视网膜小胶质细胞与糖尿病视网膜病变的关系

小胶质细胞是视网膜组织中来源于髓系祖细胞并具有免疫活性的一类细胞.正常情况下小胶质细胞处于静息状态,对周围环境起免疫监视作用;组织发生病变时,小胶质细胞活化,参与免疫与炎症反应,一方面可对病变组织起保护与修复作用,另一方面也可加重组织的损伤.小胶质细胞活化是糖尿病视网膜病变的神经病理学特征之一,提示其在病变中发挥重要功能.本文就视网膜小胶质细胞的生物学特性、作用及其活化与糖尿病视网膜病变的关系作一综述.     

小胶质细胞活化与rd小鼠遗传性视网膜变性

目的研究小胶质细胞活化与rd小鼠遗传性视网膜变性的关系。方法对出生后8、10、12、14、16及18d的rd小鼠及对照小鼠视网膜进行感光细胞凋亡TUNEL法检测及形态计量学分析。CD11b免疫组织化学染色标记视网膜小胶质细胞。结果rd小鼠出生后10d视网膜感光细胞层开始出现TUNEL染色阳性细胞,第16d达到高峰。视网膜小胶质细胞在rd小鼠出生后10d开始活化,第14d达到高峰。小胶质细胞向感光细胞层的迁移与感光细胞凋亡之间存在紧密的时间和空间关系。结论rd小鼠视网膜变性以感光细胞凋亡为主。小胶质细胞活化可能在视网膜变性过程中发挥重要作用。     

糖尿病视网膜病变中小胶质细胞的应答-从神经血管单元角度探讨小胶质细胞的异常改变

糖尿病视网膜病变是糖尿病最严重的微血管慢性并发症之一,其发病机制复杂。越来越多的证据表明小胶质细胞在糖尿病视网膜病变的发生发展中发挥重要作用,视网膜中持续活化的小胶质细胞引起视网膜神经元损伤和血一视网膜屏障破坏。本文回顾了近年来有关小胶质细胞在生理条件和糖尿病时在视网膜中的分布、形态、表面标志分子谱构成和生物学功能的变化等方面的研究进展,探讨生理条件下神经血管单元中小胶质细胞的功能、调节及其参与糖尿病视网膜病变的可能机制。     

糖尿病视网膜病变中视网膜小胶质细胞活化及干预机制研究进展

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)最常见的并发症,其发病率随DM病程的延长而增高.DR是一种高发病率和高致盲率的疾病,对DR的发病机制研究一直是国内外的热点之一.但是DR的发病机制尚未完全阐明,近年来,越来越多的学者认为DR可能是一种慢性、低度炎性反应.小胶质细胞(microglia,MG)是视网膜中的单核巨噬细胞,具有抗原呈递功能,DR中MG被活化,释放大量炎症因子,参与DR的炎症反应.了解DR中MG的活化机制,可更好地为DR的预防和治疗开辟新的视角.因此,本文就DR中视网膜MG活化及干预机制进行综述.     

小胶质细胞在糖尿病视网膜病变中的作用

糖尿病视网膜病变(DR)作为糖尿病最常见的并发症之一,是世界范围内工作人群主要的致盲疾病。DR曾被认为是视网膜微血管病变。随着研究的不断深入,视网膜神经元病变和中低度炎症也被证实是DR的重要发病机制。小胶质细胞是视网膜内的常驻巨噬细胞,主要分布在内层视网膜,负责监控视网膜内微环境变化。在异常刺激下,小胶质细胞活化并与视网膜内不同类型的细胞发生复杂的相互作用。在DR中,小胶质细胞被激活,活化的小胶质细胞内关键因子或多条通路被激活,产生大量的炎症因子、趋化因子等。同时,活化的小胶质细胞增殖能力及迁移增强,外层视网膜内小胶质细胞数量增多。小胶质细胞的过度活化最终引起视网膜神经元凋亡、血-视网膜屏障破坏,导致视力丢失。     

视网膜小胶质细胞参与糖尿病视网膜神经变性的分子机制研究进展

糖尿病视网膜神经变性(DRN)是由高血糖引起的视网膜神经血管单位破坏和血视网膜屏障功能障碍的一类疾病,神经元凋亡是该疾病的主要特征,可造成患者与视觉相关的生活质量下降。视网膜小胶质细胞(RMC)是视网膜胶质细胞的主要种群之一,主要参与视网膜神经元的发育,并维持视网膜神经元的功能。已有研究表明RMC的功能改变与DRN密切相关,靶向RMC可减少视网膜神经元损伤并减缓DRN的发生发展。本文就RMC参与DRN及其调控靶点和治疗药物展开综述,以期提供更多有效的防治策略。     

短暂清除小胶质细胞减缓光诱导损伤小鼠视网膜视功能退变

目的：探讨小胶质细胞在急性光诱导小鼠视网膜损伤中的保护作用。方法：实验研究。将30 只雄性ICR白化小鼠随机均分为对照组、光损伤组和小胶质细胞清除组。对照组不进行任何处理;光损伤组在15 000 lx白光下照射20 h;小胶质细胞清除组在白光照射前先持续5 d腹腔注射小分子抑制剂PLX5622,随后经15 000 lx白光照射20 h,继续注射3 d PLX5622后于次日取材。所有动物在取材当日,先运用视网膜电图（ERG）检测视网膜功能,随后摘取眼球,OCT包埋眼杯,进行冷冻切片,或者剥离视网膜。运用免疫组织化学和TUNEL染色等方法观察小鼠视网膜损伤程度及小胶质细胞的形态和功能。实验数据采用单因素方差分析进行比较。结果：运用15 000 lx白光照射白化小鼠20 h,可获得视网膜功能损伤和光感受器凋亡的稳定模型。ERG反应的a、b波振幅统计结果显示,光损伤组光感受器和双极细胞出现功能障碍,且TUNEL阳性细胞较对照组多（P=0.035）,激活的小胶质细胞亦明显较多（P<0.001）。免疫组织化学结果显示,清除小胶质细胞组外核层和外网状层的小胶质细胞较光损伤组少（P=0.027）,CtBP2信号和PKC-α信号较强,外节长度维持在正常水平（P<0.001）,但ERG反应b波振幅和TUNEL阳性细胞差异无统计学意义。结论：清除小胶质细胞可以在短期内减少光感受器细胞凋亡,并挽救视网膜功能。     

视网膜小胶质细胞与青光眼

近年来,小胶质细胞因其作为中枢神经系统中最有代表性的免疫细胞而成为青光眼免疫学发病机制的研究热点。其神经保护与神经毒性的双重作用归因于它对一系列病变做出反应后所能合成和分泌的物质不同。因此我们就视网膜小胶质细胞的青光眼免疫发病机制及治疗的展望进行综述。     

小胶质细胞在糖尿病视网膜病变视网膜神经血管单元中的作用

糖尿病视网膜病变(DR)是工作年龄人群主要致盲眼病,血-视网膜屏障破坏是关键环节。近年研究显示,DR不再是单纯微血管病变,而是视网膜胶质细胞与神经退行性变、微血管病变的共同发展结果。DR病程早期视网膜神经血管单元(RNVU)中神经元的损伤可能早于血管内皮的变化,胶质细胞的激活加重血管屏障功能障碍。视网膜小胶质细胞是常驻视网膜的局部免疫细胞,参与长期高糖诱导的慢性炎症反应、高糖诱导其分泌多种炎症因子,破坏血-视网膜屏障结构、增加神经元凋亡、改变Müller细胞胶质化等,影响视网膜局部稳态平衡。RNVU作为一个单元结构研究,近年来受到越来越多的关注,本文将针对小胶质细胞在RNVU中的作用机制、研究进展进行综述。     

光预适应对小鼠视网膜光感受器细胞光损伤的保护作用

目的　探讨光预适应对视网膜光感受器细胞光损伤的保护作用及其机制。方法　42只小鼠随机分为正常对照组、光损伤组、光预适应+光损伤组和光预适应组。光损伤组采用4000 Lux白色冷光源对BALB/c小鼠进行4 h持续照射;光预适应+光损伤组先采用600 Lux白色冷光源与黑暗（12 h/12 h）交替环境下饲养6 d,然后采用4000 Lux白色冷光源持续照射4 h;光预适应组仅采用600 Lux白色冷光源与黑暗（12 h/12 h）交替环境下饲养不同时间（2 d、4 d和6 d）。正常对照组、光损伤组和光预适应+光损伤组分别采用闪光视网膜电图（flash electroretinogram,FERG）和组织病理学检查检测视网膜光感受器细胞的功能和形态学变化。光预适应组运用实时荧光定量PCR法检测预适应对小鼠视网膜中白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor,LIF）mRNA相对表达水平的影响;运用Western blot法检测光预适应对信号转导子和转录激活因子3（STAT3）蛋白磷酸化水平的影响。结果　FERG检查结果显示,与正常对照组相比,光损伤组暗适应ERG a波振幅下降,差异有统计学意义（P=0.000）;与光损伤组相比,光预适应+光损伤组暗适应ERG a波振幅显著增加,差异有统计学意义（P=0.000）。组织病理学检查结果显示,与正常对照组相比,光损伤组小鼠视网膜外核层细胞核数量明显减少,差异有统计学意义（P=0.000）;与光损伤组相比,光预适应+光损伤组外核层细胞核数量明显增多,差异有统计学意义（P=0.000）。实时荧光定量PCR检测结果显示,光预适应显著增加LIF mRNA的相对表达量,且呈时间依赖性（F=128.776,P=0.000）。Western blot检测结果显示,光预适应显著增加STAT3蛋白磷酸化的相对表达量,且呈时间依赖性（F=73.493,P=0.000）。结论　光预适应对视网膜光感受器细胞光损伤具有保护作用,其可能通过激活LIF/STAT3信号通道发挥作用。     

腺苷A2A受体（A2AR）拮抗剂ZM241385对视网膜脱离动物模型视网膜光感受器细胞的保护作用

目的　探讨腺苷A_2A受体（A_2AR）拮抗剂ZM241385对视网膜脱离（RD）动物模型视网膜光感受器细胞的保护作用。方法　选取健康雄性SPF级C57BL/6J小鼠48只作为研究对象。将实验小鼠随机分为对照+二甲基亚砜（DMSO）组、对照+ZM241385组、RD+DMSO组、RD+ZM241385组,每组12只。RD模型建立后,实验小鼠立即腹腔注射ZM241385（3 mg·kg^-1,剂量不超过0.2 mL）或同体积DMSO,连续给药3 d。采用免疫荧光染色检测视网膜中Müller细胞谷氨酰胺合成酶(GS)的表达,Western blot检测单核细胞趋化蛋白（MCP）-1、肿瘤坏死因子（TNF）-α、Cleaved caspase 3和B细胞淋巴瘤抗体（Bcl）-2的表达。结果　免疫荧光染色结果显示:RD+DMSO组小鼠视网膜Müller细胞GS荧光强度较对照+DMSO组显著降低,而RD+ZM241385组小鼠视网膜Müller细胞GS荧光强度较RD+DMSO组显著升高。RD+DMSO组小鼠视网膜MCP-1、TNF-α蛋白表达水平较对照+DMSO组均显著升高,差异均有统计学意义（均为P<0.001）,而RD+ZM241385组小鼠视网膜MCP-1、TNF-α蛋白表达水平较RD+DMSO组均显著降低,差异均有统计学意义（均为P<0.001）。与对照+DMSO组相比,RD+DMSO组小鼠视网膜Cleaved caspase 3蛋白表达水平显著升高,Bcl-2蛋白表达水平显著下降,差异均有统计学意义（均为P<0.001）。而与RD+DMSO组相比,RD+ZM241385组小鼠视网膜Cleaved caspase 3蛋白表达水平显著下降,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义（均为P<0.001）。结论　A_2AR拮抗剂ZM241385通过促进RD小鼠视网膜Müller细胞GS表达,抑制炎症细胞因子MCP-1、TNF-α的表达,缓解光感受器细胞凋亡。     

Role of glycolysis in retinal vascular endothelium, glia, pigment epithelium, and photoreceptor cells and as therapeutic targets for related retinal diseases

Glycolysis produces large amounts of adenosine triphosphate (ATP) in a short time. The retinal vascular endothelium feeds itself primarily through aerobic glycolysis with less ATP. But when it generates new vessels, aerobic glycolysis provides rapid and abundant ATP support for angiogenesis, and thus inhibition of glycolysis in endothelial cells can be a target for the treatment of neovascularization. Aerobic glycolysis has a protective effect on Müller cells, and it can provide with a target for visual protection and maintenance of the blood-retinal barrier. Under physiological conditions, the mitochondria of RPE can use lactic acid produced by photoreceptor cells as an energy source to provide ATP for survival. In pathological conditions, because RPE cells avoid their oxidative damage by increasing glycolysis, a large number of glycolysis products accumulate, which in turn has a toxic effect on photoreceptor cells. This shows that stabilizing the function of RPE mitochondria may become a target for the treatment of diseases such as retinal degeneration. The decrease of aerobic glycolysis leads to the decline of photoreceptor cell function and impaired vision; therefore, aerobic glycolysis of stable photoreceptor cells provides a reliable target for delaying vision loss. It is of great significance to study the role of glycolysis in various retinal cells for the targeted treatment of ocular fundus diseases.     

补肾益精方对先天性视网膜色素变性RCS大鼠感光细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨补肾益精方对先天性视网膜色素变性RCS大鼠感光细胞凋亡的影响。方法　将先天性视网膜色素变性模型RCS大鼠24只随机分为补肾益精方组及蒸馏水组,分别给予补肾益精方药液及蒸馏水灌胃,12只健康SD大鼠常规饲养作为正常组。在给药7 d及28 d后HE染色观察各组大鼠视网膜组织病理学变化,TUNEL法检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR检测视网膜中睫状神经营养因子、脑源性神经营养因子以及碱性成纤维细胞生长因子表达情况。结果　HE染色切片光学显微镜下正常组SD大鼠视网膜结构清晰,层次分明,各层细胞排列整齐。蒸馏水组大鼠视网膜内核层及外核层均较正常组明显变薄,细胞排列稀疏,可见空泡样改变,感光细胞数减少,且随鼠龄增加减少日益显著。补肾益精方组大鼠视网膜内核层及外核层亦较正常组变薄,但与蒸馏水组相比增厚,感光细胞数较后者增多,细胞排列也较为整齐。给药7 d及28 d时补肾益精方组每个高倍视野感光细胞数分别为140±9和80±9,蒸馏水组分别为113±8和44±6,补肾益精方组较蒸馏水组明显增多,差异有统计学意义（均为P<0.05）。TUNEL检测结果显示给药7 d及28 d时补肾益精方组感光细胞凋亡率分别为31.67±5.39%及29.68±4.31%,蒸馏水组分别为50.34±5.21%及44.02±7.17%,补肾益精方组较蒸馏水组均明显降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示给药7 d及28 d补肾益精方组视网膜睫状神经营养因子表达均较蒸馏水组增加（均为P<0.05）,给药7 d时补肾益精方组视网膜脑源性神经营养因子表达较蒸馏水组明显增加（P<0.05）,28 d时两组差异无统计学意义（P>0.05）;给药7 d及28 d两组碱性成纤维细胞生长因子的表达差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论　补肾益精方对RCS大鼠感光细胞凋亡有明显的抑制作用,其作用机制可能与补肾益精方促进视网膜分泌神经营养因子有关。     

非诺贝特对糖尿病视网膜病变小鼠视网膜神经细胞的保护作用及机制

目的　探讨嘌呤受体P2X7-NOD样受体蛋白-3（Nod-like receptor pyrin domain 3，NLRP3）炎性相关信号转导通路在糖尿病小鼠视网膜神经细胞中的表达情况，初步研究非诺贝特对糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）的保护作用。方法　健康雄性小鼠60只，随机分为实验对照组（N组）、糖尿病组（D组）、非诺贝特治疗组（F组），D组及F组通过腹腔内注射链脲佐菌素制备DR模型，分别于造模后每天记录血糖情况，并于4周、8周、12周进行三组间血糖水平的比较。自造模成功后第2天起，F组每天口服非诺贝特100 mg·kg^-1连续喂养12周，4周后免疫荧光化学法观察视网膜神经胶质细胞及视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell，RGC）的活化情况，Western blot检测视网膜组织中P2X7、NLRP3蛋白的表达情况。结果　与N组相比，D组血糖水平在造模后4周、8周、12周随时间推移均有不同程度增长，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。N组中，GFAP少量表达；D组4周时GFAP的表达主要分布于内界膜（inner limiting membrane，ILM）、RGC层和内丛状层（inner plexiform layer，IPL）；非诺贝特治疗后，F组小鼠视网膜GFAP主要分布于ILM和RGC层，且密度与D组相比明显减弱。Western blot检测结果显示:N组中，视网膜P2X7和NLRP3蛋白仅有少量表达；D组中二者的表达水平在4周时明显升高，与N组相比，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；而此时F组经非诺贝特治疗后小鼠视网膜组织中P2X7和NLRP3蛋白的表达水平较D组明显降低，但仍高于N组，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　非诺贝特可通过下调糖尿病小鼠视网膜组织中P2X7和NLRP3蛋白的表达从而发挥视网膜保护作用。     

糖尿病视网膜病变中视网膜内皮细胞功能障碍的研究进展

视网膜内皮细胞(REC)是参与糖尿病视网膜病变和许多眼部疾病的主要细胞类型之一。视网膜微血管系统有助于血-视网膜屏障的维持,这对正常的视功能至关重要。REC的改变在视网膜疾病的发生发展中起着关键作用。高血糖是糖尿病微血管损伤的重要原因,通过不同的机制导致REC功能障碍,包括向衰老表型改变、迁移和增殖能力增强、炎性凋亡等,最终导致无细胞毛细血管及病理性新生血管形成。本文对糖尿病视网膜病变中REC的功能障碍作一综述。