IL-17、IL-6等细胞因子参与SSc的发病。     

黄芩甙对慢性脑低灌注大鼠认知功能及其对海马内LC-3Ⅱ和Beclin-1表达的影响

目的 观察黄芩甙对慢性脑低灌注大鼠学习记忆功能及海马区自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1表达的影响。方法 将50只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和黄芩甙低、中、高剂量组,每组各10只。采用永久性双侧颈总动脉结扎建立慢性脑低灌注大鼠模型,黄芩甙组腹腔注射3种不同剂量的黄芩甙（60、120、240 mg·kg^-1·d^-1）,对照组和模型组给予等量0.9%（质量分数）氯化钠注射液腹腔注射。4周后采用Morris水迷宫法进行行为学检测,Western blotting法检测自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1的表达。结果 与对照组相比,模型组Morris水迷宫平均逃避潜伏期和游泳距离均明显延长（P<0.01）,空间探索实验中在原平台所在象限游泳时间明显缩短（P<0.01）,海马区自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1表达明显增加（P<0.01）。与模型组比较,黄芩甙干预后,大鼠学习记忆能力显著改善（P<0.01或P<0.05）,海马内LC-3Ⅱ和Beclin-1表达均显著低于模型组（P<0.01或P<0.05）,差异有统计学意义。结论 黄芩甙能够改善慢性脑低灌注大鼠的学习记忆功能,并抑制自噬相关蛋白LC-3Ⅱ和Beclin-1的表达。     

抑郁症模型大鼠海马神经元自噬变化及其机制

目的：观察抑郁症模型大鼠海马神经元自噬的变化,探讨发生抑郁症时大鼠海马组织结构异常原因。 方法：成年健康雄性SD大鼠20只,随机分为对照组和模型组,每组10只。采用不可预见性温和应激方法制备抑郁症大鼠模型。采用透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构,Western blotting法检测大鼠海马组织中LC-3和Beclin-1的表达水平,LC-3的表达水平以LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ比值表示。 结果：模型组大鼠海马神经元出现明显自噬体;对照组和模型组大鼠海马组织中LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ比值分别为0.99±0.11和3.13±0.21,Beclin-1表达水平分别为0.79±0.09和2.15±0.28,模型组大鼠海马组织中LC-3Ⅱ/IC-3Ⅰ 比值和Beclin-1表达水平均明显高于对照组（P<0.05）。结论：抑郁症模型大鼠海马神经元存在明显的细胞自噬,可能与海马体积异常有关。     

全身炎症反应综合征患者血清炎症介质与血糖的相关性研究

目的探讨全身炎症反应综合征（SIRS）患者血清细胞因子和血糖的浓度变化及其对预后的影响。方法将患者分为SIRS组（78例）和非SIRS组（35例）;SIRS组分为生存亚组（37例）和死亡亚组（41例）;在SIRS组中随机选择血糖水平〉6．1mmol／L者进行胰岛素强化治疗。测定IL-6、IL-10、IL-13、肿瘤坏死因子（TNF-α）的血清浓度和单核细胞人类白细胞DR抗原（HLA-DR）表达强度。结果入院5d后,血清IL-6、TNF—α及血糖水平SIRS组较非SIRS组明显增高,分别为（80±38）×10^3μg／L与（42±7）×10^3μg／L、（52±20）×10^3μg／L与（17±6）×10^3μg／L、（11．9±1．1）mmol／L与（6．5±1．5）mmol／L;死亡组较生存组患者亦明显增高,分别为（108±21）×10^3μg／L与（66±22）×10^3μg／L、（28±8）×10^3μg／L与（16±9）×10^3μg／L、（14．4±2．1）mmol／L与（7．0±1．0）mmol／L。IL-10、IL-13和HLA—DR表达强度的变化却相反。胰岛素强化治疗可以扭转上述变化,降低死亡率。结论SIRS患者的血糖变化可以在一定程度上反映危重患者机体的免疫状态、评估疾病的严重程度。     

垂体肿瘤转化基因1在系统性硬化症中的表达及作用

目的 研究垂体肿瘤转化基因（PTTG1）在系统性硬化症（SSc）中的表达及其对成纤维细胞的作用。方法 收集皮肤活检组织,其中SSc患者组21例,正常组22例。分别应用实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测皮肤组织中PTTG1基因表达水平;应用免疫组化方法检测皮肤组织中PTTG1蛋白表达水平;应用小干扰RNA（siRNA）降低成纤维细胞中PTTG1基因表达,通过 Real-time PCR 方法检测细胞中 PTTG1 及与细胞纤维化密切相关的几个基因α-SMA、COL1A1、COL1A2、COL3A1的表达变化;通过细胞实时增殖检测系统检测细胞增殖。结果 与正常对照相比,SSc患者皮肤组织中PTTG1的表达水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;与正常对照相比,SSc患者皮肤组织中阳性细胞增多,PTTG1蛋白表达明显升高;原代皮肤成纤维细胞中PTTG1表达水平和α-SMA、COL1A1、COL1A2、COL3A1均存在正相关,差异具有统计学意义（R²=0.8192,P<0.05;R²=0.6398,P<0.05;R²=0.316,P<0.05;R²=0.3723,P<0.05）;同时,原代皮肤成纤维细胞中PTTG1干扰后,细胞增殖被显著抑制,纤维化相关基因（COL1A1、COL1A2、PAI-1）表达下降,胶原蛋白的基因表达降低。结论 SSc患者中存在PTTG1过度表达,干扰PTTG1可降低成纤维细胞活性,提示PTTG1与SSc纤维化程度密切相关。